ОЦЕНКА ЭКОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ВОДОХРАНИЛИЩ КАМСКОГО КАСКАДА НА ОСНОВЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ БАКТЕРИОБЕНТОСА. Pages from №8_2016_блок_ШЕРЫШЕВА Н.Г.. Оценка экологического состояния водохранилищ камского каскада на основе показателей
 Скачать 1.36 Mb.
|
|
ОЦЕНКА ЭКОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ВОДОХРАНИЛИЩ КАМСКОГО КАСКАДА НА ОСНОВЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ БАКТЕРИОБЕНТОСА ASSESSMENT OF THE ECOLOGICAL STATE OF RESERVOIRS OF THE KAMA CAS- CADE BASED ON INDICATORS OF BACTERIOBENTHOS Волжско-Камский бассейн — важнейший эколого-экономический регион страны. Водохранилища Камского каскада в настоящее время испытывают сильное антропогенное воздействие. В оценке экологического состояния водоемов перспективно использование характеристик бактериобентосных сообществ, так как они участвуют в трансформации загрязняющих веществ, аккумулируемых донными отложениями. Работа посвящена изучению экологического состояния прибрежных участков водохранилищ Камского каскада по показателям бактериобентоса: общей численности бактерий, численности сапрофитной группы, показателю СБ/ОЧБ. Как важное условие в формировании экологического состояния водоемов рассматривается тип донных отложений. Исследованы Камское, Воткинское, Нижнекамское водохранилища и Камская ветвь Куйбышевского вдхр. Экологическое состояние прибрежий водохранилищ Камского каскада охватывает все звенья шкалы экологических модификаций от границы нормы до риска — предкризисного состояния — кризис. Наиболее экологически благополучными являются прибрежья Камского вдхр., проблемными — прибрежья Воткинского вдхр. Выявлено, что тип грунта влияет на экологическое состояние водоема градиент показателя СБ/ОЧБ возрастает от нормы до кризиса в ряду песок — песчанистый ил — серые и черные илы — глинистый ил, то есть от крупнозернистых песков к тонкодисперсным илам. Количественное развитие бактериобентоса и его сапрофитной группы показало, что важными факторами в формировании экологического состояния водоемов выступают не только механическая структура и тип грунта, но и загрязненность грунта техногенными продуктами. Ключевые слова экологическое состояние, бактериобентос, сапрофитные бактерии basin is the most important ecological and economic region of the country. Reservoirs of the Kama cascade are currently experiencing a strong anthropogenic infl uence. In the assessing of the ecological status of water bodies it is prospectively to use characteristics of bacteriobenthic communities, as they are involved in the transformation of pollutants accumulated in bottom sediments. The work is devoted to the study of the ecological status of the coastal areas of the reservoirs of Kama cascade using bacteriobenthos indicators: total number of bacteria, the number of saprophytic group index SB/OChB. As an important condition in the formation of the ecological status of water bodies a type of contamination of bottom sediments was considered. Kama, Votkinsk and Nizhnekamsk Reservoir and Kama branch of the Kuibyshev Reservoir were investigated. The ecological status of the coastal zone of reservoirs of Kama cascade covers all parts of ecological modifi cations from the «norm» to «risk — the pre-crisis — the crisis». The most environmentally safe are Kama Reservoir coasts, problem — coasts of the Votkinsk reservoir. It was found that the type of soil aff ects the ecological status of the water: a gradient index SB / OChB increases from normal to crisis in sequence: sand — sandy mud — gray and black silt — silt clay, that is, from coarse sand to fi ne-dispersed Гидробиология ненности и уровня трофности води донных от- ложений. Кама — крупнейший приток Волги, значительная часть которого в настоящее время