3. Характеристика возбудителя
3.1 История открытия
Чума крупного рогатого скота - одна из жесточайших эпизоотии, причинившая многомиллионные потери скота в разных странах. Вероятным первоисточником её считают Центральную Азию, откуда она была занесена в Европу. Первое проявление чумы крупного рогатого скота в Европе приурочивают к IV веку, ко времени «великого переселения народов». Войны последующих столетий и нашествие монголов из Азии в Россию в XIII веке, 30-летняя война, войны Наполеона в начале XIX века с его походом в Россию - все эти события сопровождались разносом чумы и её долголетним стационарным существованием в Европе. Колоссальные потери скота от чумы послужили побудительной причиной к основанию в XVIII веке ветеринарных школ в разных странах.
Вся дальнейшая история вспышек и развития чумы связана также с войнами в Европе и Африке. Только введённые к концу прошлого века (80-е годы) в западноевропейских государствах строжайшие Карантины и жёсткий убой заражённых и подозрительных в заболевании животных привели к ликвидации чумы.
В Европейской России инфекция держалась почти до конца прошлого века, после чего она была подавлена и оставалась в дальнейшем лишь на окраинах (Закавказье и Забайкалье), расположенных на границе со стационарно заражёнными Турцией, Ираном, Монголией и Китаем. В 1918 г., по-видимому, с гуртами скота из Закавказья, чума была занесена на Северный Кавказ, а отсюда эпизоотия прорвалась и в центральные районы Союза. Чума свирепствовала здесь в течение 5 лет и причинила большие потери скотоводству.
В 1917 г. чума рогатого скота регистрировалась в Болгарии и Румынии, а в 1918 г. в Польше. По-видимому, из Сирии в 1920 г. и позже, в 1924 г., чума дважды перебрасывалась в Грецию и в Македонию.
Летом 1920 г. чума наблюдалась также в Бельгии, занесённая вначале в гавань Антверпена индийскими зебу. После установления диагноза, жёстких карантинных мер и убоя около 2 000 голов скота чума в Бельгии была прекращена к концу 1920 г., не получив доступа в прилежащие соседние государства.
В СССР чума крупного рогатого скота окончательно ликвидирована в 1927 - 1928 гг. в последнем очаге её длительного существования, в Закавказье, путём убоя явно больных и симультанными прививками всего здорового скота. В настоящее время СССР свободен от чумы рогатого скота как в европейской, так и в азиатской частях, а на границах с соседними восточными государствами, где чума ещё не изжита, соблюдаются строгие ветеринарно-санитарные меры по предупреждению заноса инфекции. Однако возможность заносов чумы из этих государств полностью не исключена.
3.2 Морфология возбудителя
Чуму КРС вызывает вирус — возбудитель, генетический материал которого содержится в одно- или двухцепочечной РНК клетки – Morbillivirus, семейство Paramyxoviridae, которая близки вирусам, вызывающим корь у человека и собачью чумку. Вирионы вируса — частицы полиморфной (круглой, овальной и нитевидной) формы, состоят из нуклеокапсида спиральной симметрии и липопротеидной оболочки. Размер вирионов от 60 до 300 нм. Геном представлен единой линейной молекулой минус-РНК. Возбудитель чумы изучен недостаточно, но исследования установили, что все его штаммы идентичны, в природе есть только один серовариант. Генетический анализ помог установить существование трех генетических линий возбудителя. Первая и вторая были распространены в Африке, но на данный момент ликвидированы.
Лабораторная диагностика заболевания
Особенности взятия и пересылки патологического материала
Материал для выделения вируса берут от больных (кровь, пунктат лимфоузлов) или убитых и павших животных (предлопаточные, мезентериальные лимфоузлы, селезенка). Патматериал берут в стерильную, плотно закрывающуюся посуду и доставляют в лабораторию нарочным в опечатанном термосе со льдом при строгом соблюдении мер предосторожности. Гепаринизированную кровь в стерильных условиях разливают по пробиркам и центрифугируют при 2500 мин-1 15-20 мин. Образовавшийся слой лейкоцитов между эритроцитами и плазмой в форме суспензии или пленки переносят пастеровской пипеткой в стерильный флакон. Пленку лейкоцитов отмывают от эритроцитов питательной средой и измельчают. Суспензию лейкоцитов в питательной среде используют для заражения культуры клеток. Заражать последнюю можно и цельной кровью. Вирус от больных животных можно выделить прижизненно из пунктата предлопаточных лимфоузлов в инкубационный период за сутки до начала лихорадки, а затем на всем протяжении болезни. Лимфоузлы и селезенку можно хранить при -20°С в течение 60 дн, при -40°С - 6 мес, при 2-4°С - не более 7 дн. В кусочках размером 1-2 см, помещенных в 10%-ный NаС1, вирус сохраняется при 2°С 15-30 дн. Вируссодержащая нитратная кровь в условиях комнатной температуры сохраняет активность 4-6 дн, при 5°С - 1 нед, при 0°С - 3-4 нед. В лиофильно высушенном материале, находящемся в ампулах под вакуумом при -20°С, вирус выживает более 5 лет, а при 2-4° С - не менее 1 года. При лиофилизации в качестве стабилизатора в суспензию добавляют 2% глюкозы и 5% пептона.
