Ботаническое и морфолого. Ботаническое и морфологоанатомическое описание полыни обыкновенной
 Скачать 39.51 Kb.
|
|
Ботаническое и морфолого-анатомическое описание полыни обыкновенной Полынь обыкновенная (Artemisia vulgaris L.) - многолетнее травянистое растение до 2 метров высоты, с цилиндрическим многоглавым корневищем и несколькими прямостоячими стеблями, образующими куст. Расположение листьев очередное. Листья эллиптические, перисторассеченные на крупнозубчатые или лопастные доли. Листья в соцветиях трех- или пятирассеченные; верхние: цельные, ланцетные. Жилкование сетчатое. Опушение сверху голые или негусто волосистые; с нижней стороны беловойлочные. Листья сверху зеленого, снизу серовато-белого цвета. Стебель ребристый, коротковетвистый, с густым опушением серовато-зеленого цвета. Цветки: продолговатые корзинки образующие метельчатое соцветие, листочки обертки по краю пленчатые, наружные яйцевидные, заостренные; внутренние длиннее, эллиптические, тупые. Строение цветка: краевые пестичные с узкотрубчатым венчиком; средние - обоеполые с 5 лопастями. Тычинок 5 с пыльниками. Пестик с нижней одногнездной завязью и 2 отогнутыми наружу рыльцами. Цвет красноватый. Цветет в июле - августе, плоды созревают в августе - сентябре [52,59,194]. Размножается семенами и вегетативно. В листьях - клетки эпидермиса с извилистыми стенками, эпидермис листа устьица аномоцитного типа с нижней стороны. Эфиромасличные железки в верхнем эпидермисе редко расположенные по листовой пластинке, в нижнем эпидермисе овальные. Характерны многочисленные Т-образные головчатые, простые и войлочные волоски [168,194,197]. Считается, что полынь обыкновенная происходит с востока Европы и запада Азии. В настоящее время распространена в умеренной климатической зоне по всему миру. Масло получают во Франции, в Марокко, Германии, Венгрии, Индии, Китае и Японии. Распространена в европейской части России, Западной и Восточной Сибири, Средней Азии и Казахстане. Растет на пустырях, в садах, огородах и посевах как сорняк, по лесным опушкам, вдоль дорог, по сырым кустарниковым местам, берегам рек. Народные названия полыни: чернобыль, бурьян, чернобыльник [52,54,194]. Химический состав травы полыни обыкновенной (Artemisia vulgarisl.) Полынь обыкновенная обладает сильным приятным пряным запахом. В траве полыни обыкновенной содержится эфирное масло (0,07-0,2%), в его составе: лимонен, терпинолен, фенхон, аромадендрен, тайиловый спирт, туйон (альфа и бетта), альфа-пинен, бета-пинен, камфора, альфа-копаен, альфа-гвайен, бета-кариофиллен, борнеол, кадинен, вульгарол [162], трициклен, камфен, альфа-терпинен, артемизмакетон, артемизиевый спирт, изоборнеол [141,197,198,249]. Тритерпеноиды: альфа-амирин, ферненол. Стероиды: бета-ситостерин, стигмастерин [52,53,54,244]. Аминокислоты: аргинин, гистидин, аспарагин, пролин, лизин, аланин, валин, глицин, изолейцин, [45,197,198], аспарагиновая кислота, метионин [114,115,116,231]. Фенолкарбоновые кислоты (не менее 0,5% в пересчете на хлорогеновую кислоту) [168]. Кумарины (1,2%): скополетин, умбеллиферон, императорин, эскулетин, ксантотоксол, кумарин [168,169,236]. Флавоноиды (не менее 0,5% в пересчете на рутин): кверцетин, кемпферол, изорамнетин, апигенин [64,86,87,114,196]. Углеводы: полисахариды, инулин, крахмал [64,114,115,184]. ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В данной главе приводятся описания методов, приборов и реактивов, использованных при выполнении экспериментальной части. 