микра_2кр. Общая вирусология. 1 блок Особенности биологии вирусов
 Скачать 2.18 Mb.
|
|
Возбудители гепатитов А и Е. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика Вирусные гепатиты А и Е - острые инфекционные болезни с фекально-оральным механизмом передачи, вызываемые РНК-содержащими вирусами (вирусного гепатита А и вирусного гепатита Е), характеризующиеся воспалительным поражением и гибелью печеночных клеток. Проявляется увеличением и нарушением функции печени и селезенки, иногда желтухой, а также склонностью к эпидемическому распространению. Острая инфекционная болезнь, с лихорадкой, поражением печени. Антропоноз. Таксономия, морфология, антигенная структура:Семейство Picornaviridaeрод Hepatovirus. Типовой вид —имеет один серотип. Это РНК-содержащий вирус, просто организованный, имеет один вирусоспецифический антиген. Культивирование:Вирус выращивают в культурах клеток. Цикл репродукции более длительный, чем у энтеровирусов, цитопатический эффект не выражен. Резистентность:Устойчивостью к нагреванию; инактивируется при кипячении в течение 5 мин. Относительно устойчив во внешней среде (воде). Эпидемиология. Источник-больные. Механизм заражения — фекально-оральный. Вирусы выделяются с фекалиями в начале клинических проявлений. С появлением желтухи интенсивность выделения вирусов снижается. Вирусы передаются через воду, пищевые продукты, руки. Болеют преимущественно дети в возрасте от 4 до 15 лет. Патогенез:Обладает гепатотропизмом. После заражения репликация вирусов происходит в кишечнике, а оттуда через портальную вену они проникают в печень и реплицируются в цитоплазме гепатоцитов. Повреждение гепатоцитов возникает в результате иммунопатологических механизмов. Клиника.Инкубационный период - от 15 до 50 дней. Начало острое, с повышением т-ры и тошнотой, рвотой). Возможно появление желтухи на 5-й день. Клиническое течение заболевания легкое, без особых осложнений. Продолжительность заболевания 2 нед. Хронические формы не развиваются. Иммунитет.После инфекции - стойкий пожизненный иммунитет, связанный с IgG. В начале заболевания в крови IgM, которые сохраняются в организме в течение 4 месяцев и имеют диагностическое значение. Помимо гуморального, развивается и местный иммунитет в кишечнике. Микробиологическая диагностика.Материал для исследования - сыворотка и испражнения. Диагностика основана главным образом на определении в крови IgM с помощью ИФА, РИА и иммунной электронной микроскопии. Этими же методами можно обнаружить вирусный антиген в фекалиях. Вирусологическое исследование не проводят. Лечение.Симптоматическое. Профилактика.Неспецифическая профилактика. Для специфической пассивной профилактики используют иммуноглобулин. Иммунитет сохраняется около 3 мес. Для специфической активной профилактики – инактивированная культуральная концентрированная вакцина. Рекомбинантная генно – инженерная вакцина. Гепатит Е Антропоноз, фекально – оральным механизмом передачи. Таксономия: семейство Caliciviridae. Недавно переведен из семейства в группу гепатит Е-подобных вирусов. Структура.Вирион безоболочечный, сферический.. Геном — однонитевая плюс-РНК, которая кодирует РНК-зависимую РНКполимеразу, папаинподобную протеазу и трансмембранный белок, обеспечивающий внедрение вируса в клетку. Эпидемиология, клиника.Основной путь передачи — водный. Инкубационный период 2—6 недели. Поражение печени, интоксикацией, желтухой. Иммунитет.После перенесенного заболевания стойкий. Микробиологическая диагностика: 1) серологический метод — в сыворотке, плазме крови с помощью ИФА определяют: антитела к вирусу (анти-HEVIgM, анти-HEVIgG); 2) молекулярно-генетический метод — применяют ПЦР для определения РНК вируса (HEVRNA) в кале и в сыворотке крови больных в острой фазе инфекции. Лечение.Симптоматическое. Беременным рекомендуется введение специфического иммуноглобулина. Профилактика.Неспецифическая профилактика - улучшение санитарно-гигиенических условий и снабжение качественной питьевой водой. Созданы неживые цельновирионные вакцины, разрабатываются рекомбинантные и живые вакцины. 