зарегулирована. Формирование донных осадков на мелково- дьях в водохранилищах имеет ряд особенностей зарастаемость растительностью, сезонные колебания уровня воды, сложный гидрологический режим, гидродинамическая активность водных масс, гетерогенность и микрозональность распространения. В системе водохранилищ Камского каскада прибрежные и мелководные участки занимают существенную часть общей площади водохранилищ. Поэтому оценка состояния литоральных зон имеет важное значение для получения общей информации об экологическом состоянии водохранилищ в целом. Целью данной работы было изучение экологического состояния прибрежных участков р. Камы по показателям бактериобентоса с учетом типа донных отложений. Материалы и методы исследования О тбор проб донных отложений проводился на 26- ти станциях прибрежных участков Камского, Воткинского, Нижнекамского и Куйбышевского водохранилищ в июне 2012 г. (рис. 1). Глубина отбора составляла 1-4 м, в отдельных случаях — 6,8 м ст. Ляды) им (ст. Добрянка). Пробы грунта отбирались лотом с поверхностных горизонтов (0-5 см. Для донных отложений прибрежных зон водохранилищ Камского каскада характерны основные типы грунтов пески, илистые пески, песчанистые осадки разной степени заиления, серые илы, глины [10]. В ряде случаев грунты содержат щебень, разноцветную гальку, ракушечник, щепу, растительные остатки, друзы дрейсены. В Воткинском вдхр. распространены техногенные илы (с резким запахом нефтепродуктов). Общая численность бактериобентоса (ОЧБ) определялась эпифлуоресцентным методом Введение К оличественная оценка экологического состояния водохранилищ — одна из актуальных проблем фундаментальной и прикладной гидробиологии. Особенно важным представляется изучение таких крупных и значимых в жизни больших регионов водоемов как водохранилища Волжско-Камского каскада. Их функционирование имеет двойственный характер. С одной стороны водохранилища являются мощным средообразующим фактором, особенно для прибрежного ландшафта. С другой — сами водоемы испытывают сильное антропогенное воздействие [2, 3], оказывающее влияние на активность гидро- бионтов. В оценке экологического состояния водоемов перспективно использование характеристикдон- ных микробных (бактериобентосных) сообществ, так как они участвуют в трансформации загрязняющих веществ, аккумулируемых донными отложениями. Особенность применения в качестве экологической оценки бактериобентосных сообществ заключается в том, что они позволяют выявлять потенциально неблагополучные участи донных отложений, негативное влияние которых может проявиться через определенный промежуток времени. Поэтому исследование бактериобен- тосных комплексов и его отдельных индикаторных групп позволяет прогнозировать дальнейшее развитие экосистемы, что особенно важно при антропогенном воздействии. Среди всего разнообразия микроорганизмов, осуществляющих процессы деструкции в донных отложениях, выделяются лишь несколько массовых функциональных групп бактериобентоса, имеющих наибольшую значимость для экосистем водоемов как деструкторов [4, 5, 6]. Из аэробов к ним, в первую очередь, относятся сапрофитные бактерии, разрушающие легкоусвояемые соединения белковой и углеводной природы. Эта группа бактерий широко применяется в индикации степени загряз quantitative development of bacteriobenthos and its saprophytic group showed that important factors in the formation of the ecological status of water bodies are not only the mechanical structure and the type of soil, but also pollution of soil with anthropogenic products. Key words: ecological condition, с, saprophitic bacteria Н.Г. Шерышева*, кандидат биологических наук, доцент, научный сотрудник, Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт экологии Волжского бассейна Российской академии наук, доцент кафедры Управление промышленной и экологической безопасностью, Тольяттинский государственный университет А.