МИКРОБИОЛОГИЯ 1-90. 1. Відмінності вірусів від інших мікроорганізмів Віруси мають такі відмінності
 Скачать 253.74 Kb.
|
|
13. Методи одержання живих противірусних вакцин Живі противірусні вакцини по напруженості викликуваного ними імунітету можна розділити на дві групи: 1) вакцини, що викликають напружений і стійкий імунітет (проти віспи; класичної чуми куре; поліомієліту; кору; паротиту; чуми великої рогатої худоби; чуми свиней; африканської чуми однокопитих і ін.); 2) вакцини, що викликають практично значимий, але відносно нестійкий імунітет (проти інфекційного бронхіту птахів; грипу тварин; ящуру; чуми м'ясоїдних і ін.). Зазначені розходження залежать насамперед від властивостей збудника хвороби, патогенезу захворювання і генетичних властивостей вакцинного штаму . На рівень імуногенності живих вакцин впливає багато факторів, у тому числі ряд властивостей організму хазяїна, рівень нагромадження вірусних антигенів, тривалість циркуляції вірусу в організмі, організація життєвого циклу вірусу in vivo, тип клітин, що уражаються вірусом, і т.д. Тому одне з основних умов одержання ефективних живих вакцин - такий підбор факторів, що обумовлює стабільне ослаблення вірулентності вірусу зі збереженням його імуногенних властивостей. Тривалість приживлюваності вакцинного вірусу в організмі впливає на його імуногенність. Вирішальний фактор у імуногенності живих вакцин - їх специфічність і чужерідність білків. Усі відомі в даний час методи одержання живих вакцин поділяють на дві групи. Вакцини першої групи отримані з вірусів, генетично близьких до збудника даної хвороби. Сюди відносять вісповакцину, що представляє собою мало змінений збудник віспи корів, у якого є загальний антиген зі збудником віспи людини, вірус віспи кіз для профілактики віспи овець, вірус віспи голубів проти віспи курей, вірус кору для профілактики чуми м'ясоїдних, вірус фіброми кроликів для профілактики міксоматозу й ін. Вакцини другої групи створені шляхом селекції й експериментальної зміни вірулентності вірусу.Найбільш широке застосування одержала селекція спонтанних мутантів -природно-ослаблених вірусів (штами B1, штам фіброми проти міксоматозу кроликів і ін.), а також мутантів, що виникають у процесі пасажів вірулентного вірусу на тваринах, курячих ембріонах і культурі клітин. Цим методом отримана велика частина вакцинних штамів проти сказу ,жовтої лихоманки, поліомієліту, грипу, кору, паротиту, чуми свиней .До дуже перспективних методів варто віднести селекцію мутантів, індукованих фізичними і хімічними мутагенами. 14. Стадії патогенезу вірусних інфекцій 1) проникнення вірусу в організм; ( повітряно - крапельний шлях, фекально - оральний шлях, хірургічні втручання, переливання крові, статевий шлях, проникнення через шкіру та кон'юнктиву, передача віруса від матері плоду. 2) первинна репродукція віруса в місці проникнення; 3) поширення вірусу в організмі; Після проникнення вірусу в організм він може розмножуватися спочатку в місці проникнення чи у відповідних органах і тканинах і далі розноситися кров'ю( лімфою ) по всьому організмі. 4) локалізація віруса в організмі; Після проникнення в організм і дисемінації з кров'ю, лімфою або нейрогенним шляхом вірус досягає певних тканин, де відбувається його основна репродукція. Здатність вірусу розмножуватися в певних типах клітин організму називається тропізмом. Віруси широко розповсюджуються в організмі, проте їх репродукція відбувається лише в тих клітинах, в яких вони можуть реалізувати свою генетичну інформацію 5) пошкодження чутливих клітин; Основним проявом вірулентності вірусу є деструкція чутливих клітин у тканинах - мішенях і виникнення внаслідок пошкодження тканин фізіологічних змін в організмі. В деяких випадках ураженню тканин сприяє імунна відповідь господаря. В міру зростання числа зруйнованих вірусом клітин порушується функціонування відповідних органів, що призводить до клінічного прояву хвороби. Проміжок часу з моменту проникнення віруса в організм до появи перших клінічних симптомів захворювання називається інкубаційним періодом. 