Реферат. Реферат Лабораторная диагностика мочи
 Скачать 158 Kb.
|
|
АНО ДПО «Центральный многопрофильный институт» Реферат «Лабораторная диагностика мочи» Содержание Введение 3 1. Физические свойства 4 1.1 Количество 4 1.2 Цвет 5 1.3 Прозрачность 6 1.4 Запах 7 1.5 Относительная плотность 7 2. Химическое исследование 9 2.1 Реакция мочи 9 2.2 Белок 10 2.3 Глюкоза 12 2.4 Кетоновые тела 14 2.5 Желчные пигменты 14 3. Микроскопическое исследование осадка 17 3.1 Подготовка проб 17 3.2 Техника изучения нативных препаратов 17 3.3 Организованный (органический) осадок 18 3.4 Неорганизованный (неорганический) осадок 21 Заключение 22 Список литературы 23 ВведениеМоча – жидкость, образующаяся в почках. С мочой удаляются из организма конечные продукты обмена веществ, избыток воды, различные соли, а также некоторые гормоны, ферменты и витамины. Анализ мочи дает представление не только о функции почек, но и других органов, таких как печень, сердце, желудочно-кишечный тракт и другие. Результаты исследования мочи во многом зависят от соблюдения условий ее сбора (время сбора, условия хранения, чистота посуды, соблюдение гигиенических правил, объем выпитой накануне воды, характера пищи и т.д.). Для анализа используется утренняя средняя порция мочи со сроком хранения не более 1,5 часа. Исследование мочи состоит в определении физических свойств, химического состава, а также в изучении микроскопической картины осадка. 1. Физические свойства1.1 КоличествоУ здорового взрослого человека, получающего обычное смешанное питание, чуточное количество мочи (суточный диурез) равен 800-1500 мл. В различных физиологических и патологических условиях суточный диурез может или увеличиваться, или уменьшаться. Увеличение суточного количества мочи называется полиурией. В физиологических условиях полиурия может быть связана с усиленным питьевым режимом, неврогенными факторами, также наблюдается в третьем триместре беременности, после окончания менструации, при недостаточности белковой пищи. В патологии она отмечается при эпилепсии, истерии, болезнях сердца в период рассасывании отеков, транссудатов, экссудатов, при хронической почечной недостаточности, при выздоровлении от острой почечной недостаточности. Особенно выраженная полиурия (4-6 л и более) наблюдается при несахарном диабете, когда выпадает действие антидиуретического гормоны гипофиза, стимулирующего канальцевую реабсорбцию, и сахарном диабете, при котором высокое осмотическое давление глюкозы в провизорной моче препятствует реабсорбции воды в канальцах. Уменьшение суточного количества мочи называется олигурией (менее 500-300 мл). Физиологическая олигурия может вызываться ограниченным питьевым режимом, потерей жидкости с потом в жаркую погоду или при работе в горячих цехах, при физической нагрузке. Олигурия наблюдается при таких заболеваниях почек, как гломерулонефрит, хроническая почечная недостаточность, пиелонефрит, нефротический синдром и др. Причиной уменьшения выделения мочи могут быть также системная красная волчанка, ДВС-синдром, инфекционные заболевания (холера, дизентерия, брюшной тиф, малярия), тяжелые травмы, действие лекарственных препаратов, отравление свинцом, сулемой, мышьяком, скипидаром. Полное прекращение выделения мочи называется анурией. Это очень грозный симптом, причиной которого могут быть тяжелые поражения почек (острый нефрит, переливание несовместимой крови, острая почечная недостаточность), травмы живота, острый перитонит, почечная колика, катетеризация мочеточников, шок. При ряде заболеваний происходит только задержка, а не полное прекращение мочеотделения. Формы анурии:
Ишурия – задержка мочи в мочевом пузыре в результате нарушения самостоятельного мочеиспускания. Причиной ишурии могут быть поражения предстательной железы у мужчин (воспаление, аденома,рак), стриктура (сужение) уретры, нарушение сократительной функции мочевого пузыря. Различают ишурию полную (самостоятельное мочеиспускание невозможно), неполную (самостоятельное мочеиспускание сохранено, но с остаточной мочой в пузыре), парадоксальную (сложное нарушение мочеиспускания при неврологической патологии). Суточный диурез делится на дневной и ночной. Отношение дневного диуреза к ночному у здорового человека равно 3:1 или 4:1. Изменение этого отношения в пользу ночного диуреза называется никтурией. Никтурия является одним из симптомов различных почечных заболеваний, но может наблюдаться при гипертрофии предстательной железы и несахарном диабете. 1.2 ЦветНормальная моча имеет соломенно-желтый цвет разной интенсивности. Цвет мочи у здоровых людей определяется присутствием веществ, образующихся из пигментов крови (уробилин, урохромы, гематопорфирин и др.). Цвет мочи меняется в зависимости от ее относительной плотности, суточного объема и присутствия различных красящих компонентов, поступающих в организм человека с пищей, лекарственными препаратами, витаминами. Изменения цвета мочи при приеме лекарственных препаратов.
