ЭКЗАМЕН!!!!! biology2014. Нету 39, 191, 227, 237, 261265, 282. Активный транспорт веществ через плазматическую мембрану. Роль в создании мембранного потенциала и регуляция внутриклеточного кальция
 Скачать 0.65 Mb.
|
|
134.Что такое ДНК – зонды? ДНК – зонд - короткий фрагмент ДНК, конъюгированный с флуоресцеином, ферментно, или радиоактивным изотопом, который используется для гибридизации с комплементарным участком молекулы ДНК – мишени. 135. Перечислите основные этапы упаковки хромосом.
136. Назовите все виды мутаций, которые входят в группу заболеваний под названием хромосомные болезни. Хромосомные болезни — наследственные заболевания, обусловленные изменением числа или структуры хромосомы.
137.Какие синдромы могут быть установлены по половому хроматину? 1. Синдром Шершевского – Тернера 45,Х0 2. Синдром Клайнфелтера 47,XXY ( больше не нашел) 138.В чем заключается метод флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) Метод флуоресцентной гибридизации позволяет выявлять индивидуальные хромосомы или их отдельные участки на препаратах метафазных хромосом или интерфазных ядрах на основе комплементарного взаимодействия ДНК – зонда и искомого участка на хромосоме. 139. Каким образом возникают мозаичные по генотипу организмы? Мозаицизм – существование в пределах одного организма генетически различающихся клеток. Может возникнуть в результате соматических мутаций, а также быть следствием кроссинговера, нарушения сегрегации хромосом в ходе митоза. Мутации отдельных генов могут локализоваться в отдельных клетках или группах клеток. 140. Назовите виды хромосомных мутаций.
141. Как связаны между собой хромосомные мутации и врожденные пороки развития? Хромосомные мутации ведут к тяжелым врожденным порокам.
142. Каким образом классифицированы хромосомы человека согласно Международной Денверской классификации? Согласно Денверской классификации все хромосомы человека разделены на 7 групп, расположенных в порядке уменьшения их длины и с учетом положения центромеры( метацентрические, субметацентрические, акроцентрические, спутничные) и отношения длины короткого плеча к длине всей хромосомы. Группы обозначаются буквами английского алфавита от A до G. Все пары хромосом принято нумеровать арабскими цифрами. 143. Каким образом классифицированы хромосомы человека согласно Международной Парижской классификации? Эта классификация позволяет подробно описывать отдельные хромосомы и их участки. Отдельные районы хромосом , последовательно пронумерованны от центромеры к теломере, а также отмечены бэнды внутри районов.Запись имеет следующий формат: первый символ – номер хромосомы ; второй – плечо; третий – номер района; четвертый – номер бэнда в составе района. Пример 1p31.2 144. Каковы возможности FISH – диагностики? Метод флуоресцентной гибридизации позволяет выявлять индивидуальные хромосомы или их отдельные участки на препаратах метафазных хромосом или интерфазных ядрах. 145. Что такое многоцветная FISH? Для чего она применяется? Для многоцветного кариотипирования используются цельнохромосомные ДНК – зонды , которые гибридизуются с многочисленными короткими фрагментами молекулы ДНК по всей длине определенной хромосомы, обеспечивая ее равномерное окрашивание в специфичный цвет. Разновидночтью этого метода является 24 – цветная FISH диагностика. Метод применяется для одновременной идентификации всех хромосом. Каждая хромосома получает специфический псевдоцвет. 24 – цветная FISH эффективна при выявлении хромосомных транслокаций, но не позволяет выявлять хромосомные делеции и инверсии. 146.Что такое молекулярная цитогенетика? Это группа методов анализа хромосом с применением молекулярных зондов( интернет) 147. Какие существуют современные методы цитогенетики? 1. флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) 2.сравнительная геномная гибридизация(CGH) 3. мечение хромосом с помощью полимеразной реакции с использованием специфических праймеров (PRINS) 4. флуоресцентная гибридизация пептидно – нуклеиновых соединений(PNA) 148 Какие существуют способы дифференциальной окраски хромосом?
