Микробиология стандарт. стандарт. Лабораторная работа 1 дезинфекция и стерилизация цель работы Ознакомиться с методами дезинфекции и стерилизации
Скачать 76.79 Kb.
|
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 9 Изучение морфологии дрожжей Цель работы: Ознакомиться с морфологическими особенностями грибов и дрожжей, встречающихся при производстве пищевых продуктов. Освоить технику микроскопического исследования грибов и дрожжей в препаратах «раздавленная капля». Материалы и оборудование: Микроскоп; пипетка, шпатели, препаровальные иглы и бактериологические петли; предметные и покровные стекла; фильтровальная бумага; спиртовка; поднос для предметных стекол; чистая культура дрожжей, марлевые повязки, перчатки, парафильм или пищевая пленка. Теоретическая часть: Морфология дрожжей и их характеристика Дрожжи – это высшие одноклеточные грибы. Большинство дрожжей относится к двум классам грибов – аскомицетам и дейтеромицетам. Дрожжи по отношению к кислороду делятся на факультативные анаэробы (в аэробных условиях осуществляют дыхание и активно накапливают биомассу, а в анаэробных условиях вызывают спиртовое брожение) и аэробы. Морфологически дрожжи разнообразны. Они отличаются друг от друга размерами и формой клеток. Размеры клеток дрожжей в зависимости от вида варьируют в следующих пределах; от 2,5 до 10 мкм в поперечнике и от 4 до 20 мкм в длину. Морфологическое разнообразие форм дрожжей изображено на рис. 6. а б в г д Е ж з Рис. 6 Формы дрожжевых клеток: а - овальная яйцевидная; б - цилиндрическая; в – апикулятная; лимоновидная; г – стреловидная; д – треугольная; е – серповидная; ж – колбовидная; з, и - мицелевидная Форма и размеры дрожжевых клеток зависят от вида, возраста, питательной среды, способа культивирования. В зависимости от вида дрожжи вегетативно могут размножаться почкованием (так размножаются дрожжи овальной формы), бинарным делением (характерно для дрожжей цилиндрической или палочковидной формы) или почкующимся делением. Кроме вегетативного размножения, дрожжи – аскомицеты могут размножаться половым путем с образованием аскоспор. Из дрожжей, относящихся к классу аскомицетов, большое значение имеют дрожжи-сахаромицеты рода Saccharomyces, которыешироко используются в пищевой промышленности. Главным биохимическим признаком этих дрожжей является то, что они сбраживают сахара с образованием этилового спирта и диоксида углерода. Дрожжи, используемые в промышленности, называются культурными дрожжами. Так, в хлебопекарном производстве и в производстве спирта используются верховые дрожжи рода Saccharomyces cerevisiae. Дрожжи вида Saccharomyces minor нашли применение в производстве ржаного хлеба и кваса. В пивоварении используются низовые дрожжи Saccharomyces carlsbergensis. Дрожжи-сахаромицеты имеют овальную форму, вегетативно размножаются почкованием, в неблагоприятных условиях размножаются половым путем аскоспорами. Некоторые спорогенные дрожжи являются дикими дрожжами. Эти дрожжи так же, как и культурные, способны осуществлять спиртовое брожение, но помимо спирта образуют много побочных продуктов (таких как альдегиды, высшие спирты, эфиры и др.) и поэтому ухудшают органолептические показатели продукта. Эти дрожжи являются вредителями производства различных напитков (пива, вина, безалкогольных напитков), а также возбудителями порчи многих пищевых продуктов. Дрожжи - дейтеромицеты могут размножаться только вегетативным способом. Некоторые из этих дрожжей (например, дрожжи рода Candida) используются в промышленности для получения кормового белка, органических кислот, витаминов и других продуктов микробного синтеза. Дрожжи вида Torulopsis kefir входят в состав симбиотической закваски – кефирного грибка. Другие представители несовершенных (аспорогенных) дрожжей являются дикими дрожжами и вызывают порчу многих пищевых продуктов. К дрожжам- вредителям производства относятся дрожжи родов Pichia, Hansenula, Candida, Rhodotorula, Torula, Torulopsis, Mycoderma, Trichosporon и др. Среди аспорогенных дрожжей встречаются ложные дрожжи, которые образуют псевдомицелий и растут на жидких субстратах в виде пленок. Ход работы: На занятии учащиеся изучают морфологические признаки грибов и дрожжей, их культуральные свойства, знакомятся с представителями отдельных классов. Осваивают методику приготовления препаратов «раздавленная капля» и технику микроскопирования живых неокрашенных объектов. Приготовление препаратов типа «раздавленная капля» При исследовании дрожжей на предметное стекло наносят суспензию дрожжей, накрывают покровным стеклом, излишки воды удаляют фильтровальной бумагой. Микроскопируют препарат и объективом х8 и х40. ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №10 Изучение культуральных свойств выросших в чашках колоний Цель работы: Изучить культуральные свойства выросших колоний Материалы и оборудование: Чашки Петри, среда Чапека, стерильные шпатели, пипетки, лупа, штатив, петля, перчатки, марлевые повязки, парафильм или пищевая пленка. Ход работы: Вырастить методом Коха колонии микроорганизмов. Рассмотреть выросшие колонии в проходящем свете невооруженным глазом (макроскопически) и с помощью лупы описать следующее: Форму колоний Формы колоний, которые могут вырастать на плотной среде в чашках Петри, изображены на рис. 7. Рис.7 Форма колоний: а – круглая; б – круглая с фестончатым краем; в – круглая с валиком по краю; г; д – ризоидная; е – с ризоидным краем; ж –амебовидная; з – нитевидная; и – складчатая; к – неправильная; л – концентрическая; м – сложная Форма колоний может быть круглой, неправильной, корневидной, эллипсовидной и т.