Рлзробка лз. пз11розробкалз. Методи мікробіологічного контролю лікарських засобів (закінчення)
 Скачать 30.47 Kb.
|
|
Рєзник А.С.6Ф Розробка лікарських засобів ТЕМА: «Методи мікробіологічного контролю лікарських засобів (закінчення)». Тести 1. Інфікування лікарських рослин мікроорганізмами виключає їхнє наступне використання фармацевтичною промисловістю. Інвазивні властивості фітопатогенних мікроорганізмів обумовлені такими ферментами: A. ізомерази; B. оксідоредуктази; C. гідролітичні; D. ліази; E. трансферази. 2. Як називаються поживні середовища, які використовують для культивування певних видів мікроорганізмів, які не розмножуються на універсальних середовищах? A. спеціальн; B. диференціальні; C. синтетичні; D. основні і. 3. Визначення патогенної синєгнійної палички проводять посівом на… А. жовтково-сольовий агар; В. на середовищі з гліцерином; С. среда Блаурокка; D. среда типа АГВ. 4. Які поживні середовища використовують для визначення ферментативних властивостей мікроорганізмів? A. спеціальні; B. диференціально-діагностичні; C. основні; D. селективні; E. синтетичні. 5. Дослідження зібраних лікарських рослин показало їх значну обсiменiннiсть різними бактеріями. Який метод треба використати, щоб виділити чистi культури цих бактерій? A. фазово-контрастна мiкроскопiя; B. центрифугування у градiєнтi щiльностi; C. зараження лабораторних тварин; D. посiв на щiльне живильне середовище; E. використання фільтрів з порами певного діаметру. 6. Одним з джерел забруднення лікарських засобів мікроорганізмами може бути лабораторний посуд. Який метод доцільно використовувати для його стерилізації? A. пастеризаці; B. тиндалізація; C. сухий жар; D. висушування; E. кип’ятіння. 7. Комплекс заходів, спрямованих на запобігання проникненню мікроорганізмів у рану і в організм в цілому… А. асептика; В. знезараження; С. дезинфекція; D. дезинсекція; Е. консервування. 8. Метод промислової деконтамінації носить назву… А. ВЕРХ; В. іонізуюче випромінювання; С. рідинна хроматографія; D. асептичний спосіб; Е. термічний спосіб підвищення мікробної чистоти нестерильних лікарських засобів. 9. Наявністю в стерильних лікарських препаратах продуктів розпаду бактерій (ліпополісахаридів) має назву… А. асептика; В. знезараження; С. дезінфекція; D. пірогенність; Е. валідація. 10. Причиною пірогенності лікарських препаратів є… А. порушення асептики; В. усі перераховане; С. більшення часу між приготуванням розчину і стерилізацією; D. порушення асептики технологічного процесу; Е. мікробне забруднення води, що дистилюється. 11. Методи стерилізації, які застосовуються для приготування лікарських засобів в умовах асептики можна розділити на фізичні, механічні, хімічні. Вкажіть метод стерилізації, що належить до хімічних: A. стерилізація сухим жаром; B. радiацiйна стерилізація; C. стерилiзацiя парою під тиском; D. стерилiзацiя УФ-променями; E. додавання консервантів. 12. Виробництво стерильних лікарських засобів проводять у приміщеннях: A. з класом чистоти С; B. з класом чистоти В; C. з класом чистоти D; D. для персоналу; Е. для готової продукції. 13. Оберіть метод, за допомогою якого під час заводського виробництва парентеральних лікарських засобів видаляють пірогенні речовини: A. фільтрування; B. центрифугування; C. термічна обробка при 120oC; D. ультрафільтрування; Е. відстоювання. 14. Згідно ДФУ стерильні лікарські засоби, які призначені для введення в організм людини чи тварини шляхом ін'єкцій, інфузій або імплантацій, мають назву: A. ректальні; B. вагінальні; C. оральні; D. парентеральні; Е. сублінгвальні. 