Вакцина против клещевого энцефалита-01062022. Вакцина против клещевого энцефалита

• Название: Вакцина против клещевого энцефалита
• Дата: 11.01.2023
• Размер: 268.63 Kb.
• Имя файла: Вакцина против клещевого энцефалита-01062022.docx
• Тип: Документы; #881731

Вакцина против клещевого энцефалита.

ВВЕДЕНИЕ

Клещевой энцефалит (КЭ) представляет собой вирусную инфекцию, поражающую нейроны центральной нервной системы (ЦНС). Заболевание распространено среди населения стран Европы и ряда регионов Азии. Возбудителем этой инфекции является вирус клещевого энцефалита (ВКЭ), который бывает нескольких видов - дальневосточный, сибирский и европейский. Клещевой энцефалит передаётся между людьми через укусы кровососущих насекомых, основными из которых являются иксодовые клещи. После попадания вируса в организм человека он в первую очередь начинает размножаться и накапливаться в клетках иммунной системы, после чего попадает в кровь, с которой разносится по всему организму и попадает и заражает лимфоузлы, печень, селезенку и другие органы. Но самым опасным является его способность поражать нейроны шейного отдела спинного мозга, мозжечка и мозговых оболочек. В этих отделах нервной системы он остаётся надолго и постепенно проникает все глубже в ткани головного мозга. В конечном итоге, это часто является причиной возникновения выраженных и устойчивых осложнений неврологической и психиатрической направленности, в ряде случаев происходит гибель пациента. А так как клещи очень широко распространены, то существует достаточно высокая вероятность того, что при походах в лес или просто при прогулке в парке человек может подвергнуться нападению клеща, являющегося носителем вируса.

Развитие заболевания можно предотвратить, активно используя вакцинацию населения в зонах риска по КЭ. Несмотря на это, за последние несколько десятков лет заболеваемость КЕЭ возросла. Следует отметить, что увеличение количества зарегистрированных случаев КЭ среди населения практически всех эндемичных страна Европы и Азии составляет актуальную проблему в здравоохранении этих регионов. С ростом туризма КЭ становится проблемой и в странах, расположенных за пределами эндемичных регионов [1].

Большинство случаев заражения КЭ приходится на период наибольшей активности клещей, в основном с апреля по ноябрь [2–4]. КЭ, вызванный европейским подтипом вируса, обычно проявляется в виде менингита или менингоэнцефалита и имеет двухфазное течение примерно у 2/3 пациентов. Приблизительно до 50% пациентов имеют отдаленные последствия [2]. Редким клиническим проявлением КЭ является абортивная форма заболевания [5]. Лечение КЭ носит симптоматический характер.

Эпидемиология

КЭ представляет собой эндемичное заболевание, встречающееся у населения стран Европы, в России, жителей Северного Китая и Японии. В течение нескольких последних десятков лет произошло расширение эндемичных по КЭ регионов, во многих из которых возросло количество случаев инфицирования людей. Увеличение официальных показателей заболеваемости КЭ стало следствием многоступенчатого взаимодействия различных факторов: социальных и экологических, повышения уровня грамотности населения в медицинском направлении и совершенствования методов диагностики заболевания [1,8].

ВКЭ европейского типа наиболее часто обнаруживается среди возбудителей заболевания, как правило, у населения стран Европы. Однако он был обнаружен и регионах России (на Западном Урале и в Сибири). ВКЭ сибирского типа наиболее часто обнаруживается среди возбудителей заболевания, как правило, у жителей Сибири, стран Прибалтики и Северной Финляндии. ВКЭ дальневосточного типа относится к достаточно эндемичным видам возбудителя - его обнаружили в районах Дальневосточной Азии и в Японии (а также были зарегистрированы случаи заражения людей при укусе клещей, инфицированных данными видом ВКЭ, в районах Центральной и Восточной Сибири) [1,3,9,10].

