Занятие №7 (Рожок Д.В. 316 гр. Леч. Фак.). Российской Федерации занятие Тема Микробиология спирохетозов. Микробиология риккетсиозов (эпидемических, эндемических) и хламидиоза. Микробиология протозоозов. Принципы диагностики. Проблемы специфической профилактики

• Название: Российской Федерации занятие Тема Микробиология спирохетозов. Микробиология риккетсиозов (эпидемических, эндемических) и хламидиоза. Микробиология протозоозов. Принципы диагностики. Проблемы специфической профилактики
• Дата: 18.12.2021
• Размер: 0.54 Mb.
• Имя файла: Занятие №7 (Рожок Д.В. 316 гр. Леч. Фак.).docx
• Тип: Занятие; #307937

Федеральное Государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего образования

«Тихоокеанский государственный медицинский университет»

Министерства здравоохранения

Российской Федерации


ЗАНЯТИЕ № 7.

Тема: Микробиология спирохетозов. Микробиология риккетсиозов (эпидемических, эндемических) и хламидиоза. Микробиология протозоозов. Принципы диагностики. Проблемы специфической профилактики

.

Работу выполнил студент 316 группы

Лечебного факультета

Рожок Д.В.
Владивосток 2021.

Занятие №7.

Микробиология спирохетозов. Микробиология риккетсиозов (эпидемических, эн-демических) и хламидиоза. Микробиология протозоозов. Принципы диагностики. Проблемы специфической профилактики.

Для выполнения заданий изучите материал лекции и учебника.



Техника окраски:

1. 
   Приготовленный препарат высушивают на воздухе.
   
2. 
   Фиксируют в метиловом спирте, или жидкости Карнуа или смеси Никифорова или других химических веществах, применяемых в качестве фиксаторов.
   
3. 
   Фиксированные мазки подсушивают на воздухе и окрашивают рабочим раствором Романовского - Гимзы (к 10 мл дистиллированной воды добавляют 10 капель коммерческого красителя Романовского - Гимзы), погружая стекло в стаканчик с красителем.
   
4. 
   Через 10-20 мин (1 ч) краситель сливают, препарат промывают дистиллированной водой.
   
5. 
   Готовый препарат высушивают на воздухе и микроскопируют.
   

Оценка результатов. Протоплазма форменных элементов ткани простейших окрашивается в голубовато-синий цвет, ядра клеток - в фиолетово-красный, тела микробных клеток приобретают фиолетово- красный цвет.

Задание №1.

Общая характеристика спирохет

Таксономия спирохет, имеющих клиническое значение

Спирохеты – это спирально извитые подвижные микроорганизмы. Спирохеты представляют собой цитоплазматический цилиндр, ограниченный мембраной и окружённый очень тонкой клеточной стенкой. В цитоплазме содержатся нуклеоид, рибосомы, мезосомы и включения. Спирохеты передвигаются в результате волнообразного сокращения цитоплазмы клетки. К спирохетам относятся трепонема (Treponema), боррелиа (Borrelia) и лептоспира (Leptospira). Спириллы и вибрионы, представляют собой спиралевидно изогнутые палочковидные грамотрицательные бактерии с тонкой клеточной стенкой. Спириллы имеют 4-6 изгибов и полярно расположенные жгутики, а вибрионы – один изгиб, напоминающий запятую или изогнутую палочку.

Порядок Spirochaetales → Семейство Spirochaetaceae → Род: Treponema, Borrelia, Leptospira

Задание №2.

Классификация спирохет

Borrelia – спирально изогнутые микроорганизмы размерами от 0,20,5x320 мкм, имеющие 3-8 завитков (10-20); возбудитель возвратного тифа.

Treponema – микроорганизмы спиралевидной формы, размерами от 0,90,18x620 мкм. Число завитков спирали 8-12; возбудитель сифилиса.

Leptospira – имеют вид плотно закрепленной пружины, состоящей из 12-18 завитков; возбудитель лептоспироза

Leptospiraceae)'>Задание №3.

