Инструкция опред. гр. крови. Инструкция по поведению исследования группы крови и резусфактора в кдл противотуберкулезного диспансера г. Краснодар
 Скачать 14.22 Kb.
|
|
Инструкция по поведению исследования группы крови и резус-фактора в КДЛ противотуберкулезного диспансера г.Краснодар. ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: определение группы крови и резус-фактора перекрестным способом при помощи стандартных эритроцитов, стандартных изогемагглютинирующих сывороток, цоликлонов анти-А, анти-В и анти-Д супер. ПРИНЦИП ПРОЦЕДУРЫ : определение группы крови перекрестным способом заключается в одновременном определении групповых агглютиногенов в эритроцитах испытуемой крови при помощи стандартных сывороток и групповых агглютининов в сыворотке исследуемой крови при помощи стандартных эритроцитов. Также используются цоликлоны анти-А, анти-В. Для определения резус-факторов используется цоликлон анти-Д супер разных серий. ( Изготовитель ООО "ГЕМАТОЛОГ", г. Москва). ОПИСАНИЕ ПЕРВИЧНОЙ ПРОБЫ: кровь для исследования берут из вены в вакуумную пробирку с активатором свертывания. Не полностью коагулированная кровь, может вызвать проблемы в проведении тестов и оценке результата. Гемолизированный образец должен быть заменен новым, хилезная кровь не используется. На пробирках с кровью указывают Ф.И.О. больного (полностью), № истории болезни, дату взятия крови. В направлении на исследование вносят : отделение, № истории болезни, Ф.И.О. больного, пол, год рождения, данные о группе крови и резус принадлежности, диагноз, требуемое исследование, фамилия и подпись отв. врача, дата. Кровь центрифугируют или оставляют в покое на 20-30 минут для отделения сыворотки. ТРЕБУЕМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ. Определение группы крови производитсяв помещении с хорошим освещением при температуре 15-25 град.С. Необходимый набор оборудования и освещения: - термостат водяная баня на 46-47 град.С (ТВ-2) - лабораторная центрифуга (Элекон ЦЛМН-Р-10-01) - микроскоп (ЛОМО БИОЛАМ АУ-12) - бытовой холодильник ("Атлант") - планшеты, пробирки и штативы для них, часы на 3 и 5 минут (АЛКОР-БИО), дозаторы (ЛЕНПИПЕТ - бионт 20-200 мклитров), предметные стекла, термометр (Шатлыгин и К производственная фирма, ТСЖ-Х), лупа пятикратного увеличения. - стандартные сыворотки (изгот. ГБУЗ СПК г.Коаснодар), цоликлоны анти-А, анти-В и анти-Д (изгот. ООО "ГЕМАТОЛОГ" г. Москва), антиглобулиновая сыворотка и др. реагенты. - панели стандартных эритроцитов для опр. групп крови системы АВО (ГБУЗ СПК г. Краснодар) для скрикинга и идентификации аллоиммунных антител, их титрования, контроля определения резус-принадлежности. - раствор 10% желатина (ГБУЗ СО "ОСПК" г. Первоуральск), 0,9% раствор хлорида натрия. ТЕХНИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГРУПП КРОВИ ЧЕЛОВЕКА. 1. Определение производим на планшетах, не верхнюю часть которой наносим обозначения слева направо. На верхнем крае подписываем фамилию и инициалы больного, у которого опр. группу крови. 1. Под соответствующими обозначениями групп крови на пластинку наносим по одной капле (0,1 мл) стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Цоликлоны из флаконов капельниц ( анти-А, анти-В и анти-Д). Всего получается 7 капель, которые образуют 2 ряда. (анти - Д двух серий). 3. На правую часть пластинки под сотв. обозначениями наносим по 0.01 мл станд. эритроцитов. Рядом по одной капле исследуемой крови (0.01-о.003мл). Смешиваем с реагентом. Наблюдаем за ходом реакции визуально при легком покачивании планшета в течение 3 минут. Наблюдение за ходом реакции не менее 5 минут. Агглютинация в каплях, в которых сыворотку крови испытывают со стандартными эритроцитами, может наступить поздно ( к концу пятой минуты), в связи с возможностью низкого титра содержащихся в исследуемой сыворотке агглютининов. По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 минуты, в те капли, в которых она наступила, добавляем по 0,05 мл изотонического раствора хлорида натрия и продолжаем наблюдать, покачивая пластину до истечения 5 минут. Учет реакции производится путем сопоставления результатов, полученных при помощи стандартных сывороток и стандартных эритроцитов. Вскрытые флаконы цоликлонов можно хранить при температуре 2-8 градусов С в закрытом виде в течение 1 месяца. Определение группы крови производится при температуре не ниже 15 градусов и не выше 25 градусов С. Оптимальное для реакции агглютинации соотношение эритроцитов и тестовых реагентов 1 : 10 при использовании изогемагглютинирующих сывороток, 2-3 : 10 при использовании моноклональных реагентов (цоликлонов) и реагентов, приготовленных в комбинации с коллоидами. |