6) імунна відповідь; 7) персистентність віруса. вірус виділяється з фекаліями, сечею, носовим і ексудатом з очей, молоком, слиною, через носоглотку. 15. Виділення вірусу з організму. Відбувається воно різними шляхами. При захворюваннях, що викликають пантропні віруси (європейська й африканська чума свиней, хвороба Ауескі, чума великої рогатої худоби, інфекційна анемія коней і ін.), вірус виділяється з фекаліями, сечею, носовим і ексудатом з очей, молоком, слиною. При грипі тварин (свиней, коней, великої рогатої худоби), парагрипі, інфекційному ринотрахеїті великої рогатої худоби він виділяється через носоглотку, у змивах з яких його удається виділити в чуттєвій клітинній системі. уражень; при сказі зі слиною. Вірус також виділяється зі сперми биків при ящурі, блютанзі, лейкозі, інфекційному ринотрахеїті, діареї, ефемерній лихоманці і паравакцині, чому раніше не надавали значення Переважну локалізацію вірусу, шляхи і терміни виділення його з організму при природному плині кожної інфекції лікар-діагност зобов'язаний знати твердо, тому що це в значній мірі визначає успіх вірусологічної діагностики. 16. Фактори, що впливають на чутливість тварин до вірусів. Таких факторів відомо п'ять: гормони, вік, вагітність тварин, іонізуюче випромінювання, температура. З гормонів найбільше значення має кортизон. Другий гормон - тестостерон - виконує захисну дію при інфікуванні мишей другим типом вірусу поліомієліту. Фактор вагітності також впливає на чутливість організму до вірусної інфекції. Роль віку в патогенезі вірусних хвороб значною мірою зв'язана з впливом гормонів на організм. Відомі вірусні інфекції, експериментальне відтворення яких удається тільки на молодих (частіше немовлятах) тваринах. До них відносяться ящур (миші і кроленята-сосуни), вірус мишачих гепатиті, інфекційний гастроентерит свиней і ін. Іонізуючі випромінювання. Під впливом їх змінюється чутливість організму до патогенної дії деяких вірусів. Так, наприклад, рентгенівське опромінення погіршує плин багатьох вірусних інфекцій. Вплив температури на чутливість організму до вірусної інфекції виявляється неоднозначно. Вірус грипу, введений внутрішньом'язево морським свинкам чи мишам, швидко знищується при нагріванні області інокуляції і довше зберігається при охолодженні. У холоднокровних (жаб і риб) цей вірус швидко знищується при переносі їх в акваріум з теплою водою. Однак миші, заражені вірусом Коксакі, швидко гинуть при температурі 4°С, тоді як в умовах 36 °С тварини легко переносять інфекцію і вірус швидко зникає з організму. 17 . Противірусний імунітет При вірусних інфекціях організм всі свої захисні сили спрямовує на знешкодження вірусу і нейтралізацію його токсинів. Противірусні захисні реакції організму поділяються на неспецифічні і специфічні. Складовою частиною перших є інтерферон — індуцибельний білок, відкритий у 1957 р. Він витримує низькі температури, нагрівання і ультрафіолетове опромінення, не втрачає активності при дії кислот і лугів, не токсичний, утворюється системою лімфощних органів і клітин. Інтерферони синтезуються іп УІІТО та іп УІУО у відповідь на дію природних (віруси, ендотоксини, внутрішньоклітинні паразити) і синтетичних (високо-і низькомолекулярних) індукторів. Інтерферон діє на внутрішньоклітинні етапи репродукції широкого кола РНК і ДНК-вмісних вірусів, пригнічуючи трансляцію вірусних інформаційних РНК та їхній біосинтез. Доведено, що інтерферон дерепресує ген для антивірусного білка, який локалізується в клітинах організму людини в хромосомі 21, на репродукцію вірусу діє не сам інтерферон, а противірусний білок, синтез якого в клітинах індукується інтерфероном (Ф.