токсика журнал 4 курс. Занятие 1 Дата составление плана химикотоксикологического исследования
 Скачать 3.44 Mb.
|
|
ЗАНЯТИЕ № 1 Дата___________ СОСТАВЛЕНИЕ ПЛАНА ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ЦЕЛЬ:__________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ ОСНОВНЫЕ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ, ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ЦЕЛЕВЫХ ВИДОВ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ: 1. Предмет и задачи токсикологической химии, связь с другими дисциплинами 2. Яды и их классификация. 3. Интоксикации и их классификация. 4. Права и обязанности судебно-медицинского токсиколога 5. Объекты химико-токсикологического анализа. 6. Правила проведения судебно-токсикологической экспертизы. 7. Основные документы судебно-токсикологической экспертизы. 8. Предварительные испытания. 9. Составление плана судебно-токсикологической экспертизы. Источники информации 1. Крамаренко В.П. Токсикологічна хімія .- Київ-: ”Вища школа”, 1995.-С. 3-33. 2. Токсикологічна хімія в схемах і таблицях/– Харьків -: ”Золоті сторінки” , 2005г.С. 3-13. 3. Лекции по токсикологической химии. Целевые обучающие задания: 1. Заполните пропущенные места в схемах. Т О К С И К О Л О Г И Ч Е С К А Я Х И М И Я Лабораторный экспресс-анализ острых интоксикаций Анализ остаточных количеств пестицидов Санитарно химический анализ Судебная химия изучает изучает изучает изучает СПОСОБЫ КЛАССИФИКАЦИИ ТОКСИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ КЛАССИФИКАЦИЯ ЯДОВ В ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОМ АНАЛИЗЕ. (впишите методы изолирования названных групп ядов) «Металлические» яды Пестициды «Лекарственные» яды Соли, щелочи, кислоты Фториды Угарный газ, сероводород. ХИМИЧЕСКАЯ основана на примеры ПРАКТИЧЕСКАЯ основана на примеры ГИГИЕНИЧЕСКАЯ основана на примеры ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ основана на примеры по «ВЫБОРОЧНОЙ ТОКСИЧНОСТИ» основана на примеры «Летучие» яды 2. Впишите перечисленные действия судебно-медицинского токсиколога в соответствующие колонки таблицы. Давать объективные заключения; следить за сохранением биоматериала; знакомиться с материалами дела; иметь специальную подготовку; проводить экспертизу по запросу органов дознания, следствия и охраны здоровья; не разглашать данных предварительного следствия; возбуждать ходатайство о предоставлении дополнительных данных; быть присутствующим на допросе; отказываться от проведения экспертизы в случае личной заинтересованности. Судебно-медицинский токсиколог ИМЕЕТ ПРАВО ОБЯЗАН 3. Вставьте пропущенные названия документов в схему. КНИГА АКТОВ, РЕГИСТРАЦИННЫЙ ЖУРНАЛ, РОБОЧИЙ ЖУРНАЛ, Основания для експертизы: требование органов дознания, следствия и суда; направление судебно-медицинских экспертов. Регистрация объекта Внешний вид упаковки объекта Проверка соответствия объекта, поступившего на исследование Знакомство с материалами дела (история болезни, акты судебно-медицинских експертов.) Регистрация объекта Регистрация объекта Внешний вид упаковки объекта Проверка соответствия объекта, поступившего на исследование Знакомство с материалами дела (история болезни, акты судебно-медицинских експертов.) Инструкция к лабораторной работе: Этап №1 Наружный осмотр 1. Установить консистенцию и морфологический состав объекта; 2. Установить наличие консерванта; 3. Установить запах и цвет объекта; 4. Отметить наличие инородных включений. 5. На основании выполненных исследований заполнить таблицу №1. № объекта Запах Цвет Морфологический состав объекта Наличие консерванта Инородные включения Этап № 2 Предварительные испытания объекта 1. Проведите исследование выданных вам образцов по приведенному алгоритму (Приложение 1) и в соответствии с приведенными методиками (Приложение 2). 