В норме, чем интенсивней желтый цвет мочи, тем выше ее относительная плотность и наоборот. Концентрированная моча имеет более яркий цвет. Однако нормальный цвет мочи еще не свидетельствует, что это моча здорового человека. При различный заболеваниях изменения цвета мочи может быть важным диагностическим признаком. Изменения цвета мочи при различных патологических состояниях.
Изменения только цвета осадка мочи могут быть связаны с присутствием большого количества солей, гноя, слизи и эритроцитов. Так, при большом содержании уратов осадок имеет коричнево-красный цвет, мочевой кислоты – желтый, фосфатов – беловатый, гноя – сливкообразный с зеленым оттенком, крови – красноватый, слизи – студнеобразный. 1.3 ПрозрачностьНормальная свежевыпущенная моча прозрачна. Небольшое облако мути может появляться и в нормальной моче за счет эпителиальных клеток и слизи. Выраженное помутнение мочи может быть вызвано присутствием в ней эритроцитов, лейкоцитов, жира, эпителия, бактерий, значительного количества различных солей ( уратов, фосфатов, оксалатов). Причины помутнения мочи выясняются при микроскопии осадка и с помощью химического анализа. 1.4 ЗапахМоча в норме имеет нерезкий специфический запах. При бактериальном разложении на воздухе ( при стоянии) или в мочевых путях моча может приобрести аммиачный запах (тяжелые циститы, распадающаяся раковая опухоль). При диабетической коме появляется фруктовый запах мочи, зависящий от присутствия кетоновых тел. Неприятный запах мочи отмечается после употребления в пищу большого количества чеснока или хрена. 1.5 Относительная плотностьОтносительная плотность (удельный вес) мочи определяется концентрацией растворенных в ней веществ (мочевины, мочевой кислоты, креатинина, различных солей). Относительная плотность существенно зависит от общего количества выделяемой жидкости – чем больше объем суточной мочи, тем ниже ее относительная плотность и наоборот. Относительная плотность нормальной мочи колеблется от 1010 до 1030 (плотность воды равна 1000). Относительная плотность мочи здорового человека широко варьируется в течение суток, что зависит от характера пищи, количества выпитой жидкости, потоотделения и т.д. Принято считать, что, если плотность утренней мочи равна или превышает 1018, то концентрационная функция почек не нарушена. Если относительная плотность утренней мочи низкая или очень высокая, то это требует выяснения причин, вызвавших эти изменения. Присутствие белка и особенно глюкозы повышает относительную плотность мочи. Высокая относительная плотность мочи может быть вызвана:
Низкая относительная плотность может быть обусловлена:
Относительная плотность мочи характеризует способность почек к концентрированию. Более точную информацию о концентрационной способности почек дает определение осмотической концентрации мочи методом криоскопии (определение точки замерзания). При развитии хронической почечной недостаточности способность к осмотическому концентрированию постепенно утрачивается (это состояние обозначается термином гипостенурия; концентрационный индекс ниже 1,8, относительная плотность ниже 1018). Полная же потеря осмотического концентрирования ведет к равенству осмотического давления мочи и плазмы крови (изостенурия), при этом концентрационный индекс равен 1,0, а относительная плотность составляет 1010. Исследования концентрационной и водовыделительной функции почек проводят в условиях стандартизированного водного режима ( проба Зимницкого) или же в условиях сухоедения (проба Фольгарта). Измеряют относительную плотность мочи с помощью урометра (один из видов ареометра). Мочу наливают в цилиндр, опускают урометр так, чтобы он свободно в ней плавал. Показания шкалы снимают на уровне нижнего мениска (если образовалась пена, ее снимают с помощью фильтровальной бумаги). В настоящее время пользуются универсальными урометрами с делениями шкалы от 1,000 до 1,050; для удобства обозначения запятую после единицы опускают. 