Ахметов Амир ЛД 19-07 1 тема. Методическая разработка для дистанционного обучения студентов Раздел общая микробиология
 Скачать 0.69 Mb.
|
|
ФГБОУ ВО ПГМУ ИМЕНИ АКАДЕМИКА Е. А. ВАГНЕРА Минздрава РФ Кафедра микробиологии и вирусологии Утверждаю: Зав. кафедрой микробиологии и вирусологии, д.м.н., профессор _____________ Горовиц Э.С. Методическая разработка для дистанционного обучения студентов Раздел ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ Тема занятия: Предмет и история медицинской микробиологии. Иммерсионный объектив. Основные формы бактерий. Правила приготовления мазков из чистых культур бактерий. Простые методы окраски. Курс – II, семестр – 4 Факультет: лечебный, педиатрический Продолжительность занятия: 3 академических часа Пермь, 2020. Тема занятия: Предмет и история медицинской микробиологии. Иммерсионный объектив. Основные формы бактерий. Правила приготовления мазков из чистых культур бактерий. Простые методы окраски (определения). КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ И ЗАДАНИЯ Перечислите основные достижения основоположников медицинской микробиологии: Р. Кох, Л.Пастер, П Эрлих, И.И. Мечников, Д.И. Ивановский. Роберт Кох предложил использовать для микроскопирования бактерий иммерсионную систему, для выращивания микробов - плотные питательные среды на основе желатина и агара, разработал методы выделения чистых культур микроорганизмов и методы окраски микробов анилиновыми красителями (метилвиолетом и фуксином), обосновал использование дезинфектантов при инфекционных заболеваниях. Когда в его уезде разразилась эпидемия сибирской язвы, Кох занялся изучением этой болезни. Проведя серию методичных и тщательных экспериментов, он выявил бактерию, которая являлась причиной сибирской язвы, изучил биологический цикл развития возбудителя и эпидемиологические особенности заболевания. Его статьи по проблемам сибирской язвы были опубликованы в 1876 и 1877 годах. В 1880 году он стал правительственным советником в Имперском отделении здравоохранения в Берлине. В то время в Германии от туберкулеза умирал каждый седьмой человек, и Кох решил найти возбудитель туберкулеза. Ему удалось обнаружить бактерии в виде палочек только из 271-ого препарата, при посеве которого на питательную среду и последующего специального окрашивания удалось выделить возбудителя, при заражении которым у морских свинок развивался туберкулез. 24 марта 1882 года Кох объявил о своем открытии. После этого Роберт Кох работал в Индии, где выделил микроб, вызывающий холеру - холерный вибрион. Открытия Коха сделали его одним из тех лиц, кто определяет направления развития здравоохранения. В 1885 году Кох стал профессором Берлинского университета и директором только что созданного Института гигиены, при этом продолжая изучать возбудителя туберкулеза, что впоследствии привело к разработке туберкулиновой пробы, которая и по сей день используется в диагностике туберкулеза. В 1905 году за «исследования и открытия, касающиеся лечения туберкулеза», был удостоен Нобелевской премии по физиологии и медицине. Пастер сделал ряд выдающихся открытий. За короткий период с 1857 по 1885 г. он доказал, что брожение (молочнокислое, спиртовое, уксуснокислое) не является химическим процессом, а его вызывают микроорганизмы; опроверг теорию самозарождения; открыл явление анаэробиоза, т.е. возможность жизни микроорганизмов в отсутствие кислорода; заложил основы дезинфекции, асептики и антисептики; открыл способ предохранения от инфекционных болезней с помощью вакцинации. Многие открытия Л. Пастера принесли человечеству огромную практическую пользу. Путем прогревания (пастеризации) были побеждены болезни пива и вина, молочнокислых продуктов, вызываемые микроорганизмами; для предупреждения гнойных осложнений ран введена антисептика; на основе принципов Л. Пастера разработаны многие вакцины для борьбы с инфекционными болезнями. Однако значение трудов Л. Пастера выходит далеко за рамки только этих практических достижений. Л. Пастер вывел микробиологию и иммунологию на принципиально новые позиции, показал роль микроорганизмов в жизни людей, экономике, промышленности, инфекционной патологии, заложил принципы, по которым развиваются микробиология и иммунология и в наше время. Л. Пастер был, кроме того, выдающимся учителем и организатором науки. Работы Л. Пастера по вакцинации открыли новый этап в развитии микробиологии, по праву получивший название иммунологического. Принцип аттенуации (ослабления) микроорганизмов с помощью пассажей через восприимчивое животное или при выдерживании микроорганизмов в неблагоприятных условиях (температура, высушивание) позволил Л. Пастеру получить вакцины против