Особенности взятия крови для биохимических исследований. Клинбх реферат. Кафедра клинической лабораторной диагностики Дисциплина Клиническая биохимия Внеаудиторная самостоятельная работа Особенности взятия крови для биохимических исследований. Методы получения плазмы и сыворотки крови. Виды антикоагулянтов

• Название: Кафедра клинической лабораторной диагностики Дисциплина Клиническая биохимия Внеаудиторная самостоятельная работа Особенности взятия крови для биохимических исследований. Методы получения плазмы и сыворотки крови. Виды антикоагулянтов
• Анкор: Особенности взятия крови для биохимических исследований
• Дата: 06.10.2021
• Размер: 38.46 Kb.
• Имя файла: Клинбх реферат.docx
• Тип: Самостоятельная работа; #242580

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования “Волгоградский государственный медицинский университет” Министерства здравоохранения Российской Федерации

Кафедра клинической лабораторной диагностики
Дисциплина: Клиническая биохимия

Внеаудиторная самостоятельная работа

Особенности взятия крови для биохимических исследований. Методы получения плазмы и сыворотки крови. Виды антикоагулянтов.

Работу выполнил:
студент 2 курса 2 группы
лечебного факультета
Качалин Владимир Андреевич



г. Волгоград 2021

Оглавление		Стр.
1	Введение	3
2.	Особенности взятия крови для биохимических исследований	4
3.	Методы получения сыворотки и плазмы крови	7
4.	Виды антикоагулянтов	8
5.	Заключение	10
6.	Список литературы	11

Введение

Заболевания сопровождают нас на протяжении многих лет. В настоящее время уровень развития медицинской науки позволяет грамотно и точно определить диагноз и назначить лечение. Не обходится и без биохимического анализа крови.

В данной работе будет освещены особенности взятия крови для биохимических исследований, методы получения плазмы и сыворотки крови, а также виды антикоагулянтов.

2. 
   Особенности взятия крови для биохимических исследований
   

Решение о заборе крови для исследования КОС, газового состава, электролитов и метаболитов обычно основывается на клинических или инструментальных данных, отражающих наличие патологического процесса или состояния, нарушающего деятельность одной или более функциональных систем организма. Эти данные используются для подтверждения диагноза,оценки степени тяжести патологических сдвигов и определения стратегии интенсивной терапии и реанимации.

Кровь для исследования рассматриваемых параметров может быть получена не только из артериальных сосудов, но и капилляров, периферических и центральных вен, а также легочной артерии. Артериальная кровь является лучшим источником для оценки оксигенационной, вентиляционной функции легких и величины доставки кислорода тканям.

При затруднениях, связанных с получением пробы артериальной крови, альтернативным источником этих данных может быть капиллярная кровь, забираемая из мякоти концевых фаланг среднего и безымянного пальцев кисти или мочки уха. Однако возможность использования этого источника для оценки рассматриваемых функций легких ограничена при любом состоянии, сопровождающемся значительным снижением кожного кровотока, например, при шоке.

Перед забором крови для анализа необходимо выполнить подготовительные мероприятия, позволяющие получить максимально точную и полную информацию и избежать ряда дефектов. В их число входят:

1. 
   Мероприятия, уменьшающие влияние пациента на исследуемые параметры, путем снижения чувства тревоги, страха и боли:
   

• 
  информирование пациента о проводимом заборе крови.
  
• 
  местное обезболивание раствором лидокаина 1—2% или 0,5% новокаина.
  

1. 
   Мероприятия, позволяющие использовать результаты анализа для получения дополнительной информации о состоянии пациента:
   

• 
  проведение термометрии.
  

- фиксация фракционной концентрации кислорода во вдыхаемой газовой смеси.

3. 
   Мероприятия, позволяющие уменьшить возможные осложнения:
   

• 
  определение адекватности коллатерального кровотока с помощью ультразвуковой допплерографии, фотоплетизмографии или пульсоксиметрии.
  
• 
  использование для пункции артерий игл 21—25 G.
  

Забор крови для исследования КОС и газового состава необходимо проводить в анаэробных условиях. При несоблюдении этого условия обычные сдвиги газового состава в пробе крови характеризуются повышением рО₂, рН и снижением рСО₂. Сдвиги определяются объемом воздушного пузырька и его экспозицией. Значимым принято считать объем пузырька, составляющий 0,5—1% от объема крови, при его существовании более 30 с. При попадании пузырька в пробу крови, его немедленно удаляют. С целью обеспечения анаэробных условий лучше применять специальные средства для забора крови (шприцы PICO 70, Pro-Vent, Quick-ABG).

