КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА ТОКСИКОЛОГИЯ. Контрольная работа по ветеринарной токсикологии Ковлягина И. В. студент 3 курса группа 103 б факультет Ветеринария
![]()
|
ФГБОУ ВО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» Кафедра «Анатомии сельскохозяйственных животных» Контрольная работа по ветеринарной токсикологии Выполнил: Ковлягина И. В. студент: 3 курса группа 103 Б Факультет: Ветеринария Шифр: 1610324 Проверил: Великанов В. И. Нижний Новгород, 2019 11. Регламенты применения биологически активных веществ биологически активных веществ и принципы их нормирования в кормах и продуктах животноводства. Для предотвращения отравления сельскохозяйственных и диких животных, в том числе рыб, птиц, пчел, токсическими веществами, применяемыми для обработки растений, почвы, водоемов и животных, а также с целью профилактики загрязнения продуктов питания животного происхождения их остатками устанавливают регламенты их безопасного использования и максимально допустимые уровни (МДУ) содержания в кормах и продуктах питания. МДУ в кормах - предельно допустимое количество химического вещества в кормах для сельскохозяйственных животных, выраженное в мг/кг массы корма, при котором вещество не оказывает отрицательного влияния на организм и не может содержаться в продуктаx питания, полученных от животного, в количествах выше признанных допустимыми. МДУ, выраженный в мг/кг массы корма, соответствует понятию p.p.m. – parts per million (частей на миллион), принятому за рубежом. МДУ в продуктах питания - максимально допустимый уровень содержания биологически активного вещества в растительных и животных продуктах, выраженный в тех же единицах, что и величина в кормах. Допустимые уровни содержания токсических веществ в питьевой воде, воде рыбохозяйственных водоемов, а также в воздухе рабочей зоны определяются показателями ПДК, выраженными в мг/л для воды и в мг/ м³ для воздуха. Расшифровывают эти показатели как предельно допустимые концентрации токсических веществ в объектах исследования. МДУ химических веществ для продуктов питания устанавливают органы здравоохранения на основании комплекса показателей: исследований хронической токсичности химического соединения в10-12-месячных опытах не менее чем на двух видах лабораторных животных, из которых один не является грызуном; кумулятивных свойств химического соединения; персистентности вещества во внешней среде; способности выделяться с молоком и оказывать отрицательное действие на потомство, а также других показателей. На основании исследования хронической токсичности для животных устанавливают минимальную действующую дозу (мин. ДД) или максимальную недействующую (безвредную) дозу (макс. НД) для животных. Затем с помощью коэффициента запаса, который колеблется в пределах от 30 до 100 в зависимости от свойств химического соединения, выводят мин. ДД для человека. Для этого величину мин. ДД для животных делят на коэффициент запаса. Например, величина мин. ДД токсического вещества, установленная экспериментально, составила 5 мг/кг массы животного. Коэффициент запаса для данного соединения равен 50. Тогда величина мин. ДД этого вещества для человека составит 5: 50= 0,1 мг/кг массы. На основании полученного показателя рассчитывают суточную безопасную дозу. Для этого величину мин. ДД (в данном случае 0,1 мг/кг) умножают на среднюю массу человека, которую принято считать равной 50 кг (с учетом массы детей). Таким образом, суточная безопасная доза химического вещества в нашем примере составит 0,1 мг/кг * 50 кг = 5 мг. На основании этого показателя вычисляют величину МДУ токсического вещества для продуктов питания различных видов. Несколько иначе устанавливают величину толерантности (МДУ) токсических веществ в продуктах питания за рубежом. В основу расчетов также положены хронические опыты на лабораторных животных. Исследуемое вещество не менее чем в 3 дозах дают с кормом в течение 3 мес. или даже 2 лет. На основании исследований устанавливают максимально недействующую, или подпороговую, дозу, выраженную в мг/кг корма, а не в мг/кг живой массы животного, как это принято в нашей стране. Этот показатель переводят с помощью коэффициента пересчета в мг/кг массы животного. Для белых крыс коэффициент пересчета равен 12,5. Допустим, что в хронических опытах на белых крысах максимально недействующая доза установлена равной 10 мг/кг корма. В пересчете на массу животного эта величина будет равна 0,8 мг/кг (10 : 12,5). По этой величине