Микробиология(Закарян). Первая. Общая микробиология. Глава место микроорганизмов среди
 Скачать 2.06 Mb.
|
|
Другие коринебактерии Corynebacterium vaginale. С. vaginale выделяют от здоровых женщин, а также при вагинитах в ассоциации с анаэробными бактериями. Для лечения вагинитов применяют метронидазол. МИКОБАКТЕРИИ К роду Mycobacterium относятся патогенные представители - возбудители туберкулеза, возбудители нетуберкулезных микобактериозов, возбудители лепры, а также большое количество сапрофитов и условно-патогенных видов, например. М. smegmatis - обитатель наружных половых органов, М. phlei - обитатель объектов внешней среды. Микобактерии туберкулеза Туберкулез - одна из важнейших проблем медицины. Впервые Mycobacterium tuberculosis был открыт Р. Кохом в 1882 г. Туберкулез у человека вызывают в большинстве случаев М. tuberculosis (более, чем в 90% случаев), реже М. bovis. Морфология, культуральные свойства. М. tuberculosis - прямые или слегка изогнутые тонкие палочки длиной 1-4 мкм, жгутиков, спор и капсул не образуют. Содержат большое количество липидов, поэтому устойчивы к кислотам, щелочам и спиртам, плохо окрашиваются анилиновыми красителями, для окраски применяется метод Циля-Нильсена. Встречаются зернистые формы, ветвящиеся формы, отдельные зерна Муха (кислотоустойчивые и кислотоподатливые). Микобактерии туберкулеза способны переходить в L-формы, длительно сохраняющиеся в организме. На простых питательных средах не растут. Для культивирования применяют среду Левенштейна-Йенсена (яичная среда с добавлением картофельной муки, глицерина, малахитовой зелени), картофельно-гли-цершювую среду Сотона. Микобактерии туберкулеза растут медленно. На жидких средах через 2-3 недели образуется рост в виде морщинистой пленки, на плотной среде - морщинистые сухие колонии (R-формы). М. tuberculosis высоковирулентны для морских свинок.М. bovis отличаются от М. tuberculosis. Это короткие толстые палочки, растут на питательных средах без глицерина. К этому виду чувствительны кролики. Вирулентные штаммы М. tuberculosis в микроколониях растут виде переплетенных кос или веревки благодаря наличию липоидного вещества, названною "корд-фактором" (англ, cord - веревка). Ангшены. Микобакгерии туберкулеза содержат антигены, общие с другими видами тгого рода и специфические. Прошш (туберкулин) является аллергеном. Он вызывает воспалительною реакцию только у людей инфицированных или привитых, у интактных людей не возникает реакции на введение туберкулина. Факторы патогенности. Микобактерии туберкулеза не продуцируют токсинов. Заболевание возникает в результате проникновения в макроорганизм и размножения в нем вирулентных бактерий. Патогенность их связана с действием липидов, корд-фактора, с сенси- билизирующим действием губеркулина. Устойчивость. Микобакгерии туберкулеза устойчивы к высушиванию, в высохшей мокроте па предметах сохраняются в течение нескольких месяцев. К действию дезинфицирующих веществ более устойчивы, чем другие бактерии в 5% растворе карболовой кислоты и в растворе сулемы 1*1000 погибают через сутки. Из дезинфицирующих средств наиболее чувствительны к хлорной извести и хлорамину. Заболевание у человека. Источником инфекции являются люди, больные активно протекающим туберкулезом, и животные. Пути передачи - преимущественно воздушно-капельный, реже контактно-бытовой, алиментарный (например, через молоко больных коров). Чаще всего туберкулез поражает легкие, затем но частоте поражения следуют лимфоузлы, кишечник, составы, кожа, почки и другие органы. При первичном проникновении возбудителей в организм происходит образование туберкулезных бугорков, обычно в легком, с вовлечением в процесс лимфатических узлов, формируется первичный комплекс. При благоприятном течении первичный очаг рассасывается, пораженный участок обызвествлястся. Туберкулиновая реакция становится положительной. Этот тип первичной инфекции наблюдается обычно у детей, но его обнаруживают и у взрослых, если они не были инфицированы в детстве и если туберкулиновая реакция у них осталась отрицательной. Вторичный туберкулез может возникнуть как экзогенная инфекция, вызванная бактериями, проникшими извне, или как эндогенная инфекция, связанная с бактериями туберкулеза, сохранившимися в первичном очаге. Иммунитет. Человек обладает в какой-то степени врожденной невосприимчивостью к микобактериям туберкулеза, так как не всегда заражение ведет к заболеванию. Приобретенный иммунитет при туберкулезе имеет свои особенности: 