токсика журнал 4 курс. Занятие 1 Дата составление плана химикотоксикологического исследования
 Скачать 3.44 Mb.
|
|
ИССЛЕДОВАНИЕ ВЫТЯЖЕК. ЦЕЛЬ:__________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ ОСНОВНЫЕ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ, ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ЦЕЛЕВЫХ ВИДОВ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ: 1. Токсическое действие метаболизм. 2. Особенности изолирования. 3. Анализ. 3.1 Предварительные реакции. 3.2. Подтверждающие реакции. Обязательные источники информации 1. Крамаренко В.П. Токсикологічна хімія .- Київ: ”Вища школа ”, 1989.-С. -393-408. 2. Токсикологічна хімія в схемах і таблицях/– Харків -: ”Золоті сторінки ” ,2005г.С. 36-41. 3. Токсикологічна хімія: Конспект лекцій: Навч. посіб. для студ. вищ. фармац. закл. III-IV рівнів акредитації / В.С. Бондар, О.О. Маміна, С.А. Карпушина иа ін.–Х.: Вид-во НФАУ; Золоті сторінки, 2002.-С 69-82. 4. Лекции по токсикологической химии. Целевые обучающие задания 1. Заполните схемы и таблицы Классификация пестицидов По назначению По стойкости По токсичности По способу проникновения в организм По химическому строению СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПЕСТИЦИДОВ ФОС ХОС Производные карбаминовой кислоты Перетроиды Физико- химические свойства Пути попадания в организм Поведение в организме Метаболизм Токсическое действие Выделение Изолирование Отдельные представители пестицидов Производные хлорорганических соединений (ХОС) ДДТ ГХЦГ Гептахлор Производные фосфорорганических соединений (ФОС) Хлорофос Метафос Карбофос Производные карбаминовой кислоты Карбарил (севин) Карбофуран Пропоксур Производные циклопропанкарбоновой кислоты (перетроиды) Алетрин Децис ОБЩАЯ СХЕМА СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ПЕСТИЦИДОВ Схема исследования вытяжки на хлорофос Хлорофос предварительные подтверждающие Объекты исследования Изолирование Очистка, выделение, концентрирование Идентификация ядов Количественное определение Подготовка объектов Инструкция к практической работе: 1. Подготовительный этап: выполните химические реакции, используемые при исследовании дистиллятов на фенол, уксусную кислоту, изоамиловый спирт, этиленгликоль, тетраэтилсвинец Результаты опытов занесите в таблицу. Химизм реакций Наблюдения Химико- токсикологическая оценка реакции Химическое исследование хлорофоса Обнаружение фосфат-ионов Методика. В пробирку вносят 3-5 капель минерализата и прибавляют 5 капель раствора молибдата аммония. Смесь подкисляют 10% раствором кислоты нитратной. К этому раствору прибавляют 3-5капель насыщенного раствора гидрохлорида бензидина. Затем прибавляют 10% раствора аммиака до щелочной реакции (по лакмусу). Гидроперекисная проба Методика. К смеси 0,5 мл 2,5% ацетонового раствора бензидина и 2 мл свежеприготовленной перекиси водорода в щелочной среде, прибавить 2 мл испытуемой жидкости. Реакция Фудживара В пробирку вносят 1мл исследуемого раствора, 1мл пиридина и 1мл 30% -го раствора гидроксида натрия. Смесь нагревают на кипящей водяной бане 5мин. Реакция с ацетоном. Методика. В пробирку вносят 0,1-0,5 мл раствора исследуемого вещества в этиловом спирте, прибавляют 1 мл ацетона и 0,5мл 0,5н. спиртового раствора гидроксида натрия. При наличии хлорофоса в пробе через5-15 мин появляется розовая окраска, переходящая в оранжевую Реакция с реактивом Несслера Методика. К0,5 мл исследуемого раствора прибавляют 2-3 капля реактива Несслера, перемешивают жидкости. Реакция со щелочным раствором резорцина Методика. К 0,5-1 мл исследуемой воды прибавить равное количество смеси, состоящей из 1%раствора резорцина и 10% раствора гидроксида натрия, приготовленной перед употреблением. Реакция образования изонитрила Методика. В пробирку вносят 0,01-0,03г исследуемого вещества и 1мл этилового спирта. Смесь взбалтывают, затем прибавляют 2мл 10%-го спиртового раствора гидроксида натрия и 1 каплю анилина. При нагревании смеси ощущается характерный запах изонитрила. Реакция неспецифична. Реакция с о-толуидином Методика. В фарфоровую чашку вносят 0,2-0,5мл водного или спиртового раствора исследуемого вещества, 1мл 0,5%-го раствора о-толуидина в ацетоне и 1мл смеси растворов пероксида водорода и гидроксида натрия. В присутствии хлорофоса появляется желтая или оранжевая окраска. Эту реакцию дают метафос, тиофос. Реакция с 