Профилактика бруцеллеза. Диплом Мамаева (Автосохраненный). Министерство сельского хозяйства Российской Федерации фгбоу во новосибирский гау
 Скачать 5.67 Mb.
|
|
Ежемесячно составляются отчеты о проделанной работе, акты на выбытие животных по причинам падежа и вынужденного убоя, а также документации о проведении профилактических, диагностических и лечебных мероприятий. Все виды ветеринарных мероприятий предусматриваются в годовом плане: -мероприятия по профилактике незаразных болезней животных; -противоэпизоотические мероприятия; -противопаразитарные мероприятия. Имеется 4 формы учета: -амбулаторный журнал (форма №01); -журнал противоэпизоотических мероприятий (форма № 02); -журнал регистрации предубойного осмотра сельскохозяйственных животных (форма № 03); -журнал учета падежа и вскрытия животных (форма №04). 2.2. Состояние отрасли животноводства Общая площадь территории Улаганского района 1839362 га, сельхозугодья – 138846 га, посевные площади – 3413 га. По инфекционным и инвазионным заболеваниям Улаганский район является благополучным. Наличие поголовья сельскохозяйственных животных представлено в таблице 1. Таблица – 1 Наличие поголовья сельскохозяйственных животных по Улаганскому району на 1 января 2018 года
Наличие поголовья с содержанием половозрастных групп по району представлено в приложениях 1, 2 и 3. Природные условия и исторически сложившиеся навыки населения способствовали тому, что район был и остается одним из основных производителей животноводческой продукции, преимущественно мясо - шерстного направления с преобладанием мелкого рогатого скота (овец и пуховых коз). В Улаганском районе имеются все необходимые условия для развития табунных лошадей, наличие пастбищ и природно - климатические условия позволяют в течение круглого года содержать лошадей на подножном корме. Табунное содержание лошадей не затрачивает больших средств на постройки, корма и обслуживание, основывается на максимальном использовании пастбищ. Лошади в основном алтайской породы. Содержание КРС беспривязное с применением моциона на пастбищах. Вечером весь гурт загоняют в коровник без разделения на половозрастные группы. Навоз удаляется вручную лопатой и вывозится тележкой в специально отведенное место для биотермического обеззараживания. Новорожденные телята до 2-х недель содержатся в телятниках, обычно деревянной конструкции. В холодное время года МРС содержится в капитальных кошарах, утепленных пенополистиролом. В теплое время года по возвращении вечером с пастбищ МРС загоняют под навес, рядом с которым оборудована огороженная открытая площадка. Водопой животных летом осуществляется из естественных водоемов (озера, реки и т.д.), а зимой – из поилок, различных конструкций. Кормовую базу сельского хозяйства района составляют естественные пастбища орошаемые посевные площади, комбикорма. Основу рациона составляет растительность естественных пастбищ. Зоогигиенические условия содержания животных во многих хозяйствах удовлетворительное с учетом особенностей местности. 2.3. Противоэпизоотические мероприятия против бруцеллеза План ветеринарно-профилактических и противоэпизоотических мероприятий по Улаганскому району составляется ветврачом-эпизоотологом ветстанции с учетом сведений поданных из хозяйств и данных по частному сектору и утверждается начальником ветстанции. Разработанный план диагностических, ветеринарно-профилактических и противоэпизоотических мероприятий по Улаганскому району предусматривает неспецифическую профилактику бруцеллеза, а именно диагностические исследования. План ветеринарно-профилактических и противоэпизоотических мероприятий по Улаганскому району приведен в таблице 2. Таблица 2 – План диагностических исследований, ветеринарно-профилактических и противоэпизоотических мероприятий в хозяйствах всех форм собственности на территории Улаганского района Республики Алтай на 2018 год