Заполните таблицу: порядок Spirochaetales объединяет три рода патогенных спирохет: , бореллии , трепонемы (сем. Spirochaetaceae), лептоспиры (сем. Leptospiraceae)

Род		Вид	подвид	заболевания
Treponema	Бледная трепонема Treponema pallidum		T. pallidum pallidum — возбудитель сифилиса, наиболее широко известен. T. pallidum pertenue — возбудитель фрамбезии. T. pallidum carateum — возбудитель пинты. T. pallidum endemicum — возбудитель беджеля (эндемического сифилиса).	Сифилис
Borrelia	Borrellia recurrentis (Возвратный тиф) Borrelia burgdorferi (Болезнь лайма)		Borrellia recurrentis (Возвратный тиф) Borrelia burgdorferi (Болезнь лайма) Borrelia afzelii. Borrelia garinii. Borrelia valaisiana.	Болезнь лайма. Возвратный тиф.
Leptospira	L. interrogans – патогенные лептоспиры, вызывающие заболевания у человека и животных; - L. biflexa – сапрофитные лептоспиры		Патогенные лептоспиры. Leptospira alstonii Leptospira interrogans Spirochaeta interrogans" "Spirochaeta nodosa" "Spirochaeta icterohaemorrhagiae" "Spirochaeta icterogenes" "Leptospira icteroides" Leptospira kirschneri Leptospira noguchii Leptospira alexanderi Leptospira weilii Leptospira borgpetersenii Leptospira santarosai Leptospira kmetyi Leptospira mayottensis Промежуточные или условно-патогенные лептоспиры Leptospira inadai Leptospira fainei Leptospira broomii Leptospira licerasiae Leptospira wolffii Не патогенные лептоспиры. Leptospira biflexa Leptospira idonii Leptospira meyeri Leptospira wolbachii Leptospira vanthielii Leptospira terpstrae Leptospira yanagawae	Лептоспироз

Задание №4.

Заполните таблицу: «Определение родовой принадлежности спирохет в мазке, окрашенном по Романовскому-Гимзе»

Род	Количество и характер завитков	Характер движения	Окраска по Романовскому - Гимзе
Treponema	3-10 крупные неравномерные	Толчкообразное, сгибательно-поступательное.	Сине-фиолетовая
Borrelia	8-12 мелкие неравномерные	Плавное, сгибательно-поступательно.	Бледно-розовая
Leptospira	Многочисленные первичные завитки, вторичные завитки, образуют крючки с (s)-образная форма.	Очень активное, вращательно-поступательное.	Розово-сиреневая

Задание №5.

Морфология, физиология Т. Pallidum

Т. pallidum, подвид pallidum, имеет спиралевидную форму с одинаковыми по высоте завитками, которых может быть до 14; средние размеры – 6–14³0,2–0,3 мкм, но в культурах размеры могут быть большими. Движения разнообразные – от винтообразных до сгибательных (этим обусловлена высокая инвазивность Т. pallidum и возможность распространяться по жидкостям организма). Двигательная активность обеспечивается 36 генами, кодирующими белки жгутиковых структур. Существует ряд основных вариантов существования Т. pallidum, имеющих прямое отношение к особенностям клинического течения сифилиса: а) спиралевидная форма, малоустойчивая к действию лекарственных препаратов, встречающаяся на ранних стадиях инфекции; б) цисты, являющиеся формами устойчивого выживания и размножения, возникающие в неблагоприятных условиях и сопровождающиеся образованием дополнительной системы оболочек. Существование цист объясняет скрытое, длительное, вялое течение, положительные серологические реакции у больных, устойчивость к лекарственным препаратам; в) L-формы, представленные гранулами, шарами и зернами, образующиеся под влиянием антибиотиков и устойчивые к воздействию их больших доз, обладающие сниженной патогенностью и иной, чем Т. pallidum, антигенной структурой. Объясняют скрытое или длительное бессимптомное течение инфекции. Основной способ размножения – поперечное деление, хотя многие авторы предполагают более сложный цикл. Трепонема малоустойчива во внешней среде, гибнет при высыхании, но на холоде в тканях может сохраняться до 50 сут. Прогревание при температуре 40оС в течение 1 ч приводит к утере патогенных свойств, при 48оС гибнет за 10 мин. Возбудитель сохраняется в течение 3–6 сут при 25 0С в жидкой среде, содержащей редуцирующие агенты, а также в течение 24 ч в крови при температуре 40оС.

Задание №6.

Антигены бледной трепонемы

Термолабильный белковой природы – разрушающийся при нагревании до 76-78 градусов.

Термостабильный полисахарид – не разрушающийся при наргевании до 100 градусов.

Липоидные АГ идентичный кардиолипидам – идентичен кардиолипину.

Липоидный, но по серологическому и химическому строению отличающиеся от предыдущего.

Задание №7.

Микробиологическая диагностика спирохет

Исследуемый материал: отделяемое твердого шанкра, пунктат лимфатических узлов, отделяемое слизистых оболочек и кожи при вторичном сифилисе, а также сыворотка крови и спинномозговая жидкость (для серологической диагностики).