2. На основании проведенных исследований заполните таблицу № 2 Таблица №2 Номер объекта рН объекта Едкие щелочи Карбонатные щелочи Аммиак Сероводород Химизм и оценка результатов. Вопросы к лабораторной работе: ___________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ ________________________________________________________ Общий вывод: ___________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ Подпись преподавателя ___________________________ Приложение 1 АЛГОРИТМ ПРОВЕДЕНИЯ ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫХ ИСПЫТАНИЙ ОБЪЕКТА Приложение 2 Определение реакции среды объекта Методика: небольшое количество объекта смешивают в пробирке с равным количеством дистиллированной воды. Часть водной вытяжки с помощью стеклянной палочки наносят на универсальную индикаторную бумажку. На другую бумажку наносят каплю дистиллированной воды (контрольная проба). Химико-токсикологическая оценка результатов: кислая реакция объекта исключает исследования на наличие в объекте щелочей, щелочная – кислот. Сильнокислая среда (рН 1-3) может быть вызвана наличием минеральных кислот или большого количества органических кислот, введенных извне, щелочная среда- наличием едких щелочей, аммиака, карбонатами и силикатами, солями слабых кислот и сильных оснований (цианида, нитрата и др.). Отличие едких щелочей от карбонатных Методика: 1-2 мл водного извлечения со щелочной средой помещают в пробирку. Прибавляют 1-2 кап спиртового раствора фенолфталеина (1:1000)- образуется розовое окрашивание, после чего добавляют раствор бария хлорида и взбалтывают: окраска может исчезнуть или сохраниться. Химико-токсикологическая оценка результатов: если окраска раствора сохраняется, то среда обусловлена наличием свободных гидроксильных групп, если исчезает и образуется белый осадок- то карбонатами или силикатами. Испытание на наличие аммиака и сероводорода Методика: объект щелочной реакции помещают в пробирку, закрывают корковой пробкой, к нижней поверхности которой прикреплены три бумажки: влажная красная лакмусовая; бумажка смоченная раствором меди сульфата и бумажка смоченная раствором свинца ацетата. При испытании можно наблюдать изменение окраски всех трех бумажек или только двух (медной и лакмусовой). Химико-токсикологическая оценка результатов: при изменении цвета всех трех бумажек можно сделать вывод о том, что в объекте содержится аммиак и сероводород, образовавшееся в процессе гниения биологического материала. При изменении цвета медной и лакмусовой бумажек можно предположить наличие введенного в объект аммиака. 1. Определение pH среды щелочная нейтральная кислая 2. Отличие едких щелочей от карбонатных едкие карбонатные 3. Наличие амика и сероводорода ДА НЕТ 1 ЗАНЯТИЕ № 2 Дата___________ Токсикологическая характеристика и методы выделения металлов. Дробный метод анализа для осадка в минерализате ЦЕЛЬ:__________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ ОСНОВНЫЕ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ, ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ЦЕЛЕВЫХ ВИДОВ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ: 1. Общая характеристика группы «металлических» ядов (применение в народном хозяйстве; пути попадания в организм; объекты судебно-токсикологического анализа; предельно допустимые концентрации). 2. Основные закономерности поведения в организме. 3. Общая схема судебно-химического анализа «металлических» ядов. 4. Современные методы минерализации. 5. Сущность и значение денитрации. 6. Методы определения в минерализате свинца и бария (исследование осадков на наличие свинца и бария; определение ионов свинца и бария). Обязательные источники информации 1. Крамаренко В.П. Токсикологічна хімія .- Київ-: ”Вища школа”, 1995.-С. 283-323. 2. Токсикологічна хімія в схемах і таблицях/– Харьків : ”Золоті сторінки”, 2005г. с.98-107. 3. Лекции по токсикологической химии. 