Микробиология. Рабочая тетрадь по ветеринарной микробиологии и микологии
 Скачать 429 Kb.
|
|
Характеристика возбудителей хламидиоза и риккетсиозов. Цель занятия: ознакомиться с основными свойствами возбудителей хламидиоза и риккетсиозов методами бактериологических исследований и этапами лабораторной диагностики болезней. Задание 1. Систематизировать хламидии.. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 1. Систематизировать риккетсии. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 3. Изучить морфологические свойства хламидий и риккетсий. Описать,зарисовать микроорганизмы, окрашенные по Стампу и Романовскому-Гимза,  Хламидии Риккетсии Задание 4. Каковы особенности бактериологического исследования риккетсий и хламидий? Задание 5. Какие серологические методы применяют при диагностике риккетсиозов и хламидиозов? Задание 6. Решить ситуационные задачи. 1) Назовите биологические модели для выделения риккетсий и хламидий. Ответ: Дата Подпись преподавателя ЗАНЯТИЕ № 14 Характеристика возбудителей дерматомикозов, плесневых микозов и микозов, вызываемых дрожжеподобными грибами. Методы лабораторной диагностики болезней Цель занятия: ознакомиться с основными свойствами возбудителей трихофитии, микроспории, аспергиллеза, пенициллиоза, мукоромикоза, кандидамикоза, методами микологических исследований и этапами лабораторной диагностики болезней. Задание 1. Систематизировать возбудителей трихофитии. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 2. Систематизировать возбудителей микроспории. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 3. Систематизировать возбудителей аспергиллеза. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 4. Систематизировать возбудителя пенициллиоза. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 5. Систематизировать возбудителя мукоромикоза. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 6. Систематизировать возбудителя кандидамикоза. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 8. Приготовить неокрашенный препарат из обезвреженного материала (шерсть и соскобы с кожи), полученного от животных, больных микроспорией и (или) трихофитией, провести их микроскопическое исследование и зарисовать.  Возбудитель трихофитии Возбудитель микроспории Задание 9. В затемненном помещении под ультрафиолетовыми лучами с применением ртутно-кварцевой лампы со свето-фильтром Вуда (ПРК-4 с фильтром Вуда) провести люминесцентный анализ обезвреженного материала (шерсть и соскобы с кожи), полученного от животного, больного стригущим лишаем. Поставить диагноз. Описать результаты исследований. Задание 10. Изучить морфологические и культуральные свойства грибов родов Mucor, Aspergillus, Penicillium. Приготовить неокрашенные препараты для микроскопии, результаты микроскопии зарисовать.  MucorAspergillusPenicillium Задание 11. Изучить культуральные свойства грибов рода Candida, выросших на плотной и в жидкой среде Сабуро. Приготовить мазки и исследовать их микроскопически в неокрашенном препарате (раздавленная капля) и в окраске по Граму. Зарисовать микроскопическую картину.  Неокрашенный Окрашенный по Граму Задание 12. Ознакомиться с биопрепаратами, применяющимися для диагностики, специфической профилактики трихофитии, микроспории, аспергиллеза, пенициллиоза, мукоромикоза, кандидамикоза и лечения больных животных. Заполнить таблицу.
Задание 13. Решить ситуационные задачи. 1) В хозяйстве у многих овец было отмечено появление на коже округлых и овальных облысевших очагов с мягкими, иногда сухими корочками на разных частях тела. У некоторых овец наблюдалось несколько очагов поражения с ярко выраженными экссудативными и воспалительными процессами. Какое заболевание следует подозревать и какой материал отправить в лабораторию для постановки диагноза? Ответ: 2) У собаки был отмечен стригущий лишай. При микроскопии соскобов с кожи и волос были обнаружены мелкие, располагающиеся у основания волоса споры, которые преломляли свет, плотно прилегали друг к другу, располагались мозаично. Назовите возбудителя? Ответ: 3) В лаборатории выделенную из патматериала культуру кандид высеяли на бульон Сабуро. Через 24 часа был замечен глубинный рост возбудителя, образование пленки и пристеночного кольца. Для дифференциации видов грибов рода Candida было решено определить их ферментативную активность на жидких средах Гисса. Сколько дней следует наблюдать за посевами на средах Гиса? Какие ферментативные свойства проявляют кандиды? Какие виды кандид способны проявлять вышеописанные культуральные свойствами при росте в бульоне Сабуро? Ответ: Дата Подпись преподавателя ЗАНЯТИЕ № 15 Характеристика возбудителей микотоксикозов. Методы лабораторной диагностики болезней Цель занятия: ознакомиться с основными свойствами возбудителей микотоксикозов, методами микотоксикологических исследований и этапами лабораторной диагностики болезней. Задание 1. Систематизировать возбудителей фузариотоксикоза. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 2. Систематизировать возбудителей аспергиллотоксикоза. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 3. Систематизировать возбудителя стахиботриотоксикоза. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 4. Систематизировать возбудителей пенициллотоксикоза. Царство - Категория- Группа - Подгруппа - Семейство- Род - Виды – Задание 6. Провести органолептический анализ кормов, пораженных плесневыми грибами. Описать внешний вид, цвет, запах, наличие мицелия грибов на корме. внешний вид корма: цвет: запах: вид мицелия гриба: Задание 7. Провести посев подозрительного в поражении возбудителями микотоксикозов образца корма на чашки Петри со средой Сабуро. Задание 8. Поставить кожную биопробу на кролике для определения токсичности корма. Учесть реакцию кожной пробы и определить степень токсичности корма. Заполнить таблицу.