Перемешивание и гомогенизация крови.

Цель данной процедуры — придание пробе однородности и равномерное распределение антикоагулянта для предотвращения образования сгустков. Проводится сразу после забора крови и удаления воздушного пузырька и непосредственно перед анализом пробы. Методика выполнения проста. При заборе в шприц около 5 раз его переворачивают и затем вращают между ладоней в течение 5 секунд. При заборе в капилляр — смешивают движением металлического стержня с помощью магнита по всей длине капилляра от 5 до 20 раз. Недостаточная гомогенизация считается основным источником ошибок при заборе крови. Она приводит к неправильной оценке содержания гемоглобина, гематокрита, актуального и стандартного гидрокарбоната, содержания кислорода.

Профилактика образования сгустков.

Образование микросгустков в пробе начинается через 15 секунд, в связи с чем необходимо обеспечить полную антикоагуляцию в пробе. Традиционно для предотвращения коагуляции крови в образце используется раствор натриевой соли гепарина. Использовать антикоагулянт необходимо в достаточном количестве (12—50 Ед сухого и 4—6 Ед раствора гепарина на 1 мл крови для пластикового шприца) и немедленно. В случае подозрения на наличие коагуляции в пробе, необходимо использовать ловушку сгустков.

Концентрация гепарина в пробе не должна превышать 50 Ед/мл, а «мертвое пространство» шприца, заполненное гепарином, не должно быть более 5% от объема взятой крови [1].

Взятие капиллярной крови у пациента должно проводиться следующим образом:

1. 
   Пациент должен сидеть напротив врача, рука (лучше нерабочая)
   должна находиться на столе.
   
2. 
   Забор крови проводят из 4-го пальца, поскольку синовиальное
   влагалище его изолировано, что предотвращает распространение воспалительного процесса на кисть в случае инфицирования места укола.
   
3. 
   Кожа пальца дезинфицируется спиртом.
   
4. 
   Скарификатор берут пинцетом из стерилизатора за середину, а за-
   тем рукой за конец, противоположный колющему, подняв скарификатор острием вверх, чтобы капля жидкости не стекала за режущий край.
   
5. 
   Прокол кожи делают в подушечке пальца в центральной точке,
   скарификатор погружают на всю глубину режущей поверхности.
   
   
6. 
   Первую каплю крови снимают сухой ватой (чтобы не было при-
   меси тканевой жидкости), тщательно вытирают палец (кожа должна быть
   сухой).
   
7. 
   Следующая капля крови должна иметь выпуклый мениск и не
   растекаться по пальцу, эта и последующие капли крови берутся для анализа.
   
8. 
   После забора крови место укола обрабатывается спиртом или йодом [2].
   

2. 
   Методы получения сыворотки и плазмы крови.
   

Основной принцип выделения компонентов в различии их плотности. Плазма кровипредставляет собой кровь, лишенную клеточных элементов, но содержащую фибриноген и факторы свертывания крови. Забор крови производят в стеклянные центрифужные пробирки с добавлением раствора гепарина (25 ЕД/мл) или 3,8 % раствора цитрата натрия (1 мл на 10 мл крови), центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут. Клетки крови - эритроциты и лейкоциты осаждаются, и в верхней части гемоконтейнера остается надосадочная жидкость светло-жёлтого цвета (супернатант, центрифугах), являющийся плазмой, обогащенной тромбоцитами. За счет выбора времени и скорости центрифугирования удается регулировать состав выделяемого компонента. Плазму крови отбирают пастеровской пипеткой или дозатором (V=l мл) и хранят в холодильнике при +4 °С.

Сыворотка кровипредставляет собой кровь, лишенную клеточных элементов и фибриногена (предшественника фибрина). Кровь набирают в стеклянные центрифужные пробирки без антикоагулянта и помещают в термостат при +37 °С на 1 час. Образовавшийся сгусток отделяют от стенок стеклянной палочкой, иногда достаточно встряхивания пробирки. После этого кровь центрифугируют 10-15 мин при 1000-1500 об/мин (пластмассовые пробирки можно центрифугировать при 2000-3000 об/мин меньшее время). После чего отбирают надосадочную жидкость - сыворотку и переносят в чистую пробирку. Сыворотку крови хранят в холодильнике при +4 °С [5].

2. 
   Виды антикоагулянтов
   

Антикоагулянты – это лекарственные средства, препятствующие тромбообразованию за счет воздействия на плазменные факторы свертывания крови.