Микроскопический метод - темнопольная микроскопия, окраска спирохеты по Романовскому-Гимзе, Бурри, импрегнацией серебром по Морозову

Серологический метод – МР, ИФА, РНГА, РИФ, РИБТ, РСК для определения антител к бледной спирохете в крови больного

Генодиагностика - ПЦР

Серологический метод. Микрореакцию преципитации (МР). Положительная реакция характеризуется выпадением хлопьев. МР обладает высокой чувствительностью и специфичностью, хорошо сочетается с подтверждающими диагноз специфическими трепонемными тестами, позволяет объективно оценить эффективность лечения, однако необходимо ее подтверждение одним из специфических тестов (ИФА, РНГА, РИФ, РИБТ, РСК). ИФА применяется как для отборочных целей, так и для диагностики сифилиса. Разработаны тест-системы для определения антител к бледной спирохете классов GиM, что имеет важное значение для диагностики ранних форм сифилиса (в том числе врожденного), дифференциальной диагностики рецидивов, реинфекции, оценки эффективности лечения и т.д. РНГА также используется для целей отбора и диагностики. Обладает более высокой чувствительностью и специфичностью, чем другие серологические реакции при сифилисе, отличается простотой в постановке. РИФ сопоставима по своим результатам с ИФА и РНГА. Мазки исследуют с помощью люминесцентного микроскопа, отмечая при положительном результате наличие ярко-зеленого свечения трепонем. РИБТ. Сущность реакции заключается в способности антител к бледной трепонеме иммобилизировать (обездвиживать) их в присутствии комплемента. РСК ставится по общепринятой методике с неспецифическим кардиолипиновым (экстракт липидных фракций из бычьего сердца – реакция Вассермана) и специфическим (из разрушенных ультразвуком трепонем) антигенами. Положительная реакция характеризуется задержкой гемолиза. Иммуноблотинг – вариант ИФА для определения антител в крови больного к антигенам бледной спирохеты.

Генодиагностика. Разработана ПЦР и метод ДНК-зондов для диагностики сифилиса.

Опишите метод диагностики?

1. Импрегнацию трепонем серебром (серебрение по Морозову) проводят следующим образом: мазок высушивают, заливают первым реактивом на одну минуту, после чего предметное стекло промывают водой. Затем наступает очередь второго реактива – стекло при этом нагревают на 1 минуту в пламени спиртовки (умеренно). После промывания стекло вновь нагревают до окраски мазка в коричневый цвет.



2. Темнопо́льная микроскопи́я — вид оптической микроскопии, в которой контраст изображения увеличивают за счет регистрации только света, рассеянного изучаемым образцом. При использовании метода темного поля регистрируются даже незначительные различия в преломляющей способности участков препарата.

3. Окраска по Романовскому-Гимзе (смесью азура, эозина и метиленового синего). При окрашивании простейших их цитоплазма приобретает голубой цвет, а ядра - красно-фиолетовый.

Задание №8.

Боррелии

Культуральные свойства

Культивируются на сложных питательных средах, содержащих сыворотку, тканевые экстракты, а также в куриных эмбрионах. Чувствительны к высыханию и нагреванию. Устойчивы к низким температурам.

Биохимические свойства

Биохимические свойства боррелий практически не изучены. Известно, что глюкоза усваивается ими гликолитическим путем с образованием молочной кислоты. Для многих боррелий существенными факторами роста являются длинноцепочечные жирные кислоты, и установлено, что лизолецитин гидролизуется фосфолипазой В на альфа-глицерофосфорилхолин и одну жирную кислоту.

Резистентность

Боррелии взаимодействуют с многочисленными факторами специфической и неспецифической резистентности макроорганизма. На ранних стадиях клетки первой линии защиты (фибробласты, макрофаги, эндотелиальные клетки и др.) продуцируют цитокины, состав которых может быть определяющим в последующем течение инфекции и ее исходе, в восприимчивости или резистентности к болезни.

Задание №9.

Таксономия лептоспир

Порядок: Spirochaetales.

Семейство: Leptospiraceae

Род: Leptospira

Вид: 2 вида. L.interrogans и L.biflexa.

Задание №10.

Лептоспиры – морфология

Лептоспиры - спиралевидные нити, длиной 6-20 × 0,1-0,25 мкм. Имеют многочисленные (12-18) мелкие, тесно прилегающие друг к другу завитки. Концы спиралей загнуты в виде крючков. Существуют и безкрючковые штаммы. Лептоспиры очень подвижны.

Задание №11.

Какой метод диагностики?

1 2

Импрегнацию трепонем серебром (серебрение по Морозову).

Темное поле зрения. Лептоспиры имеют вид тонких, серебристых нитей с утолщенными и загнутыми в виде крючков концами.

Задание №12.

