|
|
реферат на тему акне. Куведер Мария Хидаровна Проверил ассистент кафедры дерматовенерологии и косметологии Черникова Евгения Васильевна Новосибирск 2020 г. План Введение Микроскопическое исследование
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
«Новосибирский государственный медицинский университет»
Министерства здравоохранения Российской Федерации
(ГБОУ ВПО НГМУ Минздрава России)
Заведующая кафедрой
дерматовенерологии и косметологии
Немчанинова О.Б.
«Серодиагностика сифилиса: РПГА, реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ). Экспресс-диагностика сифилиса и ее значение»
Выполнил:
студентка 4 курса 7 группы
педиатрического факультета
Куведер Мария Хидаровна
Проверил:
ассистент кафедры
дерматовенерологии и косметологии
Черникова Евгения Васильевна
Новосибирск 2020 г.
План:
Введение
Микроскопическое исследование на бледную трепонему
Серологическая диагностика сифилиса
Отборочные серологические реакции на сифилис или микрореакции на стекле для экспресс диагностики
Диагностические подтверждающие серологические реакции при сифилисе. Реакция Вассермана.
Группа специфических серологических реакций
Роль серологических реакций для оценки эффективности терапии
Исследование спинномозговой жидкости
Список литературы
Введение
Серологические исследования при сифилисе имеют большое значение. Вопросы диагностики, профилактические мероприятия, проведения и оценки эффективности терапии и т.д. не могут решаться без помощи серологических исследований. Практическая ценность серодиагностики велика, потому что положительные серологические реакции в большинстве случаев указывают на несомненный сифилис даже в отсутствии клинических явлений. Особое значение методы серодиагностики имеют:
При проведении профилактических мероприятий: серологическом обследовании больных соматических стационаров, обследование доноров, беременных, лиц, поступающих на работу, работников детских учреждений, пищевой промышленности и т.д.
При первичном периоде сифилиса.
При скрытом сифилисе раннем и позднем, когда клинические явления отсутствуют.
При заболевании внутренних органов и нервной системы.
При снятии с учета больных сифилисом, закончивших лечение.
При контроле и оценке результатов терапии.
При всех заболеваниях неясной этиологии и подозрительных на сифилис.
Серологическая диагностика сифилиса
Серологические реакции, в зависимости от выявляемых ими антител, подразделяются на три группы:
I. Липидные (реагиновые) реакции:
1) микрореакции на стекле с липидными антигенами — экспресс метод диагностики (микрореакции преципитации — МРП, VDRL, CMF, RPR и др.);
2) реакция связывания комплемента (РСК) с липидными антигенами — реакция Вассермана;
3) осадочные реакции (реакция преципитации Кана, цитохолевая реакция Закса — Витебского и др.).
II. Групповые трепонемные реакции:
1) РСК с протеиновым антигеном Рейтера;
2) реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
3) реакция иммунного прилипания (РИП).
III. Видоспецифичные протеиновые трепонемные ре+
акции:
1) реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ);
2) РИФ_Абс. и ее варианты (IgM_FTA_ABS, 19S_IgM_FTA_ABS, и др.);
3) реакция непрямой гемагглютинации бледных трепонем (РПГА).
Различные серологические реакции используются для разных практических целей. За рубежом при массовых обследованиях населения и при необходимости экстренного выявления сифилиса используются отборочные реакции (VDRL и др.). Для диагностики (подтверждения) сифилиса применяют РСК с кардиолипиновым и трепонемным антигенами и РИФ_Абс.Сцелью контроля за эффективностью терапии рекомендуют VDRL в количественном исполнении, 19S_IgM_FTA_ABS, и в качестве реакции экспертизы в случаях расхождения трепонемных реакций применяют РИТ. При отрицательных результатах РИТ и 19S_IgM_FTA_ABS считается, что обследуемый не страдает сифилисом.
В отечественной практике используют комплекс серологических реакций, включающий:
1) отборочные реакции микропреципитации (МРП) с кардиолипиновым антигеном;
2) стандартные серологические реакции — РСК с кардиолипиновым и трепонемным антигенами;
3) РИФ и ее модификацию РИФ_Абс.;
4) РИТ.
