микробиология. микроба часть 2. История открытия и актуальность изучения
 Скачать 38.96 Kb.
|
|
История открытия и актуальность изучения. Античный период: Гиппократ Великий: описание клиники столбняка, вызвавшего смерть его сына. Аристотель: «Гангрена – отравление гниением собственных тканей». 1562г. Амбруаз Паре – описание клиники «госпитальной гангрены» как осложнения ран. Научный период: 1680г.А. Левенгук – открытие микроорганизмов анаэробов. 1839г. Вельпо, Дюпиитрен – «травматическая гангрена». 1853г. Мезоньи, Пирогов – «молниеносная гангрена». 80е гг. Х1Х века Пастер, Кох, Китасато выделили культуры клостридиальных анаэробов. 1-я Мировая война (Ховард) – «газовая гангрена» у 5% раненых. 2-я Мировая война - газовая гангрена у 0,17% раненых. Война в Корее в 50е гг.(США) - газовая гангрена у 0,07% раненых. Анаэробные микроорганизмы были открыты великим французским ученым Луи Пастером в 1861 году. В то время открытие анаэробов было ошеломляющим для ученых-биологов, полагавших, что жизнь невозможна без дыхания и использования кислорода. Утверждение о существовании анаэробных организмов показалось настолько фантастичным современникам Пастера, что они выступили против него с резкими возражениями. Это свидетельствует о том, насколько смелой, новой была для биологов XIX в. идея о существовании организмов, не нуждающихся для развития в молекулярном кислороде. После этого события коренным образом изменились представления о разнообразии организации живых существ и энергетических основах жизни. Последующие исследования многих микробиологов показали, что самые различные природные среды, в том числе полностью лишенные молекулярного кислорода, населены множеством микроскопических организмов, принимающих самое активное участие в круговороте веществ на Земле. Кроме того, было обнаружено, что анаэробы могут быть возбудителями ряда опасных инфекционных заболеваний человека и животных. Первой анаэробной бактерией, открытой Луи Пастером, была клостридиум бутирикум (Clostridium butyricum) - спороносная палочка, вызывающая маслянокислое брожение углеводов, которой свойствен один совершенно необычный признак — рост при полном отсутствии кислорода. Это явление Пастер назвал анаэробиозом, что означает жизнь при отсутствии воздуха. В дальнейшем оказалось, что спорообразующие анаэробы - не какие-нибудь редко встречающиеся диковинки, а очень широко распространенные по всей поверхности Земли организмы. Вместе с неспороносными формами они составляют большой и удивительно интересный мир анаэробных микроорганизмов, обнимающий почти всю область микробиологии с ее биохимическим и морфологическим разнообразием бактерий. Действительно, анаэробы встречаются почти среди всех известных крупных систематических групп спорообразующих и неспорообразующих форм эубактерий, кокков, хламидобактерий, микобактерий и актиномицетов, вибрионов, спирилл и спирохет. В последнем определителе (1967) французского ученого А. Р. Прево описано до 48 родов анаэробов, входящих в самые различные семейства, порядки и классы бактерий и актиномицетов. Годы Первой мировой войны стали годами интенсивного изучения анаэробных инфекций. В результате были изучены основные возбудители газовой гангрены, унифицирована и упрощена методика работы с ними. Спорообразующие анаэробы рода Clostridium принадлежат к семейству Васillaсеае и насчитывают свыше 150 видов. Эти бактерии при наличии благоприятных условий способны вызывать у человека газовую гангрену, столбняк, ботулизм, псевдомембранозный язвенный энтероколит, пищевые отравления и другие заболевания, связанные с клострилиальным поражением различных органов и систем. 2) Морфологические и тинкториальные свойства анаэробов. Споры округлой или овальной формы, располагаются в центре клетки субтерминально или терминально в зависимости от видовой принадлежности микроба. Поперечник споры обычно больше поперечника клетки, поэтому клетка, содержащая спору, выглядит раздутой и напоминает веретено (от лат, clostridium — веретено). Форма бактерий может сильно изменяться под влиянием различных факторов вплоть до появления клостридий в форме кокков, нитевидных бактерий и т.