Лептоспиры – антигенная структура

Лептоспиры имеют сложную антигенную структуру. Они содержат белковый антиген, характерный для представителей всего рода. Другим антигеном лептоспир является поверхностный липополисахаридный антиген, специфический для каждого серовара. У лептоспир обнаружены также полисахаридные и гликопептидные антигены.

Задание 13.

Микробиология риккетсиозов (эпидемических, эндемических) и хламидиоза. Морфология, физиология, антигенная характеристика возбудителей, патогенез, клинические особенности инфекций, иммунитет. Диагностика. Микробиология протозоозов. Морфология, физиология, антигенная характеристика возбудителей, патогенез, клинические особенности инфекций, иммунитет. Диагностика.

Ответить на вопросы:

1. История изучения риккетсиозов, вклад отечественной науки в развитие современных представлений о риккетсиозах.

ОТВЕТ: Большой вклад в изучение риккетсиозов внес чешский микробиолог С.Провацек, который так­же погиб от сыпного тифа при изучении болезни в Сербии. Роль вшей в передаче инфекции при сыпном тифе впервые установил в 1908 г. Н.Ф.Гамалея. Важнейшую роль в развитии учения о рик­кетсиозах, в создании классификации риккетсиозов сыграли тру­ды П.Ф.Здродовского и его учеников.

2. Биологические свойства риккетсий, особенности паразитизма, современная классификация риккетсиозов и их возбудителей.

ОТВЕТ: Риккетсии малоустойчивы к нагреванию, за исключением коксиеллы Бернета. При температуре 50—56 °С они погибают че­рез 10—30 мин, а при 80 °С — через 1 мин. Они инактивируются под действием различных дизенфицирующих средств, быстро по­гибают под действием спирта, эфира, хлороформа, но в высушен­ном состоянии и при низких температурах сохраняются длитель­ное время. Коксиелла Бернета высокоустойчива к различным факторам окружающей среды. Таким образом, риккетсии явля­ются облигатными внутриклеточными паразитами (что сближа­ет их с вирусами). Паразитируют они как на позвоночных, так и беспозвоночных животных. Риккетсии обладают тропизмом к клеткам эндотелия и серозных оболочек, в которых и происхо­дит их развитие и размножение.

Риккетсиозы встречаются во всех странах света. Два из них — эпидемический сыпной тиф и волынская ли­хорадка — эпидемические антропонозы. Они характеризуются тем, что источником инфекции является больной человек или носитель, а переносчиком — платяная или головная вошь, у которой риккетсии вызывают смертельную инфекцию. Остальные риккетсиозы — эндемические зоонозы с природ­ной очаговостью (эпизоотии). Резервуаром возбудителя являют­ся некоторые виды мелких млекопитающих, а переносчиком — кровососущие членистоногие (клещи, блохи).

Классификация риккетсии и риккетсиозов. Риккетсии представлены 3 родами: Rickettsia, Coxiella и Rochalimaea. Наиболее многочисленным является род Rickettsia, представители которого вызывают три основные группы риккетсиозов.

1. Группа клещевых пятнистых лихорадок (наиболее древняя группа). Включает клещевой риккетсиоз (клещевой сыпной тиф Северной Азии), марселъскую лихорадку, везикулезный риккетсиоз, лихорадку. Риккетсии, вызывающие эти болезни, характеризуются наличием общих антигенов. Для них характерны и признаки экологической общности — это природно-очаговые ин­фекции, резервуаром которых являются иксодовые (гамазовые) клещи, а также дикие и домашние животные.

2. Группа вшино-блошиного сыпного тифа. Она включает 2 генетически и серологически близких, но экологически и эпи­демиологически различных заболевания:

а) антропоноз — эпидемический, или вшиный, сыпной тиф;

б) зооноз — эндемический, или крысиный (блошиный), сып­ной тиф.

Считают, что вшиный сыпной тиф является результатом адаптации риккетсий крысиного сыпного тифа к организму чело­века и к новому переносчику — вшам. В последние годы к этой группе отнесено редкое заболевание, возбудитель которого R.Canada имеет свойства риккетсий группы сыпного тифа и кле­щевой пятнистой лихорадки (возбудитель выделен в Канаде от иксодовых клещей).

3. Возбудители этой группы вызывают ряд заболеваний.

Цуцугамуши, или японскую речную лихорадку, вызывает R.tsutsugamushi. Источником и переносчиком являются клещи-краснотелки (трансовариальная передача риккетсий).

Ку-лихорадка (коксиеллез) — зооноз домашних и диких жи­вотных вызывает Coxiella.

Возбудитель рода Rochalimaea в отличие от риккетсий и кок-сиел растет на искусственных питательных средах, вызывает антропонозное заболевание — волынскую траншейную лихорад­ку, или шестидневную лихорадку, переносимую вшами.

