Диагностика иммунодефицитов. Иммунцит. Иммунологическое обследование
 Скачать 2.83 Mb.
|
планИммунологическое обследование Иммунологический анамнез Данные клинического обследования Тесты in-vivo Лабораторные исследования Иммунологическое обследованиеДиагностика иммунных нарушений включает: 1) иммунологический анамнез; 2) клиническое обследование; 3) тесты in vivo; 4) лабораторные методы обследования. Иммунологический анамнезНаследственная отягощенность Патологии развития и формирования Вредные экологические факторы Перенесенные травмы, заболевания Хронизация соматического заболевания Эпизоды аллергических реакций Реакции на переливание крови Ятрогенные влияния Вредные привычки и особенности образа жизни Патология беременности Физическое обследование органов и тканей иммунной системы Кожные покровы Слизистые оболочки и пазухи Бронхолегочная система Пищеварительная и выделительная системы Нейроэндокринная система Аппарат движения и опоры Сердечно-сосудистая система Злокачественные новообразования Наличие хронических заболеваний. Связь между дефектами иммунного ответа и склонностью к инфекционным поражениям (по б. Пухлику)
Тесты in-vivoЭлиминационная проба - больному запрещают пользоваться определенными предметами или средствами косметики, гигиены, находиться в определенных помещениях или условиях, употреблять некоторые продукты. Провокационная проба Кожные пробы Реакция пассивного переноса Лабораторные исследованияОпределение С-реактивного протеина Определение пропердина Определение содержания лизоцима Определение бактерицидного свойства сыворотки крови Определение уровня гетерофильных аглютининов Определение показателей фагоцитозаСпонтанный тест с НСТ . К фагоцитам добавляют желтый краситель нитросиний тетразолий, в норме при его поглощении метаболическая активность фагоцитов возрастает, нитросиний тетразолий восстанавливается, продукты этой реакции окрашены в синий цвет. О нарушении метаболизма фагоцитов судят по снижению интенсивности синего окрашивания. Оценка фагоцитарной активности лейкоцитов1) Лейкоциты, выделенные из крови больного, отмывают от сыворотки, подсчитывают и помещают в среду, содержащую сыворотку здорового или больного (источник опсонинов) и живые бактерии (обычно Staphylococcus aureus или Escherichia coli). 2) Смесь инкубируют при 37°C, отбирая пробы через 0, 30, 60 и 120 мин после начала инкубации. Для определения числа жизнеспособных бактерий каждую пробу быстро охлаждают и делают посев. 3) Через 2 ч после начала инкубации смесь центрифугируют. Лейкоциты и фагоцитированные бактерии оседают на дно, а нефагоцитированные бактерии остаются в надосадочной жидкости. В осадке и надосадочной жидкости определяют число жизнеспособных бактерий. Хемотаксис лейкоцитовМетод кожного окна С помощью скальпеля удаляют поверхностный слой эпидермиса площадью 4 мм2. На поврежденный участок помещают покровное стекло. В течение суток каждые 0,5—2 ч покровное стекло меняют. Затем стекла окрашивают и исследуют под микроскопом находящиеся на них лейкоциты. В норме в течение первых 2 ч наблюдается приток нейтрофилов к месту повреждения. В течение последующих 12 ч нейтрофилы замещаются моноцитами. Исследование хемотаксиса in vitro основано на стимуляции выделенных из крови фагоцитов факторами хемотаксиса. Способность фагоцитов к направленной миграции можно оценить, поместив их в камеру Бойдена Иммунологические тесты, которые характеризуют клеточный иммунитет (т – звено).Т-клеточный иммунитет оценивают по таким показателям: количество T-лимфоцитов и определение субпопуляций T-лимфоцитов Метод розеткоообразования Тест розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК, розеткообразующие клетки) применяют для выявления Т-лимфоцитов. Показано, что Е-рецепторы идентичны CD2, выявляемым моноклональными антителами и присутствуют на Т-клетках). Нагрузочные тесты с лекарственными и другими веществами. Иммунологические тесты, которые характеризуют гуморальный иммунитет (в – звено).Гуморальное звено иммунной системы оценивают по таким показателям: Количество В-лимфоцитов и количество сывороточных иммуноглобулинов (классов A, M,G, E).В настоящее время с целью идентификации лимфоцитов используют 3 группы методов: иммунофлюоресценция – проточная цитометрия, розеткообразование, иммуноферментный анализ.Метод розеткообразования основывается на наличии на мембране В – лимфоцита рецептора для Fc – фрагмента иммуноглобулинов и третьего компонента системы комплимента (С3). Методы для выявления антител и антигеновМетоды, основанные на реакции преципитации - образования осадка из нерастворимых комплексов антиген-антитело в растворе, агаре, геле (нефелометрия; простая, двойная и радиальная иммунодиффузия; иммуноэлектрофорез; непрямая преципитация). Методы, основанные на реакции агглютинации (прямая и непряма агглютинация) - осаждение клеток, нагруженных антигенами (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, сперматозоидов при диагностике бесплодия), иммуноглобулинами-аглютининами. Методы, основанные на реакции лизиса бывают двух видов: а) реакция связывания комплемента (основывается на потреблении комплемента в двух конкурирующих парных системах антиген-антитело); б) реакция комплементарной фиксации (основывается на потреблении комплемента в двух последовательно реагирующих парных системах антиген-антитело). Иммунофлюоресцентный и иммуноферментный анализы |