Преобладающими резервуарами и хозяевами ВКЭ в природе являются мелкие грызуны; человек не является необходимым звеном в жизненном цикле ВКЭ и является лишь случайным хозяином. ВКЭ передается человеку в основном при укусах клещей; в России основным переносчиком является Ixodes persulcatus (I. persulcatus); в Сибири уровень инфицирования I. persulcatus достигает 40% [2,11]. Приблизительно 1% всех случаев заражения людей ВКЭ, вероятно, происходит в результате употребления инфицированного непастеризованного молока или молочных продуктов зараженных животных, особенно коз [3]. Этот путь передачи следует учитывать, в частности, в случаях появления локальных эпидемий [12,13]. В регионах России - на Урале, в Сибири и на Дальнем Востоке, где I. persulcatus широко распространен, наибольшее развитие случаев КЭ, как правило, отмечается в мае и июне [14]. Среди заболевших КЭ больше мужчин, чем женщин, вне зависимости от возраста пациентов [15,16]. Следует отметить, что в 10-20% всех зарегистрированных случаев заболевания КЭ пациентами являются дети [17]. Важным является тот факт, что по причине отсутствия выраженных симптомов КЭ у пациентов детской популяции возникают сложности в дифференциальной диагностике заболевания – наиболее часто вместо КЭ ставится диагноз «асептический менингит неясной этиологии» [18].

Распространению КЭ за пределы эндемичных районов способствует активное развитие туризма. По этой причине необходимым является включение КЭ в дифференциальную диагностику инфекций ЦНС при наличии соответствующего анамнеза у пациентов, проживающих и за пределами эндемичных районов. Риск развития КЭ, связанный с поездками, зависит от сезона путешествия, степени незащищенного пребывания на открытом воздухе, а также от употребления непастеризованных молочных продуктов [6].

Патогенез

После укуса зараженного клеща репликация ВКЭ происходит локально. Клетки Лангерганса, или дендритные клетки кожи, - это те структуры, в которых происходит начальная репликация вируса и его транспорт в локальные лимфатические узлы. Формируется первичный очаг инфекции, из которого ВКЭ распространяется по всему организму - в селезенку, печень и костный мозг. Последующее размножение ВКЭ в органах и тканях создает благоприятные условия для активной репликации возбудителя в организме, в результате чего создается сравнительно высокий титр ВКЭ в плазме крови в течение короткого промежутка времени - всего нескольких дней. Проникновение ВКЭ в головной мозг происходит во время виремической фазы (что соответствует началу развития КЭ) [19,20]. В настоящее время окончательно не известно, какой механизм обеспечивает проникновение ВКЭ в ткани головного мозга через гематоэнцефалический барьер. Различными группами исследователей и врачей были изучены 4 потенциально возможных механизма: (1) через периферические нейроны; (2) через обонятельные нейроны; (3) посредством проникновения через клетки эндотелия капилляров головного мозга; (4) посредством проникновения через промежутки между клетками эндотелия капилляров головного мозга. Симптомы и клиническая картина заболевания свидетельствуют о том, что основными мишенями ВКЭ в ЦНС являются нервные клетки [21].

Клинические признаки

Подавляющее большинство случаев КЭ (от 70% до 98%), вызванных ВКЭ, протекают бессимптомно [2,23]. Следует отметить, что количество пациентов с бессимптомным течением заболевания определить достаточно сложно, так как пациентам с клиническими признаками и симптомами заболевания легкой степени выраженности не всегда удается поставить правильный диагноз.

Инкубационный период КЭ находится в интервале от 2 до 28 дней и обычно составляет 7-14 дней. После алиментарной передачи (через ЖКТ) ВКЭ инкубационный период, как правило, короче и составляет обычно от 3 до 4 дней [24].

Примерно у 75% больных КЭ, вызванным европейским подтипом ВКЭ, заболевание носит типичное двухфазное течение. У большинства пациентов с монофазным течением заболевания обнаруживается поражение ЦНС (менингит, менингоэнцефалит), у небольшой части больных — лихорадочное состояние с головной болью, но без развития менингита (когда после начальной фазы КЭ не происходит развития менингоэнцефалитического состояния), которое классифицируют как абортивная форма КЭ или «фебрильная головная боль» [2,5,19,25].

