ИФА
|
ИФА (иммуноферментный анализ) – высокочувствительный и высокоспецифичный метод лабораторного исследования, основанный на специфическом связывании АГ и АТ в пробе с дальнейшим выявлением их ферментной меткой.
|
Когда используется
|
1) Диагностика инфекционных заболеваний: бактериальных, вирусных, грибковых, паразитарных, гельминтозов. Определение индекса авидности АТ для установления давности инфекции
2) Определение напряженности поствакционального иммунитета
3) Диагностика патологии беременных
4) Диагностика онкологических заболеваний
5) Гормональная диагностика
6) Диагностика аллергии
7) Определение различных сывороточных белков, реамопроб
8) Диагностика аутоиммунной патологии
9) Исследование цитокинового статуса
10) Лекарственный мониторинг
|
На чем основан
|
Метод основан на специфическом связывании антитела с антигеном, при этом один из компонентов конъюгирован с ферментом, в результате реакции с соответствующим хромогенным субстратом образовывается окрашенный продукт, количество которого можно определить спектрофотометрически
|
Как проводиться
|
1 этап: «твердая фаза» с иммобилизованным АГ (для определения АТ) или АТ (для определения АГ)
2 этап: внесение исследуемого материала для формирования иммунного комплекса
3 этап: отмывка от излишка не связавшегося материала
4 этап: присоединение конъюгата – анти Ig, меченного ферментной меткой (пероксидазой хрена)
5 этап: отмывка от излишков конъюгата
6 этап: ферментативная или субстратная реакция – внесение субстрата фермента (перекись водорода) с индикатором, изменяющим свой цвет (тетраметилбензидин – ТМБ)
7 этап: остановка реакции
|
Достоинства
|
1) Высокая чувствительность
2) Высокая специфичность
3) Возможность исследования как АГ, так и АТ
4) Возможность проведения качественных и количественных исследований
5) Наличие модификаций: плашечный, кассетный, иммунокомб, пробирочный и т.д.
6) Высокая пропускная способность
7) Возможность автоматизации метода
8) Возможность протоколирования результатов
|
Недостатки
|
1) Наличие ложноположительных результатов, требующих проведения дорогостоящих рефернс-исследований
2) Возможность использования только жидкого и прозрачного биологического материала
|
Какие инфекции выявляет
|
Он применяется в диагностике урогенитальных инфекций для выявления наличия в сыворотке крови специфических иммуноглобулинов (Ig или антител) - белков, вырабатываемых клетками иммунной системы, направленных на борьбу с внедрившимся в организм инфекционным агентом.
|
Материал
|
1) Сыворотка крови
2) Моча
3) урогенитальный материал
4) слюна
5) Слезная жидкость
6) Редко – другие жидкие биоматериалы
|
Скачать 17.71 Kb.