лекции по микробиологии. Курс лекций по микробиологии пятигорск, 2008 Империя Доклеточные Империя Клеточные Надцарство Эукариоты
 Скачать 1.67 Mb.
|
|
Аспирационный метод Кротова - более точный количественный метод. Посев воздуха осуществляется с помощью аппарата Кротова. Прибор Кротова устроен так, что можно сделать посев определенного объема воздуха на различные среды. Для определения общего количества сапрофитных бактерий пропускают 100 л воздуха и используют МПА. Для определения количества дрожжевых и плесневых грибов пропускают 250 л воздуха и используют среду Сабуро. Для определения количества санитарно-показательных микробов пропускают 250 л и используют желточно-солевой агар для стафилококка, среду Гарро (кровяной агар с генциановым фиолетовым) для стрептококков. В каждом помещении делают посевы на 5-10 чашек Петри. Посевы на МПА, среде Гарро и желточно-солевом агаре инкубируют при 37 С, 24 часа, а затем выдерживают при комнатной температуре 24 часа. Посевы на среде Сабуро – при 22-28 С, 4 сут. После инкубации подсчитывают количество колоний и производят пересчет на 1 м 3 воздуха. Идентификацию стафилококка, выросшего на желточно-солевом агаре, проводят по специальным тестам. Нормативы. Хотя официальных стандартов чистоты воздуха не разработано, приняты примерные показатели, по которым оценивается степень микробного загрязнения воздуха жилых помещений. Летний режим Зимний режим Микробное число Зеленящий и гемолитическ ий стрептококки Микробное число Зеленящий и гемолитический стрептококки Чистый Менее 1500 Менее 16 Менее 4500 Менее 36 Загрязнённый Более 2500 Более 36 Более 7000 Более 124 Разработаны нормативы микробной загрязненности различных помещений аптеки. Наименование помещений Условия работы Количество микроорганизмов в 1м 3 (1000 л) воздуха общее золотистого стафилококк а плесневых и дрожжевых грибов Асептический блок, стерилизационная (чистая половина) До работы Не выше 500 Не должно быть в 250 л воздуха После работы Не выше 1000 То же Ассистентская, фасовочная, дефекторная, материальная До работы Не выше 750 То же После работы Не выше 1000 То же Моечная Во время работы Не выше 1000 Не должно быть в 250 л воздуха До 12 Зал обслуживания Во время работы Не выше 1500 До 100 До 20 ЛЕКЦИЯ №8 Нормальная микрофлора организма человека. Дисбактериозы. Пробиотики. Нормальная микрофлора человека – это совокупность микробных сообществ (биоценозов) в организме здоровых людей. Микробные биоценозы сформировались в процессе эволюции в результате приспособления микроорганизмов друг к другу и к организму человека. В состав нормальной микрофлоры входит более чем 500 видов микроорганизмов. В норме встречаются как безвредные, так и болезнетворные микроорганизмы. Все виды находятся в состоянии эубиоза - динамического равновесия друг с другом и с организмом человека. Организм человека и его нормальная микрофлора это единая экологическая система. Нормальную микрофлору человека делят на 2 группы: а) аутохтонная (резидентная) – облигатная микрофлора; она состоит из постоянных микроорганизмов, максимально приспособленных к существованию в организме хозяина (сапрофиты, условно-патогенные); б) аллохтонная (транзиторная) – факультативная микрофлора; она состоит из временных микроорганизмов, которые не могут долго жить в организме человека (сапрофиты и условно-патогенные). Иногда у здоровых людей могут встречаться патогенные бактерии и вирусы (бактерио- и вирусоносительство). Микрофлора заселяет поверхность тела и полости, сообщающиеся с окружающей средой (кроме лёгких и матки). В связи с этим различают микрофлору кожи, слизистых оболочек, полости рта, верхних дыхательных путей, пищеварительного тракта и мочеполовой системы. Остальные органы и ткани человека, а также кровь, лимфа, спинномозговая жидкость стерильны (так как в них отсутствуют микроорганизмы). Для микрофлоры каждой области тела человека характерно относительное постоянство. Микрофлора кожи. Микроорганизмы находятся на поверхности кожи, в волосяных мешочках, в сальных и потовых желёзах. Они питаются выделениями жировых и сальных желёз, отмершими