д. Все они, кроме С. perfringens, подвижны, перитрихи, имеют 15—20 жгутиков. С. perfringens в организме человека или животных может образовывать капсулы. Патогенные клостридии — грамположительные палочки. Большинство патогенных клостридий способны продуцировать истинные экзотоксины очень большой силы. Например, ботулотоксин не имеет себе равных по силе среди природных биологических ядов. Биохимические свойства патогенных клостридий различны. Некоторые виды отличаются очень высокой сахаролитической активностью, другие обладают большой протеолитической активностью. Есть патогенные клостридии, которые в биохимическом отношении малоактивны. СТОЛБНЯК. Столбняк (от греч. тетанус — оцепенение, судорога) — острое инфекционное заболевание с преобладанием симптомов токсикоза, проявляющееся судорогами поперечно-полосатых мышц вследствие поражения токсином двигательных клеток центральной нервной системы. 1) Этиология Cl.tetani. Возбудитель столбняка обнаружен А. Николайером в 1884г. в содержимом ран. Чистая культура была получена японским ученым С. Китазато в 1889г. Морфология. Гамположительные палочки с закругленными концами, длиной 4-8 мкм и толщиной 0,3-0,8 мкм (в молодых культурах иногда образуют нитевидные клетки); располагаются одиночно или цепочками; подвижны (содержат 20 и более жгутиков, перетрихи), в старых культурах (30 суток и более) преобладают неподвижные формы. Споры круглые, реже овальные; расположены терминально; их диаметр в 2-3 раза превышает толщину бактерий, вследствие чего клетка имеет форму «барабанной палочки». Антигенная структура.С. tetani неоднородна и определяется наличием термолабильных жгутиковых Н-антигенов и групповых соматических О- антигенов. По типовому Н-антигену выделяют 10 сероваров. Штаммы всех сероваров вырабатывают один и тот же специфический токсин, который полностью нейтрализуется противостолбнячной сывороткой, полученной при иммунизации животных токсином любого штамма. Факторы патогенности.Патогенность обусловлена способностью продуцировать экзотоксины — тетаноспазмин и тетанолизин. • Тетаноспазмин — полипептид; — 150 000 Да; действует дистанционно, так как бактерии редко покидают рану. Антигенно однороден; хотя обнаружено 4 группы детерминант, но их структура и локализация недостаточно изучены. Токсин фиксируется на поверхности отростков нервньк клеток, проникает в них за счет лиганд-опосредованного эндоцитоза и посредством ретроградного аксонного транспорта попадает в ЦНС. Механизм действия связан с подавлением высвобождения тормозных нейромедиаторов, в частности глицина и γ-аминомасляной кислоты, в синапсах (токсин связывается с синаптическими белками синаптобревином и целлюбревином). Первоначально токсин действует на периферические нервы, вызывая местные тетанические сокращения мышц. Токсин появляется в культурах на 2-е сутки, достигая пика образования к 5—7-му дню. Разрушается при длительном хранении в термостате, под действием света и кислорода. • Тетанолизин (тетаногемолизин) обладает гемолитическим, кардиотоксическим и летальным эффектами, в патогенезе заболевания играет менее важную роль; максимальное накопление токсина в культуре наблюдают уже через 20-30 ч; процессы его образования не связаны с синтезом тетаноспазмина. 