Н. Дзюбан, доктор биологических наук, главный научный сотрудник, Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии внутренних водим. И.Д. Папанина Российской академии наук Т.А. Ракитина, инженер-исследователь, Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт экологии Волжского бассейна Российской академии наук. Sherysheva, A.N. Dzyuban, T.A. Адрес для корреспонденции sapfi r-sherry@yandex.ru 46 Н.Г. Шерышева и др.//ВОДА: ХИМИЯ и ЭКОЛОГИЯ № 8 август 2016. c. 45–50 Результаты и их обсуждение О áùàÿ ÷èñëåííîñòü áàêòåðèîáåíòîñà в литорали от верховий Камы до Куйбышевского вдхр. изменялась в пределах от 1,06 × 109 до 4,41 × 10 10 кл/мл сырого ила. Ввиду пластичной толерантности различных групп бактерий экологическое состояние водоемов каскада поданному показателю [14] охватывает широкий диапазон от границы нормы — докризисного состояния (рис. 2). Наиболее благополучные участки поданным ОЧБ отмечены в песчанистых грунтах Воткинского ст. Усть-Пизя, Паньково), Нижнекамского (ст. Вятское, Куйбышевского вдхр. (ст. Алексеевское) ив районе бьефов. Предкризисное состояние — кризис регистрировались в тонкодисперсных (ст. Тюлькино) и глинистых (ст. Вишера, Добрянка, Тихие горы) илах. Следует отметить высокую численность бактерий, попадающих в шкалу предкризисное состояние — кризис в песчанистом иле с мелкой галькой в районе ст. Березняки, что, по- видимому, обусловлено влиянием крупных химических комбинатов по производству калийных и азотсодержащих удобрений и других отраслей промышленности города ñàïðîôèòíûå áàêòåðèè. Поданным численности сапрофитных бактерий (N = 2,0 × 105 — 1,82 × 107 КОЕ/мл грунта) прибрежные участки экосистемы Камского каскада находятся в состоянии риска, предкризисном и кризисном состоянии (рис. 2). По численности СБ состояние нормы отсутствует, и большинство станций находятся в состоянии риска и предкризисном состоянии. Наименьшая граница отмеченной шкалы характерна для песков различной крупности и песчанистых илов. Кризисное состояние выявлено в отмеченном ранее песчанистом иле ст. Березняки ив техногенных песках Воткинского вдхр. (ст. Елово, Паньково). В ряду исследованных станций, оцениваемых по развитию сапрофитных бактерий, Нижнекамское и Куйбышевское вдхр. экологически наиболее благополучные ïîêàçàòåëü СБ/ОЧБ. Сапрофитные бактерии увеличивают свою долю в общей численности бактерий на участках, где в донных отложениях накапливается легкогидро- лизуемое органическое вещество. Поэтому данный показатель СБ/ОЧБ один из наиболее значимых при антропогенном загрязнении. Как следует из рис. 2, наибольшее загрязнение прибрежных участков органическим веществом охватывает территорию от нижнего бьефа Воткинского вдхр. до Куйбышевского вдхр. Экологическое состояние прибрежий оценивается в основном как предкризисное — кризис [14]. Наиболее критические зоны сформировались в техногенных песках ст. Усть-Пизя, Елово, Паньково, нижнем бьефе Воткинского вдхр. Согласно средним значениям показателей СБ/ ОЧБ наиболее благополучное состояние в системе Камских водохранилищ в целом характерно для Камского вдхр. (рис. 3): показатель СБ/ОЧБ находится между границей нормы и состоянием риска. Камская ветвь Куйбышевского вдхр. Òàáëèöà 1 Бактериобентос как показатель экологического состояния водоемов Экологическое состояние Показатели бактериобентоса ОЧБ, кл/см 3 СБ, кл/см 3 СБ/ОЧБ, Норма 7 — 10 9 10 3 — 10 4 < Состояние риска 8 — 10 9 10 4 — 10 5 0,01 — Предкризисное состояние 9 — 10 10 10 5 — 10 6 0,1 — Кризис 8 –10 11 < 10 4 — 10 7 0,1 — > Примечание ОЧБ — общая численность бактерий, СБ — численность сапрофитных бактерий, СБ/ОЧБ — соотношение численности сапрофитных бактерий к общей численности бактерий, выраженное в процентах. 