2.1. Объекты исследования Для изучения использовали лекарственное растительное сырье - трава полыни обыкновенной, полыни эстрагон, полыни горькой и шрот полыни горькой после получения настойки. Сбор сырья (трава) был проведен в течение 4 вегетационных периодов в окрестностях Белгородской области в июне-июле в фазу цветения растений. Собранное сырье до воздушно-сухого состояния подвергали воздушной сушке в естественных условиях при температуре 25-30°С, без доступа прямых солнечных лучей [142]. Шрот полыни горькой после получения настойки для исследования представлен Ярославской фармацевтической фабрикой (№ партии 8385/09). Объектом исследования служили липофильный комплекс, представляющий собой смесь каротиноидов, терпеноидов, хлорофилла, жирных кислот и других органических веществ (комплекс А) и ВПСК (комплекс В), полученные из шрота полыни горькой. 2.2. Методы исследования 2.2.1. Химические методы Обнаружение биологически активных веществ проводили с помощью специфических качественных реакций осаждения, окрашивания и комплексообразования, а также физико-химическими методами: бумажной, тонкослойной и высокоэффективной жидкостной хроматографии [38,40,43,44,46,63,79,80,144]. При проведении тонкослойной хроматографии использовали пластинки «Silufol» (UV, 366 Чехословакия), для бумажной хроматографии бумагу «Ленинградская №2», «Filtrak» Fn-1, Kisilgel 60 Art 5553. Пробы веществ (0,01-0,18мг) исходных извлечений в зависимости от чувствительности реактивов и концентрации соединений наносили с помощью микрокапилляров на расстоянии 1 см от края пластины. Из используемых нами систем растворителей чаще всего применялись следующие [19,35,65,111,143,170]: гексан - диэтиловый эфир (8:2); хлороформ - этанол (9:1); бензол - этанол (8:2); хлороформ - метанол (1:1); петролейный эфир - диэтиловый эфир (5:2); бензол - ацетон (9:1); 30% уксусная кислота; н-бутанол - уксусная кислота - вода (12:3:5), (4:1:2); хлороформ - бензол (1:2); бутанол - пиридин - вода (1:1:1); 95% этиловый спирт - раствор аммиака конц. (16:4,5); хлороформ - этилацетат - муравьиная кислота (5:4:1); хлороформ - метанол - вода (61:32:7). Хроматограммы рассматривали в дневном и УФ-свете до и после проявления реактивами. Для обработки хроматограмм нами использовались: 5%-ный спиртовый раствор алюминия хлорида; 10%-ный раствор гидроксида натрия; реактив Шталя; 0,25%-ный этанольный раствор нингидрина; раствор бромкрезолового зеленого; 0,5%-ный спиртовый раствор метилового-оранжевого. 2.2.2. Физико-химические методы - Спектрофотометрический метод применяли для качественной и количественной оценки сумм флавоноидов, каротиноидов и хлорофиллов. Спектрофотометрические исследования проводили на спектрофотометре СФ-2000 в кюветах с толщиной слоя 10 мм с использованием ионизирующих и комплексообразующих реагентов [56,112,113,132,158]. - Метод ВЭЖХ использовали для анализа качественного состава и количественного соотношения веществ спирто-водной фракции [36,91,136,143,240]. Исследования проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы «Waters» с последующей компьютерной обработкой результатов с помощью программы Мультихром для «Windows». Качественный состав и количественное содержание аминокислот также определяли с использованием метода ВЭЖХ [192] на автоматическом аминокислотном