Задание 9. Поставить биопробу на белых мышах для определения токсичности корма. Описать метод постановки биопробы. Задание 10. Решить ситуационные задачи. 1) В хозяйстве произошел массовый падеж телят 6-месячного возраста с признаками отравления. Известно, что незадолго до этого, в хозяйство поступила новая партия комбикорма. Какой материал необходимо отправить в лабораторию для исследования? Ответ: 2) В лабораторию поступили пробы кормов, предположительно вызвавшие микотоксикозы у кур. Какие методы лабораторных исследований необходимо использовать для постановки диагноза? Ответ: 3) В лабораторию поступил корм, предположительно вызвавший отравления животных. Было решено провести токсикологический анализ корма. С использованием каких биологических моделей (животных) можно провести данный анализ? Ответ: 4) В хозяйстве у всех заболевших коров были выявлены отечность молочной железы и вульвовагиниты. При обследовании недавно поступившей партии комбикорма были обнаружены зерна, окрашенные в красноватый цвет. Какое заболевание у животных должен заподозрить ветврач? Ответ: Дата Подпись преподавателя ЗАНЯТИЕ № 16 Санитарно-микробиологическое исследование воздуха, воды, почвы и навоза Цель занятия: ознакомиться с основными методами и показателями, необходимыми для санитарно-микробиологической оценки объектов внешней среды. Микробиологическое исследование воздуха Задание 1. Для определения степени загрязненности воздуха помещений кафедры микробиологии, провести посев воздуха учебной аудитории, коридора, бокса и вивария седиментационным методом (осаждение по методу Коха) на следующие питательные среды: - на чашки Петри с МПА, для определения общей микробной обсемененности воздуха; - на чашки Петри с кровяным МПА для обнаружения санитарно-показательных микроорганизмов - гемолитических стрептококков и стафилококков. Чашки с посевами поставить в термостат при 37° С. Задание 2. Определить общую микробную обсемененность воздуха. Подсчитать количество колоний, выросших на демонстрационных чашках Петри с МПА и кровяным МПА и рассчитать количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха по формуле Омелянского (на чашку площадью 100 см2 в течение 5 мин оседают микроорганизмы из 10 л воздуха):  , гдеX - количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха; N - количество колоний, выросших на МПА; S - площадь чашки Петри, см2; Т - время посева микроорганизмов. Задание 3. Описать культуральные и морфологические свойства колоний и микроорганизмов, выросших при исследовании воздуха. Приготовить мазки из 5 различных колоний, окрасить их по Граму, микроскопировать. Определить наличие санитарно-показательных микроорганизмов в воздухе. Результаты занести в таблицу. Дать санитарную оценку воздуха. Культурально-морфологические свойства микроорганизмов, выделенных из воздуха
Санитарная оценка воздуха: Микробиологическое исследование воды Задание 4. Для определения микробной загрязненности воды провести посевы водопроводной и прудовой воды на МПА. Изучить демонстрационные препараты, сравнить результаты, зарисовать. Водопроводная вода Прудовая вода Задание 5. Для определения общего микробного числа водопроводной воды 1 мл воды внести в стерильную чашку Петри и залить 12 мл расплавленного и охлажденного до 45° С питательного агара, который тщательно смешивают с водой. Посевы инкубировать в термостате при 37 ° С в течении 1-2 суток. Задание 6. Определить коли-титр и коли-индекс водопроводной и прудовой воды методом мембранных фильтров. Через мембранный фильтр № 3 пропускают 333 мл воды, затем фильтры накладывают на агар Эндо в чашки Петри и инкубируют чашки в термостате при 37°С в течении суток. Учесть результаты демонстрационных препаратов, подсчитав количество колоний, выросших на среде Эндо. Определить соответствие водопроводной воды ГОСТу. Записать, зарисовать.  Коли-титр Водопроводной воды Прудовой воды Коли-индекс  Водопроводной воды Прудовой воды Микробиологическое исследование почвы Задание 7. Определить микробную загрязненность почвы, сделав посевы почвы на МПА и подсчитав среднее количество выросших колоний. Дать оценку образца почвы в демонстрационном препарате. Задание 8.  Определить общее микробное число образца почвы методом серийных разведений. Для этого приготовить серийные 10-кратные разведения почвы в стерильной водопроводной воде (всего 9 разведений), затем из последних 4 пробирок (разведения 10-9, 10-8, 10-7, 10-6) внести по 1 мл суспензии почвы в стерильные чашки Петри, залить их расплавленным и охлажденным до 45°С МПА, перемешать. После затвердевания агара чашки перевернуть вверх дном и инкубировать в термостате при 37°С в течении 1-2 суток. Зарисовать схему исследований.   