|
|
микра. СРС 1-7 тема. Тема 1 Псевдомонады. Протей. Клебсиеллы. Морфология, культивирование, вирулентность, эпидемиология, патогенез, лабораторная диагностика и профилактика. Лабораторная диагностика сапа и мелиоидоза.
Тема 1
«Псевдомонады. Протей. Клебсиеллы. Морфология, культивирование, вирулентность, эпидемиология, патогенез, лабораторная диагностика и профилактика. Лабораторная диагностика сапа и мелиоидоза.»
Псевдомонады
Псевдомонады (лат. Pseudomonas) — род грамотрицательных аэробных неспорообразующих бактерий. Псевдомонады подвижны и имеют форму прямых или изогнутых палочек и два полярно расположенные жгутика.
Морфология. Средние размеры - 1-30, 5-1 мкм; в нативных препаратах подвижны (имеют один или два полярных жгутика). В мазках чистых культур расположены одиночно, парно, либо в виде коротких цепочек; в мазках из патологического материала их чаще можно обнаружить в цитоплазме фагоцитов, при этом палочки могут быть деформированы; в клиническом материале полиморфизм отсутствует, а каких-либо включений не наблюдают. Синтезирует крахмалоподобное вещество, покрывающее тонким слоем микробную клетку, но не формирующее морфологически очерченного слоя. Более вирулентные штаммы синтезируют повышенное его количество (мукоидные штаммы), что дает основание рассматривать слизь как фактор патогенности. Наиболее часто мукоидные штаммы выделяют из мокроты больных при заболеваниях легких (например, при бронхоэктатической болезни). Формируя капсульное вещество в пораженном организме, клинические изоляты могут легко терять это свойство в первых лабораторных генерациях. Обычно фиксированные препараты окрашиваются по Граму отрицательно.
Культивирование. Строгие аэробы. Хорошо растут на простых питательных средах. Оптимальная температура роста 37° С, но могут расти и при 5-42° С. На МПА образуют колонии размером 2-5 мм, круглые, полупрозрачные, голубовато-серые с перламутровым оттенком; на МПБ дают помутнение и образуют пленку.
Псевдомонады не прихотливы и отлично растут на многих питательных средах, особенно на таких богатых питательными веществами, как кровяной агар. Поскольку в патологическом материале синегнойная палочка часто находится в ассоциации с другими микроорганизмами, для ее изоляции целесообразно пользоваться селективными средами с иргазаном или цетримидом (цетилтриметиламмонием бромидом).
Вирулентность. Синегнойной палочки обеспечивается гликопротеидной капсулоподобной оболочкой, пилями, белками наружной мембраны клеточной стенки, участвующими в адгезии. P.aeruginosa продуцирует ряд токсинов и ферментов. Гликопротеид капсулоподобной оболочки легко отделяется от бактериальной клетки. Он обеспечивает защиту от фагоцитоза, а также является токсичным для клеток хозяина. Экзотоксин А - термолабильный белок, ответственный за инва-зивные свойства и угнетающий иммуногенез. Механизм действия заключается в блокировании синтеза белка.
Эпидемиология. Синегнойной палочки обеспечивается гликопротеидной капсулоподобной оболочкой, пилями, белками наружной мембраны клеточной стенки, участвующими в адгезии. P.aeruginosa продуцирует ряд токсинов и ферментов. Гликопротеид капсулоподобной оболочки легко отделяется от бактериальной клетки. Он обеспечивает защиту от фагоцитоза, а также является токсичным для клеток хозяина. Экзотоксин А - термолабильный белок, ответственный за инва-зивные свойства и угнетающий иммуногенез. Механизм действия заключается в блокировании синтеза белка.
Патогенез. Мембранотоксины, обладающие гемолитическими свойствами, можно подразделить на два типа. К гемолизину 1 типа относят термолабильный белок с лецитиназной активностью, способствующей возникновению очагов некроза. Гемолизин II типа - термостабильный белок, усиливающий действие гемолизина I типа. Способен растворять липиды мембран, что в случае эритроцитов приводит к гемолизу.
Лейкоцидин лизирует лейкоциты. Он представляет собой белок, тесно связанный с цитоплазматической мембраной. Выделяется только при аутолизе бактериальных клеток. Некоторые штаммы P.aeruginosa продуцируют энтеротоксин.