1. Диагностика гепатита А и Е. Профилактика. ГепатитА Лабораторная диагностика: 1) определение содержания желчных пигментов и аминотрансфераз в сыворотке; 2) культивирование на лейкоцитарных или органных культурах; 3) ИФА и метод твердофазного РИА – для выявления антител (IgМ), которые появляются в сыворотке крови уже в конце инкубационного периода и сохраняются в течение 2–3 месяцев после выздоровления. С середины желтушного периода вырабатываются IgG, которые сохраняются пожизненно; 4) молекулярно-генетические методы – обнаружение РНК-вируса в ПЦР. Лечение: средства специфической противовирусной терапии отсутствуют, лечение симптоматическое. Специфическая профилактика: убитая вакцина на основе штамма СR 326. Гепатит Е Маркѐры репликации вируса гепатита Е — AT (IgM) к Аг вируса гепатита Е и вирусная РНК. Вирусспецифические lgM выявляют методом ИФА, начиная с 10 -12- х суток после инфицирования; диагностические титры сохраняются в течение 1 - 2 мес. AT класса IgG к Аг вируса гепатита Е появляются через месяц после перенесѐнного заболевания. РНК вируса выявляют в реакциях ПЦР и молекулярной гибридизации. РНК вируса можно выявлять с первых суток инфицирования; однако в желтушном периоде обнаружить еѐ невозможно. Лечение гепатита Е Средства этиотропной терапии гепатита Е и специфической профилактики гепатита Е отсутствуют; проводят симптоматическое лечение 4 блок 1 Герпес-инфекция: таксономия, характеристика возбудителей. Лабораторная диагностика. Специфическаяпрофилактика и лечение. ВПГвызывает герпетическую инфекцию, или простой герпес, характеризующийся везикулезными высыпаниями на коже, слизистых оболочках, поражением ЦНС и внутренних органов, а также пожизненным носительством (персистенцией) и рецидивами болезни. Таксономия. Семейство Herpesviridae. Род Simplexvirus. Структура. Геном ВПГ кодирует около 80 белков, необходимых для репродукции вируса и взаимодействия последнего с клетками организма и иммунным ответом. ВПГ кодирует 11 гликопротеинов, являющихся прикрепительными белками (gB, gC, gD, gH), белками слияния (gB), структурными белками, иммунными белками «уклонения» (gC, gE, gl). Вирус вызывает литические инфекции фибробластов, эпителиальных клеток и латентные инфекции нейронов. Культивирование. Для культивирования вируса применяют куриный эмбрион (на оболочке образуются мелкие плотные бляшки) и культуру клеток, на которой он вызывает цитопатический эффект в виде появления гигантских многоядерных клеток с внутриядерными включениями. Антигенная структура. Вирус содержит ряд антигенов, связанных как с внутренними белками, так и с гликопротеидами наружной оболочки. Последние являются основными иммуногенами, индуцирущими выработку антител и клеточный иммунитет. Существует два серотипа: ВПГ 1 типа и ВПГ 2 типа. Резистентность. Вирус нестоек, чувствителен к солнечным и УФ-лучам. Эпидемиология. Источник инфекции — больной. ВПГ-1 и ВПГ-2 передаются преимущественно контактным путем (с везикулярной жидкостью, со слюной, половых контактах), через предметы обихода, реже — воздушно-капельным путем, через плаценту, при рождении ребенка. Оба типа вирусов могут вызывать оральный и генитальный герпес. ВПГ-1 чаще поражает слизистые оболочки ротовой полости и глотки, вызывает энцефалиты, а ВПГ-2 — гениталии (генитальный герпес). Патогенез. Различают первичный и рецидивирующий простой герпес. Чаще вирус вызывает бессимптомную или латентную инфекцию. Первичная инфекция. Везикула —проявление простого герпеса с дегенерацией эпителиальных клеток. Основу везикулы составляют многоядерные клетки. Пораженные ядра клеток содержат эозинофильные включения. Верхушка везикулы через некоторое время вскрывается, и формируется язвочка, которая вскоре покрывается струпом с образованием корочки с последующим заживлением. Минуя входные ворота эпителия, вирусы проходят через чувствительные нервные окончания с дальнейшим передвижением нуклеокапсидов вдоль аксона к телу нейрона в чувствительных ганглиях. Репродукция вируса в нейроне заканчивается его гибелью. Некоторые вирусы герпеса, достигая ганглионарных клеток, способны приводить к развитию латентной инфекции, при которой нейроны не гибнут, но содержат в себе вирусный геном. Большинство людей (70-90 %) являются пожизненными носителями вируса, который сохраняется в ганглиях, вызывая в нейронах латентную персистирующую инфекцию. Латентная инфекциячувствительных нейронов является характерной особенностью нейротропных герпесвирусов ВПГ. В латентно инфицированных нейронах около 1 % клеток в пораженном ганглии несет вирусный геном. Клиника. Инкубационный период 2—12 дней. Болезнь начинается с возникновения на пораженных участках зуда, появления