Л.т. Микробиология. Извитые л вибрионы м спириллы н спирохеты. Вопросы для самостоятельной подготовки
 Скачать 28.78 Kb.
|
|
Тема 1. Микроскоп и техника микроскопирования Содержание задания: Устройство оптического микроскопа. Основные технические характеристики микроскопа. Микроскопия в темном поле. Фазово-контрастная, люминесцентная и электронная микроскопия. Приготовление препаратов микроорганизмов. Порядок выполнения задания: 1. Ознакомиться с устройством биологического рабочего микроскопа и зарисовать его. Указать основные элементы конструкции. 2. Изучить основные технические характеристики микроскопа. 3. Изучить основные правила работы с микроскопом. 4. Приготовить и просмотреть препараты микроорганизмов. 5. Ознакомиться и зарисовать основные формы микроорганизмов. 6. Ответить на вопросы для самостоятельной подготовки и программированного обучения. Лабораторно – практическое занятие 1. Изучить и зарисовать микроскоп биологический рабочий: 2. Исследовать живые клетки микроорганизмов методами «раздавленной» и «висячей» капли. 3. Приготовить и просмотреть под микроскопом фиксированные препараты микроорганизмов. 4. Ознакомиться с методами окраски спор, капсул, жгутиков, ядерного вещества и включений клеток микроорганизмов Просмотреть включения (гликоген, гранулезу, жир). 5. Провести дифференциальную окраску бактерий по Граму Рис. 1. Формы бактерий: Шаровидные: а – микрококки; б – диплококки; в – тетракокки; г- стрептококки; д – стафилококки; е - сарцины. Палочковидные: ж – не образующие спор. Палочковидные спорообразующие: з - бациллярного типа; и - клостридиального типа; к - плектридиального типа спорообразования. Извитые: л – вибрионы; м – спириллы; н - спирохеты. Вопросы для самостоятельной подготовки Из чего состоит механическая часть светового микроскопа? __________ К механической части принято относить предметный столик, коаксиальные механизмы фокусировки, штатив, револьверное устройство и осветительная система -часть оптики). Из чего состоит оптическая часть светового микроскопа? _________ Оптическая часть состоит из окуляров и объективов и отвечает за формирование увеличенного изображения. Что характеризует разрешающая способность микроскопа? От чего она зависит? __ _ Качество микроскопа определяется не только его увеличением, но и разрешающей способность, которая характеризуется наименьшим расстоянием между двумя точками рассматриваемого предмета, которые видны раздельно. Чем меньше это расстояние, тем больше разрешающая способность. Разрешающая способность зависит от длины волны и числовой апертуры микроскопа. Что такое сферическая и хроматическая аберрация? Основная суть хроматической аберрации походит от дисперсии, проще говоря, когда белый луч раскладывается на свой спектр – это связано с тем, что лучи с разной длиной волны (разного цвета) преломляются под разными углами, проходя через линзы объектива. Хроматическая аберрация полностью отсутствует в зеркальных системах. Сферическая аберрация возникает из-за того, что лучи света, параллельные главной оптической оси объектива, падая на сферическую поверхность линзы или зеркала, после преломления или отражения пересекаются не в одной точке._ Какие выделяют объективы по способности устранять аберрацию? _ Ахромат — объектив с корригированной хроматической аберрацией. У ахромата хроматизм исправлен для лучей двух длин волн, лучи остальных цветов сходятся недалеко от основного фокуса, и образуют т. н. вторичный спектр, или хроматизм высоких порядков. Апланат — объектив с исправленными сферической, хроматической, и аберрацией комы. Изначально так назывался объектив, с такими свойствами, состоящий из двух симметричных ахроматических линз. Анастигмат — объектив, у которого, помимо апланатической коррекции, дополнительно коррегированы астигматизм, и кривизна поля. В анастигматах в той или иной степени коррегированы все шесть основных аберраций. Практически все современные фотографические, киносъёмочные и телевизионные объективы — анастигматы. Апохромат — объектив, хроматическая аберрация которого коррегирована лучше, чем у ахромата. В отличие от него, у апохромата хроматизм