Начальная фаза КЭ ассоциирована с наличием высокого титра ВКЭ в плазме крови пациентов. Для нее характерно наличие неспецифических симптомов – повышения температуры тела, головной боли, боли в теле, слабости, общего недомогания, снижения аппетита, тошноты и др. [4]. Продолжительность начальной фазы составляет от 2 до 7 дней, затем происходит улучшение состояния пациента, вплоть до исчезновения симптомов заболевания (как правило около 7 дней (1-21 день)). После этого развивается вторая фаза заболевания: приблизительно у 50% пациентов взрослой популяции развиваются признаки менингита, приблизительно у 40% - симптомы менингоэнцефалита и примерно у 10% - клиническая картина менингоэнцефаломиелита [2,25].

Диагностика

Развитие КЭ определяется наличием: (1) симптомов/признаков, указывающих на менингит или менингоэнцефалит; (2) повышенное количество лейкоцитов в спинномозговой жидкости (> 5 × 10⁶ клеток/л); и (3) микробиологические признаки инфекции ВКЭ (наличие специфических антител IgM и IgG) [6].

Лечение

На сегодняшний день какого-либо специфического лечения КЭ с применением противовирусных лекарственных препаратов, подавляющих репликацию ВКЭ, не существует. Пациентов обычно госпитализируют в клиники, где они получают поддерживающую терапию в зависимости от тяжести признаков/симптомов заболевания. В схемы симптоматического лечения КЭ включают прием жаропонижающих, анальгетиков, противорвотных средств, препаратов для поддержания водно-электролитного баланса и, при необходимости, противосудорожных средств. У пациентов с нервно-мышечным параличом, ведущим к дыхательной недостаточности, необходимо проведение интубации трахеи и ИВЛ [6].

Потенциальным осложнением КЭ, усугубляющим клиническую картину и являющимся предвестником неблагоприятного неврологического исхода, является отек головного мозга. Пациентам с выраженным повышением внутричерепного давления внутривенно вводят маннит и/или дексаметазон [26,27].

Меры профилактики КЭ:

Чтобы избежать заражения клещевым энцефалитом необходимо предпринять ряд мер для предотвращения укуса человека клещами. Именно поэтому перед походом в лес необходимо быть очень внимательным и осторожным, помимо этого необходимо соблюдать меры для профилактики заражения вирусом, заключающиеся главным образом в предупреждении прикрепления клещей к телу человека, к их раннему и быстрому удалению:

• 
  Не посещать в апреле-июле леса и парки с высокой травой и зарослями кустарников, где в большом количестве обитают клещи. Во время атаки клещи прикрепляются к проходящим мимо животным и людям. Поэтому во время походов следует остерегаться и обходить стороной тропы животных, и домашнего скота. На дорожках и широких тропах необходимо избегать контакта со свешивающейся на тропу растительностью, для чего необходимо держаться середины тропы;
  
• 
  Обязательно использовать репелленты, которые нужно наносить на открытые участки тела и на одежду;
  
• 
  Одежда для похода должна быть светлого цвета, с капюшоном, длинными рукавами и штанинами, которые заправить в носки, рубашку заправляют в брюки. На голове должен быть головной убор, позволяющий спрятать волосы;
  
• 
  При нахождении в лесу и парке необходимо систематически проводить осмотр на предмет наличия/отсутствия клещей на одежде и открытых участках тела;
  
• 
  После возвращении из леса или парка, в первую очередь, необходимо осуществить тщательный осмотр всех элементов одежды и тела;
  
• 
  В случае обнаружении присосавшегося клеща, его необходимо немедленно удалить, поскольку длительное нахождения клеща в присосанном состоянии резко увеличивает вероятность заражения вирусом. [7,22]
  

Заражение КЭ может наблюдаться при употреблении инфицированного непастеризованного молока. Чтобы предупредить попадание ВКЭ в организм человека таким путем нужно пить пастеризованное молоко и употреблять в пищу молочные продукты только из пастеризованного молока [4,13].