2. Химическое исследование2.1 Реакция мочиМоча здорового человека при смешанном питании нейтральна или чаще слабокислая (рН 5,0-7,0). В физиологических условиях изменения реакции мочи, в первую очередь, связаны с характером питания. Преимущественно мясная пища вызывает сдвиг в кислую сторону, растительная – в щелочную. Тяжелая физическая работа увеличивает кислотность мочи, прием щелочных растворов ( минеральные воды, сода) – ее щелочность. В идеальных условиях реакция мочи равна рН крови. Повышение кислотности мочи (рН меньше 7,0) отмечается при диабете, хронической сердечной недостаточности, подагре, острой почечной недостаточности, лихорадочных состояниях, туберкулезе почек, увеличения калия в крови, остром нефрите; щелочная реакция при циститах, после рвоты, снижения калия в крови, высокой кислотности желудочного сока во время пищеварения ( при пониженной кислотности реакция мочи изменяется мало). Определение реакции мочи имеет существенное значение при мочекаменной болезни. Так, кислая реакция способствует растворению фосфатов, щелочная – уратов. Подбирая соответствующую диету и лекарственные препараты можно целенаправленно изменять реакцию мочи. Однако необходимо иметь ввиду, что щелочная среда создает благоприятные условия для размножения микроорганизмов, вызывающих воспалительные процессы в почках и мочевыводящих путях. Необходимо напомнить, что хранение мочи при комнатной температуре ведет к ее защелачиванию и разрушению клеточных элементов, что отражается на результатах анализа. Причины, влияющие на изменения рН мочи.
Для определения рН могут быть использованы лакмусовая бумага, другие индикаторы широкого диапазона ( рН 1,0 – 12,0), узкодиапазонные рН-индикаторные бумаги, индикатор бромтимоловый синий или метод ионометрии. Реакцию мочи следует учитывать при проведении химического, микроскопического и бактериологического исследования мочи и при назначении больному диуретиков и антибактериальных средств. 2.2 БелокВ норме белок в моче практически отсутствует ( менее 0,002 г/л). Однако при некоторых состояниях небольшое количество белка может появляться в моче у здоровых лиц после приема большого приема белковой пищи, в результате охлаждения, при эмоциональных стрессах, длительной физической нагрузки ( так называемая маршевая протеинурия). Появление значительного количества белка в моче (протеинурия) является патологией. Причиной протеинурии могут быть заболевания почек (острый и хронический гломерулонефрит, пиелонефрит, нефропатия беременных и др.) или же мочевыводящих путей ( воспаление мочевого пузыря, предстательной железы, мочеточников). Почечная протеинурия может быть органической ( клубочковая, канальцевая и «избыточная») и функциональной (лихорадочная протеинурия, ортостатическая у подростков, при перекармливании грудных детей, у новорожденных). Функциональная протеинурия не связана с почечной патологией. Суточное количество белка колеблется у больных от 0,1 до 3,0 г и более. Состав белков мочи определяется с помощью электрофореза. Появление в моче белка Бенс-Джонса характерно для миеломной болезни и макроглобулинемии Вальденстрема, β2-микроглобудина – при повреждении почечных канальцев. Существуют качественные и количественные методы определения белка в моче, они основаны на его коагуляции в объеме мочи или на границе сред ( моча и кислота); измерение степени коагуляции делает пробу количественной. Качественные методы: - проба с сульфосалициловой кислотой (унифицирован); - нагревание в уксусной среде; - обнаружение белка с помощью индикаторной бумаги (полосок) и др. Количественные методы: - унифицированный метод Брандберга-Робертса-Стольникова; - с сульфосалициловой кислотой; - биуретовый метод и др. Унифицированная проба с сульфосалициловой кислотой. Реактив: 20% сульфосалициловой кислоты (2-гидрокси-5-сульфобензойная кислота – C7H5O6S). Ход определения: В две пробирки вносят по 3 мл профильтрованной мочи, в одну из них (опытную) прибавляют 6-8 капель сульфосалициловой кислоты. На темном фоне сравнивают обе пробирки. Оценка результатов: Помутнение в опытной пробирке свидетельствует о