положения исправлен для лучей трёх длин волн, т. о. значительно улучшается качество изображения, особенно у телеобъективов (уменьшаются зелёные и фиолетовые каёмки). Полуапохромат — ахромат, хроматизм которого исправлен для лучей двух длин волн, но при этом вторичный спектр сильно уменьшен по сравнению с обычным ахроматом. Суперапохромат (Суперахромат) — объектив, у которого хроматизм исправлен для лучей четырёх длин волн. С какой целью используется иммерсионные объективы? Иммерсионным объективом, называют такой объектив, на который для увеличения резкости и повышения яркости исследуемого объекта, а также для расширения пределов изображения, наносят специальное масло. Иммерсионное масло находится в пространстве между первой линзой (конденсором) и предметным стеклом. Укажите последовательность исследования микроорганизмов методом «раздавленной капли» 8. Укажите последовательность исследования микроорганизмов методом «висячей капли» ______________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ 9. Укажите последовательность приготовления фиксированного препарата (простой метод окраски) ________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ 10.Укажите последовательность дифференцированной окраски по Граму ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ___________________________________ 11.Перечислите красители, применяемые в микробиологии а) основные ______________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ б) кислые _______________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ Вопросы программированного обучения 1. Какие элементы входят в механическую часть микроскопа? 1. штатив 2. предметный столик 3. окуляр 4. тубус 5. конденсор. 2. Какие элементы входят в оптическую часть микроскопа? 1. объектив 2. микрометрический винт 3. окуляр 4. зеркало 5. конденсор. 3. Как называются объективы, устраняющие сферическую аберрацию? 1. ахроматы 2. апохроматы 3. сухие объективы 4. иммерсионные объективы. 4. Как называются объективы, устраняющие хроматическую аберрацию? 1. иммерсионные объективы 2. апохроматы 3. сухие объективы 4. Ахроматы _______________ 5. Чем определяется разрешающая способность объектива? 1. длиной волны света и числовой апертурой объектива 2. оптической длиной тубуса и фокусным расстоянием объектива 3. расстоянием наилучшего зрения и фокусным расстоянием линз окуляра 4. увеличением окуляра и увеличением объектива. 6. Лучшее изображение объекта обеспечит сочетание «окуляр-объектив»: 1. 7 90 2. 10 40 3. 20 8 4. 15 40. 7. Наиболее четкое изображение объекта в световом микроскопе обеспечит разрешающая способность: 1. 0,44 мкм 2. 0,2 мкм 3. 1,0 мкм 4. 1,3 мкм. 8. Между иммерсионным объективом микроскопа и препаратом находится: 1. воздух 2. вода 3. кедровое масло 4. спирт. 9. Укажите основные красители 1. фуксин 2. метиленовый синий 3. генциан фиолетовый 4. эритрозин 5. конго. 10. Укажите кислые красители 1. Метиленовый фиолетовый 2. индулин 3. кислый фуксин 4. нигрозин 5. флуоресцин. 12 11. В каком препарате можно увидеть движение бактерий? 1. раздавленная капля 2. висячая капля 3. отпечаток 4. мазок. 12. С какой целью проводится фиксация мазка? 1. для прикрепления клеток к стеклу 2. сделать клетки более восприимчивыми к окраске 3. сделать безопасным обращение с мазком 4. для выявления подвижности клеток. 13. Укажите правильную последовательность приготовления: а) препарата «в раздавленной капле»: 1. покрыть препарат покровным стеклом 2. вблизи горелки внести бактериологической иглой клетки микроорганизма в каплю воды 3. на предметное стекло нанести каплю воды б) фиксированного и окрашенного 1. нанести на предметное стекло каплю воды 2. обезжирить предметное стекло смесью спирта эфиром 3. вблизи горелки внести в каплю воды клетки микроорганизма 4. окрасить препарат красителем 5. зафиксировать препарат в пламени горелки 14. Укажите правильную последовательность техники микроскопирования фиксированного и окрашенного препарата 1. опустить в кедровое масло иммерсионный объектив 2. поднять конденсор 3. с помощью микроскопа найти изображение объекта 4. с помощью микроскопа четко сфокусировать объект |