Бх. 1 вопрос. Войти Регистрация faq обратная связь Вопросы и предложения Поиск по файлам Go Go Добавил Вуз
 Скачать 108.67 Kb.
|
|
Файловый архив студентов. 1212 вуза, 4106 предмета. Вузы Предметы Пользователи Добавить файлы Заказать работу Войти / Регистрация FAQ Обратная связь Вопросы и предложения Поиск по файлам Go Go Добавил: Вуз: Предмет: Файл: student94 Приволжский исследовательский медицинский университет (бывш. НижГМА) Биохимия Всякое / Biokhimia.docx Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам. Скачиваний: Добавлен: Размер: 744 17.06.2017 8.73 Mб Скачать Скачать ☆ oppo.com Новый смартфон OPPO Reno8 T. Эксперт в портретной съемке << < Предыдущая 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Следующая > >> 15. Кинетика ферментативных реакций. Зависимость скорости ферментативной реакции от температуры, рН среды, концентрации ферментов и субстрата. Уравнение Михаэлиса-Ментен, Кm. oppo.com Перейти реклама ► Со дер жание ► Кинетика ферментативных реакций - раздел энзимологии, изучающий зависимость скорости химических реакций, катализируемых ферментами, от химической природы реагирующих веществ, а также от факторов окружающей среды. Для измерения каталитической активности ферментов используют такие показатели, как скорость реакции или активность фермента. Скорость ферментативной реакции определяется изменением количества молекул субстрата или продукта за единицу времени. Скорость ферментативной реакции - мера каталитической активности фермента, её обозначают как активность фермента. Математически скорость ферментативной реакции выражается в изменении концентрации субстрата (уменьшение) или продукта (увеличение) за единицу времени: V= D[S]/t = D[P]/t. На начальном этапе [0 - t 0 ] скорость реакции прямо пропорциональна времени и имеет линейную зависимость. Графически изменение скорости ферментативной реакции определяется тангенсом угла наклона касательной к кривой профиля реакции. Чем больше угол наклона, тем больше изменение скорости реакции. С течением времени изменение скорости ферментативной реакции в экспериментальных условиях уменьшается, об этом свидетельствует уменьшение угла наклона касательной в момент времени t. Снижение скорости ферментативной реакции может происходить за счёт ряда факторов: уменьшения концентрации субстрата, увеличения концентрации продукта, который может оказывать ингибирующее действие, могут происходить изменения рН раствора, инактивация фермента и т.д. На этапе [t 1 - t x ] скорость реакции изменяется нелинейно в зависимости от времени. Поэтому для определения скорости ферментативной реакции чаще всего исследуют изменение скорости на начальном этапе [t 0 - t 1 ], где наблюдают линейное изменение концентрации продукта (или субстрата). Скорость ферментативной реакции зависит от ряда факторов, таких как количество и активность ферментов, концентрация субстрата, температура среды, рН раствора, присутствие регуляторных молекул (активаторов и ингибиторов). Рассмотрим влияние этих факторов на скорость ферментативной реакции. А. Зависимость скорости ферментативной реакции от количества ферментов При проведении ферментативной реакции в условиях избытка субстрата скорость реакции будет зависеть от концентрации фермента. Графическая зависимость такой реакции имеет вид прямой линии. ► Со дер жание ► Однако количество фермента часто невозможно определить в абсолютных величинах, поэтому на практике пользуются условными величинами, характеризующими активность фермента: одна международная единица активности (ME) соответствует такому количеству фермента, которое катализирует превращение 1 мкмоль субстрата за 1 мин при оптимальных условиях проведения ферментативной реакции. Оптимальные условия индивидуальны для каждого фермента и зависят от температуры среды, рН раствора, при отсутствии активаторов и ингибиторов. Количество единиц активности nME определяют по формуле: В 1973 г. была принята новая единица активности ферментов: 1 катал (кат), соответствующий такому количеству катализатора, которое превращает 1 моль субстрата за 1 с. Количество каталов определяют по формуле: n катал = Количество превращённого субстрата (моль) Время (с) Международная единица ферментативной активности ME связана с каталом следующими равенствами: 1 кат = 1 моль S/c = 60 моль S/мин = 60х10 6 мкмоль/мин = 6х10 7 ME, 1 ME = 1 мкмоль/мин = 1/60 мкмоль/с = 1/60 мккат = 16,67 нкат. Для оценки количества молекул фермента среди других белков данной ткани определяют удельную активность (уд. ак.) фермента, численно равную количеству единиц активности фермента (пМЕ) в образце ткани, делённому на массу (мг) белка в этой ткани: Уд. ак. = Количество превращённого субстрата (мкмоль) Время (мин) × Количество белка (мг) ► Со дер жание ► |