Все эти меры профилактики конечно очень важны, но, безусловно, самой эффективной и надёжной превентивной мерой, является вакцинация. Именно поэтому производство вакцин против клещевого энцефалита является настолько важной задачей.

Вакцинация

Пассивная иммунизация

В эндемичных по КЭ регионах для профилактики КЭ среди населения достаточно продолжительное время использовали гамма-глобулин, активный в отношении ВКЭ, который вводили внутривенно в течение 96 ч после укуса клеща (так называемая, постэкспозиционная профилактика заболевания). Однако в результате такого воздействия были зарегистрированы случаи более тяжелого течения болезни у детей, подвергшихся экспозиции иммуноглобулина [28–31]. Следует отметить, что введение гамма-глобулина после укуса клеща не обеспечивало создания надежного защитного действия и риск развития заболевания был достаточно [30]. Принимая во внимание изложенное выше, ассоциации врачей в странах Европейского Союза приняли решение не применять препараты иммуноглобулинов для пассивной иммунизации населения от КЭ [6]. Однако следует отметить, что в ряде исследований, проведенных российскими врачам, однократное внутривенное введение препарата специфического в отношении ВКЭ иммуноглобулина в дозе 0,05 мл/кг массы тела обеспечивает развитие протективного эффекта приблизительно в 80% случаев инфицирования ВКЭ [31].

К наиболее эффективным и перспективным методам профилактики развития КЭ относится активная иммунизация [2,4]. Принимая во внимание то, что источником заболевания служит инфицированное животное, а ВКЭ передается человеку при укусе клеща и не может передаться от человека к человеку, можно заключить, что с помощью вакцинации можно обеспечить только индивидуальную защиту человека от заражения. Таким образом, даже наличие в регионе высоких показателей иммунизации населения не является гарантией защиты от инфицирования лиц, не прошедших вакцинацию.

Основные рекомендации врачей по вакцинации

Принимая во внимание то, что заболеваемость КЭ в различных регионах носит изменчивый характер, рекомендованы различные графики вакцинации населения.

Согласно рекомендациям Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), в районах с высоким риском инфицирования ВКЭ (≥ 5 случаев/100 000 в год) необходимо проводить вакцинацию населения всех возрастных групп, в том числе и детей. В регионах с низкой или средней заболеваемостью КЭ (< 5 случаев/100 000 в год в течение 5 лет) рекомендуется проводить вакцинирование лиц из групп риска. Кроме того, ВОЗ рекомендовано проведение иммунизации людей, осуществляющих поездки из районов, не являющихся эндемичными по КЭ, в районы с высоким риском заражения КЭ [6].

График прививок

Существует несколько графиков вакцинации; все они включают в себя первичную (основную) вакцинацию и проведение в дальнейшем ревакцинации. Для проведения первичной вакцинации требуется введение 3 доз, как правило, с интервалом 1-3 и 5-12 месяцев между 1 и 2, 2 и 3 дозами, соответственно. Поддержание иммунитета против ВКЭ осуществляется посредством введения бустерных доз через 3 года после завершения первичной вакцинации, а затем - по 1 дозе 1 раз в 5 лет. Из-за ухудшения иммунного ответа у лиц старше 60 лет или старше 50 лет, людям в этой возрастной группе рекомендуется ревакцинация каждые 3 года [6].

Лица, заразившиеся клещевым энцефалитом, считаются защищенными от заболевания и не нуждаются в вакцинации.

Способ применения, дозировки

Вакцину от КЭ вводят внутримышечно в дельтовидную мышцу; у маленьких детей ее можно вводить в переднебоковую область бедра. Вакцину можно вводить одновременно с другими вакцинами (живыми или инактивированными), но не в одно и то же место [6].

Дозы зависят от возраста человека: для детей одна доза составляет 0,25 мл, а для взрослых – 0,5 мл.