анализаторе Agilent 1200 Series. - Атомно-абсорбционная спектроскопия использовалась в анализе микроэлементного состава изучаемых видов сырья [190]. Исследования проводили на аппарате «Зенит 700». - Определение химического состава липофильной фракции проводили с помощью хромато-масс-спектрометрического метода анализа. Хромато-масс- спектрометрический анализ проводили на хромато-масс-спектрометре АТ- 5850/5973 AgillentTechnologies(CUIA). При разработке способа получения суммы биологически активных веществ применяли модифицированный метод дробной мацерации [117]. 2.3. Фармакологические методы 2.3.1. Определение острой токсичности Острую токсичность определяли на здоровых животных по методике [216]. С этой целью мышам внутрибрюшинно вводили комплекс А в дозах от 3 мг/кг до 15 мг/кг или комплекс В в дозах от 50 мг/кг до 250 мг/кг в 0,1 мл соответствующего растворителя. Наблюдение за животными проводили в течение 24 часов. 2.3.2. Определение анальгетической активности Исследование анальгетической активности комплексов А и В проводили на мышах с использованием методики «уксусных корчей» и модели формалиновой болевой реакции [37,188,253] . «Уксусные корчи» вызывали внутрибрюшинным введением 3% уксусной кислоты в дозе 300 мг/кг. В течение 20 минут после инъекции уксусной кислоты учитывали количество судорожных сокращений брюшных мышц. Формалиновую болевую реакцию вызывали введением мышам под кожу спинки 25 мкл 0,5% раствора формалина. Оценку активности исследуемого комплекса проводили подсчитыванием числа болевых реагирований - облизывания брюшка или спинки в течение первых 5 минут (I фаза) и от 15 до 20 минут (II фаза). Для изучения анальгетической активности комплекс А вводили внутрибрюшинно, однократно, в дозе 3 мг/кг, а комплекс В в дозе 50 мг/кг, в качестве препарата сравнения использовали анальгин в дозе 5 мг/кг. 2.3.3. Определение противовоспалительной активности Модель острого асептического воспаления воспроизводили введением в подушечку правой задней лапки 0,05 мл 3,5% раствора формалина на физиологическом растворе [175]. Результаты влияния комплексов А и В на тяжесть воспалительного отека оценивали через 24 часа после инъекции формалина по разнице масс воспаленных и контрольных лапок по отношению к весу животных. 2.3.4. Определение иммунометаболической эффективности Иммунометаболическую эффективность комплексов оценивали по антиоксидантной, иммуномодулирующей и протективной активностям [156]. Антиоксидантную активность комплексов А и В определяли вначале in vitro по методике[146,171,237]. Оценку антиоксидантной активности (АОА) и антиоксидантной способности (АОС) проводили по формулам 1 и 2:  гдеV1 - объем раствора определяемого комплекса, пошедшего на титрование калия перманганата, мл; "У*2 - объем раствора калия перманганата, мл; С - концентрация раствора определяемого комплекса, в %. Для оценки иммунометаболической активности комплексов in vivo опыты проводили на крысах массой 150-200 г и мышах СВА массой 19-21 г. Модель генерализованной стафилококковой инфекции воспроизводили путем заражения животных суточной агаровой культурой Staphylococcus aureus, приготовленной на 0,9% растворе натрия хлорида. Животных инфицировали внутрибрюшинной инъекцией предварительно оттитрованных доз стафилококка, содержащих 1x10 или 2x10 микробных тел (летальная доза) в объеме 0,1 или 0,5 мл, отдельным группам животных