определяют безопасный уровень содержания токсического вещества для определенного продукта питания, входящего в состав рациона человека - Pd. Этот показатель вычисляют по формуле Pd =Х*50/ Sг где X— максимально недействующая доза (подпороговая) для животных, выраженная в мг/кг массы; 50 —средняя масса человека, кг; S— фактор безопасности, который обычно принимают равным 100. Эту цифру выводят из следующих соображений. Максимально возможные колебания чувствительности отдельных индивидуумов в пределах одного вида не превышают величины, равной 10. В этих же пределах колеблется чувствительность различных видов животных в пределах одного класса. Произведение этих двух величин составляет фактор безопасности. При определении величины Pd для фосфорорганических инсектицидов фактор безопасности иногда берут равным 20, если основным токсикологическим тестом, по которому определяют физиологическое действие токсического вещества, являются начальные признаки угнетения холинэстеразы крови; г— масса продукта, входящего в дневной рацион человека. Сумма величин Pd - безопасного ежедневного уровня поступления токсических веществ с каждым отдельным пищевым продуктом, входящим в состав дневного рациона, составляет величину AD I – acceptle daily intake - безопасный уровень поступления токсического вещества в организм человека в день. Величины МДУ, или толерантности, токсических веществ в продуктах питания являются официальными, установленными органами здравоохранения на основании величин мин. ДД токсических веществ, фактического уровня содержания остатков в готовых продуктах питания и других показателей. МДУ токсических веществ в кормах для сельскохозяйственных животных устанавливает ветеринарная служба на основании экспериментов на животных тех видов, для которых выводят этот показатель. Для экспериментального обоснования МДУ должны быть проведены исследования острой токсичности ядохимиката для лабораторных и сельскохозяйственных животных, разработан метод определения его остатков в органах и тканях животных, молоке, мясе, яйцах, кормах, изучены хроническая токсичность вещества, степень его материальной кумуляции при длительном поступлении с кормом, выделении с молоком и яйцами. По результатам экспериментов определяют максимально нетоксическую (подпороговую) (макс. НД) и минимально токсическую (пороговую) дозу (мин. ДД), а также коэффициент материальной кумуляции по отношению к животным того вида, для которого нормируются остатки. На основании показателей макс. НД и коэффициента материальной кумуляции можно рассчитать величину МДУ токсического вещества в кормах для сельскохозяйственных животных данного вида. Если при введении с кормом исследуемого вещества в течение 3 мес. в дозах, соответствующих макс. НД, официальным методом анализа не удается обнаружить его остатки в органах и тканях животных, молоке, яйцах в количествах выше тех, которые приняты органами здравоохранения в качестве допустимых, величину МДУ данного химического вещества в кормах для дойного и откормочного скота можно принять равной 1/2 макс. НД. Например, в опытах с карбофосом установлена макс. НД 100мг/кг корма. При введении пестицида коровам в этой дозе официальным методом установлено его выделение с молоком и накопление в мышечной ткани. Экспериментально обоснованную величину МДУ карбофоса в кормах для откормочного и молочного скота можно принять равной 50 мг/кг корма. В случае, если при введении с кормом токсического вещества обнаруживают его остатки в органах и тканях животного, молоке, яйцах, МДУ в кормах целесообразно определять, исходя из степени материальной кумуляции вещества в тканях, выделения с молоком и яйцами. Например, при длительном поступлении с кормом гамма-изомера ГХЦГ его обнаруживают в мышцах крупного рогатого скота и овец в количествах, в 25 раз меньших по сравнению с его содержанием в корме. Коэффициент материальной кумуляции мышцы - корм в этом случае составляет 0,04. Органами здравоохранения МДУ гамма-изомера в мясе установлен равным 0,005 мг/кг. ПДК гамма-изомера в кормах для откормочного скота, по-видимому следует принять равной ПДКкорма=МДУмяса/К м.к. Для нашего примера ПДК гамма-изомера ГХЦГ для откормочного скота равна 0,005/0,04=0,125мг/кг корма Выделение ГХЦГ с молоком составляет около 10% от уровня его содержания в корме в пересчете на жидкое молоко. Коэффициент выделения корм – молоко равен 0,1. ПДК гамма-изомера ГХЦГв корме для молочного скота можно вычислить по той же формуле ПДКкорма=МДУмолока/К выдел.