наличии в моче белка – проба положительная. Примечание. Мочу со щелочной реакцией перед исследованием подкисляют добавлением нескольких капель 10% раствора уксусной кислоты. Определение количества белка в моче по реакции с сульфосалициловой кислотой. Принцип методы: Концентрация белка в моче пропорциональна помутнению, появляющемуся при его коагуляции сульфосалициловой кислотой. Реактивы: 1) 3% раствор сульфосалициловой кислоты (C7H5O6S); 2) 0,9% раствор хлорида натрия; 3) 1% стандартный раствор альбумина (из человеческой или бычьей сыворотки) растворяют в небольшом количестве 0,9% раствора NaCl в колбе емкостью 100 мл, а затем доводят до метки тем же растворителем. Реактив стабилизируют прибавлением 1 мл 5% раствора азида натрия (NaN3). При хранении в холодильнике реактив стабилен в течение 2 месяцев. Ход определения: В пробирку вносят 1,25 мл профильтрованной мочи, добавляют 3,75 мл 3% раствора сульфосалициловой кислоты, перемешивают. Через 5 минут пробу фотометрируют на ФЭКе при длине волны 590-650 нм (оранжевый или красный светофильтр) против контроля в кювете с длиной оптического пути 5 мм. Контролем служит проба, в которой к 1,25 мл мочи добавлено 3,75 мл 0,9% раствора хлорида натрия. Концентрацию белка рассчитывают по калибровочному графику, для построения которого готовят разведения стандартного раствора альбумина. Из каждого полученного разведенного раствора берут по 1,25 мл и обрабатывают, как опытные пробы. Приготовление разведений для построения калибровочного графика.
Примечание: Прямолинейная зависимость величины экстинкции и концентрации белка сохраняется до 1г/л. При более высоких концентрациях белка пробу следует разводить и учитывать разведение при расчете. При наличии в моче веществ, содержащих йод, могут быть получены ложноположительные результаты. Поэтому тест нельзя использовать у больных, принимающих препараты йода или прошедших исследование с применением йодсодержащих ренгеноконтрастных соединений. Ложноположительные реакции при проведение исследований могут быть вызваны приемом сульфаниламидовых лекарственных средств, больших доз пенициллина и при высоких концентрациях в моче мочевой кислоты. 2.3 ГлюкозаВыделение с мочой глюкозы называется глюкозурией. В нормальной моче содержатся незначительные следы глюкозы, которые практически не обнаруживаются качественными реакциями. При патологических состояниях глюкозурия появляется при повышение уровня глюкозы в крови выше 4,6-6,6 ммоль/л или 0,8-1,2 г/л (гипергликемия). Причина глюкозурии – ограниченная способность канальцев реабсорбировать глюкозу. Гликозурия может быть временная (употребление избыточного количества сахара, введение адреналина, волнение, испуг и др.) и постоянная (сахарный диабет, гипо- и гиперсекреция некоторых гормонов – тироксина, АКТГ, глюкокортикостероидов, адреналина). Постоянная глюкозурия может быть и без гипергликемии, например при так называемом почечном диабете, когда понижается способность канальцевого эпителия реабсорбировать глюкозу. Напротив, глюкозурии может не быть, несмотря на гипергликемию, у больных со сморщенными почками при нарушении фильтрации глюкозы через склерозированные клубочки. За сутки здоровый человек с мочой выделяет меньше 2,78 ммоль глюкозы. Качественные методы определения глюкозы: - с помощью индикаторных полосок; - проба Гайнеса; - проба Фелинга; - проба Бенедикта и др. Количественные методы: - глюкозоосидантный (энзиматический) метод; - орто-толуидный метод; - унифицированный поляриметрический метод определения содержания глюкозы и др. Унифицированный метод определения с помощью индикаторных полосок. Принцип метода. Основан на специфическом окислении глюкозы с помощью фермента глюкозооксидазы. Образовавшаяся при окислении перекись водорода (Н2О2) разлагается пероксидазой и окисляет краситель. Изменение окраски красителя при окислении свидетельствует о присутствии глюкозы в моче. Пропитанную смесью ферментов и красителя реактивную бумагу в виде полосок используют для определения наличия глюкозы в моче. Основанную