физиология. Методические указания. Определение групп крови
 Скачать 97.5 Kb.
|
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ. В 1819 г. Бландель (Англия) успешно осуществил переливание крови от человека человеку. Агглютинация и свертываемость крови продолжали препятствовать применению переливания крови. Эти препятствия были устранены после открытия К. Ландштейнера. В 1900 году, он, тогда ассистент Венского института патологии, взял кровь у себя и пяти своих сотрудников, c помощью центрифуги отделил сыворотку от эритроцитов и смешал отдельные образцы эритроцитов с сывороткой крови разных лиц и с собственной. В совместной работе с Л. Янским по наличию или отсутствию агглютинации Ландштейнер разделил все образцы крови на три группы: А, В и 0. Два года спустя ученики Ландштейнера, А. Штурли и А. Декастелло, открыли четвертую группу крови - АВ. За свои открытия Ландштейнер получил в 1930 году Нобелевскую премию. В 1940 году К. Ландштейнер и его сотрудник А. Винер устанавили в эритроцитах наличие нового агглютиногена, получившего наименование резус-фактор (Rh+). За прошедшее время переливание крови и ее компонентов спасло жизнь сотням тысяч и может быть даже миллионам людей. Переливанием крови лечат многие болезни. В случаях ранений, ожогов, травм, связанных с опасностью для жизни, переливание крови являлось единственным средством спасения. Следует помнить, что при неправильном определении группы, переливании несовместимой крови могут возникнуть тяжелые осложнения и смерть больного. В квалификационной характеристике врач-стоматолог указано, что врач должен владеть методикой определения групп крови. ЦЕЛЬ ОБУЧЕНИЯ Общая цель: Уметь определять группу крови и резус-фактор классическими методами.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ И ОБЕСПЕЧЕНИЕ ИСХОДНОГО УРОВНЯ ЗНАНИЙ-УМЕНИЙ ЗАДАНИЕ ДЛЯ ПРОВЕРКИ ИСХОДНОГО УРОВНЯ Задание 1. Больному по поводу послеоперационного кровотечения показанная переливание крови. Врач определяет группу крови. В какой фракции крови находятся аглютинины? А. В плазме. В. В эритроцитах. С. В лейкоцитах. D. В тромбоцитах. Е. Во всех форменных элементах крови. Задание 2. Какие агглютиногены содержатся в крови второй группы? А. А и В. B. А. C. В. D. Их нет. E. - Задание 3. Разрушение оболочки эритроцитов и выход гемоглобина в плазму под действием различных факторов называется ..... А. Плазмолизом. B. Фибринолизом. C. Гемолизом. D. Гемостазом. E. - Задание 4. Можно ли переливать кровь первой группы резус- отрицательную человеку с четвертой группой резус- положительной? А. Можно. B. Можно не более 500 мл. C. Нельзя. D. Можно только эритроцитарную массу. E. Можно только замороженную плазму. Задание 5. У какого процента людей встречается резус-фактор? А. У 15%. B. У 55 %. C. У 75 %. D. У 85 %. E. У 95%. Задание 6. Резус-конфликт в системе мать-плод может возникать при наличии ситуации: А. Женщина резус-отрицательная, плод резус-положительный. B. Женщина резус-положительная, плод резус-отрицательный. C. Женщина резус отрицательная, мужчина резус-положительный. D. Женщина резус-отрицательная, плод резус-положительный, а мать уже была иммунизирована резус-атигеном. E. - Источники информации для пополнения знаний - умений начального уровня 1. Привес Г. Г., Лысенко Н. К., Бушкович В. И. “Анатомия человека”. СПб –МАПО- 2006. - 720 с. 2. Зинчук, В. В. Нормальная физиология. Краткий курс / В. В. Зинчук, О. А. Балбатун, Ю. М. Емельянчик; под ред. В. В. Зинчука. - Минск : Выш. шк., 2010. -431 с. : ил СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ Методика определения группы крови. Методика определения резус-фактора. Ошибки при определении группы крови и резус-фактора и способы их предупреждения Граф логической структуры темы «Определение групп крови»(См. приложение 1) Источники информации Общая хирургия: Учебник /Петров С.В. М: ГЭОТАР-Медиа, 2014.- 832 с.: ил. Общая хирургия: Учебник /Гостищев В.К. М: ГЭОТАР-Медиа, 2010.- 848 с.: ил. Учебное пособие по переливанию крови для иностранных студентов медицинских ВУЗов /Гюльмамедов Ф.И., Томашевский Н.И., Белозерцев А.М. и другие. – Донецк – ЦМК МЗ Украины. – 1999. – 96с. Лекция. Граф логической структуры. Алгоритм. ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЯТЕЛЬНОСТИ (ООД) ТАКТИЧЕСКИЙ АЛГОРИТМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГРУПП КРОВИ (см. приложение 4)ТАКТИЧЕСКИЙ АЛГОРИТМ «ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ ПО СИСТЕМЕ АВ0 СТАКТИЧЕСКИЙ АЛГОРИТМ "ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ФАКТОРА" (см. приложение 4).ТАКТИЧЕСКИЙ АЛГОРИТМ "ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ФАКТОРА С ПОМОЩЬЮ МОНОКЛОНАЛЬНОГО РЕАГЕНТА (ЦОЛИКЛОН АНТИ-D СУПЕР)" (см. приложение 5) НАБОР ЗАДАНИЙ ДЛЯ ПРОВЕРКИ ДОСТИЖЕНИЯ КОНКРЕТНЫХ ЦЕЛЕЙ ОБУЧЕНИЯ Задание 1. У больного с кровотечением из желудка при определении групп крови агглютинации не возникло ни в одной из лунок на тарелке. Какая группа крови у больного? А. 0 (I). В. А (II). С. В (III). D. АВ (IV). Е. Группу крови нужно определить повторно. Задание 2. В травматологическое отделение поступил больной с открытым переломом левого бедра с наружной кровотечением. Больному нужное срочное переливание крови. При определении группы крови агглютинация возникла в 1, 2 и 3 лунках на тарелке. Какая группа крови у больного? А. 0 (I). В. А (II). С. В (III). D. АВ (IV). Е. Группу крови нужно определить повторно. Задание 3. При определении резус принадлежности крови необходимо иметь анти-резусную сыворотку. Анти-резусная сыворотка какой группы крови для этого может быть универсальной? A. Собственной (исследуемой); B. Первой группы. C. Второй группы. D. Третьей группы. E. Четвертой группы. Задание 4. Какие из антигенов системы крови занимают ведущее место при определении ее по системе резус-фактора (Rh)? A. Антигены эритроцитов. B. Антигены лейкоцитов. C. Антигены тромбоцитов. D. Плазменные антигены. E. Сывороточные антигены. Задание 5. Причины ошибок при определении группы крови по системе АВ0 является все, кроме A. Ошибочный порядок расположения стандартных сывороток. B. Слабая агглютинабельность эритроцитов. C. Неправильное соотношение количества сывороток и эритроцитов D. Неспецифическая агглютинация эритроцитов E. Правильный порядок расположения стандартных сывороток Задание 6. Правильное соотношение исследуемой крови и стандартных гемагглютинирующих сывороток при определении группы крови по системе АВ0 А. 1:1. В. 1:0,5. С. 5:1. D. 1:10. Е. 1:0,3 Граф логической структуры занятия:"Определение групп крови" (Приложение 1). СИСТЕМЫ ГРУПП КРОВИ        ABO Rh-Hr MNSS Lewis Duffi Luteran Pp...(около 20 систем) ГРУПЫ КРОВИ ПО СИСТЕМЕ АВО И РЕЗУС      0(I)αβ A(II)β B(III)α AB(IV)o Rh(+) Rh(-) МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГРУПП КРОВИ    С помощью стандартных сывороток С помощью стандартных эритроцитов С помощью моноклональних антител (цоликлонов) Известные агглютинины α, β Известные антигены А.В. Известные антитела анти-А, анти-В МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗУС-ФАКТОРА С помощью стандартной антирезусной сыворотки АВ (IV) группы и 33% раствор полиглюкина 2:1 С помощью моноклональных антител (цоликлонов) Резус - антиген D Известные антитела анти-D, анти-С, анти-Е   ТАКТИЧЕСКИЙ АЛГОРИТМ "ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ ПО СИСТЕМЕ АВ0О С ПОМОЩЬЮ СТАНДАРТНЫХ ИЗОГЕМАГГЛЮТИНИРУЮЩИХ СЫВОРОТОК" (Приложение 2). 1 ЭТАП. ЦЕЛЬ - подготовка к определению групп крови. Нужно подготовить все необходимое для определения групп крови. Взять стандартные сыворотки, иглы, предметное стекло, стеклянные палочки, пипетки, спирт, настойку йода, ватные шарики, тарелку-планшетку с маркированием групп крови, флакон с физиологическим раствором NaCl.. На тарелку нанести по капле стандартных сывороток 0(I), А(II), В(III) групп двух разных серий. Дезинфицировать кожу пальца спиртом и уколоть стерильной иглой. 2 ЭТАП. ЦЕЛЬ - смешать капли крови с сыворотками. Взять 6 капель крови и поместить их на тарелку рядом с каплями сывороток в соотношении 1:10. Перемешать стеклянной палочкой. Для улучшения реакции необходимо периодически покачивать тарелку на протяжении 3-х минут. Потом в каждую лунку, где наступила агглютинация, добавить по 1 капле физиологического раствора и периодически покачивать еще на протяжении 2-х минут. 3 ЭТАП. ЦЕЛЬ - контроль агглютинации. Реакция в каждой капле может быть положительной (наличие агглютинации) и отрицательной (отсутствие агглютинации). Различные комбинации положительных и отрицательных результатов дают возможность судить о принадлежности исследуемой крови к той или другой группе согласно приведенной таблицы:
(+) - наличие агглютинации ( - ) - отсутствие агглютинации При положительной реакции агглютинации в трех лунках необходимо провести реакцию с сывороткой AB (ІV) группы крови (контроль). Только при отрицательной реакции можно говорить о том, что исследуемая кровь группы AB (ІV). Положительная реакция агглютинации указывает на то, что мы имеем дело или с реакцией панаглютинации (феномен Томпсона). Для определения группы крови в таких случаях пользуются перекрестной реакцией (со стандартными эритроцитами), которую, как правило, проводят в лаборатории. ТАКТИЧЕСКИЙ АЛГОРИТМ"ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ ПО СИСТЕМЕ АВ0 С ПОМОЩЬЮ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ (ЦОЛИКЛОНОВ)" (Приложение 3). Оборудование: флаконы с моноклональними антителами (цоликлонами) анти-А и анти-В, стерильная игла, предметное стекло, или стеклянные палочки, пипетки, спирт, вата, тарелка-планшетка с маркированием групп крови, флакон с физиологическим раствором. 1 ЭТАП. ЦЕЛЬ - подготовка к определению групп крови. На тарелку-планшетку, соответственно с метками, наносят в луночки по 2 капли диагностикума анти-А и анти-В. Обрабатывают подушечку ногтевой фаланги ІV пальца 96% спиртом. Прокалывают кончик ногтевой фаланги стерильной иглой. 2 ЭТАП. ЦЕЛЬ - проведение реакции агглютинации. Берут по 1-й капле крови и наносят их в луночки на тарелке рядом с каплями диагностикума в соотношении 1:10. Перемешивают стеклянной палочкой и через 1 минуту учитывают результат. 3 ЭТАП ЦЕЛЬ - учет реакции. Реакция в каждой капле может быть положительной (наличие агглютинации) и отрицательной (отсутствие агглютинации).
(+) - наличие агглютинации ( - ) - отсутствие агглютинации ТАКТИЧЕСКИЙ АЛГОРИТМ"ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ФАКТОРА" (Приложение 4). Кровь для исследования берется из пальца непосредственно перед исследованием (можно использовать консервированную кровь без предварительной обработки), а также эритроциты из пробирки после образования сгустка и отстаивания сыворотки. Капля стандартной антирезусной сыворотки для экспресс-метода наносится на дно пробирки. Туда же добавляется капля исследуемой крови. Осторожными движениями необходимо добиться, чтобы образовавшийся раствор растекся по стеклу пробирки. Через 3 минуты после внесения эритроцитов добавляется 2-3 мл физиологического раствора. Пробирка осторожно переворачивается 3 раза, после чего считывается результат: Rh + - при наличии агглютинатов на фоне просветленной жидкости; Rh - - при гомогенно окрашенной жидкости (отсутствие агглютинации). ТАКТИЧЕСКИЙ АЛГОРИТМ "ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ФАКТОРА С ПОМОЩЬЮ МОНОКЛОНАЛЬНОГО РЕАГЕНТА (ЦОЛИКЛОН АНТИ-D СУПЕР)" (Приложение 5). Цоликлон анти-D супер выпускается во флаконах 2,5 мл или 10 мл (1 мл содержит 10 доз), срок хранения - 1 год при температуре 2-8°C, вскрытый флакон допускается хранить в холодильнике в закрытом виде в течение 1 месяца. На тарелку наносят большую каплю реагента (около 0,1 мл). Рядом помещают маленькую каплю (0,01-0,05 мл) исследуемой крови и смешивают кровь с реагентом. Реакция агглютинации начинает развиваться через 10-15 сек, четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 сек. (резус положительная, нет агглютинации – резус отрицательная). Результаты реакции учитывают через 3 мин. Тарелку после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а через 20-30 сек, что позволяет за это время развиться более полной крупнолепестковой агглютинации. КРАТКИЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЕ СТУДЕНТОВ ВО ВРЕМЯ ПРАКТИЧЕСКОГО ЗАНЯТИЯ Сначала осуществляется проверка исходного уровня знаний с помощью тестов. Затем проводится самостоятельная работа студентов под руководством преподавателя. После этого преподаватель демонстрирует студентам основные методики временной остановки внешних кровотечений, методику переливания крови, ее препаратов и кровезаменителей. Затем студенты под руководством преподавателя самостоятельно осваивают конкретные методики остановки внешних временных кровотечений и переливания крови ее препаратов и кровезаменителей. Закрепление навыков проводится в манипуляционной комнате. Затем преподаватель проводит анализ занятия и коррегирует ошибки студентов. В конце занятия осуществляется заключительный тестовый контроль, подводятся итоги, выставляются оценки. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||