2) Резистентность. Вегетативные формы возбудителя столбняка гибнут и обезвреживаются от действия всех применяющихся дезинфицирующих средств. Споры же обладают большей устойчивостью. Они длительно сохраняются при кипячении в течение 10-90 мин, а споры некоторых штаммов погибают через 1-3 ч, 5% раствор фенола вызывает их гибель через 8-10 ч, 1% раствор формалина — через 6 ч; действие прямого солнечного света споры выдерживают 3-5 сут. 3) Эпидемиология. Заболевание возникает в результате загрязнения ран почвой, содержащей споры столбнячной палочки. В естественных условиях столбнякомпоражаются человек и лошадь, однако восприимчивы и другие животные: козы, собаки, кошки, из лабораторных животных — морские свинки, мыши, кролики. Нечувствительны к столбнячному токсину птицы и холоднокровные животные. Однако при переохлаждении птиц и перегревании холоднокровных животных можно получить симптом столбняка и у них. 4) Иммунитет. После перенесенного столбняка иммунитет непродолжителен, а его напряженность в полной мере соответствует наличию в крови антитоксина. При вакцинации и последующей ревакцинации удается создать довольно стойкий и напряженный иммунитет, сохраняющийся в течение многих лет. 5) Патогенез и клиника. Патогенез.Входные ворота инфекции - бытовые и производственные травмы, причем наиболее часто поверхностные или колотые, когда больной не обращается за медицинской помощью. Столбняк — токсинемическая инфекция, основным патогенетическим фактором которой является столбнячный токсин. Возбудитель остается в ткани на месте входных ворот; продуцирует экзотоксин, который поступает в кровь и распространяется по организму по кровеносным и лимфатическим сосудам, а также по нервным стволам, и достигает спинного и продолговатого мозга. Токсин фиксируется на поверхности отростков нейронов, проникает в них за счет лиганд-опосредованного эндоцитоза и посредством ретроградного аксонного транспорта попадает в ЦНС. Механизм действия токсина связан с подавлением высвобождения тормозных нейромедиаторов, в частности глицина и γ-аминомасляной кислоты, в синапсах (токсин связывается с синаптическими белками синаптобревином и целлюбревином), в результате чего нарушается проведение импульсов по нервным волокнам. Первоначально токсин действует на периферические нервы, вызывая местные тетанические сокращения мышц. При столбняке поражается не только нервная система — в патологический процесс вовлекаются все системы организма. Клиника.Инкубационный период 6-14 дней. Легкая форма (локальный столбняк) характеризуется периодическими спазмами в пораженной области. Генерализованный столбняк — наиболее часто встречаемая форма с характерными мышечными спазмами; из других проявлений можно отметить разбитость, тахикардию, аритмии, менингит, гипокальциемию. Ведущее проявление болезни — судорожный синдром, включающий болезненные сокращения мышц и длительное напряжение мышц (мышечная ригидность). Характерными проявлениями последнего считаются опистотонус (тетанический спазм, при котором позвоночник и конечности согнуты; больной лежит на спине и опирается на затылок и пятки) и сардоническая улыбка (подобие оскала, вызванного спазмом лицевых мышц). Мозговые поражения включают поражения черепно-мозговых нервов (наиболее часто - VII пары); характерны тонические спазмы лица и глотки. У человека столбняк носит нисходящий характер. Столбняк новорожденных протекает в основном так же, как и у взрослых. 6) Лабораторная диагностика. Методы лабораторной диагностики ботулизма: - Микроскопический (окраска по Граму). - Бактериологический. - Серологический (для обнаружения токсина – РНГА). - Биологический (биологическая проба на белых мышах). - Бактериологический. Культуральные свойства. Возбудитель столбняка — строгий анаэроб, чрезвычайно чувствительный к кислороду. Хорошо растет в глубине жидких питательных сред, налитых в высокие пробирки, флаконы или бутылки при наличии в них редуцирующих веществ (глюкоза, кусочкипечени или мышц, вата и др.). Питательные среды должны иметь нейтральную или слабокислую реакцию (рН 6,8-7,4). Жидкие среды после посева в них материала необходимо заливать слоем вазелинового масла, а перед посевом удалять из них кислород путем кипячения на водяной бане в течение 10-15 мин, после чего охлаждать до 40-50 °С. Оптимальной температурой при выращиванин посевов является 35-37 ºС. На