4. Методики проведения минерализации (Приложение 1) Целевые обучающие задания 1. Заполните пропущенные места в схемах и таблицах ОБЪЕКТЫ СУДЕБНО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА НА «МЕТАЛЛИЧЕСКИЕ ЯДЫ» ЯДЫ ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Ненаправленное исследование Все «металлические яды» Направленное исследование (дополнительно) Соединения ртути Соединения свинца Тетраэтилсвинец Соединения таллия Соединения мышьяка ПУТИ ПОПАДАНИЯ «МЕТАЛЛИЧЕСКИХ ЯДОВ» В ОРГАНИЗМ П у т ь п р о н и к н о в е н и я « М е т а л л и ч е с к и е » я д ы Желудочно-кишечный тракт Органы дыхания Кожа Слизистые оболочки и плацента 2 ОБЩАЯ СХЕМА СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА «МЕТАЛЛИЧЕСКИХ» ЯДОВ ОБЩИЙ МЕТОД МИНЕРАЛИЗАЦИИ СМЕСЬЮ КИСЛОТ АЗОТНОЙ И СЕРНОЙ Подготовка объекта Деструкция Разрушение жиров Проверка полноты минерализации Денитрация (полнота денитрации) реакции Охлаждение и разведение водой Осадок Минерализат Указать катионы Объекты исследования Изолирование Очистка, выделение, концентрирование Идентификация ядов Количественное определение 3 ИССЛЕДОВАНИЕ ОСАДКА ИНСТРУКЦИЯ К ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЕ 1. Подготовительный этап: выполните химические реакции, используемые при исследовании минерализата на содержание ионов бария и свинца. Результаты опытов занесите в таблицу. Химизм реакций Наблюдения Химико- токсикологическая оценка реакции Обнаружение бария. Перекристаллизация из концентрированной серной кислоты. Крупинку влажного осадка помещают на предметное стекло, сушат на воздухе, после чего на остаток наносят 2-3 капли конц. серной кислоты и нагревают до появления белых паров. Не допускайте растекания серной кислоты. Стекло оставляют для высушивания на 10-20 мин. Форму кристаллов изучают под микроскопом. Реакция образования хромата бария. К 3-5 каплям иссл. раствора добавляют 4 капли 5 %-ного раствора дихромата калия. Затем по каплям добавляют 2н. р-р ацетата натрия до изменения цвета . С родизонатом натрия ОСАДОК:_________________________ Обработка горячим раствором ацетата аммония ФИЛЬТРАТ _________________ ОСАДОК _______________________ Предварительные исследования Предварительные исследования Подтверждающие исследования Подтверждающие исследования Реэкстракция 4 Обнаружение свинца. Реакция с дитизоном. В пробирку вносят 1-2 капли исследуемого раствора и добавляют 2 капли раствора дитизона в хлороформе. Смесь тщательно взбалтывают. Реакция с иодидом калия. В пробирку вносят 0,5 мл исследуемого раствора и несколько капель 5%-ного раствора иодида калия Реакция с хроматом калия К 0,5 мл исследуемого раствора добавляют 3-5 капель 5%-ного раствора хромата калия. Реакция с серной кислотой. К 0,5 мл исследуемого раствора добавляют 3-5 капель 5%-ного раствора серной кислоты. Образование сульфида свинца. К 0,5 мл исследуемого раствора добавляют 3-5 капель 5%-ного раствора сульфида натрия. Реакция с ацетатом меди и нитритом калия. На предметное стекло наносят 2-3 капли исследуемого раствора и выпаривают досуха. После охлаждения предметного стекла на сухой остаток наносят 1-2 капли 1%-ного р-ра ацетата меди и снова выпаривают досуха. На сухой остаток наносят 2-3капли 30%-ного раствора уксусной кислоты. На край полученного пятна наносят 1-2 кристалла нитрита калия. Определяют форму и цвет полученных кристаллов. 2. Контрольный этап: Выданный раствор осаждают серной кислотой исследуют осадок согласно составленной схеме «ИССЛЕДОВАНИЕ ОСАДКА» на наличие свинца и бария. По 5 результатам проведенного исследования заполняют таблицу и делают вывод о наличии в выданном растворе свинца и бария. Проводимые действия Наблюдаемые результаты Вывод______________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________ Приложение 1 Минерализация биологического материала смесью серной и азотной кислот Измельченную навеску биологического материала помещают в колбу Кьельдаля объемом 500мл. Затем на каждые 100 г объекта добавляют 75 мл смеси, состоящей из 23 мл концентрированной серной, 25 мл концентрированной азотной кислот и 25 мл воды. После прекращения вспенивания смеси колбу закрепляют в штативе и нагревают над асбестовой сеткой (на расстоянии 1-2 см) на голом огне до разрушения твердых комочков объекта и получения темной жидкости. Затем температуру нагрева усиливают, а в реакционную колбу добавляют по каплям нитратную кислоту (1:1) небольшими порциями до тех пор, пока содержимое не станет бесцветным или слегка желтоватым. После этого нагревают смесь без добавления азотной кислоты до появления густых белых