клетками, продуктами распада. На 1 см 2 – 80 тысяч микроорганизмов. Видовой состав: 1) непатогенные стафилококки (S. epidermidis, S. saprophyticus), сарцины, дифтероиды, плесневые и дрожжеподобные грибы (C. albicans), коринебактерии, спорообразующие бациллы (Bac. subtilis), микобактерии; 2) некоторые патогенные и условно-патогенные – S. aureus (5%), стрептококки. Наибольшее количество микробов находится на открытых участках кожи (руки, лицо, шея, ушные раковины). На коже можно обнаружить транзиторные микробы, но они быстро исчезают, так как кожа обладает бактерицидным действием (уничтожение микробов). Бактерицидное действие обусловлено содержанием в поте противомикробных веществ: -глобулинов, иммуноглобулинов A , трансферрина, лизоцима и др. Это действие более эффективно, если кожа чистая. На грязной коже наблюдается усиление роста микроорганизмов, которые и определяют запах тела. Микрофлора кожи имеет большое значение в загрязнение воздуха микроорганизмами. Это происходит при шелушении кожи, так как на чешуйках находятся микроорганизмы. Через грязные руки может произойти загрязнение лекарственных средств микроорганизмами, которые вызывают их порчу. Микрофлора верхних дыхательных путей. Микроорганизмы попадают в верхние дыхательные пути вместе с частичками пыли. Большая их часть задерживается в носо- и рото-глотке. Трахея и бронхи – стерильны. В носовой полости содержится небольшое количество микробов. В носоглотке их значительно больше: стрептококки (Str. mitis – 80-90%), бактероиды, нейссерии, вейлонеллы, стафилококки, дифтероиды, лактобактерии. Встречаются патогенные и условно-патогенные микробы: Str. pneumonia, Neisseria meningitis. При ослаблении защитных сил они могут вызывать заболевания дыхательных путей: ангины, бронхиты и др. У носителей болезнетворных микробов могут встречаться гемолитические стрептококки, стафилококки, а также дифтерийная палочка, менингококки, туберкулёзная палочка, некоторые болезнетворные вирусы (гриппа, стоматита). Микрофлора пищеварительного тракта. Микрофлора пищеварительного тракта наиболее стабильна и разнообразна по своему составу. Микроорганизмы находятся в полости и на слизистых оболочках. В разных отделах пищеварительного тракта состав микрофлоры различен. В ротовой полости имеются благоприятные условия для многих микробов: температура, влажность, слабощелочное значение рН. Здесь находится более 100 видов микроорганизмов (в 1 мл слюны – 10 8 микробных тел). Основная масса локализована в зубном налёте (в 1 мг – 250 миллионов микробных тел). Главную роль в формировании постоянной микрофлоры играет слюна, так как она обладает бактерицидным действием. В ней находятся противомикробные вещества: лизоцим, лактоферрин, пероксидаза, нуклеаза, секреторный иммуноглобулин. В ротовой полости обитают стрептококки (Str. salivarius – наиболее постоянный обитатель), лактобациллы, вейлонеллы, нейссерии, коринебактерии, бактероиды. Обнаруживаются гемофильные бактерии, трепонемы, дрожжеподобные грибы, актиномицеты, микоплазмы, простейшие. В желудке содержится незначительное количество микробов. Желудочный сок имеет кислое значение рН, что вызывает гибель микроорганизмов. Желудочный сок – надёжный защитный барьер от проникновения в кишечник патогенных и условно- патогенных микробов. Если кислотность снижается, в желудке обнаруживаются лактобациллы, дрожжи, Bac. subtilis, Sarcina ventriculus, поступающие из ротовой полости. Возможно также проникновение в желудок, а затем и в кишечник дизентерийных, брюшнотифозных, паратифозных бактерий, холерных вибрионов и других патогенных микробов. При гастритах и язвенной болезни в желудке обнаруживается Campylobacter pylori. В верхнем отделе тонкой кишки обитает мало микроорганизмов, так как в тонкой кишке содержится много ферментов. Здесь обнаруживаются бифидобактерии, клостридии, эубактерии, лактобациллы, анаэробные кокки. В нижних отделах тонкой кишки микрофлора приближается к микрофлоре толстого кишечника. В толстой кишке содержатся огромное количество микробов, так как здесь имеются благоприятные условия для размножения многих микроорганизмов. За