Книга по лабораторной диагностике. Программа Лаборатории Шанс Био
 Скачать 1.05 Mb.
|
10. Содержание гормонов в крови (Код 601 - 649)Исследование в Лаборатории «Шанс Био» - 7-10 дней. Исследуемый материал: сыворотка крови (не менее 0,5 мл на исследование одного гормона). ПЛАЗМУ не использовать! Взятие: Натощак, кровь брать в чистую, сухую пробирку (пробирка с белой или красной крышкой). Тотчас отделить сыворотку, не допускать гемолиз! При повторных исследованиях брать кровь только при тех же условиях, что и до этого. Хранение, доставка: сыворотку немедленно заморозить! Повторное замораживание исключено. Доставить в день взятия материала. Факторы, влияющие на результаты: - концентрации лютеинизирующего гормона (ЛГ) колеблются в течение суток (мах – рано утром, min – вторая половина дня), - эстрадиол, тестостерон, прогестерон, тиреотропин (ТТГ) – стабильны в сыворотке при комнатной температуре 1 день, в замороженном состоянии 3 дня, - для исследования половых гормонов, следует исключить прием эстрогенов перед сдачей крови за 3 дня, - для исследования Т4 (тироксин), исключить препараты с йодом за месяц, препараты щитовидной железы за 2-3 дня, - перед проведением анализа нужно исключить физические нагрузки и стресс, - понижают уровень гормонов: анаболические стероиды, прогестерон, глюкокортикоиды, дексаметазон, ампициллин и др.,
Таблица. Содержание гормонов в крови (референтные интервалы Лаборатории «Шанс Био»)
11. микробиологическиЕ ИССЛЕДОВАНИя ((Код 701 - 703. 403) Исследование в Лаборатории «Шанс Био»: Бактериологическое исследование – 4 дня Микологическое, комплексное исследование, анализ кала на дисбактериоз – 14 дней. Исследуемый материал: При бактериологическом исследовании отбор материала и транспортировка проб является ответственным этапом работы в известной мере предопределяющем ее результаты. В каждом конкретном случае необходимо учитывать клинические проявления заболевания, его сроки, анамнестические данные, предполагаемый диагноз, преимущественную локализацию возбудителя на разных этапах патогенеза и показания к обследованию. При взятии материала для бактериологического исследования необходимо соблюдать следующие основные правила:
Бактериологическое исследование крови: Для проведения анализа используют только венозную кровь. При взятии крови особенно строго соблюдают требования асептики. Для предотвращения контаминирования образца и профилактики осложнений недостаточно ограничиться обработкой рук персонала и кожи пациента в области взятия пробы 70% этиловым спиртом. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригают, а кожу дезинфицируют спиртом. После спирта кожу животного необходимо обработать каким-либо антисептиком (например, йодоформом или хлоргексидином). Обработанная поверхность должна высохнуть (1-2 мин), и только потом можно проводить забор крови. Для получения адекватного результата предпочтительно забирать 20-30 мл крови. Отобранные образцы необходимо быстро доставить в лабораторию, сохраняя при комнатной температуре. Образцы крови нельзя замораживать. При заборе крови нужно следить, чтобы кровь стекала в пробирку струей, а не каплями, кровь взятая каплями и вспененная, скорее гемолизируется и часто дает неправильные результаты при исследовании. Бактериологическое исследование органов дыхания: При заболеваниях органов дыхания основными образцами для подобных исследований служат – мазки из носа, носоглотки, зева, мокрота. Основная процедура – забор мазков из носа, носоглотки и зева с помощью ватных тампонов. Материал забирают натощак. При заборе материала из носа используют тампоны, отдельные для каждой ноздри (транспортная среда - бак. пробирка с синей или белой крышкой). При отсутствии секрета их можно смочить стерильным физраствором. При заборе материала из зева нельзя прикасаться тампоном к слизистой оболочке полости рта и языка. Наиболее часто для выявления бактерий в нижних отделах дыхательных путей используют мокроту. Мокроту собирают (вызывают у животного кашель), Обмотав куском полотна нос и рот и сжимая носовые отверстия. После кашля находят на полотне небольшое количество мокроты. После кашля слизь остается на стенке глотки, а в некоторых случаях – между языком и коренными зубами. Оттуда ее достают тампоном или стерильной марлевой салфеткой, которые и направляют в стерильной посуде в лабораторию. Ротовая полость: Материал для бактериологических исследований отбирают ватным тампоном: отбирают поверхность слизистой