на данном принципе реактивную бумагу выпускают как отечественные, так и зарубежные фирмы. Унифицированный поляриметрический метод определения содержания глюкозы. Принцип метода. Метод основан на использовании свойства D-глюкозы вращать плоскость поляризованного луча вправо. Угол вращения луча пропорционален концентрации глюкозы в растворе. Реактив: 30% раствор ацетата свинца [Pb(CH3C00)2]. Ход определения: Исследуемая моча должна иметь кислую реакцию, быть прозрачной и не содержать белка. Белок удаляют кипячением и последующим фильтрованием. В связи с тем что некоторые пигменты, содержащиеся в моче, могут быть оптически активны, ее предварительно необходимо обесцветить. Для этого к 10 мл мочи приливают 1 мл 30% раствора ацетата свинца, подкисленного несколькими каплями уксусной кислоты (в щелочной среде свинец осаждает глюкозу), перемешивают и фильтруют. Затем трубку поляриметра наполняют прозрачным фильтратом, избегая попадания пузырьков воздуха, накрывают шлифовальным стеклом, помещают в прибор и через 2-3 минуты проводят определение. Определение проводят строго по инструкции, прилагаемой к прибору. Точность определения проверяют, исследуя стандартный раствор глюкозы. Примечание. На точность определения могут влиять β-оксимасляная кислота, антибиотики тетрациклинового ряда, стрептомицин и другие оптически активные вещества. Факторы, влияющие на определение сахаров в моче. А. Беременность и кормление грудью сопровождается ложноположительными определениями глюкозы, более 70% результатов исследования мочи у женщин в этот период показывают временную глюкозурию, не имеющую клинического значения. Б. Многие лекарственные препараты (аскорбиновая кислота, стрептомицин, гомогентизиновая кислота и др.) вызывают ложноположительную реакцию на сахар в моче. В. Стрессорные состояния, исследования, проведенные после приема обильной пищи, увеличивают содержание глюкозы. Г. Использование некачественно приготовленных реактивов или неточное соблюдение методик приводит к ложноотрицательной реакции. 2.4 Кетоновые телаКетоновые тела – это ацетон, ацетоуксусная и β-оксимасляная кислоты. В норме с мочой выделяются минимальные количества кетоновых тел, которые не обнаруживаются обычными качественными пробами. Кетонурия – выделение с мочой большого количества кетоновых тел – встречается при таких патологических состояниях, как сахарный диабет, голодание (особенно у детей в раннем возрасте – токсикозы, продолжительные желудочно-кишечные расстройства, дизентерия и т.д.). Массивная кетонурия – признак декомпенсированного тяжелого сахарного диабета, нередко гипергликемической комы. Кетоновые тела появляются в моче до того, как происходит значительное увеличение их концентрации в крови. Для определения кетоновых тел используют: - унифицированную пробу Ланге; - пробу Ротеры; - готовые наборы для экспресс-анализа ацетона в моче, выпускаемые различными отечественными и зарубежными фирмами. Унифицированная проба Ланге Принцип метода. Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами с образованием комплекса красно-фиолетового цвета. Реактивы. 1) 5% раствор нитропруссида натрия (Na2[Fe(CN)5NO]•2H2O (готовят перед использованием); 2) концентрированная уксусная кислота; 3) 25% раствор нашатырного спирта (NH4OH). Ход определения. В пробирку наливают 3-5 мл мочи, добавляют 5-10 капель нитропруссида натрия и 0,5 мл уксусной кислоты, смешивают и осторожно пипеткой по стенке пробирки наслаивают 2-3 мл нашатырного спирта. Оценка результата. В течение 3 минут на границе сред образуется красно-фиолетовое кольцо – проба положительна. 2.5 Желчные пигментыБилирубин. Нормальная моча содержит минимальное количество билирубина, которое не может быть обнаружено обычными качественными пробами. Увеличенное выделение билирубина при патологических состояниях называется билирубинемией. Выявляется при паренхиматозных поражениях печени (вирусные гепатиты), механической (подпеченочной) желтухе, циррозах, холестазе. При гемолитической желтухе моча обычно билирубин не содержит. С мочой выделяется только прямой билирубин, так как непрямой не может пройти через здоровый почечный фильтр. Билирубинемия появляется при увеличении содержания прямого билирубина в крови выше 3,4 мкмоль/л («почечный порог билирубина»). Большинство качественных проб на билирубин основано на его окислении йодом, азотной кислотой и т.