Экзаменационные вопросы по дисциплине Микробиология, вирусология
 Скачать 0.77 Mb.
|
|
Бруцеллезный единый диагностикум. Взвесь убитых бруцелл, окрашенных метиленовым синим, применяется при серологической диагностике бруцеллеза постановкой реакции агглютинации Райта и Хеддлсона. Накожная сухая живая бруцеллезная профилактическая вакцина. Взвесь вакцинного штамма. В. abortus применяется для профилактики бруцеллеза. 23. Возбудитель сибирской язвы. Таксономия, его свойства, экология, особенности морфологии. Культуральные особенности. Отличительные признаки возбудителя сибирской язвы от сходных бацилл. Клинические формы. Принципы и методы микробиологической диагностики. Препараты для специфического лечения и профилактики. Сибирская язва - острая антропонозная инфекционная болезнь, вызываемая Bacillus anthracis, характеризуется тяжелой интоксикацией, поражением кожи, лимфатических узлов. Таксономия: Царство: прокариоты Отдел: скотобактерии Класс: бактерии Семейство: Bacillaceae Вид: Bacillus anthracis Морфологические свойства. Очень крупные грамположительные палочки с обрубленными концами, в мазке из чистой культуры располагаются короткими цепочками (стрептобациллы). Неподвижны; образуют расположенные центрально споры, а также капсулу. Культуральные свойства. Аэробы. Хорошо растут на простых питательных средах в диапазоне температур 10—40С, температурный оптимум роста 35С. На жидких средах дают придонный рост; на плотных средах образуют крупные, с неровными краями (львиная грива), шероховатые матовые колонии (R-форма). На средах, содержащих пенициллин, через 3ч роста сибиреязвенные бациллы образуют сферопласты, расположенные цепочкой и напоминающие в мазке жемчужное ожерелье. Биохимические свойства. Ферментативная активность достаточно высока: возбудители ферментируют до кислоты глюкозу, сахарозу, мальтозу, крахмал, инулин; обладают протеолитической и липолитической активностью. Выделяют желатиназу, обладают слабой гемолитической, лецитиназной и фосфатазной активностью. Выделяют желатиназу, проявляют низкую гемолитическую, лецитиназную и фосфатазную активность. Антигены и факторы патогенности. Факторы агрессии: белки макрокапсулы - защита от фагоцитоза и комплемент-зависимого лизиса. Факторы инвазии: протеазы широкого спектра действия Экзотоксины: 1. Протективный антиген - мощный мембранотоксин, образующий поры в мембране гибель клетки 2. Отечный фактор - вызывает активацию аденилатциклазы и увеличение содержания цАМФ в клетке. 3. Летальный фактор - механизм действия не изучен. Резистентность. Вегетативная форма неустойчива к факторам окружающей среды, споры чрезвычайно устойчивы и сохраняются в окружающей среде, выдерживают кипячение. Чувствительны к пенициллину и другим антибиотикам; споры устойчивы к антисептикам. Эпидемиология и патогенез. Источник инфекции — больные животные, чаще крупный рогатый скот, овцы, свиньи. Человек заражается в основном контактным путем, реже алиментарно, при уходе за больными животными, переработке животного сырья, употреблении мяса. Входными воротами инфекции в большинстве случаев являются поврежденная кожа, значительно реже слизистые оболочки дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта. В основе патогенеза лежит действие экзотоксина, который вызывает коагуляцию белков, отек тканей, приводят к развитию токсико-инфекционного шока. Клиника. Сибирская язва - особо опасное заболевание. 1. При контактном пути заражения - кожная форма - наиболее легкая (язва с очагом некроза в месте внедрения). 2. При ингаляционном - легочная форма. Поражаются легкие и лимфатические узлы средостения, нарушается проходимость трахеи и бронхов. 3. При алиментарном пути заражения - кишечная форма. Наблюдается тяжелая интоксикация, рвота, поносы с кровью. При любой форме болезни возможна генерализация инфекционного процесса, ведущая к септицемии, но чаще это имеет место при легочной и кишечной формах, смертность при которых очень высока (70%). Иммунитет. После перенесенной болезни развивается стойкий клеточно-гуморальный иммунитет. Микробиологическая диагностика: Наиболее достоверным методом лабораторной диагностики сибирской язвы является выделение из исследуемого материала культуры возбудителя. Диагностическую ценность представляют также реакция термопреципитации по Асколи и кожно-аллергическая проба. Бактериоскопическое исследование. Изучение окрашенных по Граму мазков из патологического материала позволяет обнаружить возбудителя, представляющего собой грамположительную крупную неподвижную стрептобациллу. В организме больных и на белковой питательной среде микроорганизмы образуют капсулу, в почве— споры. Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают на чашки с питательным и кровяным агаром, а также в пробирку с питательным бульоном. Посевы инкубируют при 37С в течение 18ч. В бульоне В. anthracis растет в виде комка ваты; на агаре вирулентные штаммы образуют колонии R-формы. Авирулентные или слабовирулентные бактерии образуют S-формы колоний. В. anthracis обладает сахаролитическими свойствами, не гемолизирует эритроциты, медленно разжижает желатин. Под действием пенициллина образует сферопласты, имеющие вид «жемчужин». Это явление используется для дифференциации В. anthracis от непатогенных бацилл. Биопроба. Исследуемый материал вводят подкожно морским свинкам кроликам. Готовят мазки из крови и внутренних органов, делают посевы для выделения чистой культуры возбудителя. Экспресс-диагностика проводится с помощью реакции термопреципитации по Асколи и иммунофлюоресцентного метода. Реакцию Асколи ставят при необходимости диагностировать сибирскую язву у павших животных или у умерших людей. Образцы исследуемого материала измельчают и кипятят в пробирке с изотоническим раствором хлорида натрия в течение 10 мин, после чего фильтруют до полной прозрачности. Метод иммунофлюоресценции позволяет выявить капсульные формы В. anthracis в экссудате. Мазки из экссудата через 5—18 ч после заражения животного обрабатывают капсульной сибиреязвенной антисывороткой, а затем флюоресцирующей антикроличьей сывороткой. В препаратах, содержащих капсульные бациллы, наблюдается желто-зеленое свечение возбудителя. Кожно-аллергическая проба. Ставится на внутренней поверхности предплечья — внутрикожно вводят 0,1 мл антраксина. При положительной реакции через 24 ч появляются гиперемия и инфильтрат. Лечение: антибиотики и сибиреязвенный иммуноглобулин. Для антибактериальной терапии препарат выбора – пенициллин. Профилактика. Для специфической профилактики используют живую сибиреязвенную вакцину. Для экстренной профилактики назначают сибиреязвенный иммуноглобулин. Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка. Получена из крови кролика, гипериммунизированного культурой В. anthracis. Применяется для постановки реакции термопреципитации по Асколи. Сибиреязвенная живая вакцина СТИ. Высушенную взвесь живых спор В. anthracis авирулентного бес-капсульного штамма. Применяется для профилактики сибирской язвы. Противосибиреязвенный иммуноглобулин. Гамма-глобулиновая фракция сыворотки крови лошади, гипериммунизированной живой сибиреязвенной вакциной и вирулентным штаммом В.anthracis, используется с профилактической и лечебной целью. 24. Таксономия, биологические свойства возбудителя дифтерии и его биоваров. Дифференциация возбудителя дифтерии и условно - патогенных 0коринебактерий и биоваров. Дифтерийный токсин и методы определения токсигенности дифтерийной палочки. Эпидемиология, клинические формы и патогенез заболевания, особенности иммунитета. Принципы и методы микробиологической диагностики. Специфическая профилактика и лечение. Дифтерия — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся фибринозным воспалением в зеве, гортани, реже в других органах и явлениями интоксикации. Возбудителем ее является Corynebacterium diphtheriae. Таксономия. Царство: прокариоты Отдел: скотобактерии Класс: бактерии Семейство: Carinobacteriaceae Вид: Corinobacterium diphtheriae Морфологические и тинкториальные свойства. Возбудитель дифтерии характеризуется полиморфизмом: тонкие, слегка изогнутые палочки (наиб. распространенные). Бактерии нередко располагаются под углом друг к другу. Они не образуют спор, не имеют жгутиков, у многих штаммов выявляют микрокапсулу. Характерная особенность - наличие на концах палочки зерен волютина (обусловливает булавовидную форму). Возбудитель дифтерии по Граму окрашивается положительно. Культуральные свойства. Факультативный анаэроб. Микроб растет на специальных питательных средах, например, на среде Клауберга (кровяно-теллуритовый агар), на которой дифтерийная