Синегнойная палочка продуцирует нейраминидазу и ряд протеолитических ферментов. Некоторые протеазы расщепляют эластин, казеин, фибрин. Протеазы продуцируются в виде неактивных проферментов, которые активируются особой протеазой. Все протеазы ингибируют активность белков иммунной системы.
Наряду с перечисленными токсинами и ферментами системное действие на организм хозяина оказывает Л ПС. Заболевания, вызванные синегнойной палочкой, прежде всего связаны с гнойно-воспалительными процессами, возникающими в ассоциациях со стафилококками, протеем, эшерихиями. Они наблюдаются при инфицировании операционных ран, особенно ожогов. P.aeruginosa - один из главных возбудителей госпитальной инфекции.
Лабораторная диагностика. На наличие синегнойной инфекции может указать голубовато-зеленое окрашивание краев и отделяемого ран, перевязочного материала (особенно после обработки Н2О2), развитие синдрома ectyma gangrenosa (патогномоничного для синегнойных септицемий) при ожогах, поражениях мочеполовой системы. Однако следует учитывать, что диагностируют то или иное поражение только выделением возбудителя. Существует несколько схем выделения и идентификации Pseudomonas aeruginosa. В любом случае для успешного проведения анализа важное значение имеет способ взятия исследуемого материала. Техника взятия и первичного посева клинического материала аналогична таковой при лабораторной диагностике возбудителей других бактериальных кишечных и гнойно-воспалительных инфекций. Однако при взятии материала для исследования следует соблюдать и учитывать следующие важные моменты.
Исследуемый материал желательно забирать до начала терапии антибактериальными препаратами или (если она начата) только после выведения препарата из организма.
Особые трудности представляет профилактика синегнойной инфекции, т. к. возбудитель также устойчив к действию антисептиков и дезинфектантов. Более того, доказана возможность длительного сохранения возбудителя в растворах фурацилина, предназначенного для хранения катетеров и хирургического инструмента, а также для промывания ран. Pseudomonas aeruginosa способна вырабатывать факторы, нейтрализующие некоторые дезинфектанты, а в средах с достаточным содержанием питательных веществ, будучи аэробом, она может до 2 недель оставаться жизнеспособной в условиях анаэробиоза. В то же время она чувствительна к высушиванию, действию хлорсодержащих дезинфицирующих препаратов, легко инактивируется действием высокой температуры и давления (при кипячении, автоклавировании).
Лечение. Применяют гентамицин, тоброминцин и другие антибиотики последних поколений.
Профилактика. Специфическая профилактика (поливалентная вакцина) показана медицинским работникам, ожоговым больным, пациентам с открытыми переломами и глубокими ранами, лицам с иммунным дефицитом, людям старческого возраста.
Протей.
Протей - род Proteus включены три вида, из которых в патологии человека как возбудители пищевых токсикоинфекций и гнойно-воспалительных процессов различной локализации встречаются Proteus vulgaris и Proteus mirabilis
Морфология. Протеи – палочки размерами 0.4-0.6 x 1.0-3.0 мкм. Наряду с типичными встречаются кокковидные и нитевидные формы. Спор и капсул не образуют, имеют перитрихиально расположенные жгутики.
Протеи хорошо растут на простых питательных средах. На агаровой среде дают “ползучий рост” (роящиеся H-формы). Штаммы, не способные к роению, образуют крупные с ровными краями колонии (O-форма). Некоторые штаммы вызывают гемолиз эритроцитов в кровяных средах.
Протеи ферментируют многие углеводы с образованием кислоты, разжижают желатину, продуцируют сероводород. Виды различают по способности продуцировать индол, расщеплять мальтозу, давать реакцию Фогеса-Проскауэра и другим биохимическим признакам.
Культивирование. Протеи - факультативные анаэробы, хорошо растут на простых питательных средах при 20-37° С. Некоторые виды дают ползучий рост на плотной питательной среде, а при посеве в конденсационную воду скошенного агара - рост по всей поверхности среды (способ выделения чистой культуры по Шукевичу).