бешенства, сибирской язвы, куриной холеры; этот принцип до настоящего времени используется при приготовлении вакцин. Следовательно, Л. Пастер является основоположником научной иммунологии, хотя и до него был известен метод предупреждения оспы путем заражения людей коровьей оспой, разработанный английским врачом Э. Дженнером. Однако этот метод не был распространен на профилактику других болезней. Эрлих работал в различных областях медицинской биологии, химии, экспериментальной патологии и терапии. Он установил наличие различных форм лейкоцитов, значение костного мозга для образования гранулоцитов, дифференцировал определенные формы лейкозов и создал дуалистическую теорию кроветворения (1880—1898). В этот же период он открыл так называемые тучные клетки; впервые обнаружил существование гематоэнцефалического барьера; предложил специфический метод окрашивания микобактерий туберкулёза, способ многоцветной окраски мазков крови и гистологических препаратов. Создал первую сывороточно-контрольную станцию. Высказал идею о том, что клетки, ответственные за иммунные реакции, имеют на поверхности антигенраспознающие структуры — рецепторы. Эта идея, сыгравшая огромную роль в развитии иммунологии, нашла полное подтверждение. Начиная с 1891 г. Эрлих стал разрабатывать методы лечения инфекционных болезней с помощью химических веществ. Он установил факт приобретения микроорганизмами устойчивости к химиотерапевтическим препаратам. Мировую славу Эрлиху принес разработанный им «препарат 606» (сальварсан), который оказался высокоэффективным при лечении сифилиса. В 1901 г. Пауль Эрлих начал работать над проблемой злокачественных опухолей. Он предложил много важных для клинической практики лабораторных реакций. Нобелевская премия присуждена ему (совместно с И. И. Мечниковым) за работы в области иммунологии. Исследования И. И. Мечникова (1845—1916) показали, что большую роль в формировании иммунитета играют особые клетки — макро- и микрофаги. Эти клетки поглощают и переваривают чужеродные частицы, в том числе бактерии. Исследования И. И. Мечникова по фагоцитозу убедительно доказали, что, помимо гуморального, существует клеточный иммунитет. И. И. Мечников, ближайший помощник и последователь Л. Пастера, заслуженно считается одним из основоположников иммунологии. Его работы положили начало изучению иммунокомпетентных клеток как морфологической основы иммунной системы, ее единства и биологической сущности. Д.И.Ивановский (1864— 1920) открыл вирусы — представителей царства vira. Один из основоположников вирусологии. Впервые открыл проходящий через бактериологические фильтры возбудитель табачной мозаики, названный впоследствии вирусом. Труды по фитопатологии и физиологии растений. Опишите вклад пермских ученых в развитие науки. Здравосмыслов Владимир Михайлович (I87I-I942) – один из основателей микробиологической службы на Западном Урале. В 1892 году окончил медицинский факультет Казанского университета. В 1897 году организовал в Перми земскую бактериологическую лабораторию с антирабической станцией и до 1930 г. руководил этим учреждением. В 1900 г. в лаборатории было организовано производство противодифтерийной сыворотки, с 1908 г. - скарлатиновой и холерной вакцин, туберкулина, культур мышиного и крысиного тифа. В.М. Здравосмыслов руководил Пермским бактериологическим институтом, при котором организовал курсы для врачей, медсестер, оспопрививателей, дезинфекторов. С I9I6 г. по 1931 г. возглавлял кафедру микробиологии, сначала Пермского государственного университета, а затем медицинского института. С 1931 г. работал в Свердловске, с 1934 г. в Ростове-на-Дону. В.М. Здравосмыслов опубликовал около 20 работ по медицинской микробиологии и иммунологии. Он был сторонником эимической теории иммунитета, занимался разработкой методов микробиологических исследований и производства бактериальных препаратов и антитоксических сывороток. Пшеничнов Алексей Васильевич (1900-1975) - после окончания в 1925 г. медицинского факультета Пермского университета включился в борьбу с сыпным тифом. Эта проблема стала одной из ведущих во всей его последующей научной деятельности. За работы в этой области ему без защиты диссертации были присвоены: научная степень кандидата медицинских наук и звание профессора. С 1939 г. Алексей Васильевич стал заведующим кафедрой микробиологии Пермского государственного медицинского института. В 1941 г. он защитил докторскую диссертацию "Материалы по эпидемиологии сыпного тифа". В 1942 г. профессор предложил оригинальный метод заражения кровососущих насекомых - метод эпидермомембран. В тяжелых условиях войны профессор А.В. Пшеничнов и доцент Б.