3. Источники, пути передачи и распространения риккетсиозов.

ОТВЕТ: Источник – больной человек и грызуны. Переносчик – блохи, вши, клещи. Пути инфицирования – трансмиссивный (при укусе насекомого), но возможны гемотрансфузный и трансплацентарный.

4. Патогенез риккетсиозов и особенности иммунитета.

ОТВЕТ: Входными воротами является обычно кожа в месте укуса насекомого, куда вместе с фекалиями втирается инфекционный агент, далее распространяющийся ге­матогенным путем. Патологический процесс при риккетсиозах человека обусло­влен тем, что риккетсий, за исключением коксиеллы (лихорадка Ку) размножаются главным образом в эндотелии капилляров, что приводит к развитию гранулематозного васкулита, часто со-_ провождающегося тромбозом. Последний в сочетании с вазопаралитическим действием риккетсиозного эндотоксина вызывает значительные нарушения ЦНС и расстройства кровообращения. Перенесенное заболевание оставляет после себя стойкий, хотя и не абсолютный иммунитет. Имеются указания на случаи повторного и даже троекратного заболевания сыпным ти­фом. По своему характеру приобретенный после сыпного тифа иммунитет двухпрофильный — антиинфекционный и антитокси­ческий. Антиинфекционный иммунитет начинает формировать­ся вслед за заражением и сохраняется в течение 19—25 лет.

5. Материал и методы лабораторной диагностики риккетсиозов, значение серологических методов исследования, их оценка.

ОТВЕТ: Основана на клинико-эпидемиологических данных и ла­бораторных исследованиях. Лабораторное под­тверждение диагноза играет иногда решающую роль (атипичные, стертые и другие формы бо­лезни). Оно включает способы выявления (вы­деления) возбудителя, а также обнаружение спе­цифических антител и антигенов. Обнаружение возбудителя микробиологическими методами проводится до лечения антибиотиками путем введения исследуемого материала (кровь, био­псии из высыпаний на коже и др.) чувствитель­ным к риккетсиям лабораторным животным (белые мыши, крысы, морские свинки, хомяки) или куриным эмбрионам и культурам клеток. Возможно также иммуногистологическое исследование биоптатов. Разработана также ПЦР. Однако основным методом специфи­ческой диагностики риккетсиозов является серологический: определение специфических антител в крови. С этой целью применяют РСК, РА, РИГА, РИФ, ИФА. Лабораторное подтверждение риккетсиозов воз­можно лишь на второй неделе болезни. К этому вре­мени у 20-40 % больных выявляются специфические антитела в низких титрах: в РСК — 1:10+1:40; в РИФ — 1:20*1:80; в ИФА- 1:500*1:1000. Максимальных ве­личин титры антител достигают на 15-30-е сутки (при отсутствии лечения антибиотиками). При этом обязательно должны исследоваться «парные» сыворотки, взятые в начале болезни и через 7—14 дней и позже от начала болезни.

6. Сыпной тиф. Биологические свойства возбудителя, особенности эпидемиологии, методы лабораторной диагностики, профилактики.

ОТВЕТ: имеют аэробный тип дыхания (поглощают О2 и выделяют СО2). В процессе дыхания клетки активно расщепляют глутаминовую кислоту и не расщепляют глюкозу. Источник инфекции — больной человек (антропонозное заболевание). Путь передачи - трансмиссивный. Специфический переносчик - платяная вошь. Исследуемый материал - кровь, взятая из вены больного в ранние сроки лихорадки (лучше всего сгустки крови). Методы исследования: 1) микроскопия мазков, окрашенных по Романовскому-Гимзе; 2) биопроба - внутрибрюшинное заражен исследуемым материалом морских свинок, у которых наблюдают лихорадку, геморрагический некроз различные тканей, у самцов развивается периорхит (воспаление и отек мошонки); в результате животные гибнут; для выделения риккетсий Провацека это метод мало эффективен; 3) бактериологический метод — для выделения возбудителя материал засевают на культуры клеток или в куриные эмбрионы; при малом содержании возбудителя сыпного тифа заражают платяных вшей (риккетсии активно размножаются в желудке), после кормле­ния вшей инфекцию воспроизводят нa животных (накапливаются в большом количестве в головном мозге); Любые манипуляции с возбудителем представляют большую опасность! 4) серологический метод - основной метод диагностики, т.к. выделение возбудителя затруднительно. Используются реакции Вейля-Феликса, РНГА, РСК, РИФ, РНИФ, ИФА. Антитела в нужном для определения количестве появляются к концу 1-ой не­дели заболевания. Основу лечения составляет антибиотикотерапия. Наиболее эффективными антибио­тиками являются тетрациклины, левомицетин, рифампицин. Общая профилактика - ликвидация и профилактика вшивости. Специфическая профилактика имеет вспомогательное значение и проводится по эпидемическим показаниям. Прививки показаны мед. персоналу, работающему в условиях эпидемий или в научно-исследовательских лабораториях.