Продолжение таблицы 2
Продолжение таблицы 2
Окончание таблицы 2
Пояснения к плану Согласно, нормативному документу «Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных. Бруцеллёз» утвержденным Министерством сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации от 18 июня 1996 г. N 23 диагностические исследования проводятся 2 раза в год – весной и осенью, во II и IV кварталах. В целях своевременного выявления бруцеллеза в хозяйствах и населенных пунктах, в плановом порядке обязательному исследованию на эту болезнь подвергают быков - производителей, коров и молодняк старше года, баранов - производителей, овцематок (козематок). Исследованию подвергаются также лошади, так как Улаганский район территориально граничит с неблагополучным по бруцеллезу субъектом – Республикой Тыва. Взятие крови для серологического исследования предусматривает заблаговременное оповещение руководителей хозяйств, всех форм собственности о предстоящем диагностическом исследовании скота. Для оповещения населения используется средство массовой информации, а именно размещение объявления в районной газете и вывешивание объявления в общественных местах. В день исследования ветврач инструктирует всех привлеченных к работе специалистов, подробно объясняет подсобным рабочим их обязанности. Заранее ветврач получает из лаборатории стерильные пробирки. Кровь берут из яремной вены с соблюдением правил асептики и антисептики. Кровь у крупных животных берут из ярёмной вены. Пункцию вены осуществляют одноразовой стерильной кровопускательной иглой. Набирая в пробирки кровь, следят за тем, чтобы кровь не пенилась и стекала по стенке, для предотвращения гемолиза. На пробирках маркером отмечают порядковый номер пробы, и делают соответствующую запись в журнале регистрации обработанных животных, где указывают вид, пол, масть, возраст и инвентарный номер (тавро, кличку). Затем кровь в пробирках помещают на 1-2 часа в тёплое место для свёртывания; затем в прохладное - для отстаивания. Сливают сыворотку в пробирки и консервируют борой кислотой, ставят в штатив, направляют в лабораторию с нарочным и с двумя экземплярами сопроводительных документов, содержащих опись животных. Один из экземпляров сопроводительного документа лаборатория возвращает ветврачу с указанием результатов исследований (Приложение 4, 5). Также в хозяйствах проводятся профилактические дезинфекции животноводческих помещений и выгульных площадок 2 раза в год (весной и осенью). Для дезинфекции применяют горячий раствор (80-90 °С) 2%-го едкого натра (каустической соды) с экспозицией 1 час. Дезинфекции должна предшествовать механическая очистка помещений, уборка остатков кормов, навоза. После дезинфекции помещение проветривают. Кормушки, поилки, проходы в помещениях промывают водой. Проводят побелку помещений. Инвентарь, используемый для уборки навоза, подвергают дезинфекции, помещая его в емкости с дезинфицирующим раствором. Противоэпизоотические мероприятия не проводятся комплексно, так как не хватает специалистов, а у ветеринарного врача нет возможности полностью контролировать все хозяйства, в закрепленном за ним ветучастке, так как они находятся на значительных расстояниях друг от друга. В план не включены мероприятия по дератизации. 