Вирулентность. Вирулентность протеев так же, как и других энтеробактерий связана с адгезией, обусловленной микрокапсулой, пилями, белком наружной мембраны клеточной стенки. Адгезия обеспечивает прямую колонизацию клеток хозяина и опосредованное действие. В последнем случае при взаимодействии пилей с клеточными рецепторами происходит активация цитокинов (ИЛ-6, ИЛ-8), которая сопровождается воспалительной реакцией. При попадании цитокинов в кровь происходит генерализация процесса. Протеи способны проникать внутрь клетки (пенетрация) и к инвазии. Из ферментов, наносящих ущерб организму, следует упомянуть уреазу, разрушающей мочевину, что приводит к сдвигу рН среды в очаге воспаления в щелочную сторону. При этом происходит разрушение эпителиальных клеток. Протеазы повреждают IgA и IgM. Токсические свойства протея связаны с эндотоксином — ЛПС, который освобождается после разрушения бактериальных клеток.
Эпидемиология. Протеи обычно являются сапрофитами гниющих отбросов, в небольших количествах присутствуют в кишечнике животных и человека, обнаруживаются в сточных водах и почве. Чаще всего заражение происходит алиментарным путем, когда в организм человека с пищей попадает большое количество протея. Нередко протей может выступать как возбудитель дисбактериоза (эндогенная инфекция) или как типичный возбудитель госпитальной инфекции. Протей сравнительно устойчив во внешней среде, хорошо переносит замораживание. При температуре 60 °С погибает в течение 1 ч, при 80 °С - в течение 5 мин, в 1 %-ном растворе фенола гибнет через 30 мин. Может быть устойчив одновременно ко многим антибиотикам и дезинфицирующим веществам.
Патогенез. Патогенез вызываемых протеем инфекций носит мультифакторный характер. Благодаря своим факторам вирулентности протей прикрепляется к эпителиальным клеткам и инвазирует их. Это даёт возможность колонизировать слизистую оболочку, либо участок кожного покрова. Протей обладает большим набором факторов вирулентности, к числу которых относятся структурные компоненты бактерии и секретируемые ею вещества, которые принимают участие в патогенезе: пили, жгутики, гемолизины, гиалуронидаза, фосфолипазы, энтеротоксин и др.
Лабораторная диагностика. Род Proteus включает 3 вида: P. vulgaris, P.mirabilis — часто обнаруживаемые в кишечнике и моче здоровых и больных людей, животных разных видов, в навозе, в сточных водах, в почве, в разнообразных гниющих органических субстратах, и P.myxofaciens —малоизученный вид, вьщеляемый только из личинок шелкопряда непарного.
Патогенны для животных и человека: вызывают инфекции мочевых путей, кишечника. После ожогов, механических травм, хирургических вмешательств могут приводить к образованию септических очагов.
В ветеринарии наибольшее значение имеет способность протеев как самостоятельно, так и в ассоциации с другими энтеробактериями и условно-патогенными микроорганизмами других семейств, вызывать патологию желудочно-кишечного тракта преимущественно у молодняка животных.
Лечение. При пищевой токсикоинфекции, вызванной протеем, проводят неспецифическое лечение, направленное на дезинтоксикацию (промывание желудка, обильное питье и т. д.). В случае заболевания, сопровождающегося нагноением или сепсисом, используют антибиотики с учетом результатов антибиотикограммы. При колите, связанном с дисбактериозом кишечника, когда протей присутствует в больших количествах, целесообразно пероральное использование интестибактериофага, в состав которого входит протейный фаг, а также протейного или колипротеиного бактериофага.
Профилактика. Специфическая профилактика заболеваний, вызванных протеями, не разработана.
Клибсиелла.
Клебсиелла (лат. Klebsiella) — род грамотрицательных факультативно-анаэробных условно-патогенных бактерий. Имеют форму коротких толстых эллипсовидных палочек размером 0,6–6,0 на 0,3–1,0 мкм. Клебсиеллы неподвижны (подвижностью может обладать Klebsiella aerogenes), не образуют спор, имеют выраженные капсулы, благодаря которым клебсиеллы устойчивы к воздействию окружающей среды и могут долго сохраняться в почве, в воде, на предметах в помещениях.