1. Схема расположения станций отбора проб на каскаде Камских водохранилищ в июне 2012 гс использованием флуоресцеинизотиоциа- ната — FITC [11] на ядерных фильтрах (размер пор 0,17 мкм) под микроскопом Leica CTR 5500 при увеличении × Численность аэробных сапрофитных бактерий (СБ) определялась на питательной среде РПА [12, 13]. Численность бактерий выражалась в количестве колониеобра- зующих единиц на мл сырого грунта (КОЕ/мл). Показатель СБ/ОЧБ — процентное соотношение численности сапрофитных бактерий к общей численности бактерий. Экологическое состояние водоема оценивалось по шкале экологических модификаций, часть которой представлена в таблице Гидробиология устойчиво занимает позицию состояние риска. В предкризисном состоянии находятся прибрежные районы Нижнекамского вдхр. Наиболее проблемная экологическая ситуация — между предкризисными кризисным состоянием сложилась в Воткинском водохранилище. Заключение И сследование донных отложений литоральных зон водохранилищ р. Кама показало, что экологическое состояние прибрежий водохранилищ Камского каскада поданным показателей бактериобентоса охватывает все звенья шкалы экологических модификаций от границы нормы до риска — предкризисного состояния кризис, что соответствует мезотрофному, эвтрофному трофическому уровню с локальными высокоэвтрофными зонами. Наиболее загрязнены легкоокисляемым органическим веществом прибрежья Воткинского водохранилища. Поданным исследования 1983 г. [4] водохранилища р. Камы по общему содержанию бактерий в грунтах были близки к мезоэвтрофному трофическому статусу. Современное трофическое состояние водоемов Камского каскада по отмеченному показателю оценивается как мезо-высокоэвтроф- ное, что указывает на усиление процесса эвтро- фирования. Авторами [15] было показано, что тип грунта является одним из показателей тро- фии дна водоема. В наших исследованиях в отношении типов грунтов выявлено, что показатели оценки экологического состояния норма — состояние риска — предкризисное состояние — кризис возрастают в ряду песок, песчанистый ил, тонкодисперсный ил, глинистый ил, техногенный грунт. Максимальные значения характеристик количественного развития бактериобентоса обнаружены в глинистых техногенных (с запахом нефтепродуктов) песках. Каких-либо зональных закономерностей изменения экологического состояния водоемов от верховий Камы до Камской ветви Куйбышевского вдхр. не выявлено. Наиболее экологически неблагополучными являются прибрежья Воткинского вдхр., что обусловлено, по-видимому, наиболее высокой по сравнению с другими водоемами антропогенной и техногенной нагрузкой. По показателям бакте- риобентоса определяющими факторами при определении экологического состояния водоемов выступает не только механическая структура и тип грунта, но и загрязненность грунта техногенными продуктами. 2. Общая численность бактериобентоса (ОЧБ), сапрофитных бактерий (СБ) и показатель СБ/ОЧБ в прибрежных грунтах водохранилищ р. Кама в июне 2012 г. 3. Средние значения показателей СБ/ОЧБ и оценка экологического состояния прибрежных участков водохранилищ р. Кама в июне 2012 г КВ — Камское, ВВ — Воткинское, НВ — Нижнекамское, КБВ — Куйбышевское водохранилища Примечание СБ/ОЧБ — процентное соотношение численности сапрофитных бактерий к общей численности бактерий оценка экологического состояния норма — состояние риска — предкризисное состояние — кризис. 48 Н.Г. Шерышева и др.//ВОДА: ХИМИЯ и ЭКОЛОГИЯ № 8 август 2016. c. 45–50 References 1. Cherniaev A.M. (ed.) Voda Rossii. Vodokhranilishcha [Water of Russia. Water reservoirs]. FGUP RosNIIVKh, Ekaterinburg,«Akva-Press» Publ., 2001, 700 p. 2. Avakian A.B., Shirokov V.M. Kompleksnoe ispol’zovanie i okhrana vodnykh resursov [Complex use and protection of water resources]. Minsk, Universitetskoe Publ., 1990, 240 p. 3. Avakian A.B. Vodokhranilishcha — fenomen XX stoleti- ia [Water reservoirs — phenomena of the XX centuary]. Aktual’nye problemy ratsional’nogo ispol’zovaniia bio- logicheskikh resursov vodokhranilishch [Current problems of rational use of biological resources of water reservoirs]. Rybinsk, Rybinskii dom pechati Publ., 2005, pp. 7-17. 