на фоне инфицирования вводили цефалексин в дозе 60 мг\кг. Для исследования использовали порошок цефалексина для приготовления инъекционного раствора, флаконы 1 г, Словакия, K.R.K.A. Для оценки антиоксидантной активности комплексов in vivo в сыворотке крови определяли концентрацию малонового диальдегида (МДА) [174], ацилгидроперекисей (АГП) [24], оценивали активность супероксиддисмутазы эритроцитов (СОД) [118]. Для определения влияния комплексов на развитие иммунного ответа у инфицированных стафилококком животных определяли интенсивность гуморального иммунного ответа (ГИО) по количеству антителообразующих клеток в селезенке (АОК) по методике [125] и выраженность гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) по разнице масс подколенных лимфатических узлов (РМЛ) и разнице количества кариоцитов (РКЛ) по методике [191]. ГИО индуцировали эритроцитами барана (ЭБ), которые вводили внутрибрюшинно, однократно, из расчета 1><109 клеток на 1 кг массы тела. Для индукции ГЗТ внутрибрюшинно вводили 1x10 ЭБ (сенсибилизирующая о доза). Через 4 суток в подушечку правой лапки вводили 1x10 ЭБ (разрешающая доза). Одновременно с введением ЭБ (для ГЗТ сенсибилизирующей дозы) внутрибрюшинно вводили комплексы А и В в количестве 3 мг/кг и 50 мг/кг соответственно. Наблюдение за инфицированными летальной дозой мышами проводили в течение 10 дней с момента инфицирования. На протяжении этого периода определяли выживаемость мышей в процентах по отношению к контролю. Для исследования биологической активности комплекс А растворяли в оливковом масле, а комплекс В в воде. 2.3.5. Статистическая обработка Статистическую обработку результатов проводили путем вычисления средних арифметических изучаемых показателей и их стандартных отклонений [14,15,16,17]. Существенность различий средних величин оценивали по критериям Стьюдента и Вилкоксона-Манна-Уитни при Ps 0,05 [46,47,48,58]. Botanika va morfolik-shuvoqning oddiy anatomik tavsifi Shuvoq oddiy (Artemisia vulgaris L.) - silindrsimon ko'p boshli rizomlar va butani tashkil etuvchi bir necha tik turadigan daraxtlar bilan 2 metr balandlikdagi ko'p yillik o'simlik. Barglarning joylashuvi keyingi. Barglar elliptik, peristorassechennye katta tishli yoki loblarda. Uch yoki besh qismli inflorescences barglari; yuqori: to'liq, lanceolate. Venatsiya mash. Yuqoridan pastdagi yalang'och yoki tuklarsiz tuklar; pastki tomonda oq-blokli. Yashil, quyuq kulrang-oq rangli barglar. Ildiz pushti, qisqa bo'yli, kulrang-yashil rangli qalin po'stlog'i bilan. Gullar: cho'zinchoq savat bir paniculate inflorescences hosil, barglari bir film chetiga o'raladi, tashqi ovate, o'tkir; ichki uzoq, elliptik, to'mtoq. Gulning tuzilishi: tor tirnoqli qirrali pestle; o'rta - 5 pichoqlar bilan biseksual. Anterlar bilan stamens 5. Pastki bir oyoqli tuxumdonli va 2 egilgan stigma bilan pestle. Rangi qizg'ish. Iyul - avgust oylarida gullar, mevalar avgust - sentyabr oylarida pishib etiladi[52,59,194]. Urug'lar va vegetativ ravishda ko'payadi. Barglarda-sariq devorlar bilan epidermis hujayralari, bargning epidermisi pastki tomonda anomositik tipdagi stoma. Yuqori epidermisdagi Eter-yog'li bezlar kamdan-kam hollarda barg plastinkasida, pastki epidermisda tasvirlar joylashgan. Ko'p t shaklidagi boshcha, oddiy va tukli tuklar [168,194,197] bilan ajralib turadi. Oddiy shuvoq Evropaning Sharqiy va Osiyo g'arbidan kelib chiqqan deb