плотных питательных средах — кровяном или печеночном агаре — столбнячная палочка хорошо растет только при полном удалении кислорода. На чашках с кровяным агаром через 2-4 сут вырастают отдельные прозрачные или слегка сероватые колонии диаметром 2-5мм с неровной зернистой поверхностью, края колонии шероховатые, ветвящиеся. Более старые колонии имеют желтоватый плотный центр и совершенно прозрачные бесцветные неровные ветвящиеся края. На кровяном агаре каждая колония окружена зоной гемолиза. При посеве в конденсационную жидкость скошенного агара в пробирках С. tetani растет в виде едва заметных нитевидных отростков, вползающих на поверхность агара. Эту особенность микроба можно использовать при выделении чистой культуры. При этом пробирки со скошенным агаром следует помешать в анаэростат. В высоком столбике агара через 1-2 сут вырастают плотные колонии, напоминающие чечевичное зерно или диск (R-форма) либо пушинку с плотным центром (S-форма). В столбике желатина через 5-6 дней столбнячная палочка растет ввиде елочки, желатин при этом разжижается. Биохимическая активность. С. tetani обладает слабыми протеолитическими свойствами: при выращивании в жидкой среде, содержащей кусочки печени или сваренного вкрутую яичного белка, их протеолиза не происходит даже через длительное время. Микроб не сбраживает моносахариды и многоатомные спирты. Только отдельные штаммы ферментируют глюкозу. Все штаммы медленно сбраживают молоко собразованием очень мелких хлопьев. 7) Профилактика и лечение. Профилактика.При травмах обязательна хирургическая обработка раны, соблюдение правил асептики и антисептики при операциях; борьба с травматизмом. Для специфической профилактики проводится плановая или экстренная иммунизация. Для создания искусственного активного иммунитета в плановом порядке применяют столбнячный анатоксин, сорбированный на гидроокиси алюминия в составе вакцин АКДС, АДСм, АСм или экстанатоксин. Первичную вакцинацию проводят детям в 3-месячном возрасте (курс включает 3 инъекции АКДС с интервалом 30-40 суток), затем в соответствии с календарем прививок периодически проводят ревакцинации. Экстренная профилактика проводится при травмах, ожогах и обморожениях, укусах животных, при внебольничных абортах путем введения ранее привитым одного столбнячного анатоксина (0,5 мл). Непривитым вводят 1 мл столбнячного анатоксина и 250 ME донорского иммуноглобулина (если он отсутствует, то, проведя предварительную внутрикожную пробу, вводят 3000 ME противостолбнячной сыворотки по Безредко). В целях профилактики осложнений применяют также антибиотики. Важное значение в профилактике и лечении столбняка имеет хирургическая обработка ран. Лечение направлено на нейтрализацию столбнячного токсина. Применяют противостолбнячную лошадиную сыворотку в дозе 50-100 тыс. ME (курс — 2 инъекции, в тяжелых случаях — 3 инъекции дробно) или донорский противостолбнячный иммуноглобулин в дозе 900 ME. ГАЗОВАЯ АНАЭРОБНАЯ ИНФЕКЦИЯ Анаэробная инфекция ран в мирное время возникает редко, поэтому основной статистический материал относится к военному времени. Частота анаэробной инфекции, возникающей как осложнение ран, зависит от многих факторов, из которых главнейшими являются характер ранения, срок и качество оказания хирургической помощи. Газовая гангрена — полимикробное заболевание, в патогенезе которого важную роль играет и сопутствующая микрофлора (стафилококки, стрептококки, энтеробактерии и другие возбудители). Обнаружение патогенных клостридий в раневом отделяемом далеко не всегда свидетельствует о развитии соответствующего заболевания, поэтому правильный этиологический диагноз должен быть основан на совокупности клинических и микробиологических данных. Анаэробная раневая газовая инфекция (газовая гангрена, анаэробный миозит) — тяжелая раневая инфекция человека и животных, вызываемая бациллами рода Clostridium в ассоциации между собой и с аэробными или анаэробными условно-патогенными микроорганизмами, которая характеризуется острым тяжелым течением, быстро наступающим и распространяющимся некрозом преимущественно скелетных мышц с развитием отеков и газообразованием, тяжелой интоксикацией и отсутствием выраженных воспалительных явлений. 