Лабораторная работа по ботанике. Лабораторная работа 1. Лабораторная работа 1. Устройство микроскопа и правила работы с ним
 Скачать 215.05 Kb.
|
|
Лабораторная работа №1. Устройство микроскопа и правила работы с ним Цель: Изучить устройство светового биологического микроскопа и освоить правила работы с ним. Оборудование, материалы: микроскоп; предметные стекла; постоянные микропрепараты. Общие сведения: Микроскоп (от греч. micros – малый и scopio – смотрю) – это оптический прибор, предназначенный для получения увеличенных изображений, а также измерения объектов или деталей структуры, невидимых или плохо видимых невооружённым глазом. Устройство микроскопа Схема светового биологического микроскопа представлена на рис.1. Механическая часть или штатив состоит из ножки, основания, тубусодержателя, предметного столика, монокулярной насадки (тубуса), револьверного устройства, рукоятки грубой фокусировки (макрометрического винта), рукоятки тонкой фокусировки (микрометрического винта). Тубус – зрительная труба микроскопа. В верхнее отверстие тубуса свободно вставляется окуляр, на нижнем конце тубуса находится вращающееся вокруг своей оси револьверное устройство (револьвер), в которое ввинчиваются объективы. Вращая револьвер, можно быстро сменить объективы во время работы с микроскопом, подводя любой объектив под тубус. Объектив должен быть центрирован, т.е. установлен на оптическую ось микроскопа. Для этого револьвер поворачивают вокруг своей оси до появления щелчка. Предметный столик служит для размещения на нем изучаемого препарата. Препарат закрепляют на столике зажимами (клеммами). В центре предметного столика находится отверстие для прохождения лучей света и освещения препарата. В некоторых конструкциях микроскопа предметный столик может передвигаться с помощью винтов, расположенных по периферии предметного столика. Это дает возможность рассмотреть препарат в различных полях зрения. Рукоятки грубой и тонкой фокусировки (макро- и микровинты) служат для перемещения тубуса вверх и вниз, что позволяет установить его на необходимом расстоянии от препарата. При вращении винтов по часовой стрелке тубус опускается, а при вращении против часовой стрелки – поднимается. При вращении макрометрического винта объектив ориентировочно устанавливается на фокус, т.е. на то расстояние от препарата, при котором он делается видимым. Микрометрический винт служит для точной установки на фокус. Оптическая часть является наиболее ценной частью микроскопа. Она состоит из объективов и окуляра. Окуляр (от лат. oculus – глаз) состоит их двух плосковыпуклых линз, заключенных в общую металлическую оправу. Отечественные микроскопы снабжены тремя сменными окулярами, увеличение которых указано на корпусе окуляра (х7; х10; х15). Объективы ввинчиваются в гнезда револьверного устройства и состоят из системы линз, заключенных в металлическую оправу. В гнезда револьверного устройства ввинчиваются четыре объектива, увеличение которых указано на корпусе объектива (х8; х20; х40; х90 или 100). Объективы подразделяются на сухие и иммерсионные. При работе с сухими объективами (х8, х20, х40) между фронтальной линзой и препаратом находится воздух. В этом случае лучи света проходят среды с различными показателями преломления (покровное стекло, воздух), часть их отклоняется и не попадает в объектив. При работе с иммерсионными объективами (х90 или х100) для устранения светорассеяния расстояние между фронтальной линзой объектива и препаратом заполняют иммерсионным (кедровым) маслом, показатель преломления лучей света которого близок к показателю преломления лучей света, проходящего через стекло. Общее увеличение микроскопа определяется как произведение увеличения объектива на увеличение окуляра. Например, если в работе используют окуляр х15, а под тубусом находится объектив х90, то увеличение рассматриваемого с помощью микроскопа объекта составит х1350.  Рис.1. Схема светового биологического микроскопа 1 – окуляр; 2 – монокулярная насадка (тубус); 3 – револьверное устройство; 4 – объектив; 5 – предметный столик; 6 – конденсор: 7 – корпус коллекторной линзы; 8 – патрон с лампой; 9 – шарнир; 10 – рукоятка перемещения кронштейна конденсора; 11 – рукоятка тонкой фокусировки (микрометрический винт); 12 – рукоятка грубой фокусировки макрометрический винт); 13 – тубусодержатель; 14 – винт для крепления насадки. Правила работы с микроскопом На рабочем столе микроскоп ставят тубусодержателем к себе на расстоянии 3-5 см от края стола; Включают микроскоп в сеть и устанавливают правильное освещение (если позволяют технические возможности микроскопа); На предметный столик помещают исследуемый препарат и закрепляют его клеммами; Под тубус помещают нужный объектив и с помощью макро- и микровинтов устанавливают фокусное расстояние. При работе с иммерсионными объективами на препарат предварительно наносят каплю иммерсионного масла и осторожно опускают тубусодержатель макровинтом до соприкосновения со стеклом. Затем, внимательно смотря в окуляр, очень медленно поднимают тубусодержатель, вращая его против часовой стрелки, до тех пор, пока не увидят изображение.) Точную наводку объектива на фокус производят микрометрическим винтом. При работе с сухими объективами препарат вначале рассматривают с объективом х8. Поднимая с помощью макровинта тубусодержатель и внимательно смотря в окуляр, устанавливают фокусное расстояние (около 9 мм) и добиваются четкости изображения, используя микрометрический винт. Далее, двигая предметный столик или предметное стекло, устанавливают в центр поля тот участок препарата, в котором лучше всего виден изучаемый