Лабораторная диагностика
Индикацию вируса проводят путем обнаружения вирусного антигена в патологическом материале; обычно применяют серологические реакции — РИФ, ИФА, ВИЭОФ, РСК, РДП, РИГА; для обнаружения вирусной нуклеиновой кислоты — ПЦР; для обнаружения и выделения инфекционной активности вируса проводят заражение первичной культуры клеток почки теленка или эмбриона крупного рогатого скота. За культурой наблюдают 9—18 дней. На положительный результат указывает характерный цитопатический эффект (гигантские многоядерные клетки). В зараженных клетках выявляют тельца-включения (цитоплазматические и внутриядерные).
Провести индикацию и идентификацию вируса чумы крупного рогатого скота можно биопробой на иммунном и неиммунном скоте. Для этого двух молодых животных вакцинируют вакциной из штамма ЛТ; через 12 дней вакцинированных и двух невакцинированных животных заражают подкожно испытуемым материалом (кровь или 10—20%-ная суспензия селезенки и лимфатических узлов от больных животных). При наличии у невакцинированных характерных клинических признаков болезни и отсутствии таковых у иммунных животных биопроба считается положительной. У заболевших животных обнаруживают специфические антигены в серологических реакциях (РИФ, РСК, РДП, РИГА и др.).
Устойчивость возбудителя
Вирус чумы рогатого скота не обладает стойкостью против внешних физических воздействий; он легко разрушается также и под влиянием химических веществ. Сохранение в лабораторных условиях вирулентной крови и содержащих вирус органов больного животного удаётся лишь в течение немногих дней. Через 3 - 4 дня болезнетворность вируса при комнатной температуре исчезает; немногим больше она удерживается после консервирования на леднике, как это наблюдалось нами в Ставропольской ветеринарной лаборатории в 1919 - 1922 гг. Температура термостата (37 - 38°) и высушивание способствуют гибели вируса в ещё более короткие сроки. Солнечный свет разрушает вирус за 5 часов. Обёрнутые влажной бумагой, зарытые в землю хорошо закрытые пробирки с вирулентным материалом сохраняли патогенные свойства не свыше 7 дней.
Более длительно вирус чумы остаётся действенным в солёном мясе и мясном соке. Из здоровых животных, заражённых мясом чумных животных в 25% растворе поваренной соли после 28 дней хранения, три заболели тяжело и одно легко. В костном мозге, при нахождении в земле костей от чумных животных, вирус оказывается живым даже через 30 дней. В то же время разведённые водой моча и кал от больных животных разбрызганные по траве на пастбище, уже через 36 часов не заражали здоровых животных. Экстракты из селезёнки, печени и лимфатических желез чумных животных в 1% растворе карболовой кислоты не теряют своей вирулентности. Цитрированная вирулентная кровь в запечатанных пробирках, ёмкостью около 40 мл, при 6 - 7° С сохраняла свои вирулентные свойства до 51/2 месяцев.
Многие авторы установили, что засоленные и высушенные в тени кожи от чумных животных становятся незаразными по истечении 24 - 48 часов.
Слабые разведения извести (1%), глицерин и сулема (1 : 1000) быстро уничтожают вирус.
Особенности специфической профилактики и иммунитет
Иммунитет и специфическая профилактика
Восприимчивость различных видов животных. Кроме крупного рогатого скота, который восприимчив к чуме независимо от расы, возраста и пола, к искусственному заражению чувствительны также овцы и козы. Последние, по наблюдениям в Турции, заражаются и естественным путём при контакте с больным крупным рогатым скотом.
Неоднократные попытки заражения свиней вирусом чумы рогатого скота оказались безуспешными. Восприимчивость буйволов и их естественное заболевание чумой наблюдались много раз в Закавказье (1901 - 1902 гг.). Установлена восприимчивость к чуме верблюдов, оленей, антилоп, яков, газелей и различных видов диких козлов.
Остальные домашние животные совершенно нечувствительны к чуме рогатого скота. Морские свинки и белые мыши не заражаются чумой.