д. в биливердин зеленого цвета. Унифицированная проба Розина. Реактив. 1% спиртовой раствор йода. Ход определения. В пробирку наливают 4-5 мл мочи и по стенкам осторожно наслаивают раствор йода. О наличии билирубина свидетельствует появление на границе между жидкостями зеленого кольца. Уробилиноген. В моче также содержатся вещества, являющиеся производными билирубина и называемые уробилиноидами. Уробилиноиды образуются под действием ферментов бактерий и клеток слизистой оболочки кишечника из билирубина, выделившегося с желчью. В моче здорового человека содержатся следы уробилиногена, который при стоянии мочи окисляется в уробилин. За сутки выделяется не более 6 мг,у детей не более 2мг. При ряде заболеваний реакция на уробилиноиды в моче может быть слабо положительной, положительной, резко положительной. Уровень уробилиногена резко возрастает при гемолитической желтухе, а также при токсических и воспалительных поражениях печени, кишечных заболеваниях. Исследования рекомендуется выполнять на свежих образцах или сохранять мочу в темной емкости в холодильнике. Для определения уробилиногеновых тел в моче применяют пробу Нейбауэра, для определения уробилиновых тел – пробы Флоранса, Богомолова, Нейбауэра. Обычно в лаборатории имеют дело с постоявшей мочой, поэтому практическое значение имеют вторые пробы. Унифицированная проба Богомолова. Принцип метода. Уробилин при реакции с сульфатом меди образует соединение красно-розового цвета. Реактивы. 1) насыщенный раствор сульфата меди: 23 г CuSO4•5H2O растворяют в 100 мл дистиллированной воды; 2) хлороформ (CHCl3); 3) концентрированная соляная кислота. Постановка пробы. В пробирку наливают 10-15 мл мочи, добавляют 2-3 мл раствора сульфата меди. При помутнении пробы прибавляют несколько капель соляной кислоты до просветления раствора. Через 5 минут приливают 2-3 мл хлороформа и, закрыв пробирку пробкой, несколько раз встряхивают. Оценка результатов. При повышенной концентрации уробилина в моче слой хлороформа окрашивается в розовый цвет. Другие показатели. Желчные кислоты определяются в моче при вирусных гепатитах, циррозе печени, заболеваниях, вызванных закупоркой желчных путей (опухоли, желчнокаменная болезнь). Амилаза в моче возрастает, с первую очередь, при заболеваниях поджелудочной железы (закупорка выводного протока, воспаление и некроз тканей железы). Порфирины выявляются в моче при наследственных заболеваниях (первичные порфирии) и нарушениях функции печени или кроветворных органов (вторичные порфирии). Суточная моча в норме содержит около 67 мкг копропорфирина, 4,4 мкМ/л порфобилиногена, 14 нМ уропорфирина и около 6 мг уробилиногена. 3. Микроскопическое исследование осадка3.1 Подготовка пробДля исследования используют утреннюю порцию мочи не ранее через 1-2 часа после сбора. Отстоявшуюся мочу тщательно перемешивают, отбирают в центрифужную пробирку 10 мл и центрифугируют 5 минут при 2000 об./мин. Надосадочную жидкость быстрым наклоном пробирки сливают, стараясь не взболтать осадок. Пипеткой с тонко оттянутым концом оставшийся осадок переносят на середину предметного стекла и накрывают покровным. В правильно приготовленном препарате не должно быть пузырьков воздуха, и избыток жидкости, растекаясь, не должен выходить за пределы покровного стекла. Большая капля колеблется, препарат становится многослойным, что затрудняет микроскопию. Если осадок состоит из нескольких слоев, то вначале готовят препарат, как описано выше, а затем содержание пробирки вновь центрифугируют и готовят препараты из каждого слоя в отдельности. При отсутствии видимого на глаз осадка препарат готовят обычно. При наличии значительного осадка из уратов, фосфатов или эритроцитов сначала готовят нативный препарат, а затем растворяют осадок, оставшийся в пробирке, и снова готовят препарат для микроскопического исследования. Приготовление двух препаратов необходимо потому, что значительная примесь из перечисленных выше компонентов препятствует обнаружению других элементов осадка. 