7. Болезнь Брилля, дифференциальная диагностика.

ОТВЕТ: Дифференциальную диагностику проводят с эндемическим сыпным тифом, краснухой, корью, сифилисом, сепсисом, пятнистой лихорадкой скалистых гор, гриппом, брюшным тифом, паратифами А и В, геморрагической лихорадкой с почечным синдромом, менингококковой инфекцией (менингококцемией и менингококковым менингитом), лептоспирозом. Учитывая поражения сердца, обусловленные как самим рецидивом тифа, так и часто сопутствующей кардиальной патологией, необходимо дифференцировать болезнь с инфекционным эндокардитом, ревматическими пороками сердца, кардиомиопатиями.

8. Ку - лихорадка, биологические свойства возбудителя, эпидемиологические особенности, патогенез, лабораторная диагностика.

ОТВЕТ: По основным свойствам возбудитель сходен с остальными риккетсиями. Особенности возбудителя: 1) очень, мелкие кокковидные или палочковидные бактерии; образует фильтрую­щиеся формы; 2) высоко устойчивы в окружающей среде; образует споровидные формы, обеспечи­вающее устойчивость к высоким температурам и высыханию; 3) легко культивируется в переживающих тканях и желточном мешке куриного эм­бриона; 4) не имеет антигена, общего с протеем; 5) размножается в вакуолях; 6) к возбудителю чувствительны многие виды сельскохозяйственных животных. Входные ворота — дыхательный или пищеварительный тракт. Возбудитель попадает в кровь и распространяется по органам и тканям, вызывая поражение многих органов, чаще всего легких. Инкубационный период – 10 - 26 суток. На 2-3-ьи сутки начинается лихорадка, тем­пература достигает 39-40°С. Продолжительность лихорадочного периода 3 недели. Темпе­ратура снижается в течение 2-4 дней. Кожные высыпания обычно отсутствуют. Наблюда­ются головные и мышечные боли. Особенно характерны пневмонии. В легких образуются инфильтраты, сохраняющиеся и в раннем периоде реконвалесценции. Пневмония обнаружи­вается с помощью рентгенографии. Осложнения наблюдают редко, чаше при хронизации инфекции (мио-, эндо- и перикардиты). Возбудитель способен вызкывать оппортунические инфекции у лиц с иммунодефицитами. Иммунитет. После выздоровления развивается стойкая невосприимчивость к повтор­ным заражениям. Методы диагностики: 1) бактериологический метод - вначале кровью внутрибрюшинно заражают мор­ских свинок, а затем выделяют коксиел селезенки морской свинки путем культивирования на культурах клеток или в курином эмбрионе идентифицируют по морфологическим и био­логическим признакам; 2) серодиагностика - сывороточные антитела выявляют в РСК, РПГА, РА, ИФА со специфическими диагностикумами в парных сыворотках реакции положительны начиная со 2-ой недели заболевания; дифференциальный признак отрицательная реакция Вейля-Феликса; 3) кожно-аллергическай проба - внутрикожное введение 0,1 мл убитых и очищенных бактерий; положительна с 3-7-х суток, болезни.

9. Хламидии и их роль в патологии человека. Методы диагностики различных форм хламидийной инфекции. Значение для здоровья человеческой популяции

ОТВЕТ: Внутриклеточное паразитирование — объединяет хламидии с вирусами, при этом хламидии не способны синтезировать АТФ и полностью зависят от энергетических ресурсов клетки — то есть в процессе паразитирования разрушают её полностью. Наличие клеточной оболочки — объединяет хламидии с бактериями — это позволяет применять антибиотики для лечения хламидиоза. Тропизм к эпителию определённых органов (мочеполовые органы, конъюнктива). Наличие уникального жизненного цикла. Для выявления хламидий используются следующие лабораторные методики.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Иммуноферментный анализ (ИФА). Посев на хламидии (культуральный метод) с определением чувствительности к антибиотикам.ьМикроскопический анализ (общий мазок). Реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Мини-тесты, которые продаются в аптеке. Преимущества данного способа диагностики — низкая стоимость и быстрота, однако точность не превышает 20 %.

Хламидийная инфекция - высокозаразное инфекционное заболевание, передаваемое половым путем, которое ведет к развитию воспалительных изменений органов мочеполовой системы и оказывает существенное влияние на детородную функцию.