149.Как осуществляется GTG –дифференциальное окрашивание? GTG –дифференциальное окрашивание неактивных хромосом выполняют после предварительной обработки препарата метафазной пластинки слабым раствором протеолитического фермента ( трипсина) и последующим окрашивании красителем Гимза. Такой метод окраски позволяет, не только выявить линейный рисунок по всей длине плеч хромосомы, но и установить её структурную организацию , обусловленную поперечной исчерченностью. 150.Какие основные типы ДНК – зондов используют в FISH методе? Какие аномалии хромосом можно выявит с их помощью?
151. Что такое полиморфизм генов? Полиморфизм генов – существование в популяции двух или большего числа альтернативных форм ( аллелей) определенного локуса хромосомы (гена), которые различаются нуклеотидной последовательностью или различным, которые различаются нуклеотидной последовательностью или различным числом повторяющихся нуклеотидных последовательностей. 152 Чем обусловлено существование нескольких изоформ белка? Изоформа белка – любая из нескольких разных форм одного и того же белка. Различные формы белка могут быть образованы из того же гена путем альтернативного сплайсинга или могут быть вызваны однонуклеотидными полиморфизмами. 153. Какой ген называется полиморфным? Полиморфный ген – ген, который представлен в популяции несколькими аллелями. 154 Какие тандемные повторы известны? Тандемные повторы представляют собой повторяющиеся последовательности ДНК различной длины:
155.Назвать наиболее значимые заболевания с молекулярным дефектом? К наиболее значимым заболеваниям с установленным молекулярным дефектом принадлежат семейные формы болезни Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, болезнь Альцгеймера, эпилепсия, группа прогрессирующих мышечных дистрофий, наследственные атаксии, спинальные амиотрофии, ряд наиболее часто встречающихся экстрапирамидных наследственных заболеваний (хорея Гентингтона, торсионная дистония, болезнь Коновалова -Вильсона) и др. (ИНЕТ БОЛЬШЕ НИ ГДЕ НЕ НАШЕЛ) 156.Что такое прямая ДНК – диагностика? Прямая ДНК – диагностика предполагает непосредственное выявление мутации , являющейся непосредственной причиной заболевания. Оно облает абсолютной точностью и требует для анализа только образец ДНК обследуемого лица. 157 Какое необходимое условие для проведения прямой ДНК – диагностики? Для проведения прямой ДНК – диагностики необходимо точно знать структуру гена или конкретного участка гена, содержащего анализируемую мутацию. 158.На чем базируются большинство современных протоколов прямой ДНК – диагностики? В настоящее время большинство протоколов прямой ДНК – диагностики базируется на полимеразной цепной реакции(ПЦР). 159.Что такое ПЦР ? ПЦР – экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определенных фрагментов нуклеиновой кислоты в биологическом материале (пробе). 160. Методы детекции известных мутаций? Если мутации известны, то можно их выявлять либо с помощью ферментов - рестриктаз, которые распознают строго определенные нуклеотидные последовательности, либо на основе ДНК-гибридизации. 161. Какие мутации выявляет анализ одноцепочечного конформацмоногоо полиморфизма? SSCP-анализ применяется для выявления таких мутаций, как замена оснований, малые инсерции и делеции, различные перестройки и наиболее пригоден для анализа относительно коротких (200-300 п.н.) фрагментов ДНК. Чувствительность метода достаточно высока и он позволяет детектировать до 90-95% всех мутаций. 162. В чем состоит суть метода анализа одноцепочечного конформационного полиморфизма? способность обнаруживать любые типы замен. Ограничением является размер исследуемого фрагмента ДНК, так как высокая эффективность детекции мутаций, составляющая 80-90%, показана при длине фрагментов менее 200 пар нуклеотидов, а для фрагментов более 400 пар нуклеотидов вероятность обнаружения мутаций уменьшается до 50% 163. Как образование гетеродуплексов влияет на подвижность ДНК в геле?