ФИЗИОЛОГИЯ КРОВИ. Методическое пособие к практическим занятиям по нормальной физиологии для студентов медицинских факультетов высших учебных заведений Бишкек 2007
 Скачать 2.74 Mb.
|
|
Гомеостатические параметры крови Наименование должной величины Цифровое значение Функции Эритроциты, количество СОЭ Осмотическая стойкость эритроцитов Гемоглобина) в мл крови б) в 1 л крови Цветной показатель Лейкоциты, общее количество Нейтрофилы Базофилы Эозинофилы Моноциты Лимфоциты а) Т-лимфоциты б) В- лимфоциты Литература 1. Гомеостаз Под ред. П. Д. Горизонтова. – М. Физиология человека. Под ред. Г.И.Косицкого.- М. 3. Физиология человека. Под ред. Р.Шмидта и Г.Тевса.- т. 3. М 4. Основы физиологии человека- т.1/Под ред. Б. И. Ткаченко.- Санкт- Петербург, 1994. 5. Атлас по нормальной физиологии. Коробков А.В., Чеснокова САМ. Высш. школа, 1986. Физиология крови. Методическое пособие к практическим занятиям по нормальной физиологии. – Фрунзе. КГМИ. 1981. 7. Физиология крови. Методическое пособие к практическим занятиям по нормальной физиологии- Бишкек, КГМА, КРСУ, 2000. 8. Очерки по физиологии. Физиология крови. Учебное пособие. Лупинская ЗА, Зарифьян А.Г., Бишкек, 2004. 9. Физиология. Основы и функциональные системы. Курс лекций. Под ред. К.В.Судакова. М.Медицина. 2000. 10. Holes essentials of human anatomy and physiology, sixth edition. David Shier and a WCB/McGraw – Hill. 35 Тема №3. Антигенные системы крови. Цель: Знать основные понятия антиген, «агглютиноген», антитело, агглютинин, реакция агглютинации. 2. Знать основные антигенные системы крови и их значение в медицинской практике. 3. Знать основные принципы переливания крови. 4. Ознакомиться с методами определения групп крови по системам АВО и Rh. Перечень навыков, которыми должен овладеть студент Уметь различать признаки, лежащие в основе групповой классификации крови на системы АВО и Rh. Иметь четкое представление об основных принципах переливания крови. Уметь объяснить принцип определения групп крови по системам АВО и резус (Rh). Необходимо повторить основные понятия антиген, антитело, иммунитет. Вопросы для самоподготовки. Современные представления об антигенных системах крови. Основные принципы, лежащие в основе групповой классификации антигенных систем крови. Групповые антигены и групповые антитела. Иммунологические реакции, протекающие при взаимодействии агглютиногена с агглютинином (антигена с антителом. Реакция агглютинации. Антигенная система АВО. Группы крови системы АВО, их характеристика. Антигенная система резус, ее особенности. Значение Rh- фактора в клинике при переливании крови и при беременности. 6. Переливание крови (гемотрансфузия. Понятие донор и реципиент. Основные принципы переливания крови. Биологическая проба. 7.Гемотрансфузионный шок. Способы определения групп крови по системам АВО и Rh. Домашнее задание Охарактеризовать кровь по системам АВО и Rh. Схематично показать, что происходит при смешивании II и III групп и I групп, IV и IV групп, Rh + и Rh - крови. 36 Основополагающий материал Мембраны эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов содержат сложные белково-углеводные комплексы, которые определяют групповую принадлежность крови человека. Однако наиболее важным для трансфузиологии является учет групповых свойств эритроцитов, так как именно от них, в первую очередь, зависит совместимость при переливании крови. Под групповыми (изосерологическими) системами крови человека подразумеваются находящиеся в крови людей определенные сочетания отдельных антигенных свойств эритроцитов (групповых факторов) и антител по отношению к ним. Наличие антигенов и их сочетаний является постоянной характеристикой групп крови, в то время как наличие антител в норме характерно только для некоторых систем, главным образом для групп крови системы АВО. В настоящее время термин группы крови употребляется в двух смыслах. В первый из них вкладывается понятие о дифференциации внутри отдельных систем (например, 4 группы системы АВО, 9 групп системы М, 27 групп системы резус и т.д.) Более широкое понятие термина группы крови заключается в констатации групповой принадлежности человека по всем системам АВО, М, Rh-Hr, Келл, Даффи, Левис, Р, Кидд, Лютеран, Ай, Диего, Оберже, Домброк и т.