2.4. Диагностика бруцеллеза в лаборатории БУ РА «Улаганская рай СББЖ» В лаборатории БУ РА «Улаганска рай СББЖ» проводятся исследования на бруцеллез животных разных видов серологическим методом. Серологическая диагностика бруцеллеза заключается в обнаружении специфических антител в сыворотке крови животных в реакции агглютинации (РА) в пробирках и реакции связывания комплемента (РСК). Постановка и учет результатов реакции агглютинации (РА) в пробирках. Подготовку компонентов реакции к работе осуществляют в соответствии с «Наставлением по диагностике бруцеллеза животных» от 29 сентября 2003 г. N 13-5-02/0850. Компоненты реакции агглютинации: - испытуемые сыворотки крови; - позитивная бруцеллезная сыворотка, изготовленная биопредприятием; - негативная сыворотка (сыворотка крови здоровых животных из опыта или консервированная), изготовленная биопредприятием или полученная в лаборатории; - антиген бруцеллезный единый для РА, РСК - 0,5%-ный фенолизированный раствор хлорида натрия. При исследовании сывороток крови крупного рогатого скота, лошадей, верблюдов, собак, пушных зверей и морских свинок для разведения испытуемых сывороток и антигена используют фенолизированный физиологический раствор хлорида натрия (0,85%-ный); при исследовании крови овец и коз - 5%-ный и оленей (маралов) - фенолизированный 10%-ный раствор хлорида натрия. Реакцию агглютинации проводят в серологических пробирках в объеме 1 мл в четырех разведениях: - при исследовании сывороток крови овец, коз, оленей (маралов) и собак - 1:25, 1:50, 1:100 и 1:200; - крупного рогатого скота, лошадей и верблюдов - 1:50, 1:100, 1:200 и 1:400; При массовых исследованиях допускается постановка реакции в первых двух разведениях. Компоненты реакции вносят индивидуальными мерными пипетками (дозаторами) или групповыми дозаторами Флоринского. Для исследования каждой испытуемой сыворотки крови требуется 5 пробирок. В пробирках первого ряда делают исходное разведение. Для этого сыворотку крови крупного рогатого скота, лошадей и верблюдов берут в дозе 0,1 мл, вносят в пробирку, добавляют к ней 2,4 мл соответствующего раствора хлорида натрия, смешивают и получают разведение сыворотки 1:25. Сыворотку крови овец, коз, оленей (маралов) и собак берут в дозе 0,2 мл и добавляют 2,3 мл соответствующего раствора хлорида натрия (разведение 1:12,5). Таким образом, делают исходное разведение испытуемых сывороток в пробирках первого ряда штатива (по 10 проб в ряду). После приготовления исходного разведения сывороток в первом ряду в пробирки третьего, четвертого и пятого рядов вносят по 0,5 мл соответствующего раствора хлорида натрия. Затем из пробирок первого ряда при помощи группового дозатора Флоринского или индивидуальных пипеток-дозаторов переносят в пробирки второго и третьего рядов по 0,5 мл исходного разведения сывороток (1:25; 1:12,5 или 1:5). В пробирках третьего ряда сыворотки смешивают, по 0,5 мл этого разведения переносят в пробирки четвертого ряда и так же из пробирок четвертого ряда - в пятый. Из пробирок пятого ряда 0,5 мл жидкости удаляют. Таким образом делают последовательные двукратные разведения сывороток. После этого в каждую пробирку второго, третьего, четвертого и пятого рядов с разведенными сыворотками вносят при помощи группового дозатора Флоринского или другого дозирующего устройства по 0,5 мл антигена, предварительно разведенного 1:10 соответствующим раствором хлорида натрия. После добавления антигена разведение сыворотки в каждой пробирке удваивается и, в зависимости от вида исследуемых животных, будет составлять 1:50, 1:100, 1:200 и 1:400; 1:25, 1:50, 1:100 и 1:200 или 1:10, 1:20, 1:40 и 1:80. В пробирки первого ряда бруцеллезный антиген не вносят, они служат контролем качества сыворотки. При наличии хлопьев, фибрина, эритроцитов и посторонних примесей результаты реакции агглютинации не учитывают. При массовых исследованиях сыворотки разливают индивидуальной микропипеткой (с грушей) или групповыми дозаторами Флоринского в две пробирки в дозах 0,02 и 0,01 мл (сыворотки крупного рогатого скота, лошадей и верблюдов) или 0,04 и 0,02 мл при исследовании сывороток овец, коз, оленей (маралов) и собак. Затем в каждую пробирку добавляют по 1,0 мл антигена, разведенного соответствующим раствором хлорида натрия 1:20. При этом разведения сывороток будут соответственно 1:50 и 1:100 или 1:25 и 1:50. При постановке реакции агглютинации