Морфология. Клебсиеллы - грамотрицательные эллипсоидные бактерии, имеют форму толстых коротких палочек с закругленными концами, размером 0,3-0,6 х 1,5-6,0 мкм, капсульная форма имеет размеры 3-5 х 5-8 мкм. Размеры подвержены сильным колебаниям, особенно у клебсиелл пневмонии. Жгутики отсутствуют, бактерии спор не образуют, у части штаммов имеются реснички. Обычно видна толстая полисахаридная капсула; бескапсульные формы могут быть получены при воздействии на бактерии низкой температуры, сыворотки, желчи, фагов, антибиотиков и при мутациях. Расположены попарно или поодиночке.
Культивирование. Клебсиеллы - факультативные анаэробы. Хорошо растут на простых питательных средах при 35-37° С. На плотных средах образуют куполообразные слизистые колонии, на бульоне - интенсивное помутнение.
Вирулентность. Вирулентность клебсиелл связана с наличием у них капсул. Бактерии, утратившие капсулу, становятся невирулентными и при введении в организм животного быстро фагоцитируются. Капсульные варианты вызывают гибель мышей через 24—48 ч после заражения с обсеменением всех органов.
Эпидемиология. Клебсиеллез является чаще всего внутрибольничной инфекцией. Источником служит больной человек и бактерионоситель. Возможно как экзогенное, так и эндогенное заражение. Наиболее частые пути передачи - пищевой, воздушно-капельный и контактно-бытовой. Факторами передачи чаще всего является пищевые продукты (особенно мясные и молочные), вода, воздух. В последние годы частота клебсиеллезов возросла, одна из причин этого - повышение патогенности возбудителя в связи со снижением резистентности организма человека. Этому способствует также широкое использование антибиотиков, изменяющих нормальное соотношение микроорганизмов в естественном биоценозе, иммунодепрессантов и т. д. Следует отметить высокую степень резистентности клебсиелл к различным антибиотикам.
Патогенез. Клебсиеллы пневмонии (палочка Фридлендера) вначале считали возбудителями заболеваний дыхательных путей (риносклерома, озена, пневмония). Затем было установлено, что они могут быть причиной поражения слизистых оболочек век, мочеполовых органов, а также мозговой оболочки, суставов, способны вызывать сепсис, острые кишечные инфекции у взрослых и детей, гнойные послеродовые осложнения.
Клебсиеллы озены (палочка Абеля) являются этиологическим фактором хронических заболеваний дыхательной системы. Воспалительный процесс сопровождается выделением вязкого секрета, издающего зловонный запах. Течение заболевание хроническое; инкубационный период не установлен. Наиболее часто озена начинается в 816лет, а клинические проявления достигают максимума к 35-40 годам.
Клебсиеллы риносклеромы (палочка Фриша-Волковича) вызывают хронические воспалительные процессы слизистых оболочек верхних дыхательных путей, бронхов с образованием инфильтратов, которые затем рубцуются. Возбудители могут быть обнаружены в гранулемах, где они локализуются внутри и вне клеток. На слизистой оболочке носа, гортани и трахеи обнаруживают плотные беловатые узелки, покрытые вязкой мокротой, содержащей возбудитель.
Лабораторная диагностика. Основным методом диагностики является бактериологический. Материал для посева может быть различным: гной, кровь, ликвор, испражнения, смывы с предметов и др. Его сеют на дифференциально-диагностическую среду К-2 (с мочевиной, рафинозой, бромтимоловым синим), через сутки вырастают крупные блестящие слизистые колонии с окраской от желтой или зелено-желтой до голубой. Далее у бактерий определяют подвижность посевом в среду Пешкова и наличие орнитиндекарбоксилазы. Эти признаки не свойственны клебсиеллам. Окончательная идентификация заключается в изучении биохимических свойств и определении серогруппы с помощью реакции агглютинации живой культуры с К-сыворотками. Выделенная чистая культура проверяется на чувствительность к антибиотикам.
Лечение клебсиеллеза по клиническим показаниям проводится в условиях стационара. При поражении кишечника антибиотики не показаны. При явлениях обезвоживания (наличие у возбудителя энтеротоксина) перорально или парентерально вводят солевые растворы.
