Инструкц. карта к прак № 32 гемоглобин. Литература для подготовки Зеленский и др. Анатомия и физиология сельскохозяйственных животных
 Скачать 17.94 Kb.
|
|
Инструкционно - технологическая карта На выполнение лабораторной работы № 32 по предмету Анатомия и физиология Тема: Система крови Наименование работы: Определение гемоглобина в крови. Цель: Освоить методику определения гемоглобина методом Сали. Приобретаемые умения и навыки: Владеть техникой определения гемоглобина в крови. Норма времени: 2 часа. Оснащение рабочего места: кровь, пробирки. Гемометры, 0,1 % раствор соляной кислоты, пипетки, дистиллированная вода. Особые правила по техники безопасности на рабочем месте: При работе следует соблюдать правила безопасности, личную и общественную гигиену. Бережное отношение к оборудованию. Литература для подготовки: Зеленский и др.- «Анатомия и физиология сельскохозяйственных животных» - М. Агропроиздат, 2015 г. А.А. Сысоев, И.П. Битюков «Практикум по физиологии с/х животных» стр. 73 Ход работы. Освоить методику определения гемоглобина в крови по методу Сали,, изучив для этого текст методического руководство № 1 и проделав соответствующую аналитическую работу. Рассчитать количество гемоглобина в абсолютных цифрах. Ответить на вопросы. Задание для практической работы. Описать в тетради определение гемоглобина к крови по методу Сали и произвести соответствующие расчеты. Контрольные вопросы. Что такое гемолиз? Назовите и напишите форменные элементы крови, где они образуются? Дайте характеристику эритроцитам? (форма, строение, функции) Какие вещества необходимы для образования эритроцитов? Что такое эритропоэз? Какое значение для организма имеет гемоглобин? Методическое руководство № 1. Определение гемоглобина по методу Сали. Ход определения. В градуированную пробирку гемометра наливают 0,1 н. раствора соляной кислоты до нижней метки, нанесенной вокруг пробирки. В капиллярную пипетку, прилагаемую к прибору, наливают кровь до метки 0,02 мл и выливают ее в пробирку прибора. Не вынимая пипетку из раствора, несколько раз промывают ее. После этого содержимое пробирки тщательно перемешивают и оставляют на 5 минут в штативе до полного гемолиза эритроцитов. Гемоглобин , вступая в реакцию с соляной кислотой, образует солянокислый гематин, обуславливающий коричневую окраску раствора. Через 5 минут по каплям при постоянном помешивании добавляют дистиллированную воду до тех пор, пока цвет раствора не совпадет со стандартом. Деление, до которого поднялась жидкость в пробирке, показывает содержание гемоглобина (в %) по отношению к норме. Абсолютное содержание гемоглобина в стандартных растворах, которое принимают за норму, равно 16,67 г/% гемоглобина в крови. Для определения количества гемоглобина в абсолютных цифрах производят пересчет. Допустим с, что по шкале гемометра установлено 80 единиц гемоглобина, тогда абсолютное содержание его в крови будет: 80 : 100 = Х= 80*16,67 / 100 =13,33г/%. или 133 г/л (так как 1 г/% = 10 г/л) Если жидкость в пробирке доходит до метки 100, то содержание гемоглобина будет равно 16,67, а в тех случаях, когда показания будет выше или ниже 100, делают пересчет, как указано выше. Гемоглобин – это сложный железосодержащий белок, который обеспечивает перенос кислорода из органов дыхания в ткани. Он также обладает свойством частично связывать углекислый газ и выводить его из организма. У человека и позвоночных животных содержится в эритроцитах, а у беспозвоночных – в плазме крови и других тканях. Благодаря этому белку повышается тонус, активизируется обмен веществ организма и укрепляется иммунитет. На уровень гемоглобина влияет множество факторов: пол, возраст, порода, кормление, условия содержания, физические нагрузки, инфекционные болезни и даже высота над уровнем моря. Содержание этого белка в крови животных в лабораторных условиях контролируется с помощью применения тест-наборов. В основном это фотометрические методы, позволяющие точно определить его концентрацию. У здоровых животных она составляет (г/л): крупный рогатый скот – 99-129; лошади – 80-140; овцы – 90-133; козы – 100-150; свиньи – 90-110; кошки – 100-140; собаки – 110-170; кролики – 105-125; куры – 80-120; утки – 100-125. Отклонение от нормы в меньшую или большую сторону является патологией и свидетельствует о нарушениях в организме животного. Так, например: – увеличение количества гемоглобина в крови – гиперхромемия –наблюдается при обезвоживании по причине рвоты, диареи, потливости, при образовании жидкостей (транссудат – отёчная жидкость, скапливающаяся в полостях тела; экссудат – жидкость, выделяющаяся в ткани или полости организма из мелких кровеносных сосудов при воспалении); – снижение гемоглобина в крови – олигохромемия – возникает при анемиях, вследствие кровотечений, в том числе внутренних, ряда инфекционных болезней, истощения, гемолиза эритроцитов, дефицита железа, витаминов В12 и фолиевой кислоты. Заподозрить изменение уровня гемоглобина в крови животного позволяет наблюдение за питомцем. Так, к симптомам, позволяющим предположить увеличение концентрации гемоглобина, относятся: потеря аппетита; повышенная утомляемость; вялость и апатия; бледность или покраснение кожных покровов; расстройства в работе ЖКТ. Кровь животного становится темной и густой. Незначительный рост уровня гемоглобина может быть вызван физиологическими причинами, если при повторном анализе наблюдается норма – причин для беспокойства нет. В случае понижения уровня гемоглобина может наблюдаться: синюшность или бледность слизистых оболочек; слабость и сонливость; учащение пульса и частоты дыхания; озноб и понижение базовой температуры тела (как следствие замедления обменных процессов). В связи с тем, что разрушение эритроцитов происходит по причине нехватки в организме железа, у животных может отмечаться металлический запах из пасти. Низкий уровень гемоглобина встречается чаще и вызывает большую озабоченность, так как пониженные показатели указывают на наличие серьезных нарушений в функционировании организма животного. Недостаток гемоглобина при беременности, способен привести к серьёзным неблагоприятным последствиям – плод может недополучить кислород, необходимый для нормального развития головного мозга; возникает риск преждевременных родов. |