оболочки щек, десен и языка. При наличии налета или язв из них мазки желательно отбирать отдельным тампоном (транспортная среда - бак. пробирка с синей или белой крышкой). Кал на дисбактериоз (Код 403): Кал для исследования отправляют в стерильных банках (флаконы для кала с лопаткой, с красной или голубой крышкой), при этом, кал заливают физраствором до полного покрытия (не смешивая!), закрывают крышкой. Весьма желательно посев испражнений осуществлять непосредственно после их сбора или в пределах двухчасового периода (0,5-2ч); Испражнения, доставленные в лабораторию, до момента посева хранят на холоде (2-6°С). Моча: Перед проведением забора мочи следует обмыть наружные половые органы с мылом и ополоснуть стерильным изотоническим раствором натрия хлорида. Область наружного отверстия уретры осушают стерильным марлевым тампоном или салфеткой, спускают первую порцию мочи, а среднюю (50 – 70 мл) собирают в стерильную ёмкость (баночку для мочи с красной крышкой) с дальнейшим оформлением и транспортировкой пробы согласно правилам, упомянутым ранее. Полученный образец следует быстро (в течение 30 минут) доставить в лабораторию, исследование необходимо начинать не позднее 1ч после забора. При невозможности начать работу немедленно мочу можно сохранять в холодильнике не более 24ч. При невозможности самостоятельного мочеиспускания показана пункция мочевого пузыря (см. главу о взятии мочи для общего анализа). Мочеиспускательный канал: Материал забирают утром, до мочеиспускания, образец берут стерильной петлей (транспортная среда - бак. пробирка с синей или белой крышкой). Влагалище: Образец забирают из верхней трети и заднего свода влагалища тампоном (транспортная среда - бак. пробирка с синей или белой крышкой). Гной, пунктаты органов, экссудат: Берут с помощью стерильного шприца или ватного (марлевого) тампона, помещают в стерильные пробирки (транспортная среда - бак. пробирка с синей или белой крышкой) и направляют в лабораторию в соответствии с общими правилами. 12. диагностика инфекций (Код 001 - 099) Исследование в Лаборатории «Шанс Био»: Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – 1 – 3 дня. Иммунохроматография (ИХ) – 30 мин Исследуемый материал и методы исследования: см. таблицу ниже.
Хранение, транспортировка: Смывы со слизистых и выделения берут с помощью ватных палочек, помещают в пробирки Эппендорфа, с 0,5 мл физраствора (обрезая пластиковую палочку). Кровь – аналогично биохимии (пробирка с красной или белой крышкой). Материал для анализов доставляется в лабораторию в день взятия или на следующий день. Допускается хранение в холодильнике (4оС) в течение 4-5 дней. В условиях заморозки до -20оС образцы могут храниться до 30 дней (при этом, из крови необходимо отделить сыворотку). Повторное замораживание образцов не допускается! Пробы мочи замораживанию не подлежат! полимеразная цепная реакция (ПЦР). Полимеразная цепная реакция была открыта в 1984 году, американским ученым Кэрри Мюллисом, который впервые показал возможность амплификации (многократного увеличения числа копий) участков ДНК в пробирке, в процессе реакции, главной особенностью которой являются повторяющиеся температурные циклы. В 1985 году были показаны практические возможности применения ПЦР. Начиная с 1988 году, ПЦР с использованием термостабильной ДНК-полимеразы, получила широкое распространение. Уже в 1989 г. журнал «Science» назвал ДНК-полимеразу молекулой года. Однако мало кто знает, что в 1980 г. термостабильная ДНК-полимераза была выделена в России Городецким. Метод ПЦР позволяет определять малые и сверхмалые количества нуклеиновых кислот, следовательно, ПЦР поднимает лабораторную диагностику на принципиально новый уровень – уровень прямого обнаружения инфекционного агента как вирусной, так и бактериальной природы. Методом ПЦР можно определить любое изменение в генетическом материале, в том числе и единичную мутацию. 1980 – В России выделена термостабильная ДНК-полимераза (Городецкий) 1984 – Mullis (США) предложил принцип амплификации ДНК 1985 – Saiki Saiki с соавторами (США) впервые амплифицировали фрагмент ДНК (β-глобиновый ген) с использованием термочувствительной ДНК-полимеразы (фрагмент Кленова) 1987 – Mullis и Falloona амплифицировали ДНК человека 1988 – ПЦР стали проводить с использованием термостабильной ДНК-полимеразы Внедрение метода ПЦР в лабораторную практику стало одним из наиболее важных событий в медицине и молекулярной биологии в последнее десятилетие. |