=0,005/0,1=0,05мг/кг Аналогичные расчеты можно провести и для яиц. Коэффициент выделения гамма-изомера ГХЦГ с желтком при поступлении с кормом достигает 1. Поэтому ПДК гамма-изомера ГХЦГ в кормах для яйценоской птицы следует рекомендовать равной 0,005 мг/кг - величине МДУ гамма-изомера для яиц. Таким образом, исходным показателем, по которому устанавливают ПДК токсических веществ в кормах для сельскохозяйственных животных, является их МДУ в мясе, молоке и яйцах. ПДК токсических веществ в воздухе рабочей зоны и в питьевой воде устанавливают органы здравоохранения на основании комплекса токсикологических исследований, в воде рыбохозяйственных водоемов - соответствующие органы Минрыбпрома и Минсельхоза России. Однако до настоящего времени нет единых методических подходов к нормированию токсических веществ в воде рыбохозяйственных водоемов. Ряд авторов (Н.И. Лесликов, 1960, и др.) предлагают в качестве тест-организмов при экспериментальном обосновании ПДК токсических веществ в воде рыбохозяйственных водоемов использовать дафнии и другие низшие гидробионты, которые служат пищей для рыбы. Такой выбор едва ли будет удачным. ПДК токсических веществ устанавливают для рыбы, поэтому правильным было бы и в качестве тест- объекта использовать рыбу. Схемой проведения опытов должно быть предусмотрено, также, как и в опытах на теплокровных животных, определение в острых и хронических опытах максимально недействующей (нетоксичной), минимально токсичной (пороговой) и смертельной концентраций, а также СК50 при 96-часовом контакте токсического вещества с рыбой. Базисной концентрацией, по которой устанавливают ПДК, целесообразно принять максимально недействующую концентрацию. При этом обязательно должны быть предусмотрены исследования по разработке методики определения токсического вещества в воде, планктоне, рыбе, изучена динамика его остатков в воде и рыбе и установлены пути попадания токсиканта в рыбохозяйственный водоем. ПДК токсических веществ в воде рыбохозяйственных водоемов не может служить критерием оценки санитарного состояния водоема, как этo имеет место с ПДК или МДУ токсикантов в кормах или продуктах питания. Следовательно, ПДК химических веществ в воде рыбохозяйственных водоемов является лишь исходным показателем, на основании которого могут быть установлены регламенты применения пестицидов и других веществ в зоне водоемов или проведен контроль за работой очистных сооружений промышленных предприятий, сбрасывающих сточные воды в реки или моря. Поэтому ПДК в воде рыбохозяйственных водоемов не может быть меньше чувствительности аналитического метода определения остатков этого вещества в воде. По показателю ПДК или МДУ химических веществ в кормах и продуктах питания и скорости снижения их остатков в почве, растениях или организме животных устанавливают регламенты (ограничения) по применению веществ на растениях или животных. Основным регламентом на растениях служит «время ожидания» --срок (в днях) от момента последней обработки участков (кормовых культур, лугов, пастбищ) до уборки урожая на корм животным или выгонa на обработанное пастбище. Это время соответствует продолжительности исчезновения остатков пестицида до уровня, равного ПДК, установленной для кормов, в днях с момента последней обработки. Например, ПДК пестицида X в кормах для сельскохозяйственных животных установлена равной 2мг/кг. Исчезновение остатков этого пестицида на люцерне до 2 мг/кг происходит в течение25 дней со дня обработки. Следовательно, «время ожидания» пестицида X на люцерне должно составлять 25 дней. Для химических средств защиты животных устанавливают «сроки убоя», величина которых соответствует времени (в днях) снижения остатков в органотропном органе животного до МДУ химического вещества, установленного органами здравоохранения для мяса. Особенно жесткие регламенты должны быть установлены в случаях применения пестицидов, антигельминтиков и других ветеринарныx препаратов для дойного крупного рогатого скота и яйценоских птиц. В молоке и яйцах, как правило, не допускается или допускается на очень низком уровне содержание остатков токсических веществ. Поэтому для обработки дойных животных и яйценоской птицы следует применять такие препараты, которые очень быстро разрушаются в организме и не выделяются с молоком и яйцами. Если такой возможности нет, преимущество следует отдавать таким препаратам и методам применения, при использовании которых отмечается наиболее низкое выделение. Однако и для использования этих препаратов должны быть установлены жесткие регламенты. 