3.2 Техника изучения нативных препаратовПрепарат через 3-5 минут после его приготовления помещают на предметный столик микроскопа. Сначала его изучают при малом (окуляр 8х, объектив 10х),а затем при большом (окуляр 10х, объектив 40х) увеличении при опущенном конденсоре. Для максимального просмотра препарата и во избежание повторного изучения одного и того же участка рекомендуется передвигать препарат по кругу или «змейкой». При необходимости уточнения структуры найденных под малым увеличением элементов препарат помещают по отношению к объективу так, чтобы нужные элементы попали в центр поля зрения. Затем, не сдвигая препарат, устанавливают большее увеличение и микроскопируют. Если структуры встречаются в каждом поле зрения, то их количественную оценку выражают числом в поле зрения, при небольшом количестве структур, когда они встречаются далеко не в каждом поле зрения – число в препарате. Все осадки, встречающиеся в здоровой и патологической моче, разделяют на две большие группы: организованные и неорганизованные. Организованные осадки отличаются от неорганизованных своей нерастворимостью при нагревании, в уксусной и соляных кислотах, обладая сравнительно низкой относительной плотностью, они значительно медленнее оседают на дно сосуда, и моча длительно остается мутной. Легче всего оседают эритроциты, в то же время бактерии не оседают. 3.3 Организованный (органический) осадокЭпителиальные клетки. Полигональные ( большие, многоугольные с маленьким ядром), круглые (небольшого размера, круглой формы с ядром, расположенным в центре, зернистые). Присутствие эпителиальных клеток в моче в большом количестве свидетельствует о слущивании слизистой оболочки мочевыводящих путей (воспалительные процессы: травмы, например при прохождении камня), но большого диагностического значения не имеют. Эритроциты. Небольшие круглые клетки, слегка желтоватые или бесцветные. Самый характерный признак эритроцитов – их двойной контур и отсутствие зернистости. В нормальной моче эритроциты отсутствуют или определяются в виде единичных клеток в поле зрения микроскопа. В физиологических условиях появление единичных эритроцитов в осадке может быть связано с тяжелой физической работой, занятием спортом. У женщин причиной попадания эритроцитов в нормальную мочу может быть менструация или гинекологическое заболевание. Значительная примесь эритроцитов в моче обнаруживается визуально. В этих случаях моча имеет бурый цвет, если реакция ее кислая, или красный, когда реакция ее щелочная или нейтральная. Сравнительно небольшое количество эритроцитов в моче выявляется при микроскопическом исследование осадка. Наиболее частой причиной появления эритроцитов в моче является болезни почек и мочевыводящих путей ( острый и хронический гломеруло- и пиелонефрит, почечнокаменная болезнь, опухоли, инфекция, аденома предстательной железы). Выявляются эритроциты при таких заболеваниях, как малярия, оспа, геморрагическая лихорадка, опухоли кишечника, инфекционный мононуклеоз, при нарушениях свертывания крови, сердечной недостаточности. Причиной появления эритроцитов в моче могут бытьи некоторые лекарственные препараты (сульфаниламиды, передозировка антикоагулянтов, уротропин). Появление эритроцитов в моче одновременно с эритроцитарными цилиндрами свидетельствует о внутрипочечном происхождении гематурии, отсутствие же цилиндров и белка в моче указывает на внепочечный источник кровотечения ( мочевыводящие пути). Появление эритроцитов в моче – симптом, требующий обследования больного и повторных анализов мочи. Лейкоциты. Зернистые клетки, в 1,5-2 раза крупнее эритроцитов, ядра их часто не видны. От эритроцитов отличаются отсутствием двойного контура и выраженной зернистостью. При некоторых