Медико-биологическое значение и принципы определения тропонина Т в сыворотке крови. реферат биохимия. " Медикобиологическое значение и принципы определения тропонина т в сыворотке крови"
 Скачать 26.2 Kb.
|
|
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный медицинский университет" Министерство здравоохранения России Кафедра Клинической биохимии Заведующая кафедрой: Профессор, д.м.н. Бондарь Татьяна Петровна Реферат на тему: " Медико-биологическое значение и принципы определения тропонина Т в сыворотке крови". Выполнила: Студентка 302 группы Лечебного факультета Вос Леся Юрьевна Проверила: Профессор, д.м.н. Бондарь Татьяна Петровна Ставрополь, 2022. Оглавление: Введение..........................................................................................................3 Порядок проведения исследования и интерпретация результатов............4 Заключение.....................................................................................................10 Список использованной литературы............................................................10 Введение Использование в клинической практике тропонинов привело к прорыву в диагностике инфаркта миокарда, однако до настоящего времени остается причиной и большого количества ошибочных диагнозов из-за неправильной оценки получаемых результатов тропониновых тестов. Сердечный тропонин (cTn) представляет собой комплекс, состоящий из трех субъединиц. Поскольку сердечные тропонины I (cTnI) и T (cTnT) являются компонентами сократительного аппарата миокардиальных клеток и экспрессируются почти исключительно в сердце, это определяет их высокую специфичность в качестве биомаркера повреждения миокарда. Оценка выделения в кровоток пула быстро высвобождаемых тропонинов в клинической практике, с одной стороны, может уменьшить время для диагностики инфаркта миокарда, а с другой стороны, привести к значительному снижению специфичности определения тропонинов в отношении структурных повреждений и некроза миокарда. Высвобождение тропонинов происходит при различных вариантах повреждения миокарда, а не только вследствие некроза. Повышение уровня тропонинов в плазме крови свидетельствует о наличии повреждения миокарда, но не указывает на причину и механизм повреждения. Диагноз «инфаркт миокарда» подтверждается при выявлении динамического повышения уровня тропонинов выше указанного референтного значения только в том случае, когда имеются доказательства, что причиной повреждения миокарда является его необратимая ишемия. Ключевой отличительной чертой высокочувствительных тропониновых тестов по сравнению с прежними анализами является повышенная чувствительность, которая проявляется только при значениях, близких к 99-му процентилю верхнего референтного уровня. С 1-го по 4-е поколения тропониновых тестов могут определять только значительные количества тропонина вследствие массивного повреждения миокарда. Количество тропонина, соответствующее выделению цитозольного тропонина или вследствие микронекроза кардиомиоцитов, может определяться 5-м поколением тропониновых тестов. Ключевым преимуществом 5-го поколения тропониновых тестов является не увеличение точности диагностики ИМ, а уменьшение времени до верификации диагноза с помощью тропонинового теста. Алгоритм, сочетающий в себе оценку как абсолютного уровня, так и относительного изменения уровня тропонинов, позволяет повысить специфичность (при некотором снижении чувствительности) в отношении диагностики инфаркта миокарда. Результаты тропониновых высокочувствительных тестов могут широко использоваться для оценки прогноза. Порядок проведения исследования и интерпретация результатов. Тропонин (Tn, cardiac-specific troponin) – регуляторный глобулярный белок сердечной мышцы, специфический маркёр повреждения миокарда. Для подтверждения или исключения инфаркта миокарда, уточнения степени поражения сердечной мышцы, выбора тактики лечения, установления рисков развития осложнений заболеваний сердца используется определение двух видов глобулярного белка — тропонина I и тропонина Т. Исследование тропонинов в крови назначают в сочетании с миоглобином и КФК-МВ. Для анализа на тропонины используется гепаринизированная плазма венозной крови. Метод определения уровня Tn основан на иммунохимическом анализе. Концентрация тропонина I в крови у человека со здоровым сердцем не превышает 0,026 нг/мл, тропонина Т — 0,1 нг/мл. Готовность результата анализа составляет от 15 минут до суток. Тропонин (Tn, cardiac-specific troponin) – регуляторный глобулярный белок сердечной мышцы, специфический маркёр повреждения миокарда. Для подтверждения или исключения инфаркта миокарда, уточнения степени поражения сердечной мышцы, выбора тактики лечения, установления рисков развития осложнений заболеваний сердца используется определение двух видов глобулярного белка — тропонина I и тропонина Т. Исследование тропонинов в крови назначают в сочетании с миоглобином и КФК-МВ. Для анализа на тропонины используется гепаринизированная плазма венозной крови. Метод определения уровня Tn основан на иммунохимическом анализе. Концентрация тропонина I в крови у человека со здоровым сердцем не превышает 0,026 нг/мл, тропонина Т — 0,1 нг/мл. Готовность результата анализа составляет от 15 минут до суток. Тропонины I и Т