Эффективность и безопасность

Вакцины от КЭ безопасны и эффективны. Побочные эффекты после введения вакцин носят слабо выраженный характер и относительно редки. Наиболее часто они проявляются после введения первой дозы вакцины. Чаще всего появляются локальные болевые ощущения в месте инъекции, гиперемия и отечность возникают реже. Поствакцинальная кратковременная лихорадка достаточно часто встречается у детей младшего возраста, по сравнению со взрослыми. Очень редко наблюдается развитие поствакцинальных неврологических осложнений [6].

Противопоказания к вакцинации

Проведение вакцинации от КЭ противопоказано при наличии в анамнезе выраженной аллергической реакции: (1) после введения первой дозы вакцины; (2) на другие компоненты вакцины (формальдегид, протамина сульфат, антибиотики - неомицин, гентамицин); (3) к компонентами куриных яиц (так как вирусы КЭ выращивают в клетках фибробластов куриных эмбрионов).

На сегодняшний день каких-либо хорошо контролируемых клинических исследований по оценке безопасности вакцинации против КЭ женщин в период беременности проведено не было. По этой причине иммунизация беременных женщин проводится исключительно после тщательной оценки «польза-риск», проводимой в каждом случае индивидуально. Аналогичная ситуация складывается и в отношении женщин в период грудного вскармливания. Данные о способности компонентов вакцины передаваться новорожденному через грудное молоко отсутствуют. Тем не менее, с большой долей вероятности можно сказать, что антитела, вырабатываемые в организме матери после вакцинации, проникают в молоко и, таким способом могут попасть в организм ребенка. Следует отметить, что вакцины против КЭ созданы на базе инактивированного вируса, что значительно минимизирует риски неблагоприятного воздействия на плод или новорожденного.

Несмотря на отсутствие каких-либо доказательств того, что вакцинация от КЭ может стать причиной развития аутоиммунных заболеваний или же осложнить их течение, важно соблюдать осторожность в отношении пациентов данной популяции [6].

1 Описание вакцины.

В соответствии с Фармакопейной статьёй 3.3.1.0031.15 вакцина против клещевого энцефалита имеет следующие характеристики:

1. 
   Лекарственная форма - суспензия для внутримышечного введения в ампулах по 0,5 мл (1 доза);
   
2. 
   Состав:
   

Одна доза препарата (0,5 мл) содержит:

• 
  Действующее вещество:
  

Инактивированный антиген вируса клещевого энцефалита (КЭ) — от 0,6 до 3,0 мкг.

• 
  Вспомогательные вещества:
  
  • 
    Гель алюминия гидроксид (микроноситель) — 0,30–0,50 мг;
    
  • 
    сахароза (стабилизатор) — 20–30 мг;
    
  • 
    альбумин человека (стабилизатор) — 0,20–0,25 мг;
    
  • 
    соли буферной системы:
    
    • 
      натрия хлорид — 3,94 мг;
      
    • 
      динатрия гидрофосфат додекагидрат — 7,13 мг;
      
    • 
      натрия дигидрофосфат дигидрат — 0,42 мг.
      

Вакцина не содержит антибиотиков и консервантов.

3. 
   Описание лекарственной формы:
   

Гомогенная суспензия белого цвета без посторонних включений;

4. 
   Характеристика:
   

Вакцина представляет из себя стерильную очищенную концентрированную суспензию инактивированного пропиллактоном вируса клещевого энцефалита (штамм «205»), который был получен путем репродукции его во взвешенной первичной культуре клеток ВЕРО (клеток эпителия почки африканской зеленой мартышки) сорбированной на алюминия гидроксиде (микроноситель). Вакцина стимулирует выработку клеточного и гуморального иммунитета к вирусу, обеспечивает защиту от штаммов, циркулирующих как в Азии, так и в Европе.

5. 
   Показания к применению:
   

Вакцина применяется для проведения активной профилактики КЭ у лиц, в возрасте 18 лет и старше. При этом вакцинации подлежат следующие группы людей:

• 
  население, проживающее на эндемичных по клещевому энцефалиту территориях;
  
• 
  лица, прибывшие на эндемичные территории а также осуществляющие сельскохозяйственные, гидромелиоративные, строительные, заготовительные, промысловые, геологические, изыскательские, экспедиционные, дератизационные и дезинсекционные работы, а также работы по выемке и перемещению грунта, по лесозаготовке, расчистке и благоустройству леса, зон оздоровления и отдыха населения;
  
• 
  лица, осуществляющими работу с живыми культурами возбудителя клещевого энцефалита;
  
• 
  доноры, чья кровь используется для получения специфического иммуноглобулина.
  