Почему? Гетеродуплексы дают возможность наблюдать изменение подвижности мутантных фрагментов ДНК в геле, не выявляемое при стандартных условиях проведения электрофореза. Зачастую единичные мутации можно обнаружить по вызываемым ими значительным изменениям структуры доменов во фрагменте ДНК- Изменения эти отражаются и на характере плавления ДНК: домены, имевшие изначально самую высокую температуру плавления, могут стать самыми легкоплавкими. Таким образом, когда вместо гомодуплексов используются гетеродуплексы, ДГГЭ позволяет выявлять замены нуклеотидов даже в самых тугоплавких доменах. 164. Какие мутации выявляет денатурирующий градиентный гель-электрофорез? Денатурирующий градиентный гель-электрофорез (DGGE — от англ, denaturation gradient gel electrophoresis). Метод DGGE — основан на различиях в условиях и характере денатурации нормальных и мутантных двухцепочечных фрагментов ДНК, выявляемых путем сравнения их электрофоретической подвижности в полиакриламидном геле с линейно возрастающим градиентом концентраций денатурирующих агентов (мочевины и формальдегида). 165. В чем принцип метода прямого секвенирования? Секвенирование - последний этап молекулярного анализа предварительно отобранного, клонированного и протестированного более простыми методами фрагмента ДНК. Секвенирование представляет собой определение нуклеотидной последовательности фрагмента ДНК путем получения серии комплементарных молекул ДНК, различающихся подлине на одно основание. 166. что такое секвенирование днк? Секвенирование — комплекс методов направленных на расшифровку аминокислотной или нуклеотидной последовательности биополимеров (белков и нуклеиновых кислот). Секвенирование ДНК — прочтение нуклеотидной последовательности первичной структуры дезоксирибонуклеиновой кислоты. 167. то такое праймер? это короткий фрагмент нуклеиновой кислоты (олигонуклеотид), комплементарный ДНК-или РНК-мишени, служит затравкой для синтеза комплементарной цепи с помощью ДНК-полимеразы. 168. Назовите цель проекта «Геном Человека». Целью проекта было определение последовательность нуклеотидов ДНК человека и идентификация генов. 169. Дайте современное определение понятию «ген».Ген — структурная и функциональная единица наследственности живых организмов. Ген представляет собой участок ДНК, задающий последовательность определённого полипептида либо функциональной РНК. Гены (точнее, аллели генов) определяют наследственные признаки организмов, передающиеся от родителей потомству при размножении. 170. Какую часть от длины всего генома занимают кодирующие участки ДНК? Все вместе, кодирующие участки ДНК составляют не более 1.5% от длины всего генома. 171. Какую функцию выполняют некодирующие транскрибирующиеся участки генома?подобные псевдогены могут являться источником некодирующей РНК, способной выполнять регуляторную функцию. 172. Что такое псевдогены? Псевдогенами называют последовательности, родственные генам, но лишенные способности кодировать белки 173. Назовите виды тандемных повторов. микросателлиты содержат ДНК повторы от 1 до 6 нуклеотидов, минисателлиты от 7 до 100 нуклеотидов, сателлиты более 100 нуклеотидов 174. Назовите виды диспергированных повторов Диспергированные повторы включают в себя транспозоны и ретротранспозоны. 175. Как называются элементы генома, которые могут самовоспроизводиться в геноме,осуществляя реакцию обратной транскрипции? Ретротранспозоны (мобильные генетические элементы первого типа, или транспозоны, перемещающиеся через РНК интермедиаты) — это генетические элементы, которые могут самовоспроизводиться в геноме и являются вездесущими компонентами ДНК многих эукариотических организмов. 176. Перечислите базовые регуляторные элементы генома регуляторные элементы промотор (специфический сайт молекулы ДНК, с которого начинается синтез полимера), энхансеры (участок ДНК, способный связываться с факторами транскрипции и увеличить уровень транскрипции гена или группы генов), сайленсеры (участок ДНК, с которым связываются молекулы репроссоры, что приводит к снижению или к полному подавлению синтеза РНК РНК-полимеразой), инсуляторы (образуют дискретные функциональные домены – петли хромасом, ограничивающие влияние соседних регуляторных элементов). 