2,4-динитрофенилгидразином. Методика. В пробирку вносят 1-10 капель исследуемого раствора и 2 капли 1н. раствора гидроксида натрия. Через 20 мин. прибавляют 1 каплю 0,1%-го раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 4 н. растворе соляной кислоты. Пробирку выдерживают в кипящей водяной бане 30 мин. После этого смесь охлаждают, прибавляют 1 каплю 4н. раствора гидроксида натрия и 0,5 мл этилового спирта. При наличии хлорофоса в пробе появляется синяя или сине- фиолетовая окраска. Биохимическая проба. Методика: берут две пробирки. В одну пробирку добавляют 1мл исследуемого раствора, в другую 1мл чистой воды (дважды перегнанной). В обе пробирки добавляют по каплям раствора холинэстеразы и перемешивают и далее по одной капле индикаторно-буферного раствора бромтимолового синего. Сравнивают окраску в пробирках. Исследование хлорофоса методом хроматографии в тонком слое сорбента (ТСХ) На пластинку «Силуфол» наносят каплю исследуемого экстракта и каплю раствора-«свидетеля». Пластинку помещают в хроматографическую камеру с системой растворителей гексан-ацетон (1:1). Высушивают и проявляют свежеприготовленной смесью растворов 2%резорцина и 10 % натрия карбоната (2:3). 2. Контрольный этап: Выданный раствор исследуют на содержание пестицидов. По результатам проведенного исследования заполняют таблицу и делают вывод о наличии указанных ядов в образце. Проводимые действия Наблюдаемые результаты Вывод_______________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ Подпись преподавателя_____________________ ЗАНЯТИЕ № 16 Дата____________ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ЯДОВИТЫХ ВЕЩЕСТВ, КОТОРЫЕ НУЖДАЮТСЯ В ОСОБЫХ МЕТОДАХ ВЫДЕЛЕНИЯ, ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА УГАРНОГО ГАЗА, ОСОБЕННОСТИ ЕГО ВЫЯВЛЕНИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ В ОРГАНИЗМЕ ЛЮДЕЙ. ЦЕЛЬ:__________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ ОСНОВНЫЕ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ, ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ЦЕЛЕВЫХ ВИДОВ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ: 1. Определение СО. 1.1. Физико-химические свойства 1.2. Токсикологическое значении 1.3. Обнаружение и определение оксида углерода 1.3.1. Газохроматографический метод 1.3.2. Химический метод 1.3.3. Спектороскопический метод 1.4. Оценка результатов химико-токсикологичного анализу. Источники информации 1. Крамаренко В.П. Токсикологічна хімія .- Київ-: ”Вища школа”, 1995.-С. 3-33. 2. Токсикологічна хімія в схемах і таблицях/– Харьків -: ”Золоті сторінки” , 2005г.С. 3-13. 3. Лекции по токсикологической химии. Целевые обучающие задания: Химические методы исследования Кровь, содержащая карбоксигемоглобин, от прибавления определенных реактивов не изменяет или незначительно изменяет свою окраску, анормальная кровь, не содержащая карбоксигемоглобина, под влиянием этих реактивов значительно изменяет свою окраску. Химические реакции для обнаружения в крови корбоксигемоглобина Название пробы Реактив Окраска крови содержащей НbCo Окраска контрольного опыта крови Гоппе-Зейлера Сальковского-Катаяма Хорошкевича-Маркса Сидорова Бюркера Ветцеля Либермана Рубнера Залесского ИНСТРУКЦИЯ К ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЕ 1. Подготовительный этап: выполните химические реакции, используемые при исследовании Методика исследований Спектральное исследование крови Подлежащую исследованию кровь разбавляют водой до тex пор, пока не будет получен раствор, имеющий светло-розовую окраску. При спектроскопическом исследование этого раствора четко видам соответствующие спектральные полосы. Спектр оксигемоглобина крови имеет две полосы поглощения между линиями Фраунгофера D и Е при длинах волн 577-589 и 536-556 им. Спектр карбоксигемоглобина имеет две полосы поглощения при длинах волн 564-579 и 523-536 нм. После прибавления одного объема свежеприготовленного раствора сульфида аммония или других восстановителей (гидразингидрат, дитионит натрия и др.) к 4 объемам водного раствора исследуемой крови оксигемоглобин превращается в дезоксигемоглобин, который имеет одну широкую полосу поглощения при 343-596 нм.Карбоксигемоглобин не восстанавливается сульфидам аммония и другими восстановителями. Поэтому после прибавления восстановителей полосы поглощения карбоксигемоглобина не исчезают. Подпись преподавателя_____________________ |