4. Dzyuban A.N. Destruktsiia organicheskogo veshchest- va i tsikl metana v donnykh otlozheniiakh vnutrennikh vodoemov[Destruction of organic matter and the meth- ane cycle in the sediments of inland waters]. Iaroslavl’, Printkhaus Publ., 2010, 192 p. 5. Polteva A.V. Mikrobiologicheskaia otsenka ekologichesk- ogo sostoianiia zalivov ostrova Sakhalin s razlichnoi antro- pogennoi nagruzkoi. Avtoref. diss.… kand. biol. nauk [Microbiological evaluation of the ecological state of the bays of the island of Sakhalin with various anthropogenic load. Abstract of Dissertation of Doctor of Biological sci- ences]. Khabarovsk, 2009, 24 p. 6. Kuznetsov S.I. Mikrofl ora ozer i ee geokhimicheskaia deiatel’nost’ [Microfl ora of the lakes and its geochemical activity]. Leningrad, Nauka Publ., 1970, 440 p. 7. Brekhovskikh V.F., Kazmiruk T.N., Kazmiruk V.D. Donnye otlozheniia Ivan’kovskogo vodokhranilishcha: sos- toianie, sostav, svoistva [Sediments of Ivankovo Reservoir: status, composition, properties]. Institute of water prob- lems of RAS, Moscow, Nauka Publ., 2006, 176 p. 8. Zakonnov V.V., German A.V., Zakonnova A.V. Ilonakoplenie i produktivnost’ dna v vodokhranilishchakh Volgi [Silt accumulation and productivity of the bottom of the Volga reservoirs]. Sovremennye problemy vodokhra- nilishch i ikh vodosborov. T.1: Gidro- i geodinamicheskie protsessy: trudy mezhdunarodnoi nauchno-prakticheskoi konferentsii — Modern problems of reservoirs and their wa- tersheds. Volume 1: Hydro- and geodynamic processes: pro- ceedings of the international scientifi c-practical conference. Perm’, Perm’ State University, 2011, pp. 81-85. 9. Krasnova E.S., Umanskaia M.V., Gorbunov M.Iu. Trofi cheskoe sostoianie pribrezhnykh uchastkov vo- dokhranilishch Kamskogo kaskada v iiule 2009 g. [The trophic status of coastal areas of the Kama cascade of res- ervoirs in July 2009]. Sovremennye problemy vodokhranil- ishch i ikh vodosborov. T.4. Vodnaia ekologiia: trudy mezh- dunarodnoi nauchno-prakticheskoi konferentsii — Modern problems of reservoirs and their watersheds. Tom4. Aquatic ecology: proceedings of the international scientifi c-practical conference, Perm’, Perm’ State University, 2011, pp. 94-97. 10. Sherysheva N.G., Rakitina T.A. Donnye otlozheniia pribrezhnykh uchastkov vodokhranilishch Kamskogo kas- kada [The sediments of coastal areas of the Kama cascade of reservoirs]. Tatishchevskie chteniia: aktual’nye problemy nauki i praktiki. Aktual’nye problemy ekologii i okhrany ok- ruzhaiushchei sredy: Mater. X Mezhdunar. nauchno-prakt. konf. — Tatishevsky readings: actual problems of science and practice. Actual problems of ecology and the environment: Proceedings of the X International scientifi c-practical con- Ëèòåðàòóðà 1. Вода России. Водохранилища / Под ред. А.М. Черняева; ФГУП РосНИИВХ. Екатеринбург Издательство «Аква-Пресс», 2001. 700 с. Авакян А.Б. Комплексное использование и охрана водных ресурсов / А.Б. Авакян, В.М. Широков // Минск Университетское, 1990. 240 с. Авакян А.Б. Водохранилища — феномен XX столетия Актуальные проблемы рационального использования биологических ресурсов водохранилищ. Рыбинск Изд-во ОАО Рыбинский дом печати, 2005. С. 7-17. 4. Дзюбан АН. Деструкция органического вещества и цикл метана в донных отложениях внутренних водоемов. Ярославль Принтхаус, 2010. 192 с. Полтева А.В. Микробиологическая оценка экологического состояния заливов острова Сахалин с различной антропогенной нагрузкой. Автореф. дисс канд. биол. наук. Хабаровск, 2009. 24 с. Кузнецов СИ. Микрофлора озер и ее геохимическая деятельность. Л Наука, 1970. 