16. Судебно-ветеринарная экспертиза отравлений сельскохозяйственных животных. Охрана природы и некоторые вопросы экологии. Судебно-ветеринарная экспертиза. Анализ многочисленных случаев отравления сельскохозяйственных животных показал, что они обусловлены в основном тем, что работники животноводства не обладают глубокими знаниями вопросов токсикологии. Это порождает беспечность, небрежность и нередко преступную безответственность должностных лиц по вопросам профилактики и охраны продуктивных животных от отравлений минеральными удобрениями, пестицидами, недоброкачественными кормами, ядовитыми растениями, вредными примесями, препаратами для борьбы с эктопаразитами и другими опасными средствами химизации, сельскохозяйственного производства. Во всех случаях гибели или вынужденного убоя животных от отравления проводится судебно-ветеринарная экспертиза для установления причин и обстоятельств падежа животных и привлечения виновных лиц к судебной ответственности. Органы следствия, суда и прокуратуры могут возложить функцию судебно-ветеринарной экспертизы на любого ветеринарного врача или группу экспертов. Их задача на основании анализа всех материалов, относящихся к делу, дать заключение о наличии или отсутствии отравления. Для экспертизы представляют все материалы следствия по данному делу, в том числе историю болезни, протокол судебно-ветеринарного вскрытия и результаты химико-токсикологического исследования проб кормов, воды, органов и тканей павших или вынужденно убитых животных. На основании всех документов составляют акт судебно-ветеринарной экспертизы. Он состоит из трех частей: введения, описательной части и заключения. Во введении указывают дату и место экспертизы, основание ее проведения, обстоятельства дела и подробное описание характера и предмета исследования, а также кем и в чьем присутствии ведется исследование. В описательной части точно, подробно и последовательно излагают факты исследования. В заключение делают обоснованные выводы проведенного исследования и дают ответы на специальные вопросы, поставленные перед экспертом в начале исследования. Заключение подписывают только эксперты. Для обоснованного, объективного и достоверного заключения требуется высокая эрудиция ветеринарного врача в вопросах токсикологии, поскольку он несет ответственность за заключение. На суде после оглашения экспертом заключения в целях разъяснения по заключению эксперту могут задавать вопросы судья, обвинитель, потерпевший, истец, ответчик, защитник и подсудимый. Эксперт так же, как и свидетель, потерпевший и другие участники уголовного процесса, не имеет права без разрешения следователя или прокурора разглашать данные предварительного следствия, о чем они дают подписку, Судебно-следственным органам дано право назначать и отводить экспертов или назначать повторную экспертизу, если первая была неполной. Судебно-ветеринарная экспертиза включает: судебно-ветеринарное вскрытие павших или вынужденно убитых животных, взятие проб патологического материала, кормов, воды и других материалов и проведение химико-токсикологического анализа их. Судебно-ветеринарное вскрытие производят только по письменному предписанию следственных органов. При одном лишь подозрении на отравление вскрытие животных может быть произведено по решению местной власти и заключению ветврача. На вскрытии присутствует комиссия из 2—3 официальных лиц. Вскрытие должно быть полным с осмотром всех органов и тканей с подробным четким описанием в протоколе фактических изменений внутренних органов, не допуская рассуждений и предположений. В протоколе вскрытия указывают, какой материал взят для исследований, в чем упакован, куда направлен и что надлежит сделать с трупом. Пробы патологического материала следует брать в чистую стеклянную тару в количестве 250—500 г, пробы кормов не более I кг каждого наименования можно упаковывать в чистую бумагу или целлофан. На тщательно упакованные пробы наклеивают этикетки и опечатывают сургучной печатью; прикладывают опись и сопроводительное письмо с указанием назначения исследований и предполагаемых ядовитых веществ. Пробы крови, органов и содержимого рубца жвачных животных после взятия должны быть немедленно заморожены и исследованы в течение 2 ч после гибели или убоя животных во избежание разложения и улетучивания нитритов, окислов азота и аммиака при отравлении нитратами. Пробы для анализа направляют нарочным в