6. 
   Срок годности -2 года;
   
7. 
   Преимущества:
   

В вакцине отсутствуют антибиотики, формальдегид и консерванты, она обладает высокой эффективностью против вируса клещевого энцефалита, при этом для положительного эффекта необходимо использовать уменьшенный объем дозы препарата (0,5 мл), нет ограничений для применения в сезон клещевого энцефалита. [32]

2 Характеристика продуцента.

Возбудителем клещевого энцефалита является вирус рода Flavivirus семейства Flaviviridae. КЭ представляет собой эндемичное заболевание, встречающееся у населения стран Европы, в России, жителей Северного Китая и Японии. В течение нескольких последних десятков лет произошло расширение эндемичных по КЭ регионов, во многих из которых возросло количество случаев инфицирования людей. Увеличение официальных показателей заболеваемости КЭ стало следствием многоступенчатого взаимодействия различных факторов: социальных и экологических, повышения уровня грамотности населения в медицинском направлении и совершенствования методов диагностики заболевания [1,8].

2.1 Таксономическое положение

Генетический анализ показывает существование трех подтипов ВКЭ:

• 
  Дальневосточный подтип (основной переносчик – клещ Ixodes persulcatus);
  
• 
  Восточно-сибирский или урало-сибирский подтип (основной переносчик – клещ Ixodes persulcatus);
  
• 
  Европейский или западный подтип (основной переносчик – клещ Ixodes ricinus).
  

Генетически они очень похожи друг на друга - вариации аминокислотных последовательностей между подтипами составляют всего 5-6% [7]. Несмотря на выраженное генетическое сходство подтипов ВКЭ, болезни, вызываемые разными подтипами, не полностью эквивалентны по клиническим проявлениям друг другу [6].

Европейский подтип ВКЭ встречается преимущественно в Европе, однако был обнаружен в России на Западном Урале и в Сибири; сибирский подтип ВКЭ встречается в Сибири, Прибалтике и северной Финляндии; дальневосточный подтип ВКЭ эндемичен для Дальневосточной Азии и Японии, а также обнаружен в Центральной и Восточной Сибири [1,3,9,10].

Поскольку ВКЭ передается через укусы членистоногих, то его относят к экологической группе арбовирусов (англ. arthropod – borne viruses, то есть «переносимые членистоногими, и передающиеся через укус членистоногих»).

2.2 Морфологические признаки

Вирион ВКЭ имеет сферическую форму, диаметр которого составляет 40-60 нм. На рисунке 1 представлено изображение вируса клещевого энцефалита под электронным микроскопом. [33]



Рисунок 2.1 - изображение вируса клещевого энцефалита под электронным микроскопом

Генетический аппарат ВКЭ представляет из себя молекулу однонитевой плюс-РНК. Капсид вируса, внутри которого заключен его геном, имеет кубический тип симметрии. Формой нуклеокапсида (геном + капсид) имеет форму двадцатигранника. В состав нуклеокапсида входит белок С. Снаружи нуклеокапсид покрыт суперкапсидом, состоящим из липидной мембраны и интегрированных в нее гликопротеиновых шипов длиной около 10 нм. Эти шипы содержат Е-белок, благодаря чему обладают гемагглютинирующими свойствами. Благодаря этому белку вирусная частица связывается с клеточной мембраной и происходит слияние вирусной и клеточной мембран. На поверхности вирусного суперкапсида белок Е представлен димером (состоит из двух молекул), при чём каждая молекула димера состоит из трех доменов. Помимо этих шипов с Е-белком, в суперкапсид встроен также и белок М. [33] Схематически вирус клещевого энцефалита изображён на рисунке 2.