д. Принимая во внимание независимость групп крови друг от друга, таких групповых сочетаний насчитывается более 11 000 000. В перечисленных системах науке становятся известными все новые факторы, приводящие к открытию новых групповых систем. Следовательно, индивидуальные различия людей безграничны. Вместе стем из этого большого количества групповых факторов не все имеют равное значение для практической медицины. Групповые антигены являются наследственными, врожденными свойствами крови. Они не меняются в течение жизни человека. В большинстве групповых систем антигены полностью развиваются к моменту рождения ребенка, активность их сохраняется на уровне, которого они достигли к моменту рождения. Отличительным свойством всех групповых факторов являются их изоиммунные свойства, те. способность вызывать образование иммунных антител при поступлении антигена в организм, не имеющий его. Такая иммунизация чаще всего наблюдается при ошибочном повторном переливании или другом способе введения резус-положительной крови резус-отрицательному реципиенту, а также при беременности резус-отрицательной женщины резус- положительным плодом (см. ниже. Практически основную роль играют антигены эритроцитов, однако, остальные форменные элементы крови также могут обладать изоиммунными свойствами, что нужно учитывать при переливании лейкоцитарной или тромбоцитарной массы. Разные групповые факторы отличаются друг от друга по антигенной силе и, следовательно, по способности вызывать образование изоиммунных антител. 37 Групповые антитела - не столь постоянное свойство организма человека, как антигены эритроцитов. Лишь в групповой системе АВО антитела являются нормальным врожденным свойством плазмы крови, качественно не изменяющимся в течение жизни человека. В большинстве же случаев антитела достигают своего полного развития приблизительно к 18 годам, а к старости их титр снижается. Замечены сезонные колебания титра групповых антител. Групповые антитела делятся на нормальные (врожденные) и изоиммунные приобретенные) антитела. Кроме этого, групповые антитела классифицируются как полные (класс IgM) и неполные (класс IgG). Таким образом, антитела в системе АВО естественные, готовые, а потому реакция антиген + антитело происходит сразу же, при первом несовместимом переливании крови. Антитела в системе Rh- приобретенные, изоиммунные, поэтому реакция антиген + антитело проявляется при повторном несовместимом переливании крови, а первое переливание лишь запускает процесс выработки антител. Система АВО. Эта система является основной серологической системой, определяющей совместимость или несовместимость переливаемой крови. В эту систему входят два генетически детерминированных агглютиногена, которые обозначаются буквами латинского алфавита Аи В. В системе АВО также имеются два генетически детерминированных агглютинина обозначаемые греческими символами α и β. Сочетания агглютиногенов и агглютининов составляет 4 группы крови системы АВО. Группа крови Агглютиноген в мембране эритроцитов) Агглютинин в плазме крови) I O α, β II A β III B α IV AB - Групповые факторы Аи В относятся к полисахаридам, которые связаны в мембране эритроцитов с липидами и белками. Для антигена А антителом является α, а для В – антитело β. При встрече Ас и В с β происходит их взаимодействие между собой по принципу ключ к замку иначе говоря, протекает иммунная реакция антиген + антитело, которая сопровождается агглютинацией – склеиванием эритроцитов. Здесь в роли склеиваемых факторов выступают агглютиногены Аи В (эритроциты, а склеивающих – агглютинины α, β (плазма. Необходимо учитывать, что даже водной группе крови существуют разновидности агглютиногенов (например, А, А. Антитела ά и β являются иммуноглобулинами, они не только склеивают эритроциты, но и гемолизируют их, вызывая значительные изменения физико-химических свойств крови (онкотического давления, вязкости, гематокрита и др. Гемотрансфузионный конфликт сопровождается сильнейшими осложнениями, которые могут привести к гибели реципиента. 38 Второй по значимости антигенной системой крови является система Резус Словом резус К. Ландштейнер обозначил ее потому, что антирезусная сыворотка была получена при иммунизации кроликов кровью обезьян макак - резус. Для краткости обозначения используется символ Rh, представляющий собой первые буквы слова Rhesus. Впоследствии этому антигену был присвоен символ Rh 0 , так как были открыты другие факторы этой системы, обозначенные теми же буквами, нос различными значками (rh', rh", hr', hr", - номенклатура Лендштейнера и Винера). Позже Фишером и Рейсом была предложена новая номенклатура для обозначения антигенов резус. В настоящее время примеряются обе номенклатуры Rh 0 (Д, rh' (СЕ, и т.