10	Основные возбудители протозоозов (классы, виды).	Кишечные протозоозы- группа паразитарных болезней, вызываемых патогенными простейшими: лямблиями, криптоспоридиями, балантидиями, амёбами, бластоцистами, циклоспорами, изоспорами паразитирующими в кишечнике
11	Особенности морфологии и структуры простейших и способы их выявления.	Простейшие – одноклеточные эукариотические организмы. Их клетки имеют ядро с ядрышком, снаружи клетка окружена мембраной (пелликулой) – аналогом цитоплазматической мембраны животной клетки. Простейшие имеют органы движения (жгутики, реснички, псевдоподии), питания (пищеварительные вакуоли), выделения (сократительные вакуоли).
12	Фазы существования простейших (вегетативная, цистная), их последовательность	В жизненном цикле проходят две стадии: вегетативную – стадию трофозоида (активную, подвижную, размножающуюся, питающуюся) и стабильную стадию – цисты.
13	Эпидемиология протозоозов (источник, пути распространения, реципиенты).	Лямблиоз и амебиаз – это антропонозные инвазии; источник заражения человек, а пути передачи- водный, контактный. Балантидиаз- зоонозная инвазия, основным источником заражения которой являются свиньи. Источник криптоспоридиоза–молодняк сельскохозяйственных животных (телята, ягнята и др.). Бластоцисты встречаются у многих животных и человека. Механизм передачи кишечных протозойных инвазий – фекально-оральный. Попадая во внешнюю среду с фекалиями, кишечные простейшие в стадии цист способны сохранять жизнеспособность в течение нескольких недель и даже месяцев. На продукты, предметы обихода возбудители попадают с грязных рук, переносятся мухами, тараканами. При удобрении почвы огородов, садов фекалиями цисты простейших загрязняют почву, овощи, ягоды, зелень. От человека к человеку лямблии могут передаваться контактным путём. В детских коллективах может иметь место контактно-бытовой путь передачи лямблиоза, а фактором передачи служат руки детей и персонала, игрушки, туалеты, дверные ручки и др. Водный путь передачи характерен для лямблиоза, криптоспоридиоза. Цисты лямблий сохраняются в воде в течение нескольких месяцев, остаются жизнеспособными при низких температурах. Таяние снега способствует загрязнению воды водоёмов в весенний период.
14	Классификация протозоозов по органотропности. Характер течения и специфическая локализация инвазионного процесса. Особенности клинических проявлений, их связь с биологией возбудителей.	Классификация протозоозов по преимущественному поражению органов и систем: - кишечные паразитируют орагын ЖКТ (кишечник) вызывая нарушения их функции. Патогенное действие: не доказано. Предположительно, она только сопутствует другим пат. процессам. Вызывают механическую блокаду, нарушается пристеночное пищеварение и процесс всасывания. Иногда заболевание протекает бессимптомно. По некоторым данным зараженность населения составляет 10-12%, а детей 50-80%. Некоторые авторы отрицают патогенное действие лямблий. - кровяные; паразитируют в плазме крови, лимфа, спинномозговая жидкость, ткани спинного и головного мозга человека и животных. Патогенное действие: мышечная слабость, истощение, депрессия, сонливость. Болезненное состояние длится 7-10 лет и при отсутствии лечения заканчивается смертью. - дерматотропные паразитируют кожные покровы. Патогенное действие: длительно незаживающие язвы на открытых частях тела, после выздоровления - обезображивающий рубец. -висцеральные; клетки печени, селезенки, костного мозга, лимф. узлов, ретикулоэндотелиальные клетки подкожной клетчатки. Патогенное действие: неправильная упорная лихорадка, увеличение печени и селезенки. Развивается истощение, анемия. Высокая смертность.
15	Особенности иммунитета при протозоозах.	Особенности обусловлены внутриклеточной локализацией возбудителей, изменчивостью их поверхностных антигенов, наличием антигенов, общих с антигенами клеток человека, иммуносупрессивными свойствами паразитов. К тому же большинство этих возбудителей имеют довольно сложный механизм жизненного цикла, что еще более затрудняет иммунную защиту. . К этому следует добавить то обстоятельство, что сами возбудители наделены иммуносупрессорным действием, а также то, что при данных патологических процессах реализуется выраженный поликлональный митогенный эффект, истощающий защитные возможности иммунной системы, не формируя резистентности. При протозойных заболеваниях могут образовываться Ig М и IgG , но специфичность их крайне низка вследствие их образования в результате поликлональной активации В-лимфоцитов и антигенной изменчивости паразитов. Выздоровление наступает при активации Т-лимфоцитов (Тс, Тh). Полноценный постинфекционный иммунитет формируется очень редко.
16	Методы диагностики.	Микроскопический метод направлен на выявление па­разитов в нативных и окрашенных препаратах. Материалом для исследования служат кровь, пунктаты грудины или лимфатических узлов, спинномозговая жидкость, соскоб с кожных элементов, фекалии, дуоденальное содержимое, отделяемое слизис­той оболочки наружных половых органов или мочеиспускательного канала. Простейшие можно обнару­жить как в мазках, так и в гистологических препаратах, изготовленных из поражен­ных тканей. Разработано значительное число методов окраски простейших, среди которых наиболее часто применяется метод Романовского-Гимза. Культуральный метод заключается в посеве исследуемого материала на среды, содержащие кровь или нативную сыворотку, яичный белок, углево­ды, аминокислоты и другие вещества (рН сред 7,0-7,6). Культивирование большинства простейших осуществляют обычно при 370С, лейшманий и трипаносомпри 20-260 С. Результаты посевов учитывают визуально и микроскопическим методом (препарат «раздавленная» капля) через 24, 48, 72, 120 часов. Дизентерийные амебы, балантидии, трихомонады, хиломастиксы проще выявить микроскопическими методами, однако при необходимости применяют культуральное исследование. Серологический метод при протозойных инфекциях имеет вспомогательное значение. Применяется РА (американский трипаносомоз), РП (американский трипаносомоз, амебиаз), РСК (американский трипаносомоз, токсоплазмоз, висцеральный лейшманиоз, амебиаз), РИФ (американский трипаносомоз, малярия, токсоплазмоз, висцеральный лейшманиоз, амебиаз), РНГА (ток­соплазмоз), ИФА (токсоплазмоз, тропическая малярия, амебиаз, кожный и висцеральный лейшманиозы, американский трипано­сомоз). Аллергический метод – кожные аллергические пробы применяются редко, обычно для под­тверждения диагноза кожного лейшманиоза (проба с лейшманином, реакция Монтенегро) и токсоплазмоза (проба с токсоплазмином). Биологический метод (биопроба) применяется для подтверждения диагноза ряда протозоо­зов, а также в научных целях. Чувствительными животными для дизентерийных амеб и балантидий являются 2-3-недельные крысята, морские свинки, котята, щен­ки, золотистые хомячки; для лямблий — мыши; для лейшманий белые мыши и хомяки; для американских трипаносом - морские свинки; для африканских трипаносом – мартышки; для токсоплазм - белые мыши. Заражение животных осуществляют па­рентерально, в слепую кишку при лапаротомии, через длинный пластмассовый зонд или путем скармливания животным исследуемого материала. В течение 30 дней после заражения микроскопическому исследованию подвергают кровь животных, мазки-отпечатки из органов или гистологические препараты из пораженных тканей.

