Сборник основных нормативноправовых документов по предупреждению распространения вичинфекции, реализации приоритетного национального проекта в сфере здравоохранения
 Скачать 3.08 Mb.
|
|
ИНСТРУКЦИЯ по противоэпидемическому режиму в лабораториях диагностики СПИД Москва, 1990 го И Н С Т Р У К Ц И Я по противоэпидемическому режиму лаборатории диагностики СПИД ОБЩЕЕ ПОЛОЖЕНИЕ Лаборатория по диагностике СПИД проводит серологические исследования сывороток лиц, относящихся к группам риска заражения вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), доноров, лиц, подозреваемых в клиническом проявлении СПИД, лиц, находящихся в контакте с инфицированным ВИЧ или на диспансерном наблюдении, и других групп населения, которые могут быть включены в обследование по эпидемиологическим показаниям. Работа в лабораториях диагностики СПИД осуществляется в соответствии с правилами противоэпидемического режима работы с возбудителями третьей группы патогенности. Ответственность за организацию и проведение комплекса противоэпидемических и дезинфекционных мероприятий в диагностических лабораториях возлагается на главных врачей учреждений и заведующих лабораториями.
ее профиль работы и соблюдение правил противоэпидемического режима. Помещения лаборатории могут располагаться либо в отдельном здании, либо в изолированной части здания, в составе отделов или лабораторий другого профиля. Размеры комнат диагностической лаборатории не регламентируются, но должны обеспечивать требования режима работы. В случае организации диагностической лаборатории СПИД в отдельном здании (или отсеке) необходимо предусмотреть:
1.2. Размещение лабораторных комнат должно быть организовано так, чтобы максимально обеспечивать поточность поступающего на исследование материала с последующей его инактивацией. Помещение, в котором происходит прием и регистрация поступающего на анализ материала, целесообразно разместить при входе в лабораторию смежно с помещениями, в которых производится разборка и подготовка сывороток к постановке серологических реакций с учетом соблюдения поточности работы с исследуемым материалом. Автоклавную, моечную, препараторскую комнаты целесообразно сгруппировать в одном узле (месте). 1.3. Лаборатория должна быть обеспечена водопроводом, канализацией, электричеством, центральным отоплением. 1.4. В случае отсутствия в населенном пункте водопровода и канализации работа возможна только при условии постоянного снабжения водой и своевременного обеззараживания инфицированного материала. В лаборатории должны быть оборудованы раковины для мытья рук и раковины, предназначенные для мытья посуды из легко моющихся и не портящихся от дезинфектантов материалов. 1.5. Все помещения лаборатории должны иметь естественное и искусственное освещение, отвечающее требованиям, предусмотренным строительными нормами и правилами. 1.6. Для соблюдения требуемых условий постановки серологических реакций и получения адекватных результатов температура воздуха в лабораторных помещениях не должна превышать 25о С. Для районов с жарким климатом в летний период устанавливают кондиционеры с охлаждением. Желательно в лабораторных комнатах иметь приточно-вытяжную вентиляцию. 1.7. Полы в лабораторных помещениях должны быть покрыты линолеумом либо керамической плиткой. 1.8. Рабочие поверхности столов, на которых проводится прием, разборка сывороток, постановка серологических реакций, следует покрывать водонепроницаемым, несгораемым и не портящимся при дезинфекции материалом. 1.9. Лабораторная мебель должна быть легко моющейся. 1.10. В случае формирования лаборатории диагностики СПИД в составе других лабораторий (отделов) не допускается пользование общей термальной комнатой (термостатами) и общими холодильниками. Лаборатория СПИД должна пользоваться только своими термостатами и холодильниками, установленными в разборочной и серологической комнатах. 