д. Возможные варианты известных факторов позволяют образовать более чем 27 групп систем резус. Поскольку самым активным из них является антиген Д) (резус-фактор), именно в зависимости от наличия или отсутствия этого фактора кровь людей разделяют на резус-положительную (Rh + ) и резус- отрицательную (Rh - ). Переливание крови, несовместимой по групповым факторам АВО, является наиболее частой причиной возникновения гемотрансфузионных осложнений. Из вышесказанного следует, что кровь необходимо переливать таким образом, чтобы антиген не встречался со своим антителом. Это возможно только в том случае, если переливаемая донорская кровь будет одноименной с группой крови реципиента. Отсюда вытекает основное правило переливания крови I группу донорской крови переливают в I группу, II- во II, в III, IV в IV группу крови реципиента, учитывая совместимость и по другим антигенным свойствам. Клинические проявления гемотрансфузионных осложнений возникают или в момент самой трансфузии, или в ближайшее время после не общее беспокойство, возбуждение, боли в мышцах, пояснице ив области сердца, озноб, затруднение дыхания, одышка. В дальнейшем развиваются общая слабость, снижение АД, учащение пульса, иногда нарушения ритма с явлениями сердечно- сосудистой недостаточности отмечаются изменения окраски лица (покраснение, сменяющееся побледнением), тошнота, рвота, повышение температуры, двигательное беспокойство, непроизвольное мочеиспускание, дефекация. Может наступить смерть больного. Наряду с симптомами шока и острым внутрисосудистым гемолизом отмечаются нарушения гемостаза усиливается кровоточивость из раны, переходящая затем в генерализованные кровоизлияния, что также отягощает течение гемотрансфузионных осложнений, приводящих к летальному исходу. Система резус в клиническом отношении очень важна и вместе с системой АВО предопределяет совместимость или несовместимость при переливании крови. Трансфузионный резус-конфликт возникает только водном случае если резус-положительная кровь повторно переливается резус-отрицательному реципиенту. Первое переливание стимулирует выработку антитела второе - вызывает агглютинацию эритроцитов поступившими в кровь антителами и развитие гемотрансфузионного шока. 39 Клинические проявления резус - конфликта крови в большинстве случаев такие же, как и после переливания крови, несовместимой по групповым факторам АВО, но они, как правило, возникают несколько позднее. Резус-фактор учитывается также при беременности резус-отрицательной женщины резус-положительным плодом. Иммунизация организма матери происходит вовремя первых родов или при патологическом течении первой такой беременности, когда эритроциты ребенка могут преодолеть плацентарный барьер и попасть в организм матери. В ее организме развиваются анти-Д антитела, которые при последующих беременностях резус-положительным плодом через плацентарный барьер проникают в организм второго ребенка, повреждая эритроциты и другие ткани плода. Тяжесть гемолитической болезни зависит от титра антител чем выше титр резус - антителу матери, тем тяжелее поражения плода, вплоть до его выкидыша. Основные принципы переливания крови Кровь донора и кровь реципиента должны быть совместимы по системам АВО и Rh. 2. Необходимо выполнить пробу на индивидуальную совместимость. Переливание крови следует начинать с биологической пробы. Реципиенту струйно или капельно переливают 10-15 мл донорской крови (эритроцитарную массу, взвесь, плазму, затем в течение 3 мин. наблюдают за состоянием больного. В случае отсутствия явлений несовместимости, вновь вводят 10-15 мл. крови. Такую процедуру производят 3 раза. Отсутствие реакции после троекратной проверки дает право продолжить переливание. При появлении признаков несовместимости крови следует немедленно прекратить гемотрансфузию. Переливаемая кровь должна быть доброкачественной без признаков бактериальных загрязнений, возбудителей инфекционных заболеваний, гемолиза или денатурации белков вследствие длительного хранения. Не следует в кровяное русло больного в течение короткого периода вводить количество крови, превышающее 40-50% от ОЦК. Необходимо строго избегать погрешностей в методике трансфузий: заполнять кровью все системы трубок без воздуха, стабилизировать кровь без сгустков, минимально травматизировать вены при пункции, не пунктировать тромбированные вены и т.д. Практическая часть Перечень работ 10. Определение группы крови с помощью стандартных сывороток. 11. Определение группы крови с помощью Цоликлонов анти-А и анти-В. Определение Д-антигена системы резус в эритроцитах человека с помощью Цоликлона анти-Д Супер. 