І.Єршов, А.С.Новохатський, 1980). Специфічний клітинний захист організму пов'язаний з участю сенсибілізованих Т-лімфоцитів, які не діють на вірус, а за допомогою лімфотоксинів руйнують заражені вірусами клітини. Несприйнятливість організму до патогенних паразитів (малярійні плазмодії, трипаносоми тощо) дістала назву протипарази-тарного імунітету. Вироблення такого імунітету залежить від локалізації паразита. Ця форма імунітету зумовлюється захисною дією І§Е і підвищеною активністю фагоцитів. Крім названих вище форм захисту, існують поняття колективного (групового) імунітету, трансплантаційного імунітету тощо. Нині розроблені методи, що дають змогу створювати штучний імунітет. Активний штучний імунітет виробляється в результаті введення в організм ослаблених або вбитих збудників інфекції. Це викликає легку форму хвороби, під час якої в організмі утворюються специфічні антитіла і людина стає несприйнятливою протягом тривалого часу до того захворювання, проти якого було зроблено щеплення. Таке щеплення використовують проти поліомієліту, туляремії, коклюшу та інших хвороб. Профілактичне щеплення відіграє важливу роль у боротьбі з інфекційними хворобами. Пасивний імунітет створюють введенням в організм лікувальних сироваток, що містять готові антитіла проти збудників хвороб. Цей імунітет зберігається впродовж кількох місяців. Лікувальні сироватки добувають з крові тварин (частіше коней), яким поступово вводять все більші Дози інфекційного матеріалу. В крові тварини накопичуються антитіла. Періодично таку кров відбирають і виготовляють з неї лікувальну сироватку. 18. Інтерферон Інтерферони - загальна назва, під яким в даний час об'єднують ряд білків з подібними властивостями, що виділяються клітинами організму у відповідь на вторгнення вірусу. Завдяки інтерферонам клітини стають несприйнятливими по відношенню до вірусу. «Обумовлений в якості інтерферону фактор повинен бути білкової природи, володіти антивірусної активністю по відношенню до різних вірусів, принаймні, в гомологічних клітинах, опосередкованої клітинними метаболічними процесами, що включають синтез РНК і білка» У 1957 р співробітники Лондонського національного інституту вірусологи англієць А. Айзек і швейцарець Дж. Ліндеман випадково під час дослідів відкрили інтерферон. Дослідники зіткнулися з незрозумілим явищем: миші, яких заражали певними вірусами, які не хворіли. Пошуки причин цього явища показали, що миші, що не піддалися зараженню вірусами, в момент зараження вже хворіли на іншу вірусну інфекцію. Таким чином з'ясувалося, що в організмі мишей один з вірусів перешкоджає розмноженню іншого. Це явище антагонізму вірусів назвали інтерференцією . Інтерферони людини підрозділяють на групи в залежності від типу клітин, в яких вони утворюються: α, β і γ. α-Інтерферони включають декілька видів білків з молекулярною массойоколо 20 кДа. Особливе значення мають інтерферони альфа-2b (для лікування вірусних захворювань) і бета-1a (застосовуються для лікування розсіяного склерозу). По-перше, він робить вплив на клітини, сусідні з інфікованою, запускаючи в них ланцюг подій, що призводять до придушення синтезу вірусних білків і в деяких випадках збірки і виходу вірусних частинок (шляхом активації олігоаденілатціклази). Другим напрямом дії інтерферонів є стимуляція імунної системи для боротьби з вірусами. Інтерферон підвищує синтез молекул головного комплексу гістосовместімостіI і II класів і активує іммунопротеасому. Освіта інтерферону можуть стимулювати не тільки інтактні віруси, але і різні інші агенти, наприклад деякі інактивовані віруси, дволанцюжкові РНК, синтетичні дволанцюжкові олігонуклеотиди і бактеріальні ендотоксини. 