177. Что такое вектор? Вектор – молекула нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК), которую используют в генетической инженерии для передачи генетического материала другой клетке. 178. Что такое клонирование ДНК? Клонирование – метод, направлен на получение генетически идентичных клеток или организмов. 179. Что такое рекомбинантнная ДНК? фрагмент ДНК, содержащий гены человека, присоединенный к ДНК вируса. 180. Для чего используют метод «дробовика»? из-за огромных размеров генома и соответствующей массы невозможно работать молекулой ДНК напрямую. Один из подходов к «упрощению» это создание геномной библиотеки, когда геномную ДНК расщепляют с помощью рестриктаз, а затем клонируют в подходящий вектор. получаются милионы бактерий которые несут в себе плазмиду с фрагментом ДНК. Плазмиды одной колонии содержат один клон геномной ДНК, Клоны могут содержать целые гены, части генов или некодирующую ДНК. Такой подход создания геномных библиотек назвали методом дробовика». 181. Какие организмы называются генетически модифицированными? Генетически модифицированный организм (ГМО) — живой организм, генотип которого изменён в научных, медицинских или хозяйственных целях. 182. Какие компоненты входят в состав биосферы? Живое вещество - неотъемлемый компонент биосферы, так как именно жизнедеятельность живых организмов - ведущий фактор преобразования поверхности планеты, основа существования самой биосферы. Количество живого вещества в биосфере (биомасса) есть величина постоянная или мало меняющаяся с течением геологического времени, так как организмы, составляющие биомассу, обладают громадной способностью к воспроизводству - размножению и распространению по планете. Современное живое вещество генетически родственно живому веществу всех прошлых эпох. Жизнь на планете существует благодаря космической энергии Солнца. Преобразуя и аккумулируя солнечную энергию, живое вещество во все геологические эпохи влияло на химический состав земной коры, являясь мощной геохимической силой, преобразующей лик планеты. В состав биосферы входят также другие компоненты: неживое биогенное вещество, образованное живым веществом современной и минувших геологических эпох (продукты жизнедеятельности организмов, их ископаемые остатки, нефть, уголь, торф, осадочные породы, например известняки), косное вещество, в создании которого живое вещество не участвует (газы, твердые частицы, водяные пары, выбрасываемые вулканами, гейзерами и др.), биокосное вещество, создаваемое одновременно живыми организмами и косным веществом (почва, земная кора, вода обитаемых водоемов и пр.). 183. Какова роль животных организмов в биосфере? Многие организмы способны избирательно поглощать и накапливать различные химические элементы в виде органических и неорганических соединений. Например, хвощи аккумулируют из окружающей среды кремний, губки и некоторые водоросли — иод. В результате деятельности разных бактерий образованы многие месторождения серы, железных и марганцевых руд. А)Из тел ископаемых растений и планктонных организмов сформировались залежи каменного угля и запасы нефти. Скелеты мелких планктонных водорослей и раковинок морских простейших сложились в гигантские толщи известняковых пород . Б)Особую роль в биосфере играют микроорганизмы. Не будь их, круговорот веществ и энергии не смог бы осуществляться и поверхность планеты была бы покрыта толстым слоем растительных остатков и трупов животных. В)Лишайники, грибы и бактерии активно участвуют в разрушении горных пород. Их работу поддерживают растения, чьи корневые системы прорастают в мельчайшие трещины. Завершают этот процесс вода и ветер. Живые существа способствуют переносу и круговороту веществ в природе. Благодаря деятельности фотосинтетиков в атмосфере снизилось количество углекислого газа, появился кислород и сформировался защитный озоновый слой |