2. Правила и противоэпидемический режим при проведении серологической диагностики СПИД 2.1. Работа в диагностических лабораториях проводится с соблюдением мер индивидуальной защиты: в сменном боксовом халате, шапочке, сменной обуви и обязательно в резиновых перчатках. 2.2. Доставка образцов крови (сывороток) в лабораторию осуществляется в емкостях (контейнеры, стерилизационные коробки и др.) с закрывающимися крышками, из материала, который не портится при дезинфекции. Не допускается перевозка материала в сумках, портфелях и других предметах личного пользования. Оптимальной считается доставка контейнеров с исследуемым материалом в сумках-холодильниках. Образцы крови (сыворотки) должны доставляться в пробирках или флаконах, герметично закрытых резиновыми или ватно-марлевыми, обернутыми полиэтиленовой пленкой, пробками. Взятая для исследования цельная кровь должна быть доставлена в диагностическую лабораторию в течение 24 часов с момента взятия крови. В случае невозможности доставки образцов крови в установленное время материал пересылается только в виде сыворотки (без сгустков) в течение 7 дней от дня взятия крови при условии ее хранения до отправки в диагностическую лабораторию СПИД при температуре +4 -80 С. Поступающий в лабораторию материал должен сопровождаться направлением (приложение 1). 2.3. Перед работой все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем или напальчниками. Распаковка материала, присланного в лабораторию для исследования, проводится с соблюдением мер предосторожности, в резиновых перчатках. Присланные образцы крови (сыворотки) в пробирках флаконах перекладывают в штативы или другие емкости диагностической лаборатории, помещенные на эмалированные или металлические подносы, и переносят в комнату разборки и подготовки материала для серологических исследований. Контейнеры, в которых доставлен исследуемый материал, после разгрузки обрабатывают дезраствором. 2.4. Поступившие образцы крови (сыворотки) регистрируют в отдельном журнале регистрации поступающего на исследование материала (приложение 2). 2.5. Сыворотку отсасывают со сгустков крови в день поступления или не позднее 24-х часов после поступления в лабораторию. 2.6. До проведения исследования сыворотки хранят при tо : +4 -8о С и могут быть использованы для серологических исследований в течение 10 дней от дня взятия крови. 2.7. Комнаты, предназначенные для разборки и подготовки материала к серологическим исследованиям должны иметь:
В помещениях, предназначенных для приема, разборки материала и постановки серологических реакций запрещается проводить другие виды работ. 2.8. Для обеззараживания перчаток, инфицированной посуды необходимо предусмотреть эксикаторы или другие емкости с закрывающимися крышками с соответствующими дезинфицирующими растворами, баки для сбрасывания посуды и др. инфицированного материала, предназначенного для автоклавирования. Все емкости с дезрастворами должны быть промаркированы: название дезраствора, его концентрация, назначение и дата приготовления. 2.9 После регистрации и разборки сывороток их переносят в комнату для серологических исследований. Комнаты, предназначенные для серологических исследований должны иметь: - лабораторный стол для размещения посуды, необходимой в работе (мерные цилиндры, колбы, бутыль с дистиллированной водой и т. д.); - лабораторный стол для размещения аппаратуры (спектрофотометр, промыватель и т. д.); - стол для серологической работы; - холодильник на 4о С;