15. Стерилізація допоміжних матеріалів відбувається методом автоклавування при температурі 120oC протягом: A. 45 хв; B. 1год; C. 15 хв; D. 30 хв; Е. 2 год. Питання для самоконтролю Дайте характеристику впливу мікроорганізмів на якість лікарських засобів. Мікроорганізми, що містяться в лікарській формі, можуть викликати розкладання діючих та допоміжних речовин. Це призводить до втрати терапевтичного ефекту препарату, зміни зовнішнього вигляду лікарської форми,іноді до утворення токсичних продуктів. На відміну від патогенних мікроорганізмів багато сапрофітів володіють великим набором ферментів і здатні розкладати найрізноманітніші речовини, білки, ліпіди та інші. Які поживні середовища вам відомі? З якою метою їх використовують? Для випробування стерильності використовують рідкі середовища тіогліколеве, соєво-казеинове або Сабуро. Тіогліколеве середовище застосовують для виявлення аеробних і анаеробних бактерій. Рідке соєво-казеінове середовище для виявлення грибів і аеробних бактерій. Рідке середовище Сабуро використовують для виявлення грибів. При випробуванні на стерильність ЛП не рекомендується використовувати рідку середу Сабуро. При випробуванні на стерильність ЛП, в тому числі, що містять ртутні консерванти, допустимо використання тільки тіогликолевого середовища в якості універсального для виявлення аеробних і анаеробних бактерій і грибів (за умови попереднього визначення його ростових і нейтралізуючих властивостей звикористанням тест-мікроорганізмів). Інкубацію посівів здійснюють при двох температурних режимах. Дайте коротку характеристику поняттю «стерильність». Які дослідження на стерильність вам відомі? Термін «стерильність» означає відсутність в препараті життєздатних мікроорганізмів будь-якого виду дослідження на стерильність 1. Мембранна фільтрація – найбільш кращий метод, якщо випробуваний препарат фільтрується; 2. Метод прямого посіву. Прямий посів: А) Переваги: - швидкий, простий, економічний; - нефільтровані зразки. Б) Обмеження: - обмежений обсяг зразка: низька чутливість; - проблеми з антимікробною дією. 4. Які дослідження на мікробіологічну чистоту ви знаєте? В чому сутність кількісного визначення мікроорганізмів. Охарактеризуйте метод антимікробіологічної активності антибіотиків методом в агар. Випробування на мікробіологічну чистоту включає кількісне визначення життєздатних бактерій і грибів, а також виявлення певних видів мікроорганізмів,наявність яких недопустимо в нестерильних лікарських засобах. Для уникнення неправильної оцінки результатів випробування визначають дію лікарського засобу по відношенні до тест-мікроорганізмів: Bacillus subtilis (B. cereus), Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans і т.п. Кількісне визначення мікроорганізмів Випробування проводять двошаровим агаровим методом в чашці Петрі діаметром 90-100 мм. Зразок лікарського засобу в кількості 10 г (мл) розчиняють, суспензують або емульгують в фосфатному буферному розчині з рН 7,0 так, щоб об’єм розчину (суспензії, емульсії) був 100 мл. Посіви переглядають щодня. Визначення антимікробіологічної активності антибіотиків методом дифузії в агар. Визначення антимікробної активності антибіотиків засновано на їх здатності пригнічувати ріст мікроорганізмів. Визначення проводять методом дифузії в агар на щільному живильному середовищі шляхом порівняння розмірів зон пригнічення росту тест-штамів мікроорганізмів, які утворюються при випробуванні розчинів стандартного зразка і випробуваного препарату певних концентрацій. Метод заснований на логарифмічній залежності розмірів зон пригнічення росту тест-мікроорганізмів від концентрації антибіотика, яка повинні бути лінійної. Антимікробна активність антибіотиків виражається в одиницях дії - ОД або «мкг» на одиницю об'єму препарату. Для більшості антибіотиків 1 ОД або 1 мкг відповідають 1 мкг активної речовини (кислоти або підстави); для антибіотиків, що мають інше кількісне вираження одиниці, відповідні вказівки даються в фармакопейних статтях. При визначенні антимікробної активності антибіотиків використовують стандартні зразки, активність яких, як правило, встановлюють відповідно до міжнародних біологічних стандартів. При відсутності останніх для зазначених цілей можуть бути використані хімічні стандартні зразки, антимікробну активність яких розраховують на підставі показників якості, встановлених фізико-хімічними методами. Антимікробну активність стандартних зразків антибіотиків, які не мають аналогів в міжнародній колекції стандартів, розраховують також на підставі показників якості, встановлених фізико-хімічними методами.