hisoblashadi. Hozirgi kunda butun dunyodagi mo " tadil iqlim zonasida keng tarqalgan. Yog ' Fransiya, Marokash, Germaniya, Vengriya, Hindiston, Xitoy va Yaponiyada ishlab chiqariladi. U Rossiya, G'arbiy va Sharqiy Sibir, Markaziy Osiyo va Qozog'istonning Evropa qismida keng tarqalgan. Cho'llarda, bog'larda, bog'larda va begona o'tlar kabi ekinlarda, o'rmon chekkalarida, yo'llar bo'ylab, xom buta joylarida, daryolar bo'yida o'sadi. Matbuoti, radioeshittirishi va teleko'rsatuvi. Shuvoqning kimyoviy tarkibi (Artemisia vulgarisl.) Oddiy shuvoq kuchli yoqimli baharatlı hidga ega. Limonen, terpinolen, fenchon, aromadendren, tayil spirtli, tuyon (alfa va betta), alfa-pinen, beta-pinen, kofur, alfa-kopain, alfa-guayen, beta-karyofillen, borneol, kadinen, vulgarol [0,07], trisiklen, kofen, alfa-terpinen, artemismaketon, alfa-pinen, alfa-pinen, camphinol, Artemisia spirtli, isoborneol [141,197,198,249]. Triterpenoidlar: alfa-amirin, fernenol. Steroidlar: beta-sitosterol, stigmasterin [52,53,54,244]. Amino kislotalar: arginin, histidin, asparagin, prolin, lizin, alanin, valin, glitsin, izoleitsin, [45,197,198], asparajin kislotasi, metionin [114,115,116,231]. Fenol karboksilik kislotalar (xlorogen kislotasi jihatidan kamida 0,5%) [168]. Q. da bir qancha gaz.va jur. lar nashr etiladi. Flavonoidlar (rutinga nisbatan kamida 0,5%): quercetin, kempferol, izoramnetin, apigenin [64,86,87,114,196]. Uglevodlar: polisakkaridlar, inulin, kraxmal [64,114,115,184]. II BOB. TADQIQOT MATERIALLARI VA USULLARI Ushbu bobda eksperimental qismni bajarishda ishlatiladigan usullar, asboblar va reagentlar tasvirlangan. 2.1. Tadqiqot ob'ektlari Dorivor o'simlik xom ashyosini o'rganish uchun - shuvoq o'ti, shuvoq shuvoq, shuvoq, shuvoq va shuvoqning achchiq yormasi damlamani olganidan keyin. Xom ashyo (o't) yig'ish o'simlik gullash bosqichida iyun-iyul oylarida Belgorod viloyati atrofida 4 vegetatsiya davrida bo'lib o'tdi. Havo-quruq davlat uchun to'plangan xomashyo to'g'ridan-to'g'ri quyosh nuri [142] kirish holda, 25-30°C haroratda tabiiy sharoitlarda havo quritish duchor bo'ldi. Tadqiqot uchun damlamani olganidan so'ng, shuvoqning achchiqligi Yaroslavl farmatsevtika fabrikasi (partiya raqami 8385 / 09) tomonidan taqdim etiladi. Tadqiqot ob'ekti lipofil kompleksi bo'lib, u karotenoidlar, terpenoidlar, xlorofill, yog ' kislotalari va boshqa organik moddalar (a kompleksi) va VPSK (b kompleksi) aralashmasidir. 2.2. Tadqiqot usullari 2.2.1. Kimyoviy usullar Biologik faol moddalarni aniqlash yuqori sifatli cho'kma, bo'yash va komplekslash reaktsiyalari, shuningdek fizik-kimyoviy usullar bilan amalga oshirildi: qog'oz, nozik qatlamli va yuqori samarali suyuq kromatografiya [38,40,43,44,46,63,79,80,144]. Qog'oz xromatografiya qog'oz "Leningrad №366", "Filtrak" Fn-2, Kisilgel 60 Art 5553 uchun yupqa qatlam kromatografisi ishlatiladigan plitalar "Silufol" (UV, 1 Chexoslovakiya) davomida. Moddalarning namunalari (0,01-0,18 mg) reagentlar sezuvchanligiga va birikmalar kontsentratsiyasiga qarab dastlabki ekstraktsiyalar plastinkaning chetidan 1 sm masofada mikrokapillyarlar yordamida qo'llanildi. Biz foydalanadigan hal qiluvchi tizimlardan eng ko'p ishlatiladigan [19,35,65,111,143,170]: - heksan-dietil efir (8:2); - xloroform-etanol (9:1); - benzol-etanol (8:2); - xloroform-metanol (1: 1); - neft Ester-dietil efir (5: 2); - benzol-aseton (9:1); - 