Отборочные серологические реакции на сифилис или микрореакции на стекле для экспресс диагностики
Эти реакции используются для массовых серологических обследований на сифилис (лиц декретированных профессий, больных соматических стационаров, пациентов поликлиник и амбулаторий); для экспресс_диагностики в кожно_венерологических диспансерах. Их не применяют для обследования беременных и доноров, а также для контроля после излечения больных сифилисом.
Микрореакции можно ставить в обычных клинических лабораториях.
Постановка микрореакций осуществляется на стекле с каплей крови, плазмы, активированной или неактивированной сывороткой и специальным кардиолипиновым антигеном. Кардиолипиновый антиген отличается высокой чувствительностью и представляет собой экстракт бычьего сердца, обогащенный холестерином и лецитином. МРП можно проводить по количественной методике с разведением сыворотки крови.
Преимуществом экспресс метода являются быстрота получения ответа (через 30–40 мин), небольшой объем необходимой для анализа крови (2–3 капли плазмы или сыворотки).МРП могут давать ложноположительные, а в отдельных случаях и отрицательные результаты при активных формах сифилиса, поэтому окончательный диагноз этим методом устанавливать запрещено.
В качестве отборочных реакций рекомендуют также применять реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА). Наивысшую чувствительность этого теста отмечают у нелеченных (100%) и леченных (99,6%) больных как с ранними, так и поздними формами сифилиса. При контроле результатов лечения тест не имеет значения, так как дает отрицательные результаты в малом количестве случаев. Возможность использовать антиген Рейтера, простота, высокая чувствительность, малая стоимость ставят РПГА на первое место среди методов для диагностики сифилиса. Ценность ее еще более повышается при автоматическом выполнении.
Диагностические подтверждающие серологические реакции при сифилисе
Стандартные серологические реакции.
Реакция Вассермана (РВ). Разработана А. Вассерманом совместно с А. Нейссером и Бруком в 1906 г. Исторически это первый серологический метод диагностики сифилиса. Реакция основана на феномене связывания комплемента (реакция Борде — Жангу) и определяет противолипидные антитела (реагины) — классическая реакция. В настоящее время реакцию связывания комплимента ставят еще со специфическими трепонемными
антигенами (неклассическая реакция).
Липидные антигены, используемые в РВ, являются неполноценными антигенами — гаптенами. Они не обладают иммунногенной способностью. После специальной обработки эти гаптены приобретают свойства полноценных антигенов. Антигены, приготовленные из культуральных и патогенных трепонем, представляют собой полноценные антигены. В РВ используют одновременно два антигена: кардиолипиновый и трепонемный. Трепонемный антиген представляет собой обработанную ультразвуком взвесь апатогенных культуральных трепонем. Эти антигены образуют совместно с реагинами сыворотки крови больного иммунный комплекс, способный адсорбировать, связывать комплемент. Поскольку образовавшийся комплекс (реагины + антиген + комплемент) невидим, для определения наступившего связывания комплемента необходима как индикатор гемолитическая система (смесь эритроцитов барана с гемолитической сывороткой).
Если комплемент связан в первой фазе реакции (реагины + антиген + комплемент), то гемолиз не наступит, эритроциты выпадут в осадок, легко заметный невооруженным глазом (РВ положительная). Если в первой фазе комплемент связан не будет вследствие отсутствия в испытуемой сыворотке реагинов, то он используется гемолитической системой и произойдет гемолиз (РВ отрицательная). Степень выраженности гемолиза в реакции Вассермана оценивается плюсами: полное отсутствие гемолиза 4+ (РВ резко положительная), едва начавшийся гемолиз 3+ (РВ положительная), значительный гемолиз 2+ (РВ слабоположительная), полный гемолиз — РВ отрицательная.
Реакция Вассермана обладает недостаточной чувствительностью. Она отрицательна в начале первичной стадии, бывает негативной у 1/3 больных третичным активным сифилисом с поражениями кожи, слизистых оболочек, костей, внутренних органов, центральной нервной системы, поздним врожденным сифилисом, особенно если больные
в прошлом подвергались лечению антибиотиками. В первичном периоде сифилиса РВ становится положительной через 2–3 нед после появления твердого шанкра или на 5–6_й неделе после заражения, во вторичном—почти у 100% больных, в третичном активном — 70–75%,при спинной сухотке—у 50%, прогрессивном параличе—95–98%.
