ставропольский государственный аграрный университет

Название	ставропольский государственный аграрный университет
Дата	26.04.2022
Размер	3.84 Mb.
Формат файла
Имя файла	01.docx
Тип	Диссертация #498262
страница	12 из 27

1 ... 8 9 10 11 12 13 14 15 ... 27

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы исследований

Работа выполнялась с 2017 по 2020 г. в сельскохозяйственном производственном кооперативе (колхоз) им. Апанасенко, ООО «Хлебороб», на кафедрах терапии и фармакологии, эпизоотологии и микробиологии, паразитологии и ветсанэкспертизы, анатомии и патанатомии им. профессора С.Н. Никольского ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет».

В процессе выполнения диссертационного исследования, нами было разработано и запатентовано переносное автономное устройство генерации озона (Пат. № 2699265). Сконструированное устройство позволяет повышать концентрацию синтезируемого из атмосферного воздуха озона на выходе за счет включения в технологическую схему прибора камеры предварительной подготовки (очищения, осушения) поступающего воздуха. Переносное автономное устройство генерации озона способно эффективно и безопасно работать в условиях повышенной влажности (до 95%), а также высокой степени запыленности (до 1000 мг/м³) и в широком температурном диапазоне (от 0 до 40 °С), сохраняя при этом показатели производительности.

Определение концентрации озона в озоно-воздушной смеси, вырабатываемой в камере переносного автономного устройства генерации озона, выполняли с помощью автоматического газоанализатора с принудительным отбором проб воздуха «Бинар-1П» (ООО «АналитТеплоКонтроль», Россия). Концентрацию озона определяли в режиме «среднего измерения» – вывод на дисплей газоанализатора среднего значения концентраций за 20 мин.

Для приготовления озонированного физиологического раствора (ОФР) проводили барботирование физиологического раствора полученной озоно- воздушной смесью в течение 15 минут. Определение концентрации озона в озонированном физиологическом растворе выполняли с помощью

Амперометрического анализатора растворенного озона в воде «OzW1» (ООО «АналитТеплоКонтроль», Россия).

При проведении лабораторных исследований в качестве опытной модели использовали 192 нелинейных белых крыс.

Содержание и уход за лабораторными животными выполняли согласно требований ГОСТ 33215–2014. Крыс содержали в поликарбонатных клетках, покрытых стальными решетчатыми крышками с кормовым углублением. Подстилкой служили древесные опилки.

Кормление лабораторных животных осуществляли в соответствии с ГОСТ Р 50258-92. Животных кормили сухим полнорационным гранулированным экструдированным комбикормом рецепт ПК-120 для лабораторных животных (мышей, крыс, хомяков). Температуру и влажность в экспериментальной и карантинной секциях вивария, контролировали ежедневно с помощью гигрометров психрометрических ВИТ-2 (АО

«Стеклоприбор», Украина). Температурно-влажностный режим находился в пределах нормы: температура воздуха 20-22°С; относительная влажность 65- 70%.

В качестве критерия при распределении крыс по группам принималась масса тела, измерявшаяся лабораторными весами «M-ER 122ACF-150005 LCD» (Mertech, Южная Корея), таким образом, чтобы индивидуальное значение веса не отклонялось от среднего показателя более чем на 10 %. Каждому животному был присвоен индивидуальный номер. Клетки снабжались этикетками с указанием шифра исследования, вида, пола и группы животных.

В экспериментальной части работы был проведен ряд токсикологических исследований.

Схема проведения опыта исследования острой ингаляционной токсичности озоно-воздушной смеси была составлена в соответствии с ГОСТ 32646-2014. Острую ингаляционную токсичность определяли на половозрелых нелинейных белых крысах обоих полов (массой самок 130-150

г, самцов 140-160 г) в условиях ингаляционной камеры, в которую помещали клетки с подопытными крысами. Всего в исследовании было сформировано 3 группы (по группе на каждую испытуемую концентрацию: 100 ppm, 500 ppm, 2500 ppm), включающие в себя по 6 особей в каждой (3 самца и 3 самки).

Исследование острой ингаляционной токсичности аэрозоля озонированного физиологического раствора проводили в соответствии с ГОСТ 32646-2014 на нелинейных белых половозрелых крысах обоих полов (массой самок 150–160 г, самцов 170–180 г) в условиях ингаляционной камеры, в которую помещали клетки с подопытными крысами. Всего в исследовании было сформировано 4 группы (по группе на каждую испытуемую концентрацию: 0,05 мг/л, 0,5 мг/л, 1 мг/л, 5 мг/л), включающие в

себя по 6 особей (3 самки и 3 самца).

Моделирование бронхопневмонии проводили на лабораторных крысах по методике А.С. Худотеплого, Т.Б. Рахманова и В.В. Солдатова.