30% sirka kislotasi; - n-butanol-sirka kislotasi-suv (12:3:5), (4:1:2); - xloroform-benzol (1:2); - butanol-piridin-suv (1: 1:1); - 95% etil spirt-ammiak eritmasi. (16:4,5); - xloroform-etil asetat-formik kislota (5:4: 1); - xloroform-metanol-suv (61:32:7). Kromatogramlar reaktivlar paydo bo'lishidan oldin va keyin kunduzgi va UV nurida ko'rib chiqildi. Kromatogramlarni qayta ishlash uchun biz foydalanganmiz: - 5% spirtli alyuminiy xlorid eritmasi; - 10% natriy gidroksidi eritmasi; - Stealning reaktivi; - 0.25% ning hidrin etanol eritmasi; - bromkrezol yashil eritmasi; -Metil-to'q sariq rangli 0,5% spirtli eritmasi. 2.2.2. Fizik-kimyoviy usullar - Flavonoidlar, karotenoidlar va xlorofilllarning summalarini sifatli va miqdoriy baholash uchun spektrofotometrik usul qo'llanildi. Spektrofotometrik tadqiqotlar SP-2000 spektrofotometrida ionlashtiruvchi va komplekslovchi reagentlar [10] yordamida 56,112,113,132,158 mm qatlam qalinligi bo'lgan küvetlarda amalga oshirildi. - HPLC usuli sifat tarkibini tahlil qilish uchun ishlatilgan va spirtli-suv fraktsiyasining moddalarining miqdoriy nisbati [36,91,136,143,240]. Tadqiqotlar yuqori samarali amalga oshirildi "Waters" kompaniyasining suyuq kromatografi, keyinchalik kompyuter "Windows"uchun Multikrom dasturi yordamida natijalarni qayta ishlash. Aminokislotalarning sifatli tarkibi va miqdoriy tarkibi ham HPLC [192] usuli yordamida avtomatik ravishda aniqlandi amino kislotalar analizatori Agilent 1200 seriyasi. - Tahlilda atomik absorbsion spektroskopiya ishlatilgan iz element tarkibi o'rganilayotgan xom ashyo turlari [190]. Tadqiqotlar "Zenit 700"qurilmasida amalga oshirildi. - Lipofil fraktsiyasining kimyoviy tarkibini aniqlash kromato-mass-spektrometrik tahlil usuli yordamida. Kromato-ommaviy- spektrometrik tahlil at kromato-mass-spektrometrida amalga oshirildi- 5850/5973 AgillentTechnologies(CUIA). Biologik faol moddalar miqdorini olish uchun bir usul ishlab chiqish kasr maserasyon [117] tahrirlangan usuli ishlatiladi. 2.3. Farmakologik usullar 2.3.1. O'tkir toksiklikni aniqlash O'tkir toksiklik [216] usuli bilan sog'lom hayvonlarda aniqlandi. Shu maqsadda sichqonlarga 3 mg/kg dan 15 mg/kg gacha bo'lgan dozalarda yoki 50 mg/kg dan 250 ml mos keladigan hal qiluvchi uchun 0,1 mg/kg gacha bo'lgan dozalarda intraperitoneal A kompleksi kiritildi. Hayvonlarni kuzatish 24 soat davomida amalga oshirildi. 2.3.2. Analjezik faoliyatni aniqlash A va B komplekslarining analjezik faolligini o'rganish sichqonlarda "sirka qobig'i" usuli va formalin og'riq reaktsiyasi modeli [37,188,253] yordamida amalga oshirildi . "Sirka qobig'i" 3 mg/kg dozasida 300% sirka kislotasining intraperitoneal kiritilishiga olib keldi. sirka kislotasining in'ektsiyasidan keyin 20 daqiqa davomida qorin mushaklarining konvulsiv kasılmalarının sonini hisobga oldi. Formalin og'riq reaktsiyasi 25 ml 0,5% formalin eritmasining orqa terisi ostida sichqonlarning kiritilishiga olib keldi. O'rganilayotgan kompleksning faoliyatini baholash birinchi 5 daqiqa (i faza) va 15 dan 20 daqiqagacha (II faza) qorin yoki orqa tomonni yalab, og'riq reaktsiyalari sonini hisoblash orqali amalga oshirildi. Analjezik faoliyatni o'rganish uchun kompleks a intraperitoneal, bir marta, 3 mg/kg dozasida va 50 mg/kg dozasida murakkab b, taqqoslash uchun preparat sifatida analgin 5 mg/kg dozasida ishlatilgan. 