Рисунок 2.2 – Строение суперкапсида вируса клещевого энцефалита

2.3 Репродукция вируса

Схема репродукции ВКЭ включает в себя следующие этапы:

1. 
   Вирус адсорбируется на поверхности клетки. Основными специфическими рецепторами для вируса клещевого энцефалита на поверхности заражаемой клетки являются ламининовые рецепторы.
   
2. 
   Вирус проникает внутрь клетки путем эндоцитоза (впячивания клеточной мембраны) образуя эндоцитарную вакуоль (везикула, пузырёк).
   
3. 
   Вирусная оболочка сливается со стенкой вакуоли после чего происходит депротеинизация вируса с помощью клеточных протеаз и высвобождение геномной РНК в цитоплазму клетки.
   
4. 
   Происходит синтез всех основных вирусных компонентов - РНК и белков капсида. При этом, вирусная плюс-РНК является матрицы, на которой синтезируется полипептид, который в последствии нарезается на структурные и неструктурные вирусные белки.
   
5. 
   Сборка вирусных частиц в цитоплазме клетки. Сборка осуществляется по следующему механизму: сперва вирусная плюс-РНК взаимодействует с С-белком, в результате чего образуется нуклеокапсид. М- и Е-белки обеспечивают последующую сборку вирусных частиц, причем, незрелые внутриклеточные вирусные частицы содержат гликозилированный белок-предшественник preM. После прохождения этих незрелых вирусных частиц через эндоплазматический ретикулум, аппарат Гольджи и модифицированную клеточную мембрану происходит гликозилирование preM белка и вирус становится зрелым.
   
6. 
   Вирусные частицы выходят их клетки путём почкования на участках предварительно модифицированной клеточной мембраны, в результате чего формируется суперкапсид.
   

В клетках теплокровных животных этот цикл репродукции сопровождается гибелью зараженной клетки. В клетках членистоногих гибели клеток-хозяев не наблюдается. [33]

Схема репродукции ВКЭ представлена на рисунке 3



Рисунок 2.3 - Схема репродукции вируса клещевого энцефалита

2.4 Резистентность вируса

Вне клетки хозяина ВКЭ способен поддерживать жизнеспособность в течение 10 дней при температуре от 18 до 20°С. При повышении температуры среды до 56°С вирус еряет активность в течение 30 минут, а при кипячении гибель вируса наступает уже через 2-3 минуты. Гибель вируса происходит при контакте со спиртами и эфиром диэтиловым. Однако следует отметить высокую устойчивость ВАКЭ при низких значениях рН, вследствие чего создаются высокие риски заражения КЭ алиментарным путем.

Важным с эпидемиологической и патогенетической точки зрения является способность ВКЭ сохраняться в организме переносчика в активном состоянии в широком диапазоне температур: от -150°С до +30°С [33].

2.5 Линия клеток ВЕРО

Линия клеток ВЕРО - линия клеток, полученная из эпителия почки, взятой у африканской зеленой мартышки, которая в процессе производства вакцины заражается вирусом клещевого энцефалита и служит основой для получения вирусосодержащей жидкости, из которой получают вакцину против клещевого энцефалита. Морфология этих клеток – эпителиоподобна.

Эта линия клеток широко применяется для выделения вирусов, скрининга токсинов Е. coli и тестирования различных лекарственных препаратов. Из-за того что клетки этой культуры дефектны по синтезу интерферонов, ее можно использовать для культивирования генетически модифицированных вирусов, лишенных генов, которые ответственны за подавление иммунного ответа хозяина. Эти клетки зачастую выращивают на фильтрах, через которые в сосуд для культивирования поступает свежая питательная среда. Клетки это культуры при этом достаточно часто образуют монослой, который по своей структуре максимально похож на естественный однослойный эпителий, и у них формируется четко выраженные базальная и апикальная поверхности. Такие клеточные культуры называются поляризованными. При заражении поляризованных клеточных культур цикл размножения многих вирусов наиболее приближен к их циклу в организме животного.

Вариант линии Vero-B сохраняет стабильность биологических свойств в пределах 178-200 пассажей. [33]