Стандартні зразки антибіотиків зберігаються і використовуються відповідно до рекомендацій, зазначеними на етикетці стандартного зразка. 5. Мікрофлора готових лікарських форм. Мікрофлора нестерильних лікарських форм. Які шляхи підвищення мікробної чистоти нестерильних лікарських засобів вам відомі? Охарактеризуйте стерильні і асептичні лікарські форми. Мікрофлора нестерильних лікарських форм .Нестерильними називаються лікарські форми, в яких допускається вміст певної кількості непатогенних мікробів. Основні лікарські форми: настої, настоянки, порошки, пігулки, мазі, краплі і ін Ознаки псування нестерильних лікарських препаратів: зміна кольору,неприємний запах, помутніння, осад, плівка, зміна консистенції.У рідких і м'яких лікарських формах умови для зростання і розмноження мікроорганізмів більш відповідні. Це пов'язано з високим вмістом води, рослинних масел і відсутністю консервантів у складі багатьох мазей. Більш того, вміст у складі мазей антимікробних речовин не завжди гарантує їх мікробну чистоту. У рідких лікарських формах метаболіти мікроорганізмів можуть змінити його хімічний склад,а також привести до утворення токсичних продуктів. У твердих лікарських формах ризик мікробного псування мінімальний, оскільки відсутні умови для розмноження мікробів. Висока забрудненість сировини, її неправильне зберігання може приводити до зміни властивостей.Обсіменіння лікарської сировини може проходити на всіх етапах його заготівки і при зберіганні. Активному розмноженню мікроорганізмів сприяє зволоження рослин і рослинної сировини. Мікроорганізми, що розмножилися,приводять до зміни фармакологічних властивостей препаратів, отриманих з лікарських рослин. Мікроорганізми можуть також потрапляти з навколишнього середовища, від людей і обсіменяти лікарські препарати в процесі їх виготовлення з рослинної сировини. Для дотримання санітарного режиму виготовлення лікарських препаратів проводиться санітарно-мікробіологічний контроль об'єктів навколишнього середовища підприємства і кожної серії лікарської форми, що випускається. Контроль стерильності лікарських засобів проводиться шляхом посіву на тіогліколеве середовище для виявлення різних бактерій, зокрема анаеробів; при посіві на середовище Сабуро виявляють гриби, головним чином роду Кандида. Стерильність лікарських засобів з антимікробною дією визначають шляхом мембранної фільтрації: фільтр після фільтрації досліджуваного препарату ділять на частини і вносять для підрощування затриманих мікроорганізмів до рідких живильних середовищ. За відсутності росту препарат вважається стерильним. Лікарські засоби, що не вимагають стерилізації, містять мікроорганізми, тому їх досліджують на мікробну чистоту: проводять кількісне визначення життєздатних бактерій і грибів в 1г або 1мл препарату, а також виявляють мікроорганізми (бактерії родини ентеробактерій, синєгнійна паличка, золотистий стафілокок), які не повинні бути присутніми в нестерильних лікарських засобах. Шляхи підвищення мікробної чистоти нестерильних лікарських засобів Залежно від джерел і шляхів попадання мікроорганізмів в лікарські засоби можливі різні підходи до забезпечення необхідного рівня мікробної чистоти нестерильних лікарських засобів. Якщо мікробне обсіменіння викликане попаданням разом з сировиною, то для досягнення необхідного рівня мікробної чистоти досить очистити від мікроорганізмів сировину. Якщо обсіменіння мікробами відбувається в процесі виготовлення, то проводять деконтамінацію готової лікарської форми. Попереднього знезараження можна досягти пресуванням сипких матеріалів (за відсутності спорових мікроорганізмів, низькій вологості початкового порошку і високому тиску). На практиці застосовують чотири способи деконтамінації сировини і