одновременно с испытуемыми сыворотками ставят контроли с негативной и позитивной бруцеллезной сыворотками в таких же разведениях. После добавления к испытуемым и контрольным сывороткам антигена штативы с пробирками встряхивают для смешивания компонентов и помещают в термостат при 37 - 38 °С на 16 - 20 ч, затем выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч и проводят учет реакции. Результаты реакции учитывают визуально, определяя степень просветления жидкости, внешний вид агглютината (при его наличии) или антигена на дне пробирки до и затем, после легкого встряхивания, оценивают в крестах по следующей схеме: ++++ (4 креста) - полное просветление жидкости, микробные клетки антигена осели на дно пробирки в виде "зонтика", при легком встряхивании "зонтик" разбивается на хлопья и комочки, а жидкость остается прозрачной (100% агглютинации); +++ (3 креста) - неполное просветление жидкости и хорошо выраженный "зонтик" (75% агглютинации); ++ (2 креста) - неполное просветление жидкости, "зонтик" умеренно выражен (50% агглютинации); + (1 крест) - едва заметное просветление жидкости, "зонтик" выражен слабо, при встряхивании заметно небольшое количество хлопьев или комочков (25% агглютинации); - (минус) - просветления жидкости и образования "зонтика" не наступило, на дне пробирки по центру образуется небольшой осадок микробов антигена в виде точки или пятна. При встряхивании осадок легко разбивается, поднимается вверх в виде косички и равномерно распределяется в жидкости, которая при этом приобретает первоначальную мутность. Постановка и учет реакции связывания комплемента (РСК). Компоненты реакции и их подготовка к работе: - испытуемые сыворотки крови; - позитивная бруцеллезная сыворотка, изготовленная биопредприятием или полученная от больного бруцеллезом животного; - негативная сыворотка (сыворотка крови здоровых животных из опыта или консервированная), изготовленная на биопредприятии или полученная в лаборатории. Испытуемые и контрольные (позитивную и негативную) сыворотки инактивируют в водяной бане в день постановки реакции при 60 - 62 °С в течение 30 мин; антиген бруцеллезный единый для РА, РСК в рабочем титре, указанном биопредприятием-изготовителем; комплемент - сыворотка крови морской свинки, лиофильно высушенная, биофабричного изготовления или нативная (свежая или консервированная добавлением 2 - 4% борной кислоты). Сухой биофабричный комплемент растворяют физиологическим раствором, как указано на этикетке коробки. Берут такое количество ампул (флаконов), в которых содержится необходимое для проведения всего опыта количество комплемента. В каждую ампулу (флакон) вносят физиологический раствор и, не встряхивая, помещают в холодильник на 20 - 30 мин. Растворившийся комплемент осторожно перемешивают путем легкого встряхивания ампул (флаконов), сливают в одну пробирку, смешивают и помещают в холодильник при 4 - 10 °С. Непосредственно перед внесением в пробирки для титрования растворенный или нативный комплемент разводят физиологическим раствором 1:20, а остальной - хранят в холодильнике для постановки главного опыта. Рабочее разведение комплемента также готовят непосредственно перед внесением в пробирки главного опыта; гемолитическая сыворотка (гемолизин) - сыворотка крови кролика, иммунизированного эритроцитами барана, - для РСК в удвоенном титре; эритроциты барана - 2,5%-ная от осадка взвесь эритроцитов барана в физиологическом растворе. Для приготовления гемолитической системы взвесь эритроцитов и раствор гемолизина в рабочем разведении смешивают в равных объемах и при постановке РСК выдерживают в водяной бане при 37 - 38 °С в течение 15 - 20 мин. при периодическом перемешивании. При смешивании компонентов раствор гемолизина вливают во взвесь эритроцитов; - физиологический раствор - 0,85%-ный раствор химически чистого хлорида