1) невосприимчивость сочетается с повышенной чувствительностью (ГЧЗГ) к возбудителю; 2) иммунитет нестернльный, поддерживается присутствием возбудителя в организме; 3) механизм защиты клеточный; специфические антитела образуются в течение болезни, их можно обнаружить, но они не создают невосприимчивости. Иммунные Т-лимфоциты, продуцируя интерлейкины, активируют макрофаги и другие клетки. Образуются бугорки, которые ограничивают размножение микобактерий, фиксируют их в очагах, препятствуя их распространению. При туберкулезе особенно важное значение имеет состояние макроорганизма. Восприимчивость к инфекции увеличивается при неблагоприятных условиях жизни. Развитию туберкулезного процесса способствуют такие факторы, как сахарный диабет, нервная депрессия и др. Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом является мокрота, моча, промывные воды желудка, экссудат. Мазки из исследуемого материала окрашивают по Цилю- Нильсену (цветная вклейка рис. 35 и 36). При этом для обесцвечивания применяют не кислоту, а солянокислый спирт, так как микобактерий туберкулеза, в отличие от сапрофитных микобактерий, обитающих в организме человека, не обесцвечиваются спиртом. Применяется также РИФ с флюоресцирующей антисывороткой. Непосредственная микроскопия мазка дает положительный результат, если количество возбудителей велико. При малом количестве бактерий применяют методы обогащения: метод гомогенизации и метод флотации, позволяющие сконцентрировать бактерии в небольшом объеме материала. Более эффективен бактериологический метод - посев на питательные среды, выделение культуры и ее идентификация, но он требует длительного времени - 3-4 недели. Ускоренный метод состоит в том, что из исследуемого материала готовят мазок на предметном стекле и помещают в жидкую питательную среду. Через 3-4 дня образуются микроколонии, которые можно обнаружить при микроскопии мазка, окрашенного по Цилю-Нильсену. Наиболее чувствительным методом является биологическая проба - заражение морской свинки.Аллергическая проба Манту ставится путем внутрикожного введения туберкулина. Используется PPD (англ, purifed protein derivative) - очищенный белок микобактерий туберкулеза. У людей, которые не имели контакта с микобактериями туберкулеза реакция отрицательная. Реакция положительная у инфицированных лиц, в том числе у здоровых, а также у вакцинированных. Профилактические и лечебные препараты. Для специфической профилактики применяют живую вакцину BCG (Bacille Calmette-Gue-rin). Вакцинный штамм БЦЖ был получен А. Кальметтом и М. Гере-ном путем многократных пересевов палочек туберкулеза на питательной среде, содержащей желчь. Вакцинация проводится всем новорожденным в возрасте 5 или 7 дней внутрикожно. Ревакцинацию проводят лицам с отрицательной туберкулиновой пробой через 5-7 лет до 30-летнего возраста. Для лечения применяют антибиотики и химиотерапевтические средства с учетом чувствительности возбудителей, Препараты I ряда: тубазид, фтивазид, изониазид, дигидрострептомицин. Если возбудители устойчивы к этим препаратам, применяют препараты II ряда: этионамид, циклосерин, канамнцин, рифамици, виомицин. Микобактерии лепры Возбудитель проказы (лепры) Mycobacterium leprae впервые был описан в 1874 г. норвежским врачом Г. Ганссном. По морфологии сходны с микобактериями туберкулеза: прямые пли слегка изогнутые палочки длиной до 7 мкм, отличаются меньшей кислото- и спиртоустойчивостью и характерным расположением в тканях в виде "пачек сигар" внутри клеток. Палочки неподвижны, ие образуют спор и капсул. На искусственных питательных средах не культивируются. В качестве экспериментальной модели используются дсвятшюясные броненосцы, у которых в месте введения образуются типичные узелки - лепромы, а при внутривенном заражении развивается генерализованный процесс. Антигены. Имеется 2 антигена: термостабильный полисахаридный. общий для микобактерий и термолабильный белковый, специфичный для микобактерий лепры. Токсинообразование. Экзотоксина ие продуцируют. Содержат эндотоксины и аллергены. Устойчивость во внешней среде экспериментально не изучалась, поскольку чистые культуры ие получены. Заболевание у человека. Источником инфекции является больной человек. Заражение происходит при длительном и тесном общении с больным, поскольку лепра не относится к высококонтагиозным инфекциям. Считают, что заражение происходит путем прямого контакта и через предметы. Заболевание по наследству не передается - ребенок, отделенный от матери сразу после рождения, не заболевает лепрой. Проникновение.