готових лікарських засобів. Термічний спосіб. Широко поширений метод промислової деконтамінації. Не придатний для обробки термолабільних лікарських форм, для яких застосовують прогрівання до 60-70 °С гарячим повітрям, інфрачервоне і високочастотне випромінювання. Хімічний спосіб. Придатніший для стерилізації світлонепроникних речовин (бактерицидна дія реалізується лише на глибині 1 мм). Найчастіше його використовують для обробки пакувального матеріалу і технологічної води. Можлива обробка УФ-ЛУЧАМІ формоутворювальних речовин (крохмалю, тальку, цукру) в дисперсному стані (при перемішуванні). Іонізуюче випромінювання. Найбільш перспективний спосіб деконтаминації сировини і готових лікарських форм. Іонізуюче випромінювання володіє високою проникаючою здатністю. При опромінюванні не утворюються канцерогенні,мутагенні, токсичні речовини, зберігаються физико-хімічні і біологічні властивості оброблюваних ліків. Метод використовують для обробки антибіотиків, вітамінів, ферментів, гормонів і алкалоїдів. Стерильні (безмікробні) лікарські форми готують в асептичних умовах і стерилізують. До них відносяться розчини для ін'єкцій, очні краплі, препарати для дітей до 1 року. Асептичні лікарські форми готують в асептичних умовах без стерилізації. Асептика - попередження попадання мікробів в лікарський препарат. Асептичні і стерильні лікарські форми готують в асептичних умовах. При дослідженні лікарських форм здійснюють визначення мікрофлори в лікарських формах: - визначення загального мікробного числа (мікробна обсіменіність); - визначення бактерій групи кишкової палички; - визначення дріжджових і цвілевих грибів; - визначення умовно-патогенних і патогенних мікроорганізмів. 6 Дайте характеристику основним фазам процесу належної розробки мікробіологічних методик. Перший етап включає в себе теоретичний аналіз властивостей лікарських засобів, визначення та вибір умов проведення досліджень, розробку методик визначення загального числа мікроорганізмів у нерозчинних ЛЗ, розробку методик визначення загального числа мікроорганізмів у розчинних лікарських засобах методом мембранної фільтрації. Другий етап – масштабування методики та перевірка придатності. На відміну від процедур розробки методики, які дозволяють масштабування в процесі пробопідготовки лікарського засобу, при перевірці придатності методики необхідно строго дотримуватися зазначених у проекті методик (менеджменту контролю якості – МКЯ) умов: наважки препарату, об’єму розчинника для приготування проби зразка, процедур отримання його послідовних розведень тощо. Спосіб внесення тест-мікроорганізмів у пробу препарату при перевірці придатності методики має бути аналогічним способу, що використовувався при розробці методики. Проведення перевірки придатності здійснюється на одній серії лікарського засобу, належно протоколюється та може розглядатись як підготовчий етап валідації методики. Третій етап – валідація методики – має наступні особливості. Валідація мікробіологічних методів контролю – мінімально статистично підтверджена придатність методики, яка проводиться на трьох різних серіях препарату з врахуванням усіх можливих факторів впливу на достовірність результатів експериментальних досліджень. Окрім самого лікарського засобу, на відтворюваність методики можуть впливати умови, які в ній використовуються: поживні середовища та розчини, що також можуть мати відмінності залежно від партії приготування. Тому для оцінки впливу на придатність методики можливих змінних властивостей серій лікарських засобів і партій поживних середовищ і розчинів валідаційні дослідження проводять на трьох різних серіях препарату та трьох різних партіях поживних середовищ і розчинів. Таким чином, у процесі валідації умовно доводиться, що зазначені в методиці умови проведення досліджень з визначення мікробіологічної чистоти препарату дозволяють отримувати достовірнірезультати контролю якості даного лікарського засобу в цілому, незалежно від серії. |