сутки с фекалиями выделяется 17 10 12 микробных тел, что составляет 1/3 сухой массы фекалий. В толстой кишке обитает около 260 видов факультативных и облигатных анаэробов. Облигатные анаэробы составляют 96-99%: 1) грамположительные неспоровые палочки – бифидобактерии, лактобактерии, эубактерии, катенобактерии; 2) грамотрицательные неспоровые палочки – бактероиды; 3) грамположительные споровые палочки – C. perfringens, C. sporogenes (в небольших количествах). Бифидобактерии и бактероиды составляют 80-90%. Факультативные анаэробы составляют 1-4%: 1) грамотрицательные бактерии семейства Enterobacteriaceae: E. coli, p, Enterobacter, p. Citrobacter, p. Klebsiella, p. Proteus; 2) лактобациллы; 3) энтерококки (Str. faecalis). В небольшом количестве (0,001-0,01%) содержатся клебсиеллы, протей, дрожжи, синегнойная палочка, простейшие, вирусы. В очень редких случаях встречаются стафилококки и стрептококки. Значение микрофлоры человека. Л. Пастер пытался вывести безмикробных животных, для того чтобы изучить значение микробов. Но техника того времени не позволяла ответить на этот вопрос. В настоящее время безмикробную жизнь макроорганизмов изучает гнотобиология. У гнотобиотов (безмикробных животных), которых выращивают путём вскармливания стерильной пищей в специальных камерах, увеличена слепая кишка, недоразвита лимфоидная ткань, снижена масса внутренних органов, объём крови, содержание воды в тканях и антител в сыворотке крови, снижены клеточные и гуморальные факторы иммунитета. Таким образом, данные гнотобиологии говорят о жизненно важном значении микрофлоры. Микробные биоценозы поддерживают нормальные физиологические функции и играют определённую роль в иммунитете. Нарушения в микробных биоценозах во многих случаях могут привести к возникновению патологических процессов в соответствующих органах. Важную роль играет микрофлора толстой кишки. Она обладает выраженными антагонистическими свойствами (особенно анаэробные микробы) и препятствует развитию патогенных бактерий, которые могут попасть с пищей и водой в кишечник, а также гнилостных бактерий. Микробы – постоянные обитатели кишечника образуют бактериоцины, антибиотики, молочную кислоту, спирты, перекись водорода, жирные кислоты, которые подавляют размножение патогенных видов. Таким образом, анаэробы кишечника участвуют в обеспечении колонизационной резистентности, так как предотвращают колонизацию (заселение) слизистых оболочек посторонними микроорганизмами. Микробы кишечника также участвуют в процессах пищеварения, водно-солевом, белковом, углеводном, липидном обменах, образуют на слизистой оболочке кишечника защитную плёнку, способствуют формированию и развитию иммунной системы, участвуют в обезвреживании токсических соединений, синтезируют биологически активные вещества (витамины, антибиотики, бактериоцины). Большое значение имеет E. сoli, которая обладает высокой ферментативной активностью, синтезирует витамины B 1 , B 2 , B 12 , B 5 , K, обладает антагонистическими свойствами против патогенных представителей семейства Enterobacteriaceae, против стафилококков и грибов p. Candida. Но имеются и патогенные серовары E. coli, которые вызывают у детей младшего возраста тяжёлые заболевания – колиэнтериты, дизентериеподобные и холероподобные гастроэнтериты, а у взрослых – эшерихиозы в виде дизентериеподобных заболеваний или нагноительно-воспалительных поражений. Другие условно-патогенные представители нормальной микрофлоры также могут вызвать заболевания при снижении защитных сил организма: гнойно-воспалительные процессы после операций, при ожогах и обморожениях, а у новорожденных – поражения кожи, слизистых оболочек, сепсис. Условно-патогенные микроорганизмы кожи при несоблюдении правил гигиены или при ослаблении организма могут вызвать такие заболевания, как пиодермия, фурункулёз и т.д. Микроорганизмы полости рта могут служить одной из причин кариеса зубов. Дисбактериоз (дисбиоз). Дисбактериоз (дисбиоз) – это состояние, развивающееся в результате утраты нормальных функций микрофлоры. При этом происходит нарушение сложившегося равновесия между видами микробов, а также между ними и организмом человека, т.