1) Этиология газовой анаэробной инфекции. Возбудителей газовой гангрены по степени патогенности принято делить на три группы. Первая группа включает наиболее патогенные виды, каждый из которых может вызывать газовую гангрену (С. perfringens, С. novyi и С. septicum). Во вторую группу входят клостридии, обладающие менее патогенными свойствами (С. histolyticum, С. bifermentans, С. sporogenes, C.fallax). Каждый из них также способен самостоятельно вызывать газовую гангрену, но чаще при этом заболевании они встречаются в ассоциации с другими анаэробами. Третья группа представлена маловирулентными клостридиями, не способными вызывать развитие газовой гангрены, однако, присоединяясь к возбудителям первой или второй группы, они существенно ухудшают течение болезни. К нимотносятся С. tertium, С. butiricum, С. sordellii и некоторые другие. Таблица 1. Токсины С. perfringens.
Деление патогенных клостридий на варианты связано с их способностью вырабатывать различные по антигенным свойствам летальные и некротические токсины. Например, С. perfringens вырабатывает более десятка различных токсинов и ферментов. В развитии типичной картины газовой гангрены наибольшую роль играет лецитиназа (α-токсин), которая обладает летальными, гемолитическими и дермонекротическими свойствами. Этот токсин вызывает не только местные изменения в мышечной ткани — коагуляционный и колликвационный некроз здоровой ткани, но и тяжелую интоксикацию организма больного с выраженным нарушением кровообращения, гемолитической пиемией, угнетением эритро- и лейкопоэза, поражением паренхиматозных органов и костного мозга. Некоторую роль в этомразрушительном процессе могут играть другие ферменты (коллагеназа — летальный и некротический фактор, гемолизин, гиалуронидаза, ДНКаза и др.). Главные летальные и некротические факторы и токсины типов В, С, D, Е и F изучались главным образом в связи с энтеротоксемиями у человека и животных, а их роль в патогенезе газовой гангрены почти не исследовалась. Таблица 2. Токсины С. novyi.
Таблица 3. Токсины С. histolyticum
2) Резистентность. С. perfringens. Споры способны длительное время сохраняться в окружающей среде; способны вегетировать в почве, богатой гумусом. С. perfringens типа А относительно толерантен к кратковременным кислородным воздействиям, хотя имеются штаммы, погибающие при воздействии О2 на культуру в течение 3 мин. При варке мяса некоторые споры погибают в течение нескольких минут, тогда как другие выдерживают кипячение в течение 2ч; споры, находящиеся в жировой ткани, выживают на протяжении длительного времени. Термоустойчивость спор серотипов B и D относительно невысока (погибают при кипячении в течение 15-30 мин), споры типов A и Cустойчивы и выживают при кипячении и даже автоклавировании в течение 1-6 ч. Споры отличает высокая устойчивость к химическим и физическим воздействиям. С. novyi. Устойчивы к нагреванию, выживают при кипячении в течение 1-2 ч; в костях животных сохраняются до 10 лет. Споры отличает высокая устойчивость к химическим и физическим воздействиям. С. septicum. Споры способны длительное время сохранятся в окружающей среде; вегетативные формы остаются жизнеспособными при доступе кислорода в течение 6-10ч. Споры отличает высокая устойчивость к химическим и физическим воздействиям. 