д. Размеры колоний Колонии, имеющие диаметр более 4 мм являются крупными, от 2 до 4 мм – средними, от 1 до 2 мм – мелкими, менее 1 мм - точечными или росинчатыми. Цвет колоний Микроорганизмы, содержащие пигменты могут быть желтого, оранжевого, розового, кремового и др. цветов. Большинство микроорганизмов не содержат пигментов и растут на плотных средах в виде серовато-матовых колоний. Такие колонии называют бесцветными. Рельеф (профиль) колоний Рельеф или профиль колоний может быть плоским, выпуклым, куполообразным, смешанным - плоским с выпуклым центром, кратерообразным и др. (рис. 8). Рис. 8 Профиль колоний: а – изогнутый; б – кратерообразный; в – бугристый; г – врастающий в агар; д – плоский; е –выпуклый; ж – каплевидный; з - конусовидный 5. Поверхность колоний Поверхность колоний может быть гладкой, блестящей, шероховатой, морщинистой, извилистой и т.д. 6. Характер края колоний Разновидности края колоний изображены на рис. 9. Рис.9 Край колоний: а - гладкий; б – волнистый; в – зубчатый; г – лопастный; д – неправильный; е – реснитчатый; ж – нитчатый; з – ворсинчатый; и - ветвистый Край может быть ровным (гладким); волнистым; локонообразным (нитчатым); лопастным; бахромчатым; зазубренным; корневидным (ветвистым) и др. Прозрачность колоний Колонии бывают прозрачные, полупрозрачные и непрозрачные. 8. Структуру колоний Структура колоний бывает однородная (гомогенная) и неоднородная (гетерогенная). Неоднородные колонии могут быть мелко- и крупнозернистыми, радиально или концентрически исчерченными, чешуйчатыми и др. 9. Консистенцию колоний Определяется при приготовлении препаратов для микроскопического анализа. Сделать выводы ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 11 Выращивание микроорганизмов Цель работы: Вырастить уникальные образцы микроорганизмов Бактерии увлекательный вид микроорганизмов, которые играют большую роль в нашей жизни, хотим мы этого или нет. Попробуйте вырастить ваши собственные образцы бактерий, наблюдая, как они воспроизводятся в короткий промежуток времени. Сравните ваши оригинальные образцы с другими людьми и получить доказательства того, что бактерии действительно есть везде! Материалы и оборудование: Чашки Петри, питательная среда, ватные тампоны, парафильм или пищевая пленка, марлевые повязки, перчатки Ход работы: 1.Приготовьте чашку Петри с небольшим количеством питательной среды. 2. Используйте ватный тампон на определенной территории вашего дома (т.е. необходимо взять образец, протирая ватным тампоном поверхность по вашему выбору). 3. Стряхните тампон над чашкой, прежде чем положить крышку на место и загерметизируйте чашку парафильмом. 4. Поместите чашку в теплое помещение в течение на 2 или 3 дня. Проверяйте рост бактерий каждый день, делая рисунки, фотографии и описание изменений. ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №12 Выращивание своих собственных микроорганизмов Цель работы: Вырастить уникальные образцы своих собственных микроорганизмов Бактерии увлекательный вид микроорганизмов, которые играют большую роль в нашей жизни, хотим мы этого или нет. Попробуйте вырастить ваши собственные образцы бактерий, наблюдая, как они воспроизводятся в короткий промежуток времени. Сравните ваши оригинальные образцы с другими людьми и получить доказательства того, что бактерии действительно есть везде! Материалы и оборудование: Чашки Петри, питательная среда, ватные тампоны, парафильм или пищевая пленка, перчатки, марлевая повязка, штатив. Ход работы: 1.Приготовьте чашку Петри с небольшим количеством питательной среды. 2. Используйте ватный тампон по руке (т.е. необходимо взять образец, протирая ватным тампоном поверхность по вашему выбору). 3. Стряхните тампон над чашкой, прежде чем положить крышку на место и загерметизируйте чашку парафильмом. 4. Поместите чашку в теплое помещение в течение на 2 или 3 дня. Проверяйте рост бактерий каждый день, делая рисунки, фотографии и описание изменений. ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №13 Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам Цель работы: Определить чувствительность микроорганизмов к антибиотикам. Материалы и оборудование: чашка Петри 4шт, питательная среда Чапека, агар, шпатели, иглы, парафильм или пищевая пленка, антибиотики, марлевые повязки, перчатки. Практическая часть: Приготовить питательную среду и разлить ее по чашкам Петри, накрыть пленкой до опыта. Чашку Петри №1, 2 оставить в туалете на 15 мин В чашке Петри №3, 4 оставить отпечаток не мытых рук Наблюдать за ростом микроорганизмов Чашки № 1, 3 оставить без изменений и наблюдать за дальнейшим ростом микроорганизмов (контроль) В чашках Петри №2, 4 на колонии бактерий нанести с помощью пипетки антибиотики и оставить для дальнейшего роста микрооранизмов. Сравнить чашки № 1 и №2; №3 и №4. Сделать выводы. |