отека и пузырьков, заполненных жидкостью. ВПГ поражает кожу (везикулы, экзема), слизистые оболочки рта, глотки (стоматит) и кишечника, печень (гепатиты), глаза (кератит) и ЦНС (энцефалит). Рецидивирующий герпес обусловлен реактивацией вируса, сохранившегося в ганглиях. Он характеризуется повторными высыпаниями и поражением органов и тканей. Генитальная инфекция является результатом аутоинокуляции из других пораженных участков тела; но наиболее часто встречающийся путь заражения — половой. Поражение проявляется в образовании везикулы, которая довольно быстро изъязвляется. Вирус простого герпеса проникает во время прохождения новорожденного через родовые пути матери, вызывая неонаталъный герпес. Неонатальный герпес обнаруживается на 6-й день после родов. Вирус диссеминирует во внутренние органы с развитием генерализованного сепсиса. Иммунитет. Основной иммунитет— клеточный. Развивается ГЗТ. NK-клетки играют важную роль в ранней противомикробной защите. Организм пораженного реагирует на гликопротеины вируса, продуцируя цитотоксические Т-лимфоциты, а также Тхелперы, активирующие В-лимфоциты с последующей продукцией специфических антител. Гликопротеины вызывают образование вируснейтрализующих антител. Вирус - нейтрализующие антитела подавляют межклеточное распространение вирусов. Микробиологическая диагностика. Используют содержимое герпетических везикул, слюну, соскобы с роговой оболочки глаз, кровь, спинномозговую жидкость. В окрашенных мазках наблюдают гигантские многоядерные клетки, клетки с увеличенной цитоплазмой и внутриядерными включениями . Для выделения вируса исследуемым материалом заражают клетки HeLa, Нер-2, человеческие эмбриональные фибробласты. Рост в культуре клеток проявляется округлением клеток с последующим прогрессирующим поражением всей культуры клеток. Заражают также куриные эмбрионы, у которых после внутримозгового заражения развивается энцефалит. Выделенный вирус идентифицируют в РИФ и ИФА с использованием моноклональных антител. Серодиагностику проводят с помощью РСК, РИФ, ИФА и реакции нейтрализации по нарастанию титра антител больного. ИБ также способен выявлять типоспецифические антитела. При экспресс-диагностике в мазках-отпечатках из высыпаний, окрашенных по Романовскому-Гимзе, выявляются гигантские многоядерные клетки с внутриядерными включениями. Для идентификации вируса используют также амплификацию генов вирусной ДНК в реакции ПЦР. Лечение. Для лечения применяют препараты интерферона, индукторы интерферона и противовирусные химиотерапевтические препараты (ацикловир, видарабин). Профилактика. Специфическая профилактика рецидивирующего герпеса осуществляется в период ремиссии многократным введением инактивированной культуральной герпетической вакцины. 2.Патогенез инфекций, вызываемых вирусами герпеса (простой, ветряная оспа, ЭБ, ЦМВ). Герпес 1 простого типа Вирус герпеса простого типа объединяет первый и второй серотипы вируса герпеса. Вирус простого герпеса первого типа (ВПГ-1) или (HSV-1) – Herpes simplex virus 1. В клинической литературе простой герпес обозначают также как оральный (ротовой) или лабиальный (губной) герпес. ВПГ-1 самый распространенный тип герпеса, из всех имеющих клиническое значение для человека. Заражение е происходит в первые годы жизни человека. Наиболее типичная локализация орального или лабиального герпеса – поражение губ и носогубного треугольника. При определенных обстоятельствах (иммунодефицит) и место контакта вируса с организмом, ВПГ-1 поражает: слизистую оболочку половых органов, ротовой, носовой полости, глаз; кожные покровы пальцев рук, ног (чаще область ногтевого валика пальцев); ткани нервной системы. Для вирусов простого герпеса 1 и 2 типа характерны: нейротропность – это преимущественное поражение клеток нервной системы в виду присутствия или образования на клетках нервной системы рецепторов, комплементарных вирусам; нейрвирулентность – это способность развития заболеваний нервной системы; подавление фагоцитоза (звено иммунитета) до уровня незавершенного фагоцитоза. Тропизм к нервной ткани и способность ВПГ тормозить фагоцитоз – факторы свидетельствующие о способности вирусов простого герпеса избегать воздействие иммунной системы, определяет их способность к латентному носительству в нервной ткани. Персистенция в клетках нервной системы – важный защитно-приспособительный механизм герпесвирусов, позволивший