лекции частная микробиология. Лекция Возбудители стафилококкозов и стрпетококкозов
 Скачать 211.88 Kb.
|
В лаборатории из присланного материала проводят следующие исследования:Приготовление мазков, окраска их по Грамму и микроскопия. Посев присланного материала на питательные среды и выделение чистой культуры, определение культуральных и биохимических свойств. Определение патогенности – проводят заражение лабораторных животных – биопроба. Микроскопирование – делают мазки, красят по грамму и смотрят. Морфология: в мазках стафилококки располагаются скоплениями, хараткреный признак расположения скопление напоминающее гроздь винограда. Стафилококки подвижны, спор и капсул не образуют, грамположительны. Прямая микроскопия мазков, приготовленных из патматериала (гноя) дает только ориентировочный диагноз, так как стафилококки постоянные обитатели кожи и слизистых оболочек, что создает определенные трудности в лабораторной диагностике стафилококковой инфекции. Посев на питательные среды МПА, МПБ – изучают культуральные свойства. Стафилококки хорошо растут на обычных питательных средах в аэробных и анаэробных условиях. Они аэробы и факультативные анаэробы. Оптимальная температура роста – 37 С. На МПА они образуют крупные круглые колонии, блестящие с ровными краями различного цвета – золотистого, белого и лимонно-желтого, поэтому в зависимости от цвета различают: -Ст. ауреус – золотистый (патогенный вид) -Ст. альбус – белый (менее патогенный) -Ст. цитреус – лимонно-желтый (не патогенный) На МПБ образует обильное помутнение и интенсивный осадок на дне пробирки. При посеве на МПЖ уколом вызывает разжижение желатины в виде воронки. Дифференциация патогенных от сапрофитов.Для дифференциации патогенных стафилококков от сапрофитных делают посевы на специальные питательные среды. На селективную среду – обычный МПА с добавлением 10 % натрия хлорида – патогенные стафилококки выдерживают повышенную концентрацию соли и растут, а непатогенные и другие виды МОГ погибают. Кроме селективной среды делают посев на МПА с кровью (кровяной агар) – патогенные стафилококки обладают гемолитическими свойствами (гемолиз эритроцитов) – вокруг колонии – зона гемолиза. Биохимические свойства.Свертывают молоко, обесцвечивают в молоке метиленовую синьку, аммиак, сероводород. Среду с углеводами разлагают до кислоты и газа. Ферментация маннита – рассматривается как фактор патогенности стафилококка. Также для дифференциации патогенных от сапрофитных определяют у них фермент коагулазу и ДНК-азу. Коагулаза фермент, выделяют только патогенные стафилококки, способен свретывать плазму крови животных. Как определяют наличие коагулазы – берут у кролика кровь, получают плазму, затем в плазму вносят выделенную культуру стафилококков и ставят в термостат при температуре 37 С на несколько часов. Если плазма крови свернулась - образуется желеобразный сгусток – это патогенный стафилококк. Для выявления патогенности стафилококка проводят биопробу на лабораторных животных. Патогенность обусловлена выделением летального и дерматонекротического токсина. Летальный токсин определяют путем введения культуры в/в кролику. При наличии кролик погибает через 15 минут. Дерматонекротический определяют – кролику выбривают сбоку шерсть и внутрикожно вводят 0,2 мл культуры – при наличии некротоксина наступает некроз кожи через 1-2 дня. |