Плашку с диагностикумом помещают на эмалированный или металлический поднос (лоток) и проводят всю работу во втором (боксовом) халате, в резиновых перчатках. 2.10. Для защиты от возможного попадания вирусосодержащего материала во время работы рекомендуется использовать защитные очки, экраны (настольный экран типа 2-ЭН и 2-ЭН с кюветом) или другие защитные средства, подвергающиеся дезинфекции. В боксе, где проводятся серологические исследования, не рекомендуется в качестве дезинфицирующих средств использовать хлорсодержащие препараты и аммиак в открытых емкостях. 2.11. После окончания работы исследуемый материал (пробирки с сывороткой) переносят в холодильник, а использованную инфицированную посуду помещают в бак для грязной посуды. Туда же кладут для контроля режима работы парового стерилизатора стеклянные герметично запаянные трубки (ампулы) с никотинамидом или Д(+)-маннозой и 0,1% фуксина основного или фуксина кислого, генцианвиолета, фенолового красного (температура плавления 1320 С). Баки плотно закрывают крышкой, завязывают шпагатом, пломбируют и сдают в автоклавную под расписку автоклаверу (приложение 3). 2.12. Хранение бака для автоклавирования не допускается более рабочей смены. Обеззараживание в паровом стерилизаторе (автоклаве) проводится при температуре 1320 +20 под избыточным давлением 2,0 кгс/см2 (0,20 МПа) в течение 60 мин. После обеззараживания лаборант проверяет ампулу с химическим контролем. Расплавление химического теста и его окрашивание красителем свидетельствует о достижении необходимой температуры. Только после этого бак с посудой передается в моечную 2.13. Пробирки с кровью помещают в специальную маркированную емкость (кастрюля, ведро, бак), закрывающуюся крышкой, с дезинфицирующим раствором (3% раствор хлорамина, осветленный раствор хлорной извести, 0,6% осветленные растворы нейтрального гипохлорита кальция (НГК), гипохлорита кальция технического (ГКТ); 0,5% растворы ДП-2, сульфохлорантина на менее чем на 2 часа. Приготовление растворов осуществляется в соответствии с приложениями 8, 9). Другой способ обеззараживания – в паровом стерилизаторе при режиме – 2,0 кгс/см2 (0,2 МПа) при температуре 132 ±20 С в течение 60 мин. Кипячение является наиболее простым и доступным методом дезинфекции. Дезинфицирующий эффект достигается после кипячения в течение 30 минут (с момента закипания). 2.14. Поверхность рабочих столов и все предметы, соприкасавшиеся с исследуемым материалом (пипетки, пробирки, ампулы), должны быть обеззаражены. С этой целью можно использовать следующие дезинфицирующие средства: 6% раствор перекиси водорода без моющего или с моющим средством, 4% раствор формальдегида, 0,6% раствор НГК, 0,4% раствор ГКТ, 0,5% раствор ДП-2, сульфохлорантина в течение 60 мин. методом погружения или двухкратного протирания (для поверхностей). При наличии видимых пятен крови их следует сначала залить дезинфицирующим раствором на рекомендуемое время обеззараживания, затем удалить смесь крови и дезинфицирующего средства, сбросить тампон или салфетку в дезинфицирующий раствор. После этого поверхность следует протереть дезинфицирующим раствором. Если применяется 70% этиловый спирт (при отсутствии других средств), поверхность следует протереть несколько (3-5) раз, поскольку спирт быстро испаряется. 2.15. Растворы перекиси водорода готовят ежедневно. Растворы хлорамина можно готовить 1 раз в две недели, хлорной извести, ГКТ, НГК – на 6 дней, однако готовые растворы используют в течение рабочего дня. 2.16. Насасывание сывороток и другого исследуемого материала производят только с помощью груши или автоматической пипетки с последующим обеззараживанием наконечников в емкости (эксикатор и др.) с дезинфицирующим раствором. Дезинфекцию наконечников к автоматическим пипеткам можно проводить 700 спиртом или 6% раствором перекиси водорода в течение 60 мин., или автоклавированием при 1,1 кгс/см2 (0,2 МПа) при температуре 1200С ± 2 в течение 45 мин. Одноразовый инструментарий (пластины, наконечники к автоматическим пипеткам и др.) обеззараживаются в паровом стерилизаторе при 2,0 кгс/см2 (0,2 МПа), температуре 1320С ± 2 в течение 60 минут и выбрасывают в специально отведенные места. 