совместно с тропонином С входят в состав тропонин-тропомиозиновой системы. Тропомиозин вместе с актином образуют тонкие миозиновые нити поперечно-полосатой мускулатуры – миокарда и скелетных мышц. Тропониновый комплекс осуществляет функцию исполнительного звена в кальцийзависимом управлении расслабления и сокращения миофибрилл. В гладкой мускулатуре тропонинов нет. Тропонин I и тропонин Т можно обнаружить только в сердечной мышце, поэтому эти белки являются кардиоспецифичными. При повреждении миокарда тропонины I и Т высвобождаются из миокардиальных клеток и через лимфатическую систему поступают в кровеносное русло. Чем обширнее очаг поражения, тем большее количество тропонинов устремляется в кровь. Небольшое количество тропонинов находится в свободном состоянии в цитозоле кардиомиоцита. По этой причине уже через 3-6 часов первая порция тропонинов поступает в кровь. Вторая часть тропонинов соединена с мышечными филаментами, потому их дальнейшее высвобождение из клетки идёт медленно. Оба вида кардиоспецифических тропонинов имеют одинаковое значение в диагностике заболеваний сердца. Необходимо учитывать лишь то, что высокая концентрация тропонина I в крови сохраняется на протяжении 7-10 дней, а тропонина Т — до 20 дней. Определение уровня тропонинов в комбинации с другими маркёрами некроза миокарда применяется в кардиологии для дифференциальной диагностики стенокардии и инфаркта миокарда при остром коронарном синдроме (ОКС); оценки эффективности восстановления кровотока после осуществления тромболизиса; проведения отбора в группу высокого коронарного риска среди пациентов с ОКС без подъёма сегмента ST. Кардиохирурги и сосудистые хирурги исследуют тропонины в крови с целью выявления возможных пери- и постоперационных осложнений после ангиопластики, стентирования и аортокоронарного шунтирования. Первый забор крови на исследование тропонинов рекомендуется произвести при поступлении в больницу, второй — спустя 4-6 часов после сердечного приступа, третий забор — по истечении 8-12 часов, а затем каждый день на протяжении 1-2 недель. Такое частое исследование тропонинов в крови требуется для наблюдения за ходом проводимой терапии и определения прогноза болезни. Отрицательный результат тропонинового теста при повторном взятии анализа у больных с выраженным дискомфортом в области сердца с высочайшей вероятностью исключает диагноз острого инфаркта миокарда. В сравнении с другими сердечными маркерами, высокая концентрация тропонинов сохраняется в течение 7-20 дней после коронарной “катастрофы”. В связи с этим результаты Tn применяются в случаях позднего обращения пациента. Такие ситуации встречаются, если больные предполагали, что это был затянувшийся приступ стенокардии, и купировали боль с помощью большого количества нитроглицерина и анальгетиков. Анализ крови на тропонины назначают при интенсивной боли за грудиной, нарушениях гемодинамики и сердечного ритма. Такие симптомы могут свидетельствовать о развитии острого коронарного синдрома или тромбоэмболии легочной артерии. Определение концентрации тропонинов производится при высокой температуре, лейкоцитозе, ускоренном СОЭ, неспецифических болях в области сердца. Эти проявления могут говорить о воспалительных заболеваниях сердца – миокардите или перикардите. Проведение анализа показано при сохраняющихся болях за грудиной, затрудненном дыхании, сердцебиении после травмы грудной клетки. Данные симптомы могут указывать на ушиб сердца. Исследование концентрации тропонинов периодически назначают при химиотерапевтическом лечении онкологических больных. Это позволяет обнаружить ранние признаки кардиотоксического воздействия цитостатических препаратов на миокард. Нецелесообразно назначать анализ на тропонин при отсутствии симптомов и нормальной ЭКГ, так как диагноз острого инфаркта миокарда не устанавливается только на основании увеличенной концентрации тропонинов. Кардиоспецифические маркеры — тропонин I и тропонин Т — в большинстве случаев используются в неотложной кардиологии. В экстренных ситуациях, на догоспитальном этапе без предварительной подготовки, врачами бригады скорой помощи используется экспресс-диагностика тропониновыми тест-полосками. Экспресс-определение является сверхчувствительным и доступным качественным методом исследования тропонина. Для этого на специальную полоску с мечеными антителами помещается капля крови пациента. Если в плазме крови есть тропонин, то в реакционной зоне полоски происходит образование иммунных комплексов, которые затем перемещаются в детекционную зону с сигнальной и контрольной полосками. На контрольной полоске оседают остатки меченых антител. Сигнальная полоска содержит специфический белок стрептавидин, являющийся индикатором для иммунных комплексов. Изменение цвета полоски через 20-30 минут подтверждает диагноз острого инфаркта миокарда. Анализ на количественное определение концентрации тропонинов рекомендуется сдавать на голодный желудок. Между последним приёмом пищи и взятием крови желателен восьмичасовой промежуток (в срочных случаях не менее 4 часов). Накануне из рациона следует исключить алкоголь и богатые насыщенными жирными кислотами продукты. За 60 минут до забора крови нельзя курить. Кровь на исследование тропонинов берут в пунктах приёма лабораторных анализов, в приёмном