объект. Затем, вращая револьверное устройство вокруг своей оси, под тубус помещают объектив на х20 или х40. При этом под тубус не должен попасть объектив х90. В револьверном устройстве объективы располагаются таким образом, что если найдено изображение с объективом х8, то при рассмотрении препарата с объективами большего увеличения нужно слегка подрегулировать четкость изображения с помощью макро- и микрометрических винтов; Во время микроскопирования необходимо держать оба глаза открытыми и пользоваться ими попеременно; После окончания работы следует убрать препарат с предметного столика, опустить вниз конденсор, поставить под тубус объектив х8, удалить мягкой тканью или марлей, смоченной в спирте, иммерсионное масло с фронтальной линзы объектива х90, под объектив положить марлевую салфетку, опустить тубусодержатель. Правила техники безопасности при работе в ботанической лаборатории Находясь в лаборатории, необходимо выполнять следующие общие требования и меры предосторожности: запрещается входить в лабораторию в верхней одежде; работать в лаборатории – только в специальном халате; на каждом лабораторном занятии назначается дежурный, который отвечает за санитарное состояние лаборатории на время занятия; открывать окна можно только по разрешению преподавателя; запрещается приносить и употреблять в пищу напитки и продукты; включать и выключать тумблеры в электрическом щитке можно только с разрешения преподавателя; при работе с оборудованием и оптическими приборами в случае обнаружения неисправности приборов, электропроводки или розеток нужно сообщить об этом преподавателю. Запрещается самому производить ремонт; при изготовлении временных препаратов осторожно обращаться с режущими инструментами и стеклами. В случае нанесения порезов необходимо поставить об этом в известность преподавателя (для оказания медицинской помощи); запрещается выбрасывать сломанные предметные и покровные стекла в мусоросборник, осколки необходимо складывать в специальный контейнер; для работы с фиксированными в спирте объектами необходимо использовать пинцет; по окончании работы следует сдать инструменты и отработанные препараты преподавателю; микроскопы отключить от сети и накрыть чехлами; навести порядок на рабочем месте, сдать дежурному. При работе с реактивами необходимо соблюдать следующие правила: работу с концентрированными кислотами, щелочами и ядовитыми веществами можно проводить только в вытяжном шкафу; наливать или насыпать реактивы следует только над столом; не следует оставлять открытыми банки с реактивами; пролитые или рассыпанные реактивы нужно немедленно удалить со стола с помощью тряпки и промыть поверхность водой. Ход работы: Осмотрите ваш инструмент. Если на нём есть пыль, его нужно аккуратно протереть с помощью мягкой салфетки, уделяя особое внимание оптическим элементам в объективе. Поставьте микроскоп перед собой. Всю работу выполняйте сидя. Ориентируясь на край стола, выберите максимально удобное положение, отступив примерно 2-3 сантиметра от его края. Откройте диафрагму. Если в микроскопе есть конденсор, его надо поднять вверх. Начинайте исследования объекта с минимального увеличения. Для этого поставьте в микроскоп соответствующий окуляр. Поработайте с объективом: опустите его так, чтобы между ним и предметным стеклом оставалось около 1 см. Отрегулируйте свет, используя зеркальце или электрическую подсветку (верхнюю или нижнюю, в зависимости от типа и модели вашего микроскопа). Положите на предметный столик препарат, который вы хотите рассмотреть. Следите сбоку за движением объектива. Работая макровинтом, одновременно опускайте объектив вниз. Когда расстояние между препаратом и линзой объектива снизу станет 4-5 мм, вращение макровинта можно прекратить. Теперь смотрите одним глазом в окуляр и вращайте винт грубого наведения к себе. Таким образом объектив поднимется до того уровня, который позволит вам хорошо рассмотреть препарат. При работе с любым микроскопом соблюдайте важную меру предосторожности. Никогда не смотрите в окуляр, одновременно опуская объектив. Опускать его всегда нужно, следя за процессом сбоку, чтобы покровное стекло и линза всегда находились на безопасном расстоянии друг от друга. Если вы хотите больше увеличить изучаемый объект, выберите один из его участков и поместите его в центре поля зрения микроскопа. Смените окуляр на увеличение до 40, поставив револьвер в рабочее положение. Хорошего изображения вы добьётесь, вращая микрометренный винт так, чтобы его точка всё время находилась между двумя рисками, не выходя за их пределы.  Видимость структур растительных тканей и клеток при различном разрешении и увеличении. Задание 1. Следуя инструкциям, изложенным выше, рассмотрите готовые микропрепараты различных растительных тканей при различном увеличении. Сравните и схематично зарисуйте, обозначив части клеток и тканей. Задание 2. Заполните таблицу.
Вопросы для самоконтроля: Принципы метода микроскопии Основные части микроскопа. Правила техники безопасности с микроскопом Список используемой литературы: 1. Ботаника [Электронный ресурс] : лаб. практикум : в 4 ч. Ч. 1. Анатомия и морфология растений / И. Е. Ямских, И. П. Филиппова. – Электрон. дан. (3 Мб). – Красноярск : ИПК СФУ, 2009. 2. Вехов В. Н., Лотова Л. И., Филин В. Р. Практикум по анатомии и морфологии высших растений. М., Изд-во Моск. ун-та, 1980. 196 с. с ил. 3. В.Г.Хржановский, С.Ф.Пономаренко. Практикум по курсу общей ботаники. Москва. ВО «Агропромиздат». 1989. 4. Л.И.Булавинцева, Л.Н.Анищенко, Д.Н.Зайцев. Руководство к практическим занятиям по технологии и методике обучения биологии. Брянск. 2008. |