возбудителя в организм возможно через поврежденную кожу или через слизистые оболочки верхних дыхательных путей. Характерен для лепры длительный инкубационный период -в среднем 3-5 лет, ио описаны случаи с более коротким инкубационным периодом в несколько месяцев и с более длительным - до 20 лег. Характерно медленное течение заболевания. Заболевание может протекать в тяжелой лепроматозной форме и в более доброкачест- венной - туберкулоидной форме. Иммунитет. Человек обладает врожденной резистентностью к лепре. Даже люди, находящиеся в течение длительного времени в общении с больными, заболевают редко. В течение болезни при тяжелой лепроматозной форме угнетается клеточный иммунитет, и внутрикожная проба Мицуды с лелромином отрицательная. При туберкулоидной форме проба положительна. Антитела к микобактсриям лепры обнаруживаются у больных, но защитной роли не играют. Лабораторная диагностика проводится бактериоскопическим методом. В мазках из носовой слизи, соскобов с пораженных участков, окрашенных по Цилю-Нильсену, обнаруживают при микроскопии "лепрозные шары" с характерно располагающимися в них микобактериями лепры. Проба с лепромином используется как прогностическая. Лечебные препараты. Специфической профилактики нет. Однако отмечается снижение заболеваемости после применения вакцины БЦЖ . Больных лечат в лепрозориях. Для лечения применяют сульфоновые препараты, средства, стимулирующие иммунитет, диуцифон. АКТИНОМИЦЕТЫ Возбудителями актшюмикоза являются различные виды лучистых грибов - актиномицеты: Actinomyces israelii, Actinomyces bovis и другие. По морфологии они представляют собой нитевидные клетки, ветвящиеся, распадающиеся на короткие палочковидные и кокковидные формы. Грамположительны. Факультативные анаэробы, культивируются в присутствии СО 2 , при 35-37°С. В пораженных тканях образуют друзы, которые в виде мелких зерен можно видеть простым глазом. Под микроскопом в центре друзы обнаруживается скопление ветвящихся нитей, окруженное лучами с колбообразно вздутыми концами. По антигенам, содержащимся в клеточной стенке, актиномицеты делятся на серогруппы. Актиномицеты устойчивы во внешней среде, длительно сохраняются в высушенном состоянии, выдерживают нагревание до 60°С в течение часа. Заболевание может возникнуть при заражении извне, через поврежденную кожу или слизистые оболочки при жевании колосков злаков, уколе соломой, шипами растений. Возможна эндогенная инфекция, так как актиномицеты обитают в полости рта, на слизистой оболочке верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта. Возникновению болезни способствует ослабление защитных сил организма. Чаще всего актиномикозом поражается нижняя челюсть, легкие, плевра, реже печень, кишечник, мозг. Вначале образуются плотные инфильтраты, которые затем нагнаиваются и вскрываются с образованием долго не заживающих свищей с выделением гноя. После перенесенного заболевания невосприимчивость не формируется, антитела не обладают защитным действием. Развивается аллергическое состояние - ГЧЗТ. Микробиологическая диагностика проводится путем исследования гноя из свищей, мокроты, мочи, пунктата из инфиль- трата. Из исследуемого материала выбирают желтоватые зерна, микроскопируют, в препарате раздавленной капли в 10-20% растворе щелочи, определяют наличие друз. Выделяют культуру актиномицетов на специальной питательной среде, определяют вид по ферментативным свойствам и с помощью РИФ. Антитела в сыворотке крови больных определяют в РСК. Ставят внутрикожную аллергическую пробу с экстрактом из актиномицетов. Для лечения применяют пенициллины, тетрациклины, левомицетин, сульфаниламиды. С целью иммуностимуляции используют актинолизат или вакцину. ПАТОГЕННЫЕ АНАЭРОБЫ РОДА CLOSTRIDIUM К патогенным клостридиям относятся возбудители столбняка, анаэробной газовой инфекции, ботулизма. Патогенные анаэробы имеют общие свойства. Это крупные грамположительные палочки, образующие споры, которые располагаются терминально или субтерминально. В аэробных условиях не размножаются. Не погибают, благодаря способности к спорообразованию. Вырабатывают экзотоксины. Естественным местом их обитания является кишечник человека и животных, с испражнениями которых клостридии попадают в почву и в виде спор могут длительное время находиться в ней. Клостридии столбняка Возбудитель столбняка Clostridium tetani (лат. tetanus - судорога) обнаружен в 1883 г. Н.