палочка даёт колонии 3 типов: а) крупные, серые, с неровными краями, радиальной исчерченностью, напоминающие маргаритки; б) мелкие, черные, выпуклые, с ровными краями; в) похожие на первые и вторые. В зависимости от культуральных и ферментативных свойств различают 3 биологических варианта C.diphtheriae: gravis, mitis и промежуточный intermedius. Ферментативная активность. Высокая. Ферментируют глк и мальтозу в образование кислоты, не разлагают сахарозу, лактозу и маннит. Не продуцируют уреазу и не образуют индол. Продуцирует фермент цистиназу, рпсщепляющую цистеин до H2S. Образует каталазу, сукцинатдегидрогеназу. Антигенные свойства. О-антигены – термостабильные полисахаридные, расположены в глубине клеточной стенки. К-антигены – поверхностные, термолабильные, серовароспецифические. С помощью сывороток к К-антигену С.diph. разделяют на серовары (58). Факторы патогенности. Токсины: Основную роль в патогенности дфитерийной палочки играет дифтерийный экзотоксин. Он угнетает синтез белка и состоит из 2-х субъединиц - А и В. Субъединица А отвечает за проникновение в клетку, В – за связывание с рецептором. Проникновение складывается из 2-х стадий: 1) Специфический эндоцитоз за счет рецепторов 2) Возможно проникновение без участия рецепторов, с помощью мембранного канала Токсин действует на клетки чувствительных к нему органов (надпочечники, миокард, нервная система), удлинняя фактор элонгации и блокируя таким образом синтез белка, что приводит к гибели клеток (некроз). Токсин может всысываться в кровь и оказывать генерализованное действие на многие клетки. Информация о синтезе токсина заложена в геноме дифтерийной палочки. Однако, для того, чтобы токсин мог секретироваться, необходима специальная протеаза, информация о синтезе которой заложена в профаге. Таким образом, дифтерийные палочки обладают токсигенностью (способностью выделять токсин) только при наличии профага. Ферменты: нейраминидаза, гиалуронидаза, фибринолизин. Являются факторами инвазии, хотя она не свойственна дифтерийной палочке. Корд-фактор (димиколат трегалозы) - нарушает процессы процессы фосфорилирования и дыхания в клетках. Факторы адгезии: фимбрии (реснички). Резистентность. Устойчив к высушиванию, действию низких температур, поэтому в течение нескольких дней может сохраняться на предметах, в воде. Эпидемиология. Источник дифтерии — больные люди. Заражение происходит чаще через дыхательные пути. Основной путь передачи воздушно-капельный, возможен и контактный путь — через белье, посуду. Патогенез. Входные ворота инфекции — слизистые оболочки зева, носа, дыхательных путей, глаз, половых органов, раневая поверхность. На месте входных ворот наблюдается фибринозное воспаление, образуется характерная пленка, которая с трудом отделяется от подлежащих тканей. Бактерии выделяют экзотоксин, попадающий в кровь, — развивается токсинемия. Токсин поражает миокард, почки, надпочечники, нервную систему. Клиника. Существуют различные по локализации формы дифтерии: дифтерия зева, которая наблюдается в 85—90 % случаев, дифтерия носа, гортани, глаз, наружных половых органов, кожи, ран. Инкубационный период составляет от 2 до 10 дней. Заболевание начинается с повышения температуры тела, боли при глотании, появления пленки на миндалинах, увеличения лимфатических узлов. Отека гортани, развивается дифтерийный круп, который может привести к асфиксии и смерти. Другими тяжелыми осложнениями, которые также могут явиться причиной смерти, являются токсический миокардит, паралич дыхательных мышц. Иммунитет. После заболевания - стойкий, напряженный антитоксичный иммунитет. Особое значение – образование АТ к фрагменту В. Они нейтрализуют дифтерийный гистотоксин, предупреждая прикрепление последнего к клетке. Антибактериальный иммунитет – ненапряженный, серовароспецифичен. Для определения напряженности антитоксического иммунитета применяют реакцию Шика (внутрикожное вве- дение дифтерийного токсина). При слабой напряженности иммунитета наблюдается местная воспалительная реакция. Микробиологическая диагностика. С помощью тампона у больного берут пленку и слизь из зева и носа. Бактериоскопический метод. Окраска по методу Нейссера или метиленовыми синим. Важное значение имеет дифференциальная диагностика дифтерийной палочки с другими коринебактериями - представителями нормальной микрофлоры (дифтериоидами). В мазках они раполагаются в виде «частокола», а не в виде буквы «V», а также не имеют зерен волютина или содержат их по длине палочки, а не на концах. При люминесцентной микроскопии для зерен волютина C. diphtheriae характерно коричнево-красное свечение. Бактериологический метод. Основной метод диагностики — бактериологический: посев на среду Клаубера II (кровяно-теллуритовый агар), на плотную сывороточную среду для выявления продукции цистиназы, на среды Гисса, на среду для определения токсигенности возбудителя. Внутривидовая идентификация заключается в определении био- и серовара. Для ускоренного обнаружения дифтерийного токсина применяют: РПГА с антительным эритроцитарным диагностикумом, реакцию нейтрализации антител (о наличии токсина судят по эффекту предотвращения гемаггютинации); РИА (радиоиммунный) и ИФА (имунноферментный анализ). Лечение. Основной метод терапии — немедленное введение специфической антитоксической противодифтерийной лошадиной жидкой сыворотки. Иммуноглобулин человека противодифтерийный для в/в введения. Ассоциированные вакцины: АКДС (абсорбированная коклюшно–столбнячная вакцина), АДС (абсорбирован-ный дифтерийно - столбнячный анатоксин). 25. Бордетеллы, таксономия, вызываемые заболевания. Возбудитель коклюша, культуральные особенности, особенности, факторы патогенности. Патогенез, клинические периоды коклюша. Принципы и методы микробиологической диагностики. Дифференциация возбудителей коклюша, паракоклюша и бронхосептикоза. Специфическая профилактика коклюша. Коклюш — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением верхних дыхательных путей, приступами спазматического кашля; наблюдается преимущественно у детей. Возбудитель коклюша Bordetella pertussis. Таксономия. Царство: прокариоты Отдел: скотобактерии Класс: бактерии Семейство: Alcaligenaceae Вид: B.pertussis. Морфологические и тинкториальные свойства. В.pertussis — мелкая овоидная грамотрицательная палочка с закругленными концами. Спор и жгутиков не имеет, образует микрокапсулу, пили. Культуральные и биохимические свойства. Строгий аэроб. Оптимальная температура культивирования 37С. B.pertussis очень медленно растет только на специальных питательных средах, например на казеиново-угольном агаре — КУА, среде Борде — Жангу (картофельно-глицериновый агар с добавлением крови), образуя колонии, похожие на капельки ртути. Характерна R-S-трансформация. Расщепляют глк. и лактозу до кислоты без газа. Антигенная структура. Антиген, который обусловливает формирование в организме агглютинирующих антител (агглютининов), может состоять из нескольких компонентов, которые называют факторами. Всего известно 14 факторов. Фактор 7 — родовой, его содержат оба возбудителя. Фактор 1 имеет только возбудитель коклюша, 14 — только паракоклюша, остальные встречаются в различных сочетаниях. Так, для B. pertussis характерно сочетание факторов 2, 3, 4, 5, 6, для B. parapertussis — 8, 9, 10. Таким образом, агглютинация адсорбированными факторными сыворотками позволяет разграничить возбудителей коклюша и паракоклюша. Отличаются они и по культуральным свойствам. Биохимически оба возбудителя инертны. К – антигены выявляют в реакции агглютинации Факторы патогенности. Адгезины: 1. Филаментозный гемагглютинин. Содержит трипептид RGD, аналогичный центру связывания CR3 (имеется на лейкоцитах, эндотелиальных клетках) прилипание к лейкоцитам, клеткам эндотелия. 2. Реснички 3. Пертактин (белок НМКС) адгезия к эпителию трахеи. 4. Трахеальный колонизируюий фактор. Способны к пенетрации и внутриклеточному паразитированию. Токсины: 1. Пертуссис-токсин - стимулирует синтез аденилатциклазы в реснитчатом эпителии, обладает адгезионными свойствами, за счет взаимодействия с интегринами клеток вызывает их склеивание. 2. Аденилатциклаза-гемолизин. 3. Дерматонекротический токсин - вызывает гибель клеток (некроз) за счет угнетения Na-K-зависимой АТФазы. 4. Трахеальный цитотоксин - секретируемый пептидогликан, вызывает гибель эпителиальных клеток 5. Фактор вариации вирулентности. Бордетеллы могут изменять вирулентность. Существует 4 фазы - вирулентная, 2 промежуточных, авирулентная. Изменение вирулентности - генетически детерминированный индуцибильный процесс, индуктором которого является температура. |