После окончания специфического лечения первичного серопозитивного и вторичного свежего сифилиса реакция становится отрицательной в сроки от 1,5 до 7–8 мес.
Группа специфических серологических реакций
Существует пять основных типов специфических реакций, в которых используется трепонемный антиген. Они отличаются друг от друга методами определения комплексов антиген—антитело: иммунофлюоресценция, иммобилизация, иммуноферментный анализ, гемагглюцинация, фиксация комплемента.
1. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) занимает центральное положение среди специфических реакций.
Принцип ее заключается в том, что исследуемой сывороткой обрабатывается антиген, который представляет собой бледная трепонема штамма Никольса, полученный из орхита кролика, высушенный на предметном стекле и зафиксированный ацетоном. После промывания препарат обрабатывается люминесцирующей сывороткой против глобулинов человека. Флюоресцирующий комплекс (античеловеческий глобулин + флюоресцеин тиоизоционат) связывается с человеческим глобулином на поверхности бледной трепонемы и может быть идентифицирован методом люминесцентной микроскопии.
Для серодиагностики сифилиса используется несколько модификаций РИФ:
а) реакция иммунофлюоресценции с абсорбцией (РИФ6Абс.). Групповые антитела удаляются из исследуемой сыворотки с помощью разрушенных ультразвукомкультуральных трепонем, что резко повышает специфичность реакции. Поскольку исследуемая сыворотка разводится только 1:5, то модификация сохраняет высокуючувствительность.
Показания для постановки РИФ_Абс.:
— положительная реакция Вассермана у беременных при отсутствии клинических и анамнестических данных в пользу сифилиса;
— положительная реакция Вассермана у лиц с различными соматическими и инфекционными заболеваниями;
— отрицательная реакция Вассермана у лиц с клиническими проявлениями сифилиса (метод ранней диагностики сифилиса).
Переход положительной РИФ_Абс. в отрицательную, в результате проведенного лечения, является абсолютным критерием успешности противосифилитического лечения.
Ложноположительные результаты РИФ_Абс. отмечали у беременных, алкоголиков, больных с ревматоидным артритом, системной и дискоидной красной волчанкой, склеродермией, смешанной болезнью соединительной ткани, циррозом печени. Иногда реакция бывает положительной у здоровых людей. Кроме того, могут быть технические ошибки;
б) реакция IgM РИФ Абс. Выше указано, что у больных с ранним сифилисом в первые недели болезни появляются IgM, которые в данный период являются носителями специфических свойств сыворотки. В более поздние сроки болезни начинают преобладать IgG. Этот же класс иммуноглобулинов ответственен и за ложноположительные результаты, так как групповые антитела бывают результатом длительной по времени иммунизации сапрофитными трепонемами (полости рта, половых органов и др.).
Раздельное изучение классов Ig представляет особый интерес при серодиагностике врожденного сифилиса, где противотрепонемные антитела, синтезированные в организме ребенка, будут представлены IgM, а IgG будут материнского происхождения. Реакция IgM_РИФ_Абс. основана на использовании во второй фазе коньюгатации_IgM, вместо сифилисе доля положительных результатов РИТ приближается к 100%. Негативация РИТ в результате полноценного лечения наступает не всегда; реакция может оставаться положительной на протяжении многих лет. Показания к постановке реакций такие же, как для РИФ_Абс.
Ложноположительная РИТ может наблюдаться у больных лепрой, трепонематозными заболеваниями (пинта, беджель и пр.), злокачественными заболеваниями, красной волчанкой, сердечнососудистыми заболеваниями, пневмонией.
3. Иммуноферментный анализ (ИФА). Принцип метода заключается в том, что антигенами бледной трепонемы сенсибилизируется поверхность твердофазового носителя (лунки панелей из полистирола или акрила). Затем в такие лунки вносится исследуемая сыворотка. При наличии в сыворотке антител против бледных трепонем образуется комплекс антиген—антитело, связанный с поверхностью носителя. На следующем этапе в лунки наливают антивидовую (против глобулинов человека) сыворотку, меченную ферментом (пероксидазой или щелочной фосфатазой). Меченые антитела (конъюгат) взаимодействуют с комплексом антиген—антитело, образуя новый комплекс. Для его выявления в лунки наливают раствор субстрата (5_аминосалициловая кислота). Под действием фермента субстрат меняет цвет, что указывает на положительный результат реакции. По чувствительности и специфичности метод близок к РИФ_Абс. Показания к постановке ИФА такие же, как для РИФ_Абс. Разработаны макро_ и микроварианты ИФА. Реакция может быть автоматизирована.