Тестовые задания

1. Риккетсии культивируют:

а) на простых питательных средах

б) на кровяном агаре

в) ЖСА

г) в куриных эмбрионах и культуре ткани с пониженным метаболизмом+

2. Эпидемические риккетсиозы — это:

а) зоонозы

б) антропонозы+

в) сапронозы

г) антропозоонозы

3. Для специфической профилактики риккетсиозов используются:

а) бактериофаг

б) вакцина+

в) специфическая сыворотка

г) иммуноглобулины

4. Для культивирования хламидии используют:

а) среду Клауберга

б) среду Эндо

в) желточный мешок куриного эмбриона+

г) сахарный агар

5. Хламидии относятся:

а) к вирусам

б) к грамотрицательным бактериям+

в) к грамположительным бактериям

г) к простейшим

6. Преимущественный метод, использующийся при диагностике хламидиозов:

а) на выделении чистой культуры хламидий на культуре клеток Мак-Коя или

куриных эмбрионов

б) на нарастании титра антител в сыворотке с помощью РПГА и ИФА

в) в обнаружении хламидии в патологическом материале с помощью иммунофлюоресцентного метода, с использованием ДНК-гибридизации и ПЦР+

7. При каком заболевании можно поставить диагноз на основании найденных цист:

а) лямблиоз+

б) амебиаз+

в) малярия

г) трипаносомоз

8. Совокупность каких методов применяется для диагностики малярии:

а) микроскопический,

б) микроскопический, иммунологический,

в) микроскопический, иммунологический, ПЦР+

г) бактериологический, серологический

9. Какие препараты применяют для лечения протозойных инфекций:

а) ремантадин

б) цитостатики+

в) сульфаниламиды

г) адаптогены

10. Почему препарат «толстая капля» предпочтительнее «тонкого мазка» для диагностики трипаносомоза и малярии:

а) легко окрашивается

б) в «толстой капле» концентрация возбудителей выше+

в) легче приготовить препарат

Преподаватель: Коршукова О.А.