е. нарушается состояние эубиоза. При дисбактериозе происходят качественные и количественные изменения бактериальной микрофлоры. При дисбиозе – изменения и среди других микроорганизмов (вирусов, грибов). Дисбактериозы вызывают различные эндогенные (внутренние) и экзогенные (внешние) факторы. Чаще всего развиваются дисбактериозы кишечника. К важнейшим экзогенным факторам относится безконтрольное применение антибиотиков. Эти лекарственные средства селективно (избирательно) действуют на определённые микроорганизмы и уничтожают чувствительные к ним виды. Поэтому создаются условия для размножения видов, устойчивых к антибиотикам. Для нормальной микрофлоры кишечника характерно следующее соотношение между видами - преобладание анаэробных бифидобактерий и незначительное содержание аэробных бактерий, что способствует нормальной работе кишечника. При дисбактериозе кишечника это соотношение нарушается и преобладает аэробная флора, вплоть до полного отсутствия бифидо- и лактобактерий, резко увеличивается количество условно- патогенной микрофлоры, особенно часто встречаются патогенный стафилококк, протей, дрожжеподобные грибы рода Candida, клебсиеллы, реже – синегнойная палочка, клостридии. Главная причина дисбактериоза - нарушениеантагонистической активности нормальной микрофлоры кишечника (т.е. нарушение колонизационной резистентности). В результате аномально размножаются те микроорганизмы, которые в норме присутствуют в небольших количествах и относятся к факультативной (транзиторной) микрофлоре. Происходит нарастание и распространение гнилостных микроорганизмов p. Pseudomonas, p. Proteus, грибов p. Candida, в том числе условно-патогенных микробов, которые образуют токсические вещества (индол, скатол). Т.о. при дисбактериозе наблюдается: 1) резкое уменьшение общего количества микробов, вплоть до полного исчезновения отдельных видов нормальной микрофлоры (бифидо- и лактобактерий, нормальной кишечной палочки); 2) преобладание видов, которые в норме встречаются в минимальном количестве. В результате нарушения нормальной микрофлоры кишечника нарушается его нормальная работа, т.е. развивается дисфункция кишечника. Наблюдаются нарушения стула (запоры чередуются с поносами), метеоризм. Могут наблюдаться признаки общей интоксикации и развитие иммунодефицита (частые простудные заболевания, герпес, лямблиоз, кандидоз). Последствия дисбактериоза: 1) резкое увеличение антибиотикорезистентности бактерий; 2) снижение образования витаминов и ферментативной активности микрофлоры; 3) снижение иммунологической резистентности организма. Считается, сто дисбактериоз и дисбиоз – это эндогенные инфекции, развивающиеся чаще всего в результате нарушения нормальной микрофлоры антимикробными препаратами. Препараты для лечения дисбактериозов. Лечение заключается в восстановлении нормальной микрофлоры. Для восстановления нормальной микрофлоры применяются пробиотики. Пробиотики – это живые микроорганизмы или вещества, которые нормализуют состав и функции микрофлоры в организме. К пробиотикам относятся: 1) эубиотики – препараты, содержащие живые (лиофильно высушенные) микроорганизмы (чаще представители нормальной микрофлоры, обладающие выраженными антагонистическими свойствами). Они могут быть монокомпонентными (монокультуры) и поликомпонентными. Монокомпонентные: - колибактерин – живая культура кишечной палочки штамма М-17, антагонистически активного против патогенных бактерий семейства Enterobacteriaceae; - бифидумбактерин – живые Bifidobacterium bifidum в высушенном виде; - лактобактерин – высушенная взвесь живых антагонистически активных штаммов лактобактерий; - бактисубтил – препарат (в капсулах), содержащий высушенную культуру Bac. subtilis (штамм IР5832); - фловинин БС – чистая культура бацилл штамма IР5832 с вегетативными спорами. Поликомпонентные: - бификол – препарат, содержащий высушенные живые антагонистически активные штаммы кишечной палочки и бифидобактерий. - бифиформ – препарат, содержащий высушенные живые бифидобактерии и энтерококки; а также аципол, бифилакт, ацилакт,линекс . |