Научно-производственные опыты по определению терапевтического действия озонированного физиологического раствора (ОФР) проводились на 70 головах телят Ярославской породы 1-1,5 месячного возраста в хозяйствах Апанасенковского и Петровского районов Ставропольского края.

В (СПК) им. Апанасенко Апанасенковского района Ставропольского края осуществляется выращивание телят на подсосе, но раздельно от коров- кормилиц в групповых загонах. При таком выращивании молодняка как в ООО «Хлебороб» Петровского района Ставропольского края, теленок находится в индивидуальном белом боксе, и во время кормления вынужден выходить на выгульную минимизированную площадку. В изучаемых двух хозяйствах с 4-й недели кормления, постепенно добавляли минеральную подкормку; сухой корм; концентрированный корм в соответствии ГОСТ 9268- 2015 «Комбикорма-концентраты для крупного рогатого скота. Технические условия»; витамины. В хозяйствах до 2-х месячного возраста за телятами осуществляли ежедневный осмотр их внешнего состояния.

С целью изучения распространенности заболеваний респираторных органов сельскохозяйственных животных и, в частности, бронхопневмонии среди 1-1,5 месячных телят, нами были использованы отчетные материалы управления ветеринарии Ставропольского края «Сведения о незаразных болезнях животных в Ставропольском крае».

Формирование групп больных животных в хозяйствах СПК им. Апанасенко и ООО «Хлебороб» проводилось на протяжении периода с октября по декабрь 2019 года. Поголовье исследуемых больных бронхопневмонией телят в СПК им. Апанасенко было разделено на 3 группы: 1 (контрольная группа) – 10 голов, 2 (опытная группа) – 11 голов, 3 (опытная группа) – 11 голов. В ООО «Хлебороб» также были сформированы 3 группы телят, больных бронхопневмонией: 1 (контрольная группа) – 12 голов, 2 (опытная группа) – 13 голов, 3 (опытная группа) – 13 голов.

Для оценки физиологического состояния животных проводили осмотр животного, термометрию, перкуссию грудной клетки, аускультацию легких.

Дифференцированный диагноз ставили с использованием инструментальных методов диагностики, с последующим занесением результатов в соответствующие истории болезни.

Гематологические исследования проводили на гематологическом анализаторе Automated Veterinary Hematology Analyzer PCE – 90 VET (HTI, США).

Биохимические исследования крови проводили на автоматическом биохимическом и иммуноферментном анализаторе Chemwell Combi V 1. 03 (Awareness Technology, США) с использованием тест – наборов фирмы Cormay (Польша). Нормы показателей крови животных использовали по Воронину Е.С. (2006).

Бактериологические исследования проводили согласно стандартной методике «Основные методы лабораторных исследований в клинической бактериологии» (1994). Идентификацию и определение патогенности выделенных культур бактерий осуществляли по определителю бактерий

Берджи (1997). Культивирование посевов проб осуществляли на специальных дифференциально-диагностических средах: Эндо, ГРМ №10, кровяном агаре, МПА, агар Сабуро. Инкубирование микроорганизмов осуществляли в термостате (REDLINE BINDER, Германия) при температуре 37^оС в течении 24-48 часов, а плесени при температуре 27^оС в течение 2-5 суток.

Для лечения больных бронхопневмонией телят в (СПК) (колхоз) им. Апанасенко Апанасенковского района Ставропольского края использовали препарат «Амоксициллин 150», (ООО «Нита-Фарм, Россия) – полусинтетический антибиотик пенициллинового ряда) согласно инструкции по применению препарата; «Нитокс Форте», (ООО «Нита-Фарм, Россия) – согласно инструкции по применению препарата.

Для лечения больных бронхопневмонией телят в ООО «Хлебороб» ветеринарные специалисты использовали препараты «Азитронит» (ООО

«Нита-Фарм, Россия) – антибиотик группы макролидов, согласно инструкции по применению препарата; «Тетрогидровит» (ООО «Нита-Фарм, Россия) – из фармакотерапевтической группы: витамины и витаминоподобные средства, согласно инструкции по применению препарата; «Бутофан» (ООО «Нита- Фарм, Россия) – из лекарственных препаратов, регулирующих метаболические процессы в организме, согласно инструкции по применению препарата.

Статистические методы исследования. Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета статистических программ Statistica 6.0. Для оценки достоверности изменений между группами использовали парный t критерий Стьюдента. Статистически значимыми считали различия при значении р<0,05.

Расчёт экономической эффективности лечебно-профилактических мероприятий проводился согласно методическим рекомендациям по определению экономической эффективности ветеринарных мероприятий утверждённым ГУВ МСХиП РФ 21.02.1997 г.

Согласно задачам работы, исследования проводились по представленной схеме (Рис. 5).