химико-токсикологический отдел соответствующей ветеринарной производственной районной, межрайонной, областной, краевой или республиканской лабораторий. Поступивший в лабораторию материал разделяют на три части. Первая часть может быть использована для основного анализа, вторая — для дополнительного, третья опечатывается и отправляется на хранение. Эта проба служит контрольной. Токсикологическому анализу подвергаются корма, вода, пастбища, сенокосные угодья, органы и ткани животных, продукты животноводства, в том числе птицеводства, рыбоводства и пчеловодства. Токсикологический анализ включает следующие методы исследования: Биологический метод основан на использовании дафний, мух дрозофил, комнатных мух, личинок комаров, на которых воздействуют экстрактами ядовитых веществ кормов или патологического материала. По токсическому эффекту и летальности насекомых судят о токсичности исследуемых объектов. Для исследования токсичности можно также использовать табельных белых мышей, которым внутрь, подкожно или внутрибрюшинно вводят водные или спирто-водные экстракты с последующим учетом клинических симптомов отравления и летальности подопытных животных. Биохимический метод основан на использовании ферментов ацетилхолинэстеразы и транспортной Na+, К+-АТ Фазы мембран гемолизированных эритроцитов кролика. При исследовании на наличие ФОС и карбаматов воздействуют на эритроциты водными экстрактами проб и после 2-часового контактирования определяют остаточную активность указанных ферментов. При выраженном более чем на 30 % угнетении ацетилхолинэстеразы и Na+, К+-АТ Фазы говорят о наличии специфических ингибиторов в исследуемых объектах. Исследования ведут в сравнении с контрольными пробами. Метод не специфичен, но отличается высокой чувствительностью. Химические методы включают колориметрические, титрометрические принципы и принципы осадочной реакции. Колориметрия основана на образовании цветных комплексов при взаимодействии ядохимикатов с реактивами, и по степени окраски судят о концентрации токсических веществ в исследуемых объектах. Титрометрию используют для количественного определения хлорида натрия в комбикормах для свиней и птиц, высокочувствительных к указанной соли. Метод основан на титровании иона хлора раствором нитрата серебра в присутствии в качестве индикатора хромата калия. Реакцию осаждения применяют при определении алкалоидов. Метод основан на образовании осадка при взаимодействии алкалоидов с танином, хлоридом ртути, фосфорно-вольфрамовой, фосфорно-молибденовой или пикриновой кислотами вследствие нерастворимости в воде образующихся продуктов. Физико-химические методы наиболее перспективны для практического использования. Они включают методы тонкослойной и газовой хроматографии. Тонкослойная хроматография основана на применении системы подвижных растворителей на хроматографической пластинке, проходящих определенное расстояние от линии старта до линии финиша. Количественное определение проводят на основании сравнения размера пятен, образуемых из исследуемых проб со стандартными растворами. Метод тонкослойной хроматографии является полуколичественным, но чувствительность его высокая. Газовая хроматография — наиболее совершенный физико-химический метод токсикологического анализа. Его используют для определения хлорорганических и фосфорорганических соединений. Экстракты из токсических веществ пропускают через металлические и стеклянные колонки, заполненные твердым порошкообразным носителем. Исследуемые соединения с помощью инертного газа (газ-носитель) пропускают через колонку, в которой они разделяются на отдельные компоненты. Выход этих компонентов регистрируют с помощью детектора. Сигнал с детектора усиливается, передается на самописец и регистрируется на ленте в виде пиков. По времени выхода идентифицируют вещество, а по размеру пика устанавливают его количество. Помимо этих методов, иногда используют спектроскопию, полярографию и методы нейтронно-активационного анализа. Охрана природы и некоторые вопросы экологии. Научно-технический прогресс в области промышленного и сельскохозяйственного производства тесно связан с необходимостью принятия эффективных природоохранных мер по очистке промышленных выбросов в атмосферу от вредных примесей, обезвреживанию сточных вод, организации замкнутых систем производственного использования воды, рациональному использованию в растениеводстве минеральных удобрений, химических средств защиты растений от вредителей, болезней и сорняков. |