В 1938 г. появилась работа,, которая говорит о восприимчивости кроликов к вирусу чумы, происходившему от телёнка (вирулентная кровь). Вирус пассажировали на кроликах без ограничений, причём выяснилось, что 81,3% опытных животных были инфицированы; у большинства из них обнаруживалось повышение температуры на 1 - 2° в течение 24 - 48 часов. После убоя кроликов находили в пейеровых бляшках мелкие сероватые узелки, которые при гистологическом исследовании оказывались закрытыми фолликулами, подвергшимися некрозу.
Степень восприимчивости отдельных рас крупного рогатого скота к чуме изучали многие исследователи, причём некоторые склонны думать, что улучшенные породы скота более восприимчивы к чуме и заболевают тяжелее, чем украинский степной скот и другие простые породы. Но при искусственном заражении украинские волы так же тяжело заболевают чумой, как и красный степной скот или помеси симменталов. Поэтому правы те исследователи, которые объясняют разницу в восприимчивости не расовыми особенностями и изнеженностью или грубостью пород скота, а лишь их длительностью пребывания в инфицированной, или, наоборот, в благополучной по чуме среде.
В Закавказье, где чума свирепствовала долгие десятки лет, часто тяжело заболевало и гибло от чумы лишь 10 - 20% скота, тогда как в заново возникавших очагах чумы смертность достигала 80% и более.
Коровы передают иммунитет по наследству своим телятам. Однако в литературе имеются наблюдения, что и телята, происходящие от коров, никогда не болевших чумой, также обнаруживают временный, преходящий иммунитет.
Источники инфекции и пути её распространения. Основным источником инфекции служит больное животное, выделяющее заразное начало с секретами и экскретами: носовым истечением (в острый период болезни), мочой и в особенности с калом, с кровью, спинномозговой жидкостью, желчью, слюной и смывом слизи с брюшных покровов. Опыты непосредственного контакта больного и здорового животных в специальном стойле неизменно приводили к заболеванию восприимчивых животных. Вторичные источники инфекции: загрязнённая заразным началом вода, стойла, фураж, подстилка, навоз, кровь, мясо, кожа больных чумой животных, трупы павших хотя и могут сохранять заразное начало при известных условиях до 30 дней, но практическое значение их в распространении инфекции незначительно. В частности, кожа при температуре Ю - 20°С утрачивает вирулентность через 2 недели. Высыхание обезвреживает кожи в 2 суток. Роль людей и невосприимчивых животных в качестве передатчиков заразы не исключается, но перед непосредственным контактом также отступает на второй план. Давным давно отмечено, что простое отделение больных, животных от здоровых стеной или глубокой канавой предупреждает передачу инфекции. Отсюда следует, что и аэрогенное заражение инфицированным воздухом не имеет значения в разносе чумы. По-видимому, инфекция проникает в организм, главным образом, per os.
Можно подтвердить первостепенное значение непосредственного контакта и совершенно незначительную роль вторичных посредников в передаче инфекции личными наблюдениями над чумой рогатого скота в Закавказье (1901 - 1902 гг.) и Ставропольской губернии (1919 - 1922 гг.). Достаточно своевременно изъять в заражённой местности животных-вирусо-носителей, чтобы обеспечить исчезновение чумы и быстрое снятие карантина.
Некоторые авторы подчёркивают, что больные животные выделяют особо вирулентное и контагиознее заразное начало преимущественно в период лихорадки и при падении температуры. Нужно отметить также, что в отдельных случаях более устойчивые экземпляры сравнительно легко справляются с инфекцией; у них замечается лишь подъём температуры и едва заметные изменения в ротовой полости. Всё же эти животные могут служить источником заразы.
Насколько серьёзно значение длительного вирусоносительства при чуме, остаётся под вопросом.
Отдельные авторы предостерегают от опасности распространения чумы выздоровевшими коровами, у которых остаётся' хронический вагинит (вагинальное истечение оказалось вирулентным) и хроническая диаррея. Однако подобные случаи вируеоносительства очень редки.
Мровка и Шерн отметили, что среди переболевших чумой животных имеются такие, у которых в сычуге длительно остаются эрозии и язвы, сохраняющие жизнеспособное вирулентное заразное начало. Эти по внешнему виду здоровые животные будто бы способствуют иногда возникновению неожиданных вспышек эпизоотии в совершенно здоровых до этого стадах, куда такие животные попадают случайно. Шерн сообщает даже об эксперименте, поставленном им в Турции на специально выписанных из совершенно благополучной европейской местности 3 головах скота, которые были искусственно зпражены содержимым сычуга от подозреваемого в длительном вирусоносительстве животного. Оказалось, что это клинически здоровое животное ещё через 101 день после перенесённой болезни содержало вполне жизнеспособный вирус, которым Шерн с успехом инфицировал одно из упомянутых совершенно здоровых животных. Многие авторитетные исследователи отнеслись к наблюдениям Мровка и Шерна скептически и подвергли их критике.