3) Эпидемиология. Естественная среда обитания анаэробов, в том числе возбудителей анаэробной инфекции,— кишечник животных, в особенности травоядных, а также всеядных (свиньи). В их кишечнике, как правило, находят Cl. perfringens, а нередко и других возбудителей анаэробной инфекции; здесь они размножаются как сапрофиты, не вызывая заболевания животного. Из кишечника здорового человека ряд авторов также выделил наряду с другими анаэробами и Cl. perfringens. Хозяйственная деятельность человека — удобрение полей фекалиями, выпас скота и так далее — способствует широкому распространению возбудителей анаэробной инфекции во внешней среде, в первую очередь в почве. В некоторых почвах при наличии питательных веществ, достаточной влажности и температуры патогенные анаэробы могут даже размножаться. Но и при неблагоприятных условиях внешней среды анаэробные бактерии способны сохраняться очень долгое время в состоянии спор; вместе с кормами они вновь попадают в кишечник животных. 4) Иммунитет. В процессе инфекции образуются антитоксины, что приводит к формированию антитоксического иммунитета. Он определяется уровнем антитоксина и противоферментативных антител в сыворотке крови. Однако напряженность постинфекционного иммунитета невысока. Противомикробные антитела не обладают протективными свойствами, чтобы препятствовать размножению клостридий. Образующийся антитоксический иммунитет не является напряженным. 5) Патогенез и клиника. Патогенез.Факт частого возникновения анаэробной инфекции при осколочных ранениях связан с особенностями патогенеза этого раневого осложнения. Осколочные ранения отличаются тем, что в них всегда находится большое количество некротических тканей и тканей с резко пониженной жизнеспособностью; кроме того, при осколочных ранениях более выражена так называемая сила бокового удара, то есть распространение энергии ранящего снаряда в сторону от раны, в результате этого дополнительно повреждаются значительные участки тканей. В поврежденных тканях быстро развивается травматический отек, и они сдавливаются в прочном апоневротическом футляре, сдавливаются и мелкие сосуды мышц, нарушается микроциркуляция и, следовательно, снабжение тканей кислородом. В результате образуется участок ишемизированных тканей, в которых анаэробы находят благоприятные условия для размножения. Клиника. Чаще всего газовая гангрена развивается после обширных и глубоких проникающих ранений мягких тканей. В мирное время это следствие автомобильной или железнодорожной катастрофы, травм на производстве, в сельском хозяйстве или в быту, внебольничных абортов, ожогов, обморожений, хирургических операций на желудочно-кишечном тракте, ампутаций, инъекций различных лекарственных препаратов и т.д. Классификация клиническая (А.П. Колесов и соавт. 1989г.) 1) по микробной этиологии – клостридиальные – неклостридиальные (гнилостные); 2) по характеру микрофлоры – моноинфекции – полиинфекции – смешанные (анаэробы и аэробы); 3) по локализации – местные – регионарные (неограниченные) – системные; 4) по источникам инфекции – экзогенные 10% – эндогенные 90%; 5) по происхождению – внебольничные – внутрибольничные; 6) по причинам возникновения – травматические – спонтанные – ятрогенные. Течение анаэробной инфекции может быть молниеносным, быстро прогрессирующим и торпидным. При молниеносном течении уже спустя несколько часов после ранения развиваются грозные явления, приводящие к смерти через 1-2 суток; лечение в большинстве случаевоказывается неэффективным. При быстро прогрессирующем течении признаки осложнения появляются не ранее 24 час. после ранения (обычно через 2-3 суток); смерть может последовать через 4-6 дней; этот вид встречается наиболее часто. Торпидное течение характеризуется поздним (не ранее 5-6-го дня) развитием анаэробной инфекции, распространение ее идет медленно и к летальному исходу может приводить через 2-3 недели и позже. При быстро прогрессирующем, а тем более при торпидном течении анаэробной инфекции жизнь раненого может быть спасена своевременными и радикальными лечебными мероприятиями. Наиболее благоприятная форма анаэробной инфекции — позднее образование газового абсцесса, обычно вокруг инородного тела или осколка кости. 6) Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат кусочки пораженной ткани, взятые при обработке раны, экссудат из раны, кровь. Методы лабораторной диагностики ботулизма: - Микроскопический (окраска по Граму). - Бактериологический. - Серологический (реакция имунофлюоресценции). - Биологический. - Экспресс-метод. - Микроскопический. Вначале исследуемый материал бактериоскопируют. Наличие в препаратах крупных грамположительных палочек, часть из которых образует капсулу, позволяет поставить предварительный диагноз. Можно использовать метод флюоресцирующих антител. Бактериоскопическое исследование проводится в реакции иммунофлюоресценции с использованием иммунной сыворотки. - Бактериологический. Бактериологическое исследование позволяет выделить возбудителей, идентифицировать их по биологическим свойствам. Выделение чистой культуры ведут, засевая материал на среды Китта-Тароцци, Вильсона-Блера и молоко (среда Тукаева). На среде Китта-Тароцци Clostridium perfringens дают помутнение среды и образование пузырьков газа. При посеве в пробирку со стерильным молоком происходит так называемая «штормовая реакция» - молоко свертывается с образованием сгустка уже через 3-4 ч. На среде Вильсона-Блера появляются колонии черного цвета в глубине среды. - Биологической пробой вызывают у животных анаэробную инфекцию. -Экспресс-метод. Ускоренный метод - газожидкостная хроматография, которая позволяет в течение нескольких минут по выявленным продуктам метаболизма определить наличие клостридий. Для быстрого обнаружения токсина C. perfringens в раневом отделяемом определяют его лецитиназу, что выявляется помутнением жидкости в пробирке. При отрицательной реакции жидкость остается прозрачной. Таблица 1. Дифференцирующие признаки патогенных клостридий - возбудителей газовой анаэробной инфекции
С. perfringens — длинная грамположительная палочка. Имеет серовары А, В, С, D и F. В жидких питательных средах, приготовленных из гидролизатов мяса или казеина (рН 7,4), при 37-43°С растет быстро (3-8 ч) с бурным газообразованием и изменением рН в кислую сторону. Смесь газов (водород, углекислый газ, аммиак, сероводород, летучие амины, альдегиды, кетоны), выделяющихся из больших объемов растущей культуры, в присутствии огня может дать взрыв. Существует три устойчивых варианта колоний С. perfringens: гладкий (S), слизистый (М) и шероховатый (R), однако при определенных условиях могут появляться колонии смешанного (О) варианта. Колонии, выросшие на поверхности кровяного агара, часто окружены одной или двумя зонами гемолиза и при выдерживании на воздухе приобретают зеленоватую окраску. Вокруг колоний, вырабатывающих α-токсин (лецитиназу), в желточном агаре образуется зона перламутрового преципитата. Большинство штаммов обладает протеолитическими свойствами, медленно расплавляя свернутую сыворотку (вареные кусочки мяса) на 2—7-й день. Многие штаммы вырабатывают ферменты, расплавляющие через 24 ч 7% желатин. Характерной для С. perfringens является способность свертывать лакмусовое молоко с образованием сгустка кирпичного цвета и полным просветлением молочной сыворотки. Все штаммы сбраживают с образованием кислоты и газа глюкозу, галактозу, мальтозу, лактозу, левулезу, сахарозу и не ферментируют маннит и дульцит. Некоторые штаммы разлагают глицерин и инулин. С. septicum — полиморфная грамположительная палочка с субтерминальными спорами. В зависимости от состава среды она может превращаться в короткие вздутые формы и длинные нити. Последние часто обнаруживаются в трупах животных на поверхности печени, прилегающей к диафрагме. Строгий анаэроб. На поверхности плотных питательных сред только через 48 ч образует блестящие полупрозрачные колонии диаметром до 4мм с неровными бахромчатыми краями, имеет тенденцию к ползучему росту. Чаще образует R-форму колоний. В глубине 1% агара образуетколонии диаметром 1-2мм с уплотненным центром и радиально отходящими перепутанными нитями. В 2% агаре колонии имеют вид чечевиц, сердца и т.