10-1 10-2 10-3 10-4 10-5   10-6 10-7 10-8 10-9   Задание 9. В демонстрационном препарате рассчитать количество микроорганизмов в 1 г почвы по формуле: С = N· 20 · 10n , где С – концентрация микроорганизмов в 1 г почвы; N – количество колоний, выросших на МПА из определенного разведения почвы; 20 – пересчет количества микроорганизмов на 1 г почвы (при внесении на МПА 0,05 мл почвенной суспензии); 10n – степень разведения почвы, с которой подсчитывались колонии. Сделать мазки из колоний микроорганизмов, окрасить по Граму, микроскопировать и зарисовать. Дать оценку микробной обсемененности почвы.  Задание 10. Определить перфрингенс-титр почвы, засевая различные разведения почвы на среду Вильсона-Блера и в пробирки со стерильным обезжиренным молоком. Посевы инкубировать в течение 1-2 суток при 43° С. Дать оценку обсемененности почвы клостридиями в демонстрационном препарате. Задание 11. Для изучения микроорганизмов почвы, участвующих в процессе разложения белка, высеять пробу почвы в колбу с МПБ. Под пробку поместить лакмусовую бумажку, смоченную дистиллированной водой (для обнаружения аммиака), и фильтровальную бумажку, смоченную уксусно-кислым свинцом (для обнаружения сероводорода и метилмеркаптана). Бумажки не должны касаться среды. Посевы поставить в термостат при температуре 28-30°С на 3-6 суток. Учесть результаты опыта в демонстрационных препаратах. Задание 12. Изучить морфологию возбудителей гнилостного распада белковых веществ, обитающих в почве. Из посевов почвы в МПБ приготовить препараты живых бактерий (раздавленная капля) и фиксированные, окрашенные фуксином. Зарисовать.  Живые бактерии Окрашенные фуксином Микробиологическое исследование навоза Задание 13. Приготовить мазки из проб навоза кролика, морской свинки, мыши и коровы. Окрасить мазки метиленовым синим, микроскопировать, микрокартину зарисовать.  Кролик Морская свинка Мышь Корова Задание 14. Определить общее микробное число навоза методом серийных разведений (см. задание 8, занятие 14). Поставить посевы в термостат при температуре 28-30°С на 5 суток. В демонстрационном препарате рассчитать количество микроорганизмов в 1 г навоза по формуле: С = N· 20 · 10n (см. задание 9, занятие 14). Задание 15. Сделать мазки из колоний микроорганизмов, окрасить по Граму, микроскопировать и зарисовать. Дать оценку микробной обсемененности навоза.  Задание 16. Для оценки возможности использования навоза в качестве органического удобрения, выделить из навоза термофильные бактерии и определить их концентрацию. Для этого из серийных разведений навоза 10-2, 10-4 и 10-6 сделать посевы на МПА. Посевы инкубировать в термостате при 60°С 2-3 суток. В демонстрационном препарате рассчитать количество термофильных бактерий (см. задание 9, занятие 14). Зарисовать колонии термофильных бактерий навоза. Сделать из колоний мазки, окрасить по Граму, микроскопировать, зарисовать. Сделать вывод.  Задание 17. Решить ситуационные задачи. 1) В хозяйстве участились случаи расстройства пищеварения у коров, проявляющиеся диареей. Есть предположение, что ближайший водоем, к которому коров водят на водопой, загрязнен навозными стоками. Хозяйство просит СЭС провести санитарно-микробиологическое исследование воды. Как правильно отобрать пробы воды из водоема для анализа? Ответ: 2) Врачу необходимо провести полный анализ почвы. Какие методы исследований он в себя включает и какие показатели необходимо определить? Ответ: 3) В инкубатории птицефабрики необходимо провести санитарно-микробиологическое исследование воздуха, используя метод осаждения Коха. Какие действия для этого должен предпринять врач? Ответ: 4) Врач определяет количество санитарно-показательных микроорганизмов во внешней среде. Во время исследования было установлено, что выделенные микроорганизмы активно размножаются в почве. Относятся ли эти микроорганизмы к санитарно-показательным или нет? Почему? Ответ: 5) В лабораторию поступили пробы конского навоза для определения наличия и концентрации в нем термофильных бактерий. Лаборант сделал серийные разведения навоза и посеял их на МПА. Посевы инкубировал в термостате при 37°С 2-3 суток. По истечении срока культивирования лаборант не смог идентифицировать термофильные бактерии. В чем его ошибка? Ответ: Дата Подпись преподавателя Издательско - полиграфический отдел ФГБОУ ВО МГАВМиБ – МВА имени К.И.Скрябина 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23 |