натрия в дистиллированной воде с рН 6,8 - 7,2 или физиологический раствор, содержащий ионы магния и кальция. Последний в обязательном порядке готовят в случае использования нативного комплемента (свежей или консервированной сыворотки крови морской свинки). Рабочие разведения всех компонентов для РСК готовят перед постановкой реакции. РСК проводят в водяной бане при 37 - 38 °С в объеме 1 мл (по 0,2 мл сыворотки, антигена, комплемента и 0,4 мл гемолитической системы). Перед каждой постановкой главного опыта проводят титрование комплемента в бактериолитической системе на сыворотке из опыта, т.е. того вида животных, которых исследуют, или в гемолитической системе. Если в пробирках с сывороткой и антигеном отмечают задержку гемолиза по сравнению с той же сывороткой без антигена, это означает, что для титрования была взята положительная сыворотка. В таком случае определение титра комплемента проводят по ряду пробирок без антигена. Сыворотку разводят 1:5 физиологическим раствором (1 мл сыворотки + 4 мл физиологического раствора), инактивируют, и вносят по 0,2 мл в два ряда по 10 пробирок. Затем в пробирки каждого ряда вносят комплемент. Для более точной дозировки вначале готовят необходимые разведения комплемента в десятикратных объемах в отдельных пробирках дополнительного ряда. В пробирки вносят комплемент, разведенный 1:20 (1,0 + 19,0 физраствора), в дозах 0,2; 0,4; 0,6 мл и т.д. до 2 мл и добавляют в каждую пробирку недостающее до 2 мл количество физиологического раствора, т.е. соответственно 1,8; 1,6; 1,4 мл и т.д. по следующей схеме, приведенной в таблице 3. Таблица 3 - Схема дозировки комплемента
Из первой пробирки этого ряда переносят по 0,2 мл жидкости в первые пробирки с сывороткой, взятой для титрования, из второй пробирки - соответственно во вторые пробирки с сывороткой и т.д. Работу выполняют аппаратом Флоринского. Титрование проводят путем внесения микропипеткой в пробирки каждого ряда с сывороткой комплемента, разведенного 1:20 (0,1 + 1,9 физраствора), в возрастающих дозах от 0,02 до 0,2 мл с интервалом 0,02 мл и добавления недостающего до 0,2 мл (в каждой пробирке) количества физиологического раствора. После внесения комплемента в первый ряд пробирок с сывороткой вносят по 0,2 мл антигена в рабочем разведении, а во второй ряд - по 0,2 мл физиологического раствора, смешивают путем встряхивания штатива и ставят в водяную баню при 37 - 38 °С на 20 мин. Затем во все пробирки добавляют по 0,4 мл гемолитической системы, смешивают путем встряхивания и вновь помещают в водяную баню на 20 мин., после чего учитывают результат. Схема титрования комплемента в бактериологической системе представлена в таблице 4. Таблица 4 – Схема титрования комплемента в бактериологической системе
Титром комплемента в бактериологической системе считают его минимальное количество, вызывающее полный гемолиз эритроцитов в пробирках с негативной сывороткой или позитивной сывороткой без антигена в течение 20 мин. в водяной бане при 37 - 38 °С. Учет результатов титрования проводят немедленно после выемки штатива из бани. В примере, приведенном в таблице 1, титр комплемента в баксистеме равен 0,1. Рабочий титр комплемента для главного опыта на 0,02 больше, т.е. 0,12. Схема титрования комплемента в гемолитической системе приведена в таблице 5. Таблица 5 - Схема титрования комплемента в гемолитической системе в РСК
Титром комплемента в гемолитической системе считают его минимальное количество, вызывающее полный гемолиз эритроцитов в течение 10 мин. в водяной бане при 37 - 38 °С. В приведенном примере титр комплемента в гемолитической системе равен 0,08. Рабочий титр комплемента для главного опыта на 0,04 больше, т.е. 0,12. Количество комплемента, необходимого для проведения главного опыта, рассчитывают по формуле: | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||