Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. 15 микра. Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам Дискодиффузионный метод
 Скачать 36.35 Kb.
|
|
Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам Диско-диффузионный метод На поверхность плотной питательной среды, засеянной сплошным газоном исследуемой культурой, накладывают не более 6 дисков, пропитанных антибиотиками, на расстоянии не менее 2 см друг от друга. Регистрация результатов проводится через 18-24 часов инкубирования в термостате по диаметру зоны отсутствия роста вокруг дисков с антибиотиками. Наличие роста вокруг диска свидетельствует о нечувствительности данного микроба к антибиотику. Для интерпретации результатов используются специальные таблицы. Р  исунок 1. Определение чувствительностимикроорганизмов диско-диффузионным методом: 1 – микроорганизм чувствителен к антибиотику; 2 – микроорганизм умеренно резистентен к антибиотику; 3 – микроорганизм устойчив к антибиотику. Метод Е-тестов Принцип метода. Определение чувствительности микроорганизма проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной. В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК).  Рисунок 2. Определение чувствительности микроорганизмов с помощью Е-тестов Метод серийных разведений в бульонной среде В пробирках, содержащих 1 мл Мюллер-Хинтон бульона, готовят серийные двукратные разведения антибактериального препарата, например 100 мкг/мл – 1-я, 50 мкг/мл – 2-я, 25 мкг/мл – 3-я, 12,5 мкг/мл – 4-я и т.д. Затем в каждую пробирку вносят 0,1 мл испытуемой бактериальной суспензии. Одновременно ставят контроль роста (1 мл Мюллер-Хинтон бульона и 0,1 мл суспензии бактерий). Посевы инкубируют при 37°С в течение 18-24 ч., после чего отмечают результаты. Отсутствие помутнения среды свидетельствует о задержке роста бактерий в присутствии данной концентрации препарата.  |