отделении стационара, в отделении неотложной помощи. В небольшом количестве венозную кровь собирают в пробирку с гепарином. Биоматериал в срочном порядке доставляют в лабораторию. В наше время используется около 30 тест-систем для количественного определения тропонинов в сыворотке. Большинство тест-систем основано на иммунохимическом анализе – «сэндвич-методе». В луночку с сорбированными антителами к тропонину добавляют 100 мкл исследуемой сыворотки (антигена). Затем, одновременно или последовательно, в зависимости от типа теста, происходит связывание тропонина сыворотки (антигена) с мечеными антителами. В ходе иммунных реакций, тропонин располагается между двух антител, как в “сэндвиче”. В течение 60 минут, полученный образец инкубируют, а потом отмывают от не связавшихся компонентов. После добавления тетраметилбензидина и соляной кислоты образец изменяет свою окраску. Далее прибором-спектрофотометром определяют оптическую плотность окрашенного раствора. Насыщенность цвета прямо пропорциональна количеству тропонина в крови. Все этапы автоматизированы и выполняются при помощи специальных иммунохемилюминесцентных анализаторов. В срочных ситуациях время выполнения исследования составляет около двух часов. При плановом проведении анализа результаты выдаются на руки вечером этого же дня или следующим утром. В норме концентрация тропонина I в крови пациентов старше 18 лет не должна превышать 0,026 нг/мл, тропонина Т — 0,1 нг/мл. У здорового человека тропонины не поступают в кровеносное русло. Незначительное увеличение содержания тропонинов в крови бывает при интенсивных занятиях спортом. На результаты анализа может повлиять гемолиз эритроцитов и повышенное содержание билирубина в плазме крови. При симптомах нестабильной стенокардии тропонины являются “суррогатными маркёрами” внутрикоронарного тромбоза. Их появление в крови — признак развития микронекрозов сердечной мышцы и свидетельство неблагоприятного коронарного прогноза. Если ишемия кардиомицитов непродолжительная, то роста тропонинов в крови не происходит. Повышенный уровень тропонинов возможен при геморрагических инсультах и субарахноидальных кровоизлияниях в головной мозг. Это связано с нейрогенным механизмом повреждения миокарда. В его основе лежит усиленное влияние симпатической нервной системы на сердце и, как следствие, длительный коронарный вазоспазм. Высокий показатель белка сопровождает гиповолемический и септический шоки. Повышенный уровень тропонинов в этих случаях свидетельствует об уменьшении коронарного перфузионного давления, вследствие чего снижается приток крови к кардиомиоцитам, и провоцируется выход тропонинов в кровь. Концентрация сердечного маркера увеличивается при амилоидозе. Причиной роста показателя является гибель атрофированных кардиомиоцитов, вызванная накоплением высокоагрессивного амилоида в интерстициальном пространстве, а также закупоркой внутримышечных артерий. Избыточная концентрация тропонинов возможна при гипертрофической кардимиопатии. Этот феномен связывают с мутацией генов, кодирующих синтез тропонина I и тропонина Т. Исследование тропонинов проводится пациентам с клиникой острого коронарного синдрома при одновременном поражении скелетной мускулатуры. В таких случаях результаты анализов крови на миоглобин и КФК-МВ неинформативны, так как их содержание в крови повышается при повреждении мышечного корсета. Увеличение уровня тропонинов возможно и при других экстракардиальных причинах: расслоении аорты, заболеваниях аортальных клапанов, хронической почечной недостаточности, тяжелой анемии, выраженной дыхательной недостаточности. Заключение Тропониновые тесты являются методом верификации повреждения миокарда, и только при подтверждении, что причиной является необратимая ишемия миокарда, диагностируется инфаркт миокарда. Предпочтительнее является использование высокочувствительных тропониновых тестов 5-го поколения, позволяющих сократить время для диагностики миокардиального повреждения, и в случае инфаркта миокарда использовать 3-х часовой и или 1 часовой протокол (если от момента появления боли в груди прошло более 3 часов). Правильно интерпретировать полученные результаты анализа может только лечащий врач (терапевт, кардиолог, кардиохирург). Для этого специалист учитывает характерный болевой синдром, анамнез заболевания, другие лабораторные показатели, данные ЭКГ и эхокардиографии. Необходимо быть готовым к тому, что сильные боли за грудиной в сочетании с положительным результатом экспресс-теста на тропонин служат показанием для экстренной госпитализации. Список использованной литературы: 1. Всероссийское научное общество кардиологов. Диагностика и лечение больных острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST на ЭКГ. Российские рекомендации // Приложение к журналу «Кардиоваскулярная терапия и профилактика». — М., 2007. 2. Всероссийское научное общество кардиологов. Лечение острого коронарного синдрома без стойкого подъема сегмента ST на ЭКГ. Российские рекомендации // Приложение к журналу «Кардиоваскулярная терапия и профилактика»). — М., 2006 г. 3.https://cyberleninka.ru/article/n/troponiny-klinicheskoe-znachenie-i-interpretatsiya-rezultatov-laboratornyh-testov/viewer 4. https://unimed.ru/biblioteka/iha-issledovaniya/serdechnye-troponiny.html |