Указания, что значительную роль в распространении заразы может играть сырое мясо от прирезанных чумных животных, допущенное в обращение и в пищу людям (промывные воды, кухонные отбросы), мы не можем подтвердить личными наблюдениями, хотя совершенно исключить этот путь разноса чумы также нет оснований (солёное мясо консервирует вирус).
Распространение чумы происходит обычно довольно медленно; при стойловом содержании заражаются животные, стоящие по соседству с больными; на пастбище инфекция прогрессирует ещё медленнее.
Иммунизация
Защитные свойства сыворотки животных, переболевших чумой, были впервые установлены русскими исследователями Земмером, Ненцким, Зибер-Шумовой и Выжникевичем.
Первые опыты искусственной гипериммунизации животных для добывания противочумной сыворотки были поставлены сначала в Институте экспериментальной медицины, затем Джунковским с сотрудниками на Зурнабадской противочумной станции в Закавказье. В то же приблизительно время метод гипериммунизации был разработан в Африке. Успешные результаты лечения начальной стадии чумы сывороткой отмечены русскими исследователями и за рубежом. Автор настоящего руководства также принимал участие в получении гипериммунной сыворотки в 1902 г. в Закавказье и позже, в 1919 - 1922 гг., в Ставрополе.
Пассивные прививки одной сывороткой. Методы получения активной противочумной сыворотки представляют некоторое разнообразие, хотя сущность дела сводится к подбору молодых и крепких животных, способных к энергичной продукции антител. Одни авторы применяют гипериммунизацию вирулентной чумной кровью в постепенно нарастающих дозах, другие - после создания основного иммунитета вводят сразу очень большие дозы вирулентной крови. Некоторые считают слишком большую дозировку вируса (чумной крови) бесполезной, так как она будто бы не стимулирует особо интенсивной выработки защитных свойств.
Гипериммунная сыворотка создаёт у здоровых животных кратковременный пассивный иммунитет. Одни определяют длительность его в 10, другие в 16 или даже в 21 - 28 дней.
По Колле и Турнеру, большими дозами сыворотки (100 - 200 мл) можно будто бы сообщить иммунитет на 4 - 6 месяцев. Мы лично в Ставрополе наблюдали у одной коровы заболевание натуральной чумой уже через 10 дней после предохранения сывороткой. Во всяком случае, пассивный иммунитет нужно считать кратковременным.
Предохранительные прививки одной гипериммунной противочумной сывороткой применялись в различных местах в довольно широком масштабе,
но результаты были не одинаково успешны.
В восточной Индии (1906 - 1908 гг.), а также в восточной Бенгалии (1907 - 1909 гг.) отход после массовых прививок противочумной сывороткой едва превышал 1%, т. е. результаты были хорошими. В Закавказье прививки одной противочумной сывороткой практиковались примерно в тех же годах (1905 - 1909 гг.), но не дали положительного эффекта. Подобные же неудачи пассивной иммунизации отмечены и на Филиппинских островах.
Безуспешность прививок одной сывороткой объясняют чрезвычайной породной чувствительностью крупного рогатого скота и буйволов, чего совершенно нельзя сказать относительно тех же животных в Закавказье. В других случаях неудачи приписывались разнице в действии сывороток на различные породы скота. Так, например, при последней вспышке чумы крупного рогатого скота в Бельгии противочумная сыворотка, полученная из Египта (1920), не защищала от чумы немецкий и бельгийский скот.
Несмотря на противоречивые результаты, мнения различных исследователей сходятся на том, что в известных случаях применение одной сыворотки вполне целесообразно.
Использование сыворотки показано при иммунизации молочных и стельных коров, а также во всех случаях, когда рогатый скот можно считать уже заражённым. Пассивная иммунизация уместна в таких странах, местностях и стадах, которые поражены болезнями крови (гемоспоридиозы), так как опыт показал, что латентные инфекции причиняют большие потери при симультанных прививках (введение вируса одновременно с сывороткой и активное переболевание). Указывают на практическую выгодность сывороточных прививок в тех случаях, когда животные направляются в местности, поражённые чумой, с целью транзита или временного пребывания, когда нужно создать защитную кольцевую зону вокруг чумного очага, находящегося на исходе инфекции, когда явно больные животные уничтожены и опасность новых вспышек чумы предупреждена.
|
Скачать 53.24 Kb.