ВПН-1 получить максимально возможное распространение в популяции людей. Для вирусов простого типа характерны две фазы нахождения в макроорганизме (латентная и манифестационная). Клинической манифестации ВПГ проявляется 1-3 раза в год, патогенез на губах развивается и заканчивается в течение семи-десяти дней. Частота рецидивов зависит от состояния иммунной защиты человека, чаще заболевают люди страдающие иммунодефицитными состояниями. Латентное (скрытая) фаза невидимая для иммунитета длится в остальное время существования вируса. Симптомы герпеса 1 типа Наиболее частой клинической формой ВПГ-1 у детей является везикулярное поражение губ, иногда острое респираторное заболевание. У взрослых, кроме того, наблюдаются поражения кожи, конъюнктивы и роговицы глаза. При орально-генитальном контакте ВПГ-1 проявляется в виде поражения половых органов. Женщины поражаются генитальной формой ВПГ-1 значительно чаще мужчин. Общеклинический признак ВПГ-1 – синдром интоксикации: лихорадка ; общая слабость; головная боль ; мышечные и суставные боли. igg (IgG) положительный Для дифференциальной диагностики ВПГ-1 и ВПГ-2 используют лабораторные методы, целесообразность их применения заключается в: определении вида возбудителя на основании сродства к иммуноглобулину; дифференциации возбудителя например (ВПГ-1 от ВПГ-2) определении стадии заболевания (острая, хроническая, латентная) Примерная интерпретация результатов исследования при выявлении иммуноглобулинов IgM и IgG: IgM определяют лабораторными методами начиная с пятого дня заболевания, IgG определяют только со второй недели от начала заболевания; IgM циркулируют в периферической крови до трех месяцев, а IgG циркулируют в крови многие годы, при хроническом течении пожизненно; IgM не проникает в плаценту при беременности, IgG в больших количествах проникает в плаценту, то есть выявление его у беременной женщины не имеющей клинической манифестации герпеса положительный фактор (означает готовность организма к защите при случайном заражении во время беременности); IgM не способен нейтрализовать вирус, является фактором запуска иммунных процессов в организме, IgG способен нейтрализовать вирус, является фактором защиты организма. Выявление специфического к ВПГ-1 IgG в периферической крови в высоких титрах в период клинического течения заболевания (наличие вируса подтверждено ПЦР) свидетельствует о развитии напряженного иммунитета к этому заболеванию. Выявление IgG в низких титрах, при отрицательной реакции ПЦР свидетельствует о ранее перенесенном заболевании, вирус герпеса в организме находится в латентном состоянии. Герпес 1 простого типа при беременности Женщины в целом более восприимчивы к вирусу простого герпеса. Доказано, что провоцирует клинику герпеса состояния, ослабляющие иммунную систему организма. Беременность и еѐ проявления (интоксикации, гормональные перестройки, другое) безусловно являются факторами нарушающими гомеостаз организма. Герпес во время беременности в форме клинического проявления может возникнуть с высокой долей вероятности, вирус простого герпеса первого типа: в обычном состоянии организма, не оказывает влияние на органы половой сферы, между тем при беременности развитие патогенеза может проявиться поражением нервной ткани плода. (вирус проникает через плацентарный барьер); при беременности нежелателен особенно при первичном развитии клинических проявлений на фоне отсутствия в крови защитных антител (специфических иммуноглобулинов), которые образуются в ответ на переболевание; и антитела к нему не защищают беременную от ВПГ-2 (генитальная форма герпеса); попавший в организм в первой половине беременности может спровоцировать уродства; внедрившийся в организм на поздней стадии может стать причиной заражения плода во время родов. Лечение герпеса 1 типа Лечение вирусов имеет особенности: тотальное уничтожение вируса невозможно; нет профилактических лекарственных препаратов; вирусы не чувствительны к воздействию антибиотиков; при кратковременном течении ВПГ-1 медикаментозное лечение не целесообразно. Единственным лекарственным средством прямого действия является ацикловир. Фармацевтической промышленностью ацикловир выпускается в трех препаративных формах (таблетки, мазь, раствор). Применение его в соответствии с инструкцией позволяет значительно снизить: продолжительность клинического течения заболевания; |