2.17. После дезинфекции и влажной уборки помещения проводят обеззараживание воздуха с помощью бактерицидных ламп типа ДБ-30 в течение 60 мин. При определении количества ламп исходят из расчета: 2,5 Вт на 1 м3 для неэкранированных ламп и 1 Вт на 1 м3 – для экранированных. Неэкранированные лампы включают только в отсутствие людей. При выходе из рабочей комнаты сотрудник лаборатории обязан убрать исследуемый материал со стола, обработать стол дезинфицирующим раствором, а руки после обеззараживания тщательно вымыть с мылом. Перчатки обеззараживают в 6% растворе перекиси водорода или 700 спирте. 2.18. Стирка халатов и др. спец. одежды на дому категорически запрещается. Смена спец. одежды должна осуществляться 1 раз в неделю. Перед стиркой спец. одежду замачивают на 3 часа в 1% растворе хлорамина или 3% растворе перекиси водорода с 0,5% моющего вещества (температура раствора 500С) или автоклавируют при 1,1 кгс/см2 (0,1 МПа) при температуре 1200С ± 2 в течение 45 мин. Пятна крови предварительно смачивают растворами более высокой концентрации (как для поверхностей). 2.19. Для обеззараживания поверхности пола (текущая дезинфекция) в конце рабочего дня используют 1% раствор хлорамина, 1% осветленный раствор хлорной извести с последующим проветриванием помещения. Пролитая на пол кровь, сыворотка и др. заливаются раствором одного из дезинфицирующих средств, указанных для обеззараживания поверхности рабочего стола. 2.20. При работе с дезинфицирующими средствами необходимо соблюдать меры предосторожности, изложенные в "Правилах по охране труда работников дезинфекционного дела и по содержанию дезинфекционных станций, дезинфекционных отделов, отделений профилактической дезинфекции санитарно-эпидемиологических станций, отдельных дезинфекционных установок", утв. Минздравом СССР 09.02.79 г. № 1963-79. 2.21. Приготовление растворов дезинфицирующих средств проводят в хорошо проветриваемых помещениях с использованием мер индивидуальной защиты – резиновых перчаток, герметичных очков (тип ПО-2, ПО-3 или моноблок), респираторов с противогазовым патроном марки А или В (тип РУ-60М, РПГ-67 и др.), халата, шапочки, резинового фартука. Запасы препаратов хранят в защищенном от попадания прямых солнечных лучей месте. Центрифугирование исследуемого материала Центрифугирование исследуемого материала (при освобождении сывороток от сгустков крови и элементов) проводят в комнатах, предназначенных для подготовки сывороток к серологическим реакциям. Исследуемый материал помещают в центрифужные стаканы или во флаконы с крышкой. Центрифугу обязательно закрывают крышкой. После окончания центрифугирования (после полной остановки ротора) сотрудник открывает крышку центрифуги, вынимает пробирки и убеждается в их целостности. В случае подозрения на разрыв сосуда (пробирки) с исследуемым материалом крышку снимают не ранее, чем через 40 мин. после остановки ротора. Гнездо с разбитым сосудом (пробиркой) заливают раствором одного из дезинфицирующих средств на 60 мин. Затем удаляют содержимое гнезда, сбрасывают в дезинфицирующий раствор, протирают марлевой салфеткой, смоченной в дезрастворе. После окончания центрифугирования во всех случаях ротор, стенки центрифуги, крышку протирают одним из дезинфицирующих растворов. 4. Передача информации при выявлении сывороток с антителами к ВИЧ 4.1. При выявлении образцов крови, содержащих антитела к ВИЧ (не менее двух положительных результатов при 2-х и 3-х кратной перестановке; по-возможности, вторую и третью перестановки реакции производить с диагностикумом другой серии или другого принципа действия) все результаты с протокольными показателями заносятся в журнал повторных исследований (приложение 4). После получения положительного результата производится повторное взятие крови и ее исследование в ИФА. При положительном результате обе сыворотки (от первого и повторного взятия) направляются в кратчайшие сроки для потверждения в референс-лабораторию. 