40 Работа 10. Определение группы крови с помощью стандартных сывороток Цель работы научиться определять группы крови, используя стандартные сыворотки крови, в которых находятся известные агглютинины. Необходимо для работы стандартные сыворотки 0 (I), А (II), В (III), стеклянная пластинка, стеклянные палочки, глазные пипетки, карандаш по стеклу, физиологический раствор, стерильный скарификатор, спирт, вата, эфир, йод. Объект исследования – человек. Ход работы На стеклянную пластинку над соответствующими обозначениями наносят разными пипетками по капле сыворотки 0(I), А, В) групп крови двух серий. Из проколотого пальца стеклянной палочкой переносят на пластинку 6 капель крови. Каждую помещают рядом со стандартной сывороткой (количество крови должно быть примерно враз меньше объема сыворотки. Разными палочками размешивают каплю крови с сывороткой до равномерного розового цвета. Реакция агглютинации наступает через 1-5 мин. При этом капля становится прозрачной, а эритроциты склеиваются в комочки. Группа крови устанавливается по наличию или отсутствию агглютинации Результаты реакции в каплях с сыворотками одной и той же группы двух серий должны совпадать. В последнем случае для исключения неспецифической агглютинации необходимо провести реакцию с сывороткой IV группы. Если агглютинация не наступит, то исследуемая кровь IV группы (рис) Рис. 12. Анализ результатов определения групповой принадлежности по системе АВО с помощью стандартных сывороток. 41 Рекомендации к оформлению работы. Нарисуйте пластинку с нанесенными на неѐ сыворотками I, II и III групп. Покажите реакцию исследуемой крови со стандартными сыворотками. Выводы. Работа 11. Определение группы крови с помощью Цоликлонов анти Аи анти В. Цель работы научиться определять группу крови, используя методику, выявляющую более высокую специфичность и выраженность реакции агглютинации. Необходимо для работы Цоликлоны анти Аи анти В, стеклянная пластинка, стеклянные палочки, карандаш по стеклу, стерильный скарификатор, спирт, эфир, йод, вата. Объект исследования – человек. Ход работы. Цоликлоны анти Аи анти В представляют собой асцитную жидкость мышей, в которой содержатся антитела против группоспецифических антигенов Аи В человека. Цоликлон анти А – красного цвета Цоликлон анти В – синего цвета Для определения групп крови используется явление агглютинации исследуемой крови с Цоликлоном анти Аи анти В. На стеклянную пластинку под соответствующим надписями двумя отдельными пипетками наносят по капле (0,1 мл) Цоликлона анти Аи анти В. Рядом с каплями антител помещают по капле крови ( 0,01-0,03 мл. те. враз меньше капли Цоликлона). Затем капли тщательно смешивают отдельными сухими стеклянными палочками. Наблюдают заходом реакции с Цоликлонами визуально, при легком покачивании пластинки в течение 3 мин. Агглютинация наступает впервые с, но наблюдение следует вести 3 мин. ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов Аи В. Результат реакции в каждой капле может быть положительным (есть агглютинация) или отрицательным (нет агглютинации. Интерпретация результатов представлена ниже. Результат реакции с Цоликлоном Исследуемая кровь принадлежит к группе Анти А Анти В - - 0 (I) + - А) - + В) + + АВ(IV) Рекомендации к оформлению работы. Нарисуйте пластинку с нанесенными на ней Цоликлонами анти Аи анти – В. Покажите, к какой группе относится исследуемая кровь. Выводы 42 Работа 12. Определение Д антигена системы резус в эритроцитах человека с помощью Цоликлона анти – Д Супер Цель работы научиться определять резус – принадлежность крови человека с помощью методики, выявляющей более высокую специфичность и выраженность реакции агглютинации. Необходимо для работы Цоликлон анти Д Супер, стеклянная пластинка, стерильный скарификатор, спирт, эфир, йод, вата. Объект исследования – человек. Ход работы Цоликлон анти Д Супер представляет собой культуральную жидкость, содержащую моноклональные человеческие анти – Д антитела. Последние продуцируются гетерогибридомой, полученной в результате слияния человеческой лимфобластоидной линии с миеломной клеточной линией мыши. На стеклянную пластинку наносят большую каплю (около мл) Цоликлона анти – Д Супер. Рядом помещают маленькую каплю (0,01 – мл) исследуемой крови и смешивают их стеклянной палочкой. Если исследуемая кровь резус – положительная, то реакция агглютинации начинает развиваться через 10-15 с, достигая четкой выраженности через с. Резус – отрицательная кровь агглютинации не вызывает. Рекомендации к оформлению работы. Нарисуйте в журнале вид исследуемой крови после реакции с Цоликлоном анти – Д Супер. Выводы. |