патологических состояниях внешний вид лейкоцитов может изменяться. Так, при нефротическом синдроме они уменьшаются в размере, оболочка их уплотняется, клетки слегка опалесцируют; при пиелонефрите лейкоциыт увеличены в размере (иногда в 2-3 раза проиив нормы), бледные, имеют истонченную разрыхленную оболочку, порой с нитевидными обрывками и пузырями вокруг нее; при циститах лейкоциты деформированы, со смазанными контурами и неяркой зернистостью. Появление значительного количества лейкоцитов в моче наблюдается при очень многих заболеваниях почек и мочевыводящих путей (острый и хронический пиелонефрит, цистит, уретрит, острый и хронический гломерулонефрит), при лихорадочных состояниях. Большое количество лейкоцитов (более 50-60 в поле зрения) характерно для острых воспалительных процессов. При этом выявляются и бактерии в моче. Отсутствие бактерий (стерильный посев) заставляет подозревать туберкулез или волчаночный нефрит. Присутствие в моче кроме лейкоцитов цилиндров и белка указывает на почечную патологию. Лейкоциты в моче могут появляться при наличии ампициллином, ацетилсалициловой кислотой и после приема героина (наркомания). Цилиндры. Белкового или клеточного состава слепки почечных канальцев. Появление цилиндров в осадке мочи – важный признак почечной патологии. Только гиалиновые цилиндры могут встречаться в нормальной моче (1-2 в препарате), их появление необязательно связано с почечной патологией. Гиалиновые цилиндры – чрезвычайно нежные, бледные, прозрачные образования, при ярком освещении едва заметны. Длина гиалиновых цилиндров от 0,1 – 0,3 до 1,0 – 2,0 мм, диаметр 10-50 мкм. На их поверхности может быть легкая зернистость за счет отложения аморфных солей или клеточного детрита, что может затруднить их дифференцировку от зернистых цилиндров. Образуются из денатурировавшегося белка в почечных канальцах под влиянием кислой реакции мочи. Гиалиновые цилиндры, появляющиеся при наличии белка в моче, могут иметь и внепочечное происхождение (физическое напряжение, лхлождение, повышение артериального давления, работа в горячих цехах, лихорадочные заболевания, сердечная недостаточность). Гиалиновые цилиндры встречаются при многих органических заболеваниях почек (острый и хронический нефрит, пиелонефрит, почечно-каменная болезнь, туберкулез, опухоли), при отравлениях тяжелыми металлами, лечении диуретиками, но иногда при нефритах цилиндры могут отсутствовать. Зернистые цилиндры имеют приблизительно такие же размеры, как и гиалиновые. Они имеют более четкие контуры, не прозрачны, состоят из сплошной зернистой массы желтоватого цвета, образующейся из перерожденных и распавшихся клеток почечного эпителия. Чаще всего встречаются при выраженных поражениях паренхимы почек (острый и хронический гломерулонефрит), но иногда они появляются при застойной почке, вирусных заболеваниях, после интенсивной физической нагрузки, отравления свинцом, при лихорадочных состояниях. Восковидные цилиндры – гомогенные образования, значительно крупнее и шире гиалиновых, более плотные, грубые, бледно-желтого цвета. Широкие восковидные цилиндры образуются из гиалиновых и зернистых цилиндров при их задержке в канальцах с особенно широким просветом, расширенным вследствие закупорки. Чаще всего наблюдаются при тяжелых хронических заболеваниях почек. Эритроцитарные цилиндры состоят из эритроцитов, обычно желтоватого цвета. Бывают двух видов: одни сплошные, состоят только из эритроцитов, в других – отдельные эритроциты только наслоены на гиалиновые или зернистые цилиндры, часто рядом с другими форменными элементами. Заключенные в цилиндрах эритроциты либо представляются хорошо сохранившимися, либо бывают выщелочены и обесцвечены. Присутствуют в моче при остром прогрессирующем гломерулонефрите и некоторых других почечных заболеваниях (инфаркт почки, тромбоз почечной вены), а также при полиартрите, тяжелой гипертонической болезни. Лейкоцитарные цилиндры особенно характерны для пиелонефрита, в меньшей степени для волчаночного нефрита и некоторых других заболеваниях