4.2. Направляемые на исследование образцы крови или сывороток должны быть с сопроводительным документом, составленным по форме в соответствии с приложением 5 приказа №690 от 05.09.88 г. Минздрава СССР. 4.3. О положительных результатах зав. диагностической лабораторией сообщает руководителю учреждения (отделения) – отправителю сыворотки, заполнив соответствующую форму (приложение 6). На основании этого извещения зав. учреждением (отделением), в котором находится обследуемое лицо, высылает экстренное извещение (Минздрав СССР № 58-у) в соответствующую СЭС (районную, областную, городскую и т. д.). 4.4. Выявленные инфицированные ВИЧ лица, кроме иностранных граждан, берутся на диспансерный учет в кабинетах инфекционных заболеваний районных поликлиник. Сыворотки этих лиц при повторных диспансерных обследованиях направляют в лабораторию диагностики СПИД с соответствующим направлением. 4.5. Если лаборатория имеет разрешение Режимной комиссии на хранение образцов сывороток с антителами к ВИЧ, на них заводится документация согласно "Положения о порядке учета, хранения, обращения, отпуска культур" и т. д. (1980, Минздрав СССР, форма №№1 и 3). 5. Меры в случае аварии 5.1. Все рабочие места должны быть обеспечены дезинфицирующим раствором и аптечкой, в которую входят 700 спирт, йод, перевязочный материал, навеска марганцевокислого калия и соответствующее количество дистиллированной воды для его разведения 1 : 10 000. Необходимо предусмотреть неприкосновенный запас дезинфицирующих средств. О каждом аварийном случае немедленно сообщить руководителю лаборатории или его заместителю. При попадании заразного (или подозрительного на инфицирование ВИЧ) материала на халат, одежду это место немедленно обработать одним из растворов дезинфицирующих средств, затем обеззаразить перчатки, снять халат и замочить в одном из растворов (кроме 6% перекиси водорода, нейтрального гипохлорита кальция, которые разрушают ткани) или сложить в стерилизационные коробки для автоклавирования. Обувь обрабатывают двухкратным протиранием ветошью, смоченной в растворе одного из дезинфицирующих средств. Кожу рук и других участков тела под загрязненной одеждой протирают 70% спиртом. При попадании заразного материала на лицо его тщательно моют с мылом. Глаза промывают водой или раствором марганцевокислого калия в разведении 1 : 10 000. При попадании заразного материала в рот ротовую полость прополаскивают 700 спиртом. При повреждении кожи (порез, укол) из поврежденной поверхности выдавить кровь, кожу обработать 700 спиртом, затем – йодом. При попадании инфицированного материала на пол, стены, мебель, оборудование загрязненное место заливают дезинфицирующим раствором (см. п. 2.14.), затем протирают ветошью, смоченной в дезинфицирующем растворе. Используемую ветошь сбрасывают в емкость с дезинфицирующим раствором или в бак для последующего автоклавирования. Сразу после ликвидации аварии зав. лабораторией докладывает администрации учреждения о случившемся (и председателю режимной комиссии, если таковая имеется). 5.2. За пострадавшими устанавливают наблюдение в течение 12 месяцев после несчастного случая. В течение всего периода наблюдения пострадавший должен быть предупрежден, что он может послужить источником инфекции. В случае отрицательных анализов на СПИД через 6 недель, 12 недель, 6 месяцев и год после несчастного случая наблюдение прекращают (по рекомендации ВОЗ 10.06.89 г.). 6. Специалисты, работающие в лабораториях диагностики СПИД и с вирусом иммунодефицита, должны обследоваться 2 раза в год на содержание антител к ВИЧ с последующим депонированием образцов сывороток в НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи АМН СССР. Диспансерное наблюдение предполагает длительное слежение за показателями гуморального иммунитета к ВИЧ с целью раннего выявления возможного инфицирования. При отправке образца сыворотки необходимо сообщать следующие данные:
Полученные образцы сывороток исследуются в НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи АМН СССР в реакциях ИФА и иммуноблота на анти-ВИЧ. Ответственность за своевременное обследование сотрудников, находящихся под риском заражения ВИЧ, возлагается на руководителей учреждений. С выходом настоящей инструкции отменяется: "Временная инструкция о противоэпидемическом режиме работы с материалом, зараженным вирусом СПИД или подозрительным на его содержание", утвержденная Минздравом СССР 12.11.85 г. № 28-6/24, и раздел III "Временной инструкции о противоэпидемическом режиме работы с материалом, зараженным вирусом СПИД, больными СПИД и при обследовании населения и доноров, утвержденная Минздравом СССР 12.03.86 г. № 28-6/7. Начальник Главного эпидемиологического управления Минздрава СССР М. И. Наркевич Приложение 1-а НАПРАВЛЕНИЕ на исследование крови на наличие антител к ВИЧ (в случае отправления материала – первичного или повторного - от одного обследуемого)
Приложение 1 НАПРАВЛЕНИЕ на исследование крови на наличие антител к ВИЧ
Должность, фамилия, подпись лица, направившего материал Дата х/ Для иностранных граждан ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Приложение 2 ЖУРНАЛ регистрации материала, поступающего на выявление антител к ВИЧ-1
Приложение 3 ЖУРНАЛ "Обеззараживание инфицированных материалов"
Приложение 4 ЖУРНАЛ повторных исследований на выявление антител к ВИЧ
Приложение 5 ЖУРНАЛ регистрации и исследования сывороток, присланных на потверждение в реакции иммуноблота
Приложение 6 СПИСОК лиц, содержащих антитела к ВИЧ, выделенные только в ИФА_____________________
Подпись заведующего лабораторией диагностики СПИД Приложение 7 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ сывороток крови на выявление антител к вирусу СПИД
Подпись заведующего лабораторией диагностики СПИД Приложение 8 Приготовление растворов дезинфицирующих средств
Приложение 9 Таблица Приготовление осветленных растворов хлорной извести, НГК, ГКТ
Примечание: для приготовления 10 л рабочего раствора расчетное количество препарата необходимо увеличить в 10 раз. Для приготовления осветленных растворов хлорной извести, ГКТ, НГК тщательно размешивают расчетное количество препарата (порошок) и отстаивают в закрытой емкости в защищенном от прямого попадания солнечных лучей месте (в течение суток для хлорной извести, НГК или одного часа для ГКТ). После этого надосадочную жидкость сливают в отдельную емкость и используют в качестве осветленных рабочих растворов. Эти растворы сохраняют стабильность и могут быть приготовлены на 6 дней, однако используются только в течение рабочего дня. В связи с тем, что исходный продукт (сухая хлорная известь, НГК, ГКТ) может содержать разное количество активного хлора в результате хранения, марки препарата, для приготовления раствора необходимой концентрации делают соответствующий перерасчет по следующей формуле: А 1000 Х = ---------- г, где В Х – количество исходного препарата (г) на 1 л рабочего раствора; А – концентрация активного хлора в рабочем растворе, %; В - концентрация активного хлора в исходном препарате, %. Приложение 10 Нормы расхода дезинфицирующих средств При определении потребности в дезинфицирующих средствах следует исходить из следующих норм расхода на исследование одной сыворотки: 3 мл 30% пергидроля; 2,0 г хлорамина или хлорной извести; 1,0 г ГКТ; 0,6 г НГК; 0,4 г ДП-2 или сульфохлорантина; 4,5 г формальдегида (+ 10 г 960 спирта). При отсутствии автоклава расход хлорсодержащих средств может быть увеличен в 2 раза для лабораторий с объемом работ до 900 исследований в день, и в 1,5 раза – свыше 900 исследований. При отсутствии достаточного набора помещений в лаборатории, ручной обработке пластин для реакций, количестве исследований до 400 сывороток в день, норма расхода пергидроли может быть увеличена до 6 мл на одно исследование. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||