2.3.3. Yallig'lanishga qarshi faoliyatni aniqlash O'tkir aseptik yallig'lanish modeli o'ng orqa oyoqning yostig'i 0,05 ml 3,5% formalin eritmasini fiziologik eritma [175] ga kiritish orqali qayta ishlab chiqilgan. A va B komplekslarining yallig'lanish shishlarining zo'ravonligiga ta'siri natijalari formalin in'ektsiyasidan keyin 24 soat ichida hayvonlarning og'irligiga nisbatan yallig'langan va nazorat oyoqlarining massalari o'rtasidagi farq bo'yicha baholandi. 2.3.4. Immunometabolik samaradorlikni aniqlash Komplekslarning immunometabolik samaradorligi antioksidant, immunomodulyatsiya va protektiv faollik [156] bilan baholandi. A va B komplekslarining antioksidant faoliyati dastlab in vitro usul bilan[146,171,237] aniqlandi. Antioksidant faollik (AOA) va antioksidant salohiyatni (AOS) baholash 1 va 2 formulalari bo'yicha amalga oshirildi: qaerdaV1-kaliy permanganat, ml titrlashga ketgan aniqlangan kompleksning eritmasi hajmi; " y * 2 - kaliy permanganat eritmasi hajmi, ml; C-belgilangan kompleksning eritmasi konsentratsiyasi, %da. In vivo jonli komplekslarning immunometabolik faolligini baholash uchun tajribalar 150-200 g og'irlikdagi kalamushlarda va 19-21 g massa sichqonlarida o'tkazildi, umumiy stafilokokk infektsiyasining modeli 0,9% natriy xlorid eritmasida tayyorlangan Staphylococcus aureus kunlik agar madaniyati bilan hayvonlarni yuqtirish orqali qayta ishlab chiqildi. 1 yoki 10 ml hajmida 1x10 yoki 2x10 mikrobial jismlarni (o'lim dozasi) o'z ichiga olgan stafilokokk dozalarini intraperitoneal inyeksiya bilan yuqtirgan hayvonlar, infektsion fonida alohida hayvon guruhlari 60 mg / kg dozasida sefaleksin bilan AOK qilingan. Tadqiqot uchun sefaleksin kukuni inyeksiya eritmasini tayyorlash uchun, 1 g, Slovakiya, K. K. A. Sarum in vivo komplekslarining antioksidant faolligini baholash uchun malon dialdegid (MD) [174], atsilhidroperoksid (AGP) [24] konsentratsiyasi eritrotsitlar superoksid dismutaz (SOD) [118] ning faolligini baholadi. Staphylococcus yuqumli hayvonlarda immun javob rivojlantirish komplekslari ta'sirini aniqlash uchun usul [125] va popliteal limfa tugunlari massalari (rml) va usuli [191] tomonidan kariyotsitlar (RCL) soni farq sekin turi (HZT) og'irligiga ko'ra taloq (AOC) Antikor hujayralari soni humoral immun javob (GDO) jadalligini aniqlanadi. GYO 1 kg tana vazniga 109><1 hujayra miqdorida intraperitoneal, bir marta AOK qilingan Qo'chqor qizil qon hujayralari (eb) tomonidan indüklendi. GZTNI induktsiya qilish uchun 1x10 eb (sezgirlik) intraperitoneal tarzda kiritildi haqida doz). 4 kundan so'ng, o'ng oyoq padiga 1x10 eb (ruxsat beruvchi doz) kiritildi. Bir vaqtning o'zida eb (gzt sezgir doza uchun) intraperitoneal mos ravishda 3 mg/kg va 50 mg/kg miqdorida a va b komplekslarini joriy etildi. Infektsiyalangan o'lik dozani sichqon bilan kuzatish infektsiyadan boshlab 10 kun davomida amalga oshirildi. Ushbu davr mobaynida sichqonlarning omon qolish darajasi nazoratga nisbatan foizda aniqlandi. Biologik faoliyatni o'rganish uchun a kompleksi zaytun moyida va suvdagi kompleksda eriydi. 2.3.5. Statistik ishlov berish natijalarni statistik qayta ishlash o'rtacha arifmetik o'rganilayotgan ko'rsatkichlarni va ularning standart sapmalarini hisoblash yo'li bilan amalga oshirildi [14,15,16,17]. O'rtacha qiymatdagi farqlarning ahamiyati Student va Vilkokson-Mann-Whitneyning PS 0,05 [46,47,48,58] mezonlariga muvofiq baholandi. |