Рестрикционный анализ
ДНК расщепляют с помощью рестриктаз (бактериальных эндонуклеаз), которые распознают и разрывают определенные последовательности нуклеотидов в нужных участках. Отдельные рестриктазы способствуют вьщелению строго определенных фрагментов ДНК. Размер полученных фрагментов ДНК можно определить путем электрофореза в агарозном или полиакриламидном геле. После электрофореза каждый фрагмент ДНК располагается в определенном участке геля в виде дискретной полосы. Фрагменты ДНК выявляют путем обработки геля бромидом этидия, который связывается с ДНК. Такие фрагменты ДНК высвечиваются при ультрафиолетовом облучении в красной области спектра. Длину каждого фрагмента можно выявить, сравнивая расстояние, пройденное фрагментом ДНК при электрофорезе, с расстоянием, пройденным стандартным фрагментом ДНК известного размера.
Методические указания:
Таблица: Классификация и функции плазмид.
Название плазмид
|
Функции плазмид
|
|
|
Таблица: Молекулярно-генетические методы лабораторной диагностики.
Название метода
|
Достоинства метода
|
Недостатки метода
|
|
|
Контрольные вопросы:
1.Чем отличается строение генома бактерий от клеток эукариотов ?
2. Что такое рекомбинации и каковы их основные виды?
3. Каково значение плазмид?
4. Какие достоинства и недостатки имеются у метода ПЦР?
5. Назовите основные методы внутривидового типирования микроорганизмов.
Список литературы:
Обязательная:
Борисов Л.Б., Смирнова А.М., Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., медицина. 1994 г.
Воробьев А.В., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова А. М. Микробиология. М., Медицина. 1998 г.
Коротяев А.И., Бабичев С.А., Медицинская микробиология, вирусология , иммунология. СпецЛит, 2000 г
Борисов Л. Б. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. М. 1973 г.
Дополнительная:
Пяткин К.Н., Кривошеин Ю.С. Микробиология. М., 1980 г.
Генкель П.А., Микробиология с основами вирусологии. М., 1974 .
Шлегель Г. Общая микробиология. М., Мир, 1982
Занятие № 10. Контрольное занятие по теме «Морфология и физиология микроорганизмов».
Цель: проверить знания по теме «Общая микробиология».
Знать: классификацию, морфологию, физиологию и генетику микроорганизмов.
Вопросы для самоподготовки:
История микробиологии. Этапы развития. Современные задачи. Вклад российских ученых в развитие микробиологии и иммунологии.
Предмет и задачи медицинской микробиологии и иммунологии. Клиническая микробиология, ее задачи. Критерии этиологической диагностики. Диагностика нозокомиальных инфекций.
Бактериологическая лаборатория. Классификация и значение. Оборудование рабочего места. Правила поведения в бактериологической лаборатории.
Основные систематические группы микроорганизмов. Понятия «популяция», «культура», «штамм», «колония», «клон». Бактерии: определение, систематическое положение. Тесты для дифференциации представителей различных семейств бактерий.
Морфологические формы бактерий. Понятие о морфологических свойствах микроорганизмов. Нитчатые формы бактерий: актиномицеты, нокардии.
Структура и химический состав бактериальной клетки. Клеточная стенка, микроорганизмы с дефектной клеточной стенкой, их характеристика, строение, репродукция, методы изучения, роль в патологии человека, лабораторная диагностика.
Строение и функции цитоплазматической мембраны, цитоплазмы, рибосом, мезосом бактериальной клетки. Ядерный аппарат бактерий и его особенности.
Споры, капсулы, жгутики, реснички, ворсинки, фимбрии, пили. Функциональное назначение органелл. Методы выявления. Определение подвижности бактерий.
Тинкториальные свойства бактерий. Цели и методы окраски.
Иммерсионный микроскоп. Особенности устройства. Принцип действия. Использование в практике.
Методы микроскопического исследования (люминесцентная, темнопольная, фазово-контрастная, электронная микроскопия). Бактериоскопический метод диагностики, его задачи и возможности
Ферменты бактерий. Понятие о биохимических свойствах микроорганизмов. Автоматическая регуляция синтеза ферментов. Идентификация бактерий по ферментативной активности.
Типы окислительно-восстановительных процессов у бактерий.
Понятие о метаболизме. Анаболизм и катаболизм. Особенности метаболизма у бактерий. Методы изучения метаболизма бактерий. Способы получения энергии бактериями, Мембранное и субстратное фосфорилирование.
Особенности дыхательного аппарата бактерий.
Структурные особенности наследственного вещества бактерий. Плазмиды бактерий: определение, основные свойства, классификация.
Строение генома бактерий. Понятие о генотипе и фенотипе. Виды наследуемой изменчивости. Механизмы передачи генетического материала у бактерий.
Механизмы изменчивости. Мутации, их особенности, типы мутантов у бактерий.
Модификации у бактерий: кратковременные и длительные. Механизм модификаций. Отличие мутационной изменчивости от длительных модификаций.
Типы и механизмы питания бактерий. Классификация бактерий по источникам углерода и азота.
Питательные среды, их классификация. Требования, предъявляемые к питательным средам. Рост и размножение бактерий. Фазы роста на жидких питательных средах.
Принципы и методы выделения чистых культур микроорганизмов. Культивирование бактерий.
Действие физических и химических факторов на микроорганизмы, Использование в практике. Стерилизация, способы, аппаратура. Дезинфекция. Дезинфектанты.
Влияние биологических факторов на микроорганизмы. Использование в практике.
Понятие о химиотерапии и химиотерапевтических препаратах. Классификация химиопрепаратов.
Антибиотики: классификация по источнику получения, механизму и спектру действия.
Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам. Механизмы формирования и пути преодоления лекарственной устойчивости возбудителей инфекционных болезней. Принципы рациональной антибиотикотерапни. Осложнения антибиотикотерапии.
Химиотерапия вирусных инфекций.
Бактериофаги. Получение, титрование, использование. Взаимодействие фага с бактериальной клеткой. Умеренные и вирулентные бактериофаги. Применение в медицине Внутривидовое типирование бактерий. Методы. Использование в практике.
Основы медицинской биотехнологии.
Бактериологический метод диагностики, его задачи и возможности.
Вирусы как своеобразная форма жизни. Принципы классификации вирусов. Структура и химический состав вирусов. Особенности биологии вирусов. Репликация вирусных нуклеиновых кислот.
Процессы взаимодействия вирусов с чувствительными клетками и факторы, способные их нарушить. Методы культивирования вирусов.
Патогенные грибы. Их классификация, особенности биологии.
Список литературы:
Обязательная:
Борисов Л.Б., Смирнова А.М., Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., медицина. 1994 г.
Воробьев А.В., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова А. М. Микробиология. М., Медицина. 1998 г.
Коротяев А.И., Бабичев С.А., Медицинская микробиология, вирусология , иммунология. СпецЛит, 2000 г
Борисов Л. Б. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. М. 1973 г.
Дополнительная:
Пяткин К.Н., Кривошеин Ю.С. Микробиология. М., 1980 г.
Генкель П.А., Микробиология с основами вирусологии. М., 1974 .
Шлегель Г. Общая микробиология. М., Мир, 1982
|
Скачать 446 Kb.