4. Реакция непрямой гемагглютинации (РПГА). Принцип реакции заключается в том, что в качестве антигенаиспользуются формалинизированные и таннизированные эритроциты, на которых адсорбированы антигеныбледной трепонемы. При добавлении такого антигена ксыворотке больного происходит склеивание эритроцитов — гемагглютинация. Специфичность и чувствительность реакции выше по сравнению с другими методами
обнаружения антител к бледной трепонеме при условии высокого качества антигена. Реакция становится положительной на 3_й неделе после заражения и остается таковой спустя много лет после выздоровления. Число ложноположительных и ложноотрицательных результатов невелико. Разработан микрометод этой реакции, а также автоматизированная реакция микрогемагглютинации. Аналогом этой реакции за рубежом является ТРНА (T. pallidum haemagglutination).
5. Реакция гемабсорбции в твердой фазе (IgM SPHA
(IgM—Solid phase haemabsorption).
Роль серологических реакций при оценке эффективности терапии.
Серологические реакции являются показателем эффективности лечения. Их необходимо проводить перед началом, во время и после противосифилитического лечения. При первичном сифилисе это особенно важно для определения длительности лечения, а при вторичном и других формах сифилиса — для оценки результатов лечения.
Многочисленными исследованиями установлены примерные сроки негативации серологических реакций у больных с различными клиническими формами сифилиса после окончания полноценного специфического лечения. У некоторых больных, однако, несмотря на полноценное лечение, серологические реакции остаются положительными и после него. В этих случаях речь может идти о серорезистентности пролеченных больных или о стойко положительных серологических реакциях.
При этом нередко употребляемое определение «серорезистентный сифилис» следует считать неверным, так как оно заранее предполагает, что у человека, страдающего сифилисом, положительные серологические реакции. Причины серорезистентности во многом остаются не ясными. По мнению Н. М. Овчинникова и Т.В. Васильева (1987), общей причины серорезистентности не существует. Также нельзя однозначно ответить, нужно ли продолжать лечение таких больных. Основными причинами серорезистентности являются:
— поздно начатое и неполноценное лечение больного;
— наличие у больных сифилисом хронических сопутствующих заболеваний (туберкулез, малярия и т. п.);
— присутствие трепонем в очагах, трудно доступных для действия антибиотиков (особенно если они находятся в измененной форме или в полимембранных фагосомах);
— переход бледных трепонем в формы, трудно поддающиеся действию пенициллина (L_формы, цисты, гранулы), а также наличие в организме больного флоры, вырабатывающей пенициллиназу, полностью или частично нейтрализующую пенициллин; нахождение трепонем в полимембранных фагосомах клеток организма, что делает трепонемы недоступными для действия антибиотика и антител;
— нарушения липидного обмена.
Существует также точка зрения, что серорезистентность у лиц, получивших полноценное специфическое лечение и не имеющих никаких признаков сифилиса, является результатом аутоиммунных реакций, происходящих в организме (аутоаллергия). Возможно, что у некоторых людей серорезистентность является анамнестической следовой реакцией уже в отсутствие бледных трепонем.
Таким образом, вопрос о причинах серорезистентности и необходимости продолжения лечения должен решаться индивидуально.
|
Список источников:
ФЕДЕРАЛЬНЫЕ КЛИНИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ВЕДЕНИЮ БОЛЬНЫХ СИФИЛИСОМ
Ю.И. Скрипкин учебник «Кожные и венерические болезни»
Ю.С. Бутов национальное руководство «Дерматовенерология»
ФЕДЕРАЛЬНЫЕ КЛИНИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ВЕДЕНИЮ БОЛЬНЫХ АКНЕ
Огурцова А.Н. Критерии оценки степени тяжести в выборе тактики лечения угревой бо- лезни // Дерматологія та венерологія. – 2004. - No 1 (23). - С. 45-47.
|
|
|
Скачать 28.88 Kb.