Антикоагулянты в основном тормозят появление нитей фибрина и способствуют прекращению роста уже возникших тром- бов, противодействуя влиянию тромбина на фибрин. Они также усиливают воздействие на тромбы эндогенных фибринолитических ферментов.

Антикоагулянты делят на две группы:

а) антикоагулянты прямые – (т. е. взаимо действующие непосредственно с фактора- ми свертывания крови), эффективные in vitroи invivo;

б) антиакоагулянты непрямые (антагонисты витамина К) – длительного действия, действуют только in vivo и после латентного периода.

К антикоагулянтам прямого действия относят гепарин, который может быть нефракционированным (НФГ) и фракционированным (низкомолекулярным) – (НМГ), а также селективные ингибиторы тромбина прямого действия. Кроме того, к прямым антикоагулянтам относят фондапаринукс натрия – синтетический препарат, обладающий сходным с гепарином действием.

Нефракционированный гепарин (гепарин натрий)

Получают из легких крупного рогатого скота и слизистой оболочки кишечника свиней.

Гепарин связывается антитромбином III (АТIII), вызывает конформационные изменения в его молекуле и ускоряет комплексирование антитромбина III с серинпротеазами системы коагуляции; в результате блокируется тромбин, ферментативная активность активированных факторов IX – XII, плазмина и калликреина.

Наиболее высокая биодоступность отмечается при внутривенном введении. После внутривенного введения действие начинается немедленно, период полувыведения (T_1/2) составляет 1 ч. При подкожном введении биодоступность низкая (10–40 %), T_1/2 составляет 1–2 ч [4].

Низкомолекулярные (фракционированные) гепарины

Гепарины с низкой молекулярной массой или низкомолекулярные гепарины (НМГ) получают путем химической или фермента- тивной деполимеризации нефракционирован- ного гепарина (НФГ) и составляют примерно 1/3 размера его молекулы. НМГ состоят из смеси полисахаридов со средней молекуляр- ной массой 4000–6000 дальтон. Механизм влияния НФГ и НМГ на факторы свертыва- ния крови сходен, однако имеются различия в антикоагулянтных свойствах, биодоступ- ности, фармакокинетике и действии на тром- боциты.

НМГ в отличие от НФГ обладают преиму- щественно анти-Ха-фактором активностью, в меньшей степени блокируя непосредственно тромбин. Соотношение: анти-тромбин/анти- Ха-фактор активности у НФГ составляет 1/1, а у разных НМГ от 1/1,5 до 1/4.

НМГ меньше связываются с белками плазмы, макрофагами и эндотелиальными клетками, что обеспечивает лучшую биодоступность его небольших доз и быструю всасываемость из подкожных депо.

НМГ меньше влияют на тромбоциты и реже вызывают развитие тромбоцитопений, а следовательно и геморрагических осложнений при его применении.

В общем, антикоагуляционное действие НМГ более предсказуемо и стабильно, чем действие НФГ.

В настоящее время известно множество НМГ, из которых в нашей стране чаще применяются: надропарин кальций (фраксипарин), эноксапарин натрий (клексан, ловенокс), дальтепарин натрий (фрагмин), ревипарин натрий (кливарин) [3].

Заключение

Использование инновационных знаний в области медицины лабораторная диагностика достигла немалых высот и все эти достижения позволяют лучше и точнее определить причину патологии и поставить верный диагноз.

В ходе данной работы были освещены особенности взятия крови для биохимических исследований, методы получения плазмы и сыворотки крови, а также виды антикоагулянтов.

Список литературы:

1. 
   А. Е. Муронов, И. Б. Заболотских: ПРАВИЛА ЗАБОРА И ХРАНЕНИЯ КРОВИДЛЯ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ А. Е.
   
2. 
   Блиняева, Л. Г. Физиология крови: учебно-методическое пособие / Л. Г. Блиняева, В. О. Лемешевский, М. В. Синелева. – Минск : ИВЦ Минфина, 2018. – 60 с.
   
3. 
   Е.Ю. Васильева, И.И. Воробьева: АНТИКОАГУЛЯНТЫ В КАРДИОЛОГИИ: ПЕРСПЕКТИВЫ НОВЫХ ЛЕКАРСТВ
   
4. 
   Д. Н. Емельянов, В. С. Сергеев: АНТИКОАГУЛЯНТЫ В КАРДИОЛОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ
   

Фомина, М.В.Ф76 Правила работы в биохимической лаборатории: методические указания к учебно-ознакомительной, специальной (распределённой практике) и преддипломной практике / М.В. Фомина, О.А. Науменко Н.В. Малышева; Оренбургский гос. ун-т. — Оренбург: ОГУ, 2012. - 3 2 с.