паров окислов серы. Если жидкость при этом не темнеет, то разрушение заканчивают, в противном случае операцию разрушения объекта продолжают. После окончания минерализации жидкость охлаждают, переносят в стакан и проверяют наличие окислителей, смешивая каплю минерализата с каплей дифениламина в концентрированной серной кислоте. Синее окрашивание указывает на присутствие окислителей, которые разрушают формалином. Для этого минерализат разбавляют небольшим количеством воды (10-15 мл), нагревают до кипения, добавляют осторожно по каплям 0,5-1,0 мл формалина до прекращения выделения пузырьков газа. При необходимости операцию разрушения окислителей повторяют, после чего минерализат разбавляют водой до 180-190 мл. Минерализация биологического материала смесью серной, азотной и хлорной кислот. 100 г измельченной навески органа помещают в колбу Кьельдаля объемом 500мл , туда добавляют 25 мл воды, 25 мл концентрированной азотной кислоты, 25 мл концентрированной серной кислоты и 25 мл 42%-ого раствора хлорной кислоты в указанной последовательности. Далее проводят разрушение органических веществ, как описано выше. Минерализат, полученный одним из способов, оставляют на 18-20 ч при комнатной температуре. При образовании осадка его отфильтровывают и исследуют на свинец и барий (при грязно-зеленой окраске осадок дополнительно исследуют на хром). Минерализат (фильтрат после отделения сульфатов бария и свинца ) разбавляют водой до 200 мл и исследуют на марганец, хром, серебро, медь, кадмий, висмут, цинк, мышьяк, олово, таллий. Минерализация органических веществ методом сплавления с окислителем 1-2 г объекта смешивают со смесью карбоната и нитрата натрия (2:1) в количестве 4-6 г, затем смачивают водой и высушивают при нагревании на водяной бане. В тигле расплавляют 5-6 г нитрата 6 натрия. Уменьшив пламя горелки под тиглем, в последний вносят отдельными порциями полученную анализируемую смесь. После сгорания первой порции вносят вторую, затем третью и так до тех пор, пока не будут сожжены все порции смеси. После сжигания последней порции смеси посуду, в которой она находилась, "споласкивают" 2-3 г карбоната натрия, после чего эту порцию тоже сжигают. Во время сплавления следят за тем, чтобы не вспыхнуло пламя в тигле, для чего регулируют пламя горелки. Плав охлаждают и обрабатывают кипящей водой. Полученный раствор исследуют на "металлические" яды (мышьяк, серебро и некоторые другие, кроме ртути). Минерализация органических веществ методом сухого озоления Объект измельчают, высушивают на песчаной бане, затем при осторожном нагревании обугливают пробу. Остаток в тигле послеобугливания объекта смачивают концентрированным раствором нитрата аммония или концентрированной нитратной кислотой, высушивают на кипящей водяной бане и нагревают над слабым пламенем горелки (дно тигля не должно соприкасаться с огнем ). При необходимости.( неполное сгорание органических веществ - зола окрашена в черный или серый цвет ) содержимое тигля вновь смачивают концентрированным раствором нитрата аммония, высушивают и прокаливают. Содержимое тигля охлаждают, обрабатывают соляной кислотой ( при исследовании на марганец ) или азотной (при исследовании на медь), раствор фильтруют, фильтрат выпаривают на водяной бане досуха, остаток растворяют в 3-5 мл воды и подвергают анализу. Выделение ионов свинца Рb 2+ из минерализата После минерализации с помощью концентрированных серной и азотной кислот барий и свинец находятся в виде осадка сульфата бария и сульфата свинца, окрашенного в белый цвет. Осадок может быть также окрашен за счет соосаждения катионов хрома, железа, серебра. Осадок отфильтровывают, промывают 5 мл 1%-ного раствора серной кислоты H 2 SO 4 , а затем 5 мл воды (для удаления примесей сопутствующих ионов). Промывные воды присоединяют к основному фильтрату и объем жидкости доводят до 200 мл. Осадок обрабатывают горячим (кипящим) раствором ацетата аммония CH 3 COONH 4 . При этом осадок сульфата бария остается на фильтре, а осадок сульфата свинца переходит в раствор. PbSO 4 + 4 СН 3 СООNН 4 →[Pb(СН 3 СОО) 2 ·PbSО 4 ] |