Д. Монастырским и в 1884 г. А. Николайером. Морфология, культу-ральные свойства, С. tetani -грамположительные палочки длиной 4- 8 мкм, образуют круглые терминально расположенные споры, размеры которой превышают их по- перечник, что придает им вид барабанных палочек. Подвижны, жгутики расположены перитрихиально. Капсулу не образуют (рис. 37). Облигатные анаэробы, растут при рН 6,8-7,4 и температуре 37°С. Биохимически неактивны. Антигены. По специфическим жгутиковым Н-антигенам различают несколько сероваров. все они имеют общий О-антнген, и нее они продуцируют один и тот же экзотоксин, что важно в практическом отношении. Токсинообразование. Токсин С. tetani - белок, но механизму действия различают тетаносиазмин, повреждающий нервные клетки, что приводит к судорогам, и тетанолизин, вызывающий гемолиз. Ферменты желудочно-кишечного тракта не разрушают токсин, но он не вса- сывается через слизистую оболочку кишечника и поэтому безопасен при попадании, в пищеварительную систему через рот. Устойчивость. Споры обладают большой устойчивостью во внешней среде. В почве, на предметах сохраняются десятками лет, выдерживают кипячение в течение часа. Под действием дезинфицирующих веществ погибают через 8-10 часов. Заболевание у человека. Столбняк - раневая инфекция. Возбудитель столбняка является постоянным обитателем кишечника травоядных животных, встречается также у людей, попадает с фекалиями в почву, где в форме спор сохраняется длительное время. Из почвы заносится на одежду человека, на различные предметы. Заболевание может наступить даже в случаях незначительных повреждений кожи и слизистых облочек, при ожогах и отморожениях, у рожениц при несоблюдении правил асептики, при криминальных абортах, у новорожденных. Особенно опасны глубокие раны, в которые создаются анаэробные условия. Споры возбудителя попадают в рану из почвы. С. tetani не являются инвазивными микробами, возбуди гели остаются локализованными в области поврежденных тканей (ранение, ожог, .травма, пупочная культя, матка после в небольничного аборта, хирургический шов), в которые попали споры. Развитие заболевания обусловлено токсинемией. Чем больше токсина, тем. короче инкубационный период, в среднем 5- 14 дней, он может быть укорочен до 1 дня и удлинен до 30 дней. Токсин проникает в центральную нервную систему, вызывает ее поражение. У человека столбняк развивается по нисходящему типу: вначале наблюдается спазм жевательных мышц (тризм, "замкнутая челюсть"), которые сокращаются до такой степени, что трудно открыть рот. Постепенно в процесс вовлекаются другие поперечно-полосатые мышцы. Любой внешний раздражитель вызывает судороги. Больной находится в сознании, боль при судорогах, бывает сильной. Смерть обычно наступает от асфиксии или от паралича сердца. Больной столбняком не заразен для окружающих. Иммунитет. Перенесенное заболевание не оставляет иммунитета. Введение анатоксина создает продолжительный иммунитет. Лабораторная диагностика. Лабораторные исследования для диагностики заболевания проводятся редко. В клинике диагноз столбняка ставится, в основном, по симптомам заболевания. В сомнительных случаях исследуют материалы вскрытия. Исследования на наличие воз-, будителя столбняка проводят с целью проверки стерильности перевязочных материалов и инъекционных растворов. Исследования прово- дят бактериологическим методом и путем постановки биологической пробы - заражения исследуемым материалом мышей, у которых развивается столбняк по типу восходящего, начиная с конечностей, хвоста ("хвост трубой"). Контрольные мыши, получившие исследуемый материал вместе с противостолбнячной сывороткой, остаются здоровыми. Профилактические и лечебные препараты. Специфическая профилактика направлена на создание искусственного антитоксического иммунитета. Плановая иммунизация проводится столбнячным анатоксином, который входит в состав вакцин АКДС, АДС. Иммунизируют детей с 5- 6-месячного возраста с последующими ревакцинациями. При угрозе развития столбняка (ранение, ожоги II и III степени, отморожения II и III степени, роды на дому, внебольничные аборты, операции на кишечнике) осуществляют экстренную профилактику. С этой целью лицам, привитым не более 10 лет назад, достаточно ввести 0,5 мл анатоксина. Непривитым необходима активно-пассивная иммунизация: введение анатоксина 1,0 мл и противостолбнячной сыворотки 3000 ME - разными шприцами, в разные части тела, с интервалом в 30 минут. Сыворотку вводят по Безредка. В дальнейшем вводят анатоксин по схеме. |