19. Плин вірусної інфекції. Гострий плин характеризується яскравим проявом клінічних ознак хвороби (наростанням їх числа і виразністю прояву, потім - у залежності від біологічних властивостей вірусу, фізіологічного й імунобіологічного стану організму, видужання чи загибелі тварини). Приклади гострої вірусної інфекції- грип птахів, свиней, коней, ньюкаслська хвороба, інфекційний ринотрахеїт, чума і ящур великої рогатої худоби, чума свиней і ін. Однак крім гострої вірусна персистенція може проявлятися в трьох формах(В. А. Зуєв (1988)) - латентній, хронічній чи повільній Латентна інфекція - безсимптомна персистенція вірусу, при якій можуть відбуватися репродукція зрілого вірусу і виділення його в зовнішнє середовище. Цикл вірусної репродукції може порушитися на будь-якому етапі, і тоді виділення вірусу з такої системи вимагає спеціальних, часто дуже складних, лабораторних прийомів. У деяких випадках в організмі, що підтримує латентну вірусну інфекцію, під дією яких-небудь зовнішніх впливів може наступити активація персистуючого вірусу, що часто приводить до розвитку гострої форми інфекційного процесу (хвороби). Прикладом латентної вірусної інфекції служить широко розповсюджена герпетична інфекція з її тривалою, практично довічною персистенцією вірусу в чуттєвих гангліях трійничного нерва. Хронічна інфекція - персистенція вірусу, що супроводжується появою одного чи декількох симптомів захворювання з наступним розвитком і підтримкою патологічного процесу протягом тривалого часу. Плин хронічної інфекції нерідко характеризується ремісіями, що перемежовуються з періодами загострень протягом декількох тижнів чи місяців. Прикладом хронічної вірусної інфекції може служити добре відома хронічна аденовірусна інфекція. Повільна інфекція - персистенція вірусу, що характеризується його своєрідною взаємодією з організмом хазяїна, при якому, незважаючи на розвиток патологічного процесу, як правило, в одному органі чи в одній тканинній системі має місце багатомісячний чи навіть багаторічний інкубаційний період, після якого повільно, але неухильно розвиваються симптоми захворювання, які завжди закінчується летально. 20. Механізм виникнення, поширення і передачі вірусних інфекцій У вірусологічному контексті епідеміологія - наука про причини, поширеність і частоту вірусних хвороб, а також про поширення і передачі вірусів, що викликають захворювання. Найважливіше те, що віруси - внутрішньоклітинні організми; вони залежать від живих клітин, що постачають їх основними ферментами і хімічними будівельними блоками, необхідними для реплікації. Таким чином, сферою проживання вірусів виявляється все рослинний і тваринний світ. Поширення вірусів між окремими людьми може відбуватися повітряно-крапельним шляхом, аліментарним, водним, статевим, ін'єкційним, контактним, зі слиною чи слизом (рукою в рот, рукою в ніс або рукою на кон'юнктиву), Рука - рот, рот - рот Рука - ніс, рука - кон'юнктива Людина (носій) - людина ,Членистоногі. Для вивчення вірусних хвороб епідеміологи використовують вірусологічні, серологічні, молекулярні та екологічні методи. В патогенезі вірусних інфекцій розрізняють такі стадії: 1) проникнення вірусу в організм;2) первинна репродукція віруса в місці проникнення;3) поширення вірусу в організмі;4) локалізація віруса в організмі;5) пошкодження чутливих клітин;6) імунна відповідь;7) персистентність віруса. 