п., иногда с протуберанцами. На кровяном агаре узкая зона гемолиза появляется вокруг колонии только на 2-е сутки. Ферментирует с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, лактозу, галактозу, фруктозу, салицин и не разлагает глицерин и маннит, разжижает желатин и свертывает лакмусовое молоко с образованием кислоты и газа. Очень редко разлагает сахарозу. Не образует индол, не восстанавливает нитраты в нитриты и не вырабатывает большого количества сероводорода. С. fallax — грамположительная прямая, иногда инкапсулированная палочка с закругленными концами, редко образующая овальные центральные или субтерминальные споры. Перитрих, подвижна в молодых культурах. Строгий анаэроб. На поверхности агара через 1-2 сут образует плоские прозрачные колонии с неровным краем диаметром 1-2мм, которые затем становятся матовыми, с возвышением в центре. На агаре с кровью лошади вокруг колоний имеется узкая зона гемолиза. В глубине агара колонии напоминают мелкие чечевицы, иногда с выростами на краю. Ферментирует глюкозу, мальтозу, лактозу, сахарозу, маннит, салицин, не разлагает крахмал и глицерин, не сбраживает молоко с образованием кислоты. Не образует сероводород, индол, не восстанавливает нитраты в нитриты. Выделяется из ран в 1-4% случаев. С. sordelii — грамположительная палочка, образующая овальные, центральные и субтерминальные споры на обычных средах. Перитрих, подвижна в свежих культурах. Анаэроб нестрогий. На поверхности питательных сред через 1-2 сут образует слабовыпуклые серовато-белые колонии с неровным краем. На кровяном агаре (эритроциты лошади) колонии окружены узкой зоной гемолиза. В глубине агара колонии имеют форму чечевиц или сердца свыростами по краю. Ферментирует мальтозу, глюкозу и фруктозу, не разлагает лактозу и сахарозу. Разжижает желатин и свернутую сыворотку, вырабатывает сероводород и индол. С. peffringens. Все 6 типов С. peffringens способны вызывать газовую гангрену у человека и животных в том случае, если возбудитель вырабатывает лецитиназу. В экспериментальных условиях весьма чувствительны к заражению голуби, воробьи, тогда как другие животные (кролики, свинки, мыши и т.д.) более устойчивы к заражению. Типичную картину изменения тканей, вызываемых С. perfringens, можнополучить при внутримышечной инъекции морской свинке 0,5 мл свежей культуры гладкой формы этого микроба. Смерть животного наступает в сроки от нескольких часов до нескольких суток. С. fallax обнаружены при аппендиците, ранениях, хроническом артрите у людей и при гангрене скота. Свежие культуры, изолированные из ран, в первых генерациях бывают патогенными для мышей и морских свинок, однако вирулентность штаммов быстро теряется. С. sordellii в эксперименте на животных способен вызвать заболевание, похожее на газовую гангрену, с подкожным желатинозным отеком, иногда розово-красного цвета. Смерть животных происходит обычно за счет действия летального токсина в течение 1-2 дней после введения культуры. Описаны случаи смертельных кишечных заболеваний у человека и рогатого скота. Среди других клостридий, относительно часто изолируемых из ран, следует упомянуть С. tertium, С. butyricum, которые непатогенны для лабораторных животных, но могут оказывать некоторое влияние на течение газовой гангрены, находясь в ассоциациях с патогенными клостридиями. 7) Профилактика и лечение. Предупреждение развития анаэробной инфекции состоит в своевременной и полноценной хирургической помощи раненым. Параллельно вводится поливалентная антитоксическая очищенная концентрированная сыворотка по 10 тыс. ME. С лечебной целью эту дозу увеличивают в 5 раз (по 50 тыс. ME каждой сыворотки) и применяют антибиотики. Лечение только одной сывороткой в ряде случаев не дает нужного эффекта, в то время как комплексное применение антитоксической сыворотки и антибиотиков сопровождается значительным снижением летальности. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||