И. Райхер создали вакцину против сыпного тифа и были удостоены Государственной премии. В дальнейшем под руководством А.В. Пшеничнова сотрудники кафедры микробиологии и риккетсиозной лаборатории ПНИИВС решили еще многие вопросы по проблеме сыпного тифа. Большую научную ценность также представляют исследования А;В. Пшеничнова и его сотрудников по работе над проблемой клещевого энцефалита на Западном Урале. А.В. Пшеничнов опубликовал также 216 научных работ. Под его руководством выполнено более 1000 научных исследований. Он был руководителем 48 кандидатских и консультантом 5 докторских диссертаций. Много внимания уделял А.В. Пшеничнов педагогической, организаторской и общественной работе. • Борис Иосифович Райхер (I9I0-I959) окончил в 1931 г. I Ленинградский медицинский институт и приступил к работе санитарного врача на Урале. В 1932 г. уже был выдвинут заведующим отделом паразитарных тифов в Нижне-Тагильском санитарно-бактериологическом институте. В 1938 г. он переехал в Пермь на работу в качестве ассистента кафедры микробиологии медицинского института. В 1942 г. под руководством профессора А.В. Пшеничнова выполнил и защитил кандидатскую диссертацию на тему "Экспериментальные и эпидемиологические наблюдения над периодом инкубации при сыпном тифе". Вскоре был утвержден в должности доцента кафедры микробиологии. Вслед за этим наступил наиболее плодотворный период его научной работы в творческом сотрудничестве с профессором А.В. Пшеничновым. В 1943 году они создали вакцину против сыпного тифа, которая была названа вакциной Пшеничнова-Райхера. За этот препарат они были удостоены Государственной премии СССР. В 1944 г. Б. И. Райхер успешно защитил докторскую диссертацию на тему "Материалы к учению о сыпном тифе" и через год был утвержден в звании профессора. Основным направлением научной деятельности Б.И. Райхера и в дальнейшем оставались экспериментально-эпидемиологические вопросы по проблеме риккетсиозов. За короткую творческую жизнь им было опубликовано 58 работ. Под его руководством были выполнены 4 кандидатские диссертации. Свою научную работу Б.И. Райхер всегда тесно связывал с практическим здравоохранением и эта хорошая традиция сохранилась до настоящего времени на кафедрах микробиологии и эпидемиологии. Заполните таблицу по образцу.
Что такое иммерсионная микроскопия? Для чего используется этот вид микроскопии в бактериологии, в чем его преимущество? Что такое разрешающая способность микроскопа. Какова разрешающая способность иммерсионной микроскопии? Иммерсионная микроскопия – масляной микроскоп. Иммерсионный объектив светового микроскопа, для эксплуатации которого необходима замена воздушной прослойки между ним и препаратом на др. оптическую среду - иммерсию (кедровое масло и т.д.), к таким относятся объективы с увеличением 60, 90, 100. Данный иммерсионный метод микроскопии применяется для того, чтобы свет проходил через рассматриваемый предмет, иммерсионную жидкость, при этом луч не преломлялся. Благодаря этому происходит получение изображения более высокого качества и разрешения. Разрешающая способность микроскопа — это способность выдавать чёткое раздельное изображение двух близко расположенных точек объекта. Степень проникновения в микромир, возможности его изучения зависят от разрешающей способности прибора. Заполните таблицу «Характеристика видов микроскопии в микробиологии»
6. Как называются фиксированные препараты для изучения морфологии и структуры бактерий. Опишите особенности приготовления препаратов из культур бактерий, выросших на плотной питательной среде. С какой целью и как проводится фиксация бактерий при приготовлении препаратов? Фиксированные препараты рассматривают под микроскопом именно в окрашенном виде. Под словом "фиксация" имеется ввиду такая обработка живого объекта (который вы собираетесь рассмотреть), которая дает возможность быстро прервать жизненные процессы в том или ином объекте (поясню проще — убить), при этом сохранив тонкую структуру. При приготовлении мазка из культуры микроорганизмов, выросшей на поверхности плотной питательной среды, на обезжиренное предметное стекло наносят петлёй небольшую каплю физиологического раствора, располагая её в центре круга, нарисованного с обратной стороны карандашом по стеклу. При работе спиртовка должна находиться прямо перед вами, на удобном для работы расстоянии. Предметное стекло должно находиться в чашке Петри или лотке: категорически запрещается готовить мазки на предметном стекле, лежащем на столе! В правую руку берут бактериологическую петлю, в левую - пробирку с культурой. Петлю стерилизуют, внося её в пламя горелки в вертикальном положении. После того как петля накалится докрасна, проводят конец