21 . Шляхи передачі вірусів: 1. Аліментарний шлях, при якому вірус потрапляє в організм людини із забрудненими продуктами харчування, водою, а також внаслідок недотриманні правил особистої гігієни (вірусний гепатит А, Е та ін.) 2. Трансмісивний, при якому вірус потрапляє у кров чи внутрішнє середовище людини. Головним чином це відбувається при маніпуляції зараженими хірургічними інструментами або шприцами, при незахищеному статевому контакті, укусах інфікованих тварин і кровосисних членистоногих, а також трансплацентарно від матері до дитини. Таким шляхом передаються віруси, що швидко руйнуються в навколишньому середовищі (вірус гепатиту В та С, ВІЛ, вірус сказу та ін.) 3. Повітряно-крапельний шлях передачі, при якому вірус потрапляє в організм людини разом з повітрям, яке містить частинки мокроти і слизу викинутих хворою людиною або твариною. Це найбільш небезпечний шлях передачі, так як з повітрям вірус може переноситися на значні відстані і викликати епідемії. Так передаються віруси грипу, парагрипу, паротиту, вітряної віспи та інші. 4. Контактно-побутовий шлях, що включає зараження через прямий контакт з джерелом інфекції, статеві контакти, спільне використання предметів побуту та особистої гігієни (герпесвіруси, вірус папіломи людини, контагіозний молюск та інші). 22. Вплив антропогенних факторів на екологію вірусів. На екологію вірусів великий вплив мають антропогенні фактори, а саме: забруднення довкілля промисловими відходами; тотальне застосування пестицидів, антибіотиків, вакцин та інших біопрепаратів, урбанізація з величезною концентрацією населення в мегаполісах; розвиток сучасних транспортних засобів, господарське освоєння нових територій, створення індустріального тваринництва з високою концентрацією поголів'я на обмежених площах. Все це призводить до порушення структури сформованих біоценозів, сприяє залученню в епідемічний і епізоотичний процес нових збудників, змінює властивості і шляхи циркуляції відомих вірусів, а також імунореактивність і сприйнятливість людських і тваринних популяцій. 23. Специфічна профілактика вірусних хвороб тварин Профілактика вірусних хвороб будується в загальному на тих же принципах, що і профілактика інших інфекційних хвороб. Міри попередження і боротьби, можна розділити на три групи: організаційні заходи, специфічна профілактика і хіміопрофілактика. Організаційні заходи боротьби з вірусними інфекціями викладені в підручниках по епізоотології, а хіміопрофілактика вірусних хвороб ще слабко розроблена, тому в цьому розділі мова йтиме про вакцинопрофілактику і серопрофілактику, Специфічна профілактика вірусних хвороб забезпечується застосуванням різних типів вакцин: цільновіріонних (живих і інактивованих); субодиничних; рекомбінантних; вакцин з живих рекомбінантів; синтетичних пептидів, і антиідиотипічних вакцин. 24.Мікробіологія, її роль народному господарстві Мікробіологія - біологічна наука, яка вивчає будову та життєдіяльність найпоширенішої групи живих організмів, невидимих для неозброєного ока. Значення мікроорганізмів: 1)корисне-а)кругообіг речовин у природі, б)родючість грунту, в)утворення покладів корисних копалин, г)виробництво органічних кислот, спиртів, вітамінів, амінокислот, ферментних препаратів, антибіотиків та ін.,д) харчова й легка промисловість: дріжджі (вино, пиво, хліб), молочнокислі бактерії (кисломолочні продукти, сири, квашіння, окислювання шкір); 2) шкідливе - а)збудники захворювань людей, тварин, рослин; б)псування харчових продуктів, руйнування різних матеріалів і товарів. Мікробіологія як наука: 1) медична, ветеринарна, санітарна, сільськогосподарська, водна, морська, геологічна, космічна, технічна; 2) мікробіологія харчових продуктів: молока і молочних продуктів, м’ясних і рибних продуктів, фруктів та овочів і продукти їх переробки тощо; 3) мікробіологія непродовольчих товарів: деревини, шкір і хутра, волокнистих матеріалів тощо. |