440 с. Бреховских В.Ф. Донные отложения Иваньковского водохранилища состояние, состав, свойства / В.Ф. Бреховских, Т.Н. Казмирук, В.Д. Казмирук. Ин-т вод. проблем РАН. М Наука, 2006. 176 с. Законнов В.В. Илонакопление и продуктивность дна в водохранилищах Волги / В.В. Законов, А.В. Герман, А.В. Законнова // Современные проблемы водохранилищ и их водосборов. Т Гидро- и геодинамические процессы труды международной научно-практической конференции. Пермь Перм. гос. унт. 2011. С. 81-85. 9. Краснова Е.С. Трофическое состояние прибрежных участков водохранилищ Камского каскада в июле 2009 г. / Е.С. Краснова, МВ. Уманская, МЮ. Горбунов // Современные проблемы водохранилищ и их водос- боров. Т. Водная экология труды международной научно-практической конференции. Пермь Перм. гос. унт, 2011. С. 94-97. 10. Шерышева Н.Г. Донные отложения прибрежных участков водохранилищ Камского каскада /Н.Г.Шерышева, ТА. Ракитина // Татищевские чтения актуальные проблемы науки и практики / Актуальные проблемы экологии и охраны окружающей среды Матер. X Междунар. научно-практ. конф. Тольятти Волжский университет им. В.Н. Татищева, 2013. С. 278-286. 11. Гальченко В.Ф. Метанотрофные бактерии. М ГЕОС, 2001. 500 с. Кузнецов СИ. Методы изучения водных микроорганизмов СИ. Кузнецов, ГА. Дубинина. М Наука, 1989. 286 с. Вяткина Г.Г. Численность различных физиологических групп микроорганизмов вводе и донных отложениях Новороссийской бухты / ГГ. Вяткина, В.В. Коксина, ЭВ. Карасева Б.И. Рукавцов // Геоэкологические исследования и охрана недр. М Геоинформцентр, 2002. Вып. 2. С. 41-49. 14. Дзюбан АН. Микробиологические процессы в донных отложениях Рыбинского водохранилища и озера Плещеево как факторы формирования качества водной среды / АН. Дзюбан, ДБ. Косолапов, И.А. Кузнецова // Гидробиол. журн. Т. 41, №4. 2005. С. Гидробиология ference, Tol’iatti, Volzhsky University after V.N. Tatischev, 2013, pp. 278-286. 11. Gal’chenko V.F. Metanotrofnye bakterii [Methanotrophic bacteria]. Moscow, GEOS Publ., 2001, 500 p. 12. Kuznetsov S.I., Dubinina G.A. Metody izucheniia vod- nykh mikroorganizmov [Methods of studying aquatic or- ganisms]. Moscow, Nauka Publ., 1989, 286 p. 13. Viatkina G.G. Chislennost’ razlichnykh fi ziologicheskikh grupp mikroorganizmov v vode i donnykh otlozheniiakh Novorossiiskoi bukhty [The number of diff erent physio- logical groups of microorganisms in the water and sedi- ments of Novorossiysk Bay]. Viatkina G.G., Koksina V.V., Karaseva E.V., Rukavtsov B.I. Geoekologicheskie issledo- vaniia i okhrana nedr [Geoecological research and conser- vation of mineral resources]. Moscow, Geoinformtsentr Publ., 2002, vol. 2, pp. 41-49. 14. Dzyuban A.N., Kosolapov D.B., Kuznetsova I.A. Mikrobiologicheskie protsessy v donnykh otlozheni- iakh Rybinskogo vodokhranilishcha i ozera Pleshcheevo kak faktory formirovaniia kachestva vodnoi sredy [Microbiological processes in the bottom sediments of the Rybinsk Reservoir and Lake Plescheevo as the factors of water quality]. Gidrobiol. zhurn. — Hydrobiological journal, vol. 41, no. 4, 2005, pp. 82-88. 15. Sigareva L.E., Timofeeva L.A., Zakonov V.V. Trofi cheskoe sostoianie donnoi podsistemy v volzhskikh vodokhranilishchakh (otsenka po khlorofi llu) [The tro- phic status of the bottom subsystem in the Volga reservoirs (estimated by chlorophyll)]. Mat-ly Vseross. konf. IBVV RAN — Proceedings of All-Russia conference of Institute of Biology of Inland Water of RAS, Borok, Izhevsk, Permiakov S.A. Publ., 2012, pp. 261-264. 15. Сигарева Л.Е. Трофическое состояние донной подсистемы в волжских водохранилищах (оценка по хлорофиллу) / Л.Е. Сигарева, Л.А. Тимофеева, В.В. Законов // Мат-лы Всеросс. конф. ИБВВ РАН, Борок. Ижевск Издатель Пермяков С.А., 2012. СНГ. Шерышева и др.//ВОДА: ХИМИЯ и ЭКОЛОГИЯ № 8 август 2016. c. 45–50 |