Профилактика. Средства специфической иммунопрофилактики клебсиеллезов не разработаны. Для предупреждения клебсиеллезов следует строго соблюдать правила хранения пищевых продуктов, правила асептики и антисептики в лечебных учреждениях и правила личной гигиены.
Лабораторная диагностика сапа и мелиоидоза
Лабораторная диагностика сапа основана на результатах серологических исследований (РСК); бактериологическое исследование проводят в исключительных случаях. Бактериологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии и биопробы, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим и ферментативным свойствам.
Лабораторная диагностика мелиоидоза основана на результатах бактериологического исследования.
Бактериологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии и биопробы, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим, ферментативным и серологическим свойствам.
Морфология,_культивирование,_вирулентность,_эпидемиология,_патогенез,_лабораторная_диагностика_и_профилактика_герпесвирусной_инфекции.»'>Тема 2 «Герпесвирусы. Морфология, культивирование, вирулентность, эпидемиология, патогенез, лабораторная диагностика и профилактика герпесвирусной инфекции.»
Герпесви́русы — большое семейство ДНК-содержащих вирусов, вызывающее разнообразные болезни не только у человека и других млекопитающих, но и у птиц, рептилий, амфибий, рыб.
Морфология. Вирион герпесвируса имеет овальную форму, диаметр 150-200 нм. В центральной части вириона находится ДНК, окружённая икосаэдрическим капсидом, состоящим из 162 капсомеров. Снаружи вирус окружает оболочка с гликопротеиновыми шипами, сформированными из внутреннего слоя ядерной мембраны клетки. Пространство между капсидом и оболочкой называется тегумент (содержит вирусные белки и ферменты, необходимые для инициации репликации). Геном – двунитевая линейная ДНК. Она состоит из двух фрагментов - короткого S и длинного L.
Культивирование. Для культивирования вируса применяют куриный эмбрион (на хорион-аллантоисной оболочке образуются мелкие плотные бляшки) и культуру клеток, на которой он вызывает цитопатический эффект в виде появления гигантских многоядерных клеток с внутриядерными включениями. Вирус патогенен для многих животных. При экспериментальном заражением кроликов в роговицу глаза ВПГ вызывает кератит, при введении в мозг – энцефалит. В естественных условиях животные не болеют.
Эпидемиология. Простой герпес - одна из самых распространенных инфекций, которая поражает различные возрастные группы людей, чаще в осенне-зимний период. Отмечаются спорадические случаи заболевания, иногда небольшие вспышки в семьях, детских коллективах, больницах. Эпидемий не наблюдается.
Источником инфекции являются больные и носители. Основной механизм передачи - контактный, аэрогенный. Заражение происходит при попадании вирусов на поврежденные кожные покровы или слизистые оболочки.
Эпидемиология герпеса, вызванного вирусами типов 1 и 2, различна. ВПГ типа 1 передается через слюну, зараженные слюной руки и предметы быта, а ВПГ типа 2 - половым путем. Возможно заражение плода через плаценту.
Патогенез. По клиническим проявлениям различают первичный и рецидивирующий герпес. Входными воротами возбудителя при первичной герпетической инфекции являются поврежденные участки кожи и слизистых оболочек рта, глаз, носа, мочеполового тракта, где вирусы репродуцируются. Затем по лимфатическим сосудам вирусы попадают в кровь и заносятся в различные органы и ткани.
Инкубационный период при первичном герпесе составляет в среднем 6-7 дней.
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются содержимое герпетических пузырьков, слюна, соскобы с роговой оболочки глаза, кровь, цереброспинальная жидкость, в летальных случаях . кусочки головного и спинного мозга.
Экспресс-диагностика заключается в обнаружении гигантских многоядерных клеток с внутриядерными включениями в мазках-отпечатках из высыпаний, окрашенных по Романовскому-Гимзе.
Профилактика. Для профилактики тяжелых форм рецидивирующего герпеса в период ремиссии применяют многократное введение инактивированной, культуральной герпетической вакцины. Вакцинация, а также применение иммуномодуляторов, например реаферона, удлиняют межрецидивный период и облегчают течение последующих рецидивов.
|
|
|
Скачать 0.81 Mb.