петледержателя через пламя. После этого из пробирки вынимают пробку, удерживая её мизинцем правой руки. После обжигания на спиртовке края пробирки в неё вносят петлю, которую охлаждают, прикасаясь к стенкам пробирки. Затем петлёй с поверхности среды снимают небольшое количество культуры. Не касаясь стенок пробирки, вынимают петлю и закрывают пробирку пробкой над спиртовкой. После этого пробирку с культурой помещают в штатив, а культуру на петле вносят в приготовленную заранее каплю физиологического раствора, хорошо размешивают и равномерно распределяют по стеклу в виде небольшого круга или овала 1–1,5 см в диаметре. По окончании приготовления мазка петлю вновь стерилизуют в пламени спиртовки. В результате фиксации клетки прочно прикрепляются к стеклу и лучше прокрашиваются. Фиксация необходима в случае работы с патогенными микроорганизмами (в целях самобезопасности). Дайте определение и характеристику простым методам окраски бактерий. Простые методы окраски бактерий являются одноэтапными и заключаются в окраске микропрепарата одним красителем. Используют основные анилиновые красители, такие как, фуксин, генцианвиолет, метиленовый синий в виде водных растворов или пропитанных красителем фильтровальных бумажек, которые помещают на мазок и смачивают водой. Продолжительность окраски составляет 3-5 минут, после чего микропрепарат промывают водой, высушивают и микроскопируют. В препаратах, окрашенных простым методом, можно получить представление о форме, расположении и размерах микробных клеток. Напишите определения Прокариоты – это одноклеточные живые организмы, не обладающие (в отличие от эукариот) оформленным клеточным ядром и другими внутренними мембранными органоидами (такими как митохондрии или эндоплазматический ретикулум, за исключением плоских цистерн у фотосинтезирующих видов, например, у цианобактерий). Размеры бактерий измеряются в микрометрах. Дайте соотношение основных единиц измерения размеров микроорганизмов: 1000 нм – 1 мкм 1000 мкм – 1 мм Выберите один или несколько правильных ответов 1. К заслугам И.И. Мечникова относится A. Создание учения о фагоцитозе. Б. Определение значения микробов в развитии воспаления. B. Изобретение ртутной (каломельной) мази для лечения сифилиса. Г. Начало учения об антагонизме микробов. Д. Организация первой в России бактериологической станции в Одессе. Е. Создание учения о роли антител в появлении иммунитета. 2. К работам Д.И. Ивановского относится A. Открыл вирус мозаичной болезни листьев табака. Б. Установил, что вирус не виден в световой микроскоп. B. Установил, что вирусы не размножаются на питательных средах. Г. Показал, что вирусы видны в электронный микроскоп. 3. Микроорганизмы относят к царствам: прокариот эукариот вирусов 4. К неклеточным (доклеточным) формам микроорганизмов относят царства: вирусы прионы вироиды 5. К клеточным формам микроорганизмов относят следующие домены, кроме: истинных бактерий (эубактерий) архебактерий эукариотов прионов 6. При приготовлении мазков-отпечатков из органов используют метод фиксации: над пламенем спиртовки УФ-облучением с помощью погружения в смесь Никифорова или этиловый (метиловый) спирт с помощью погружения в 5% р-р серной кислоты высушивание на солнечном свету 7. Для каких целей в микробиологической практике применяют биологический микроскоп? для изучения формы, размеров бактерий для изучения тонкого строения бактерий для изучения тонкого строения вирусов для экспресс - диагностики инфекционных заболеваний для изучения подвижности микроорганизмов 8.К палочковидным формам относятся A. Стафилококки. Б. Клостридии B. Стрептобациллы. Г. Мелкая палочка. 9. Палочковидные бактерии различаются по всем перечисленным признакам, кроме: А. Длине и толщине Б. Характеру концов В. Количеству завитков Г. Расположению в мазке 10. К шаровидным формам относятся Б. Сардина В. Стрептококки Г. Стрептобацилла 11. К извитым формам относятся A. Вибрион Б. Спириллы B. Клостридии Г. Спирохеты МАТЕРИАЛЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ К ЗАНЯТИЯМ 1.На портале ДО ПГМУ в разделе ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ…. размещены Презентации лекционного материала Наглядные материалы Список основной и дополнительной литературы Литусов Н.В. Общая микробиология. Иллюстрированное учебное пособие. – Екатеринбург: Изд-во УГМУ, 2015. – 516 с. 2.Обучающие фильмы История микробиологии. Морфология бактерий. https://youtu.be/PUp-VJwUF4o Правила приготовления мазка из чистых культур бактерий ttps://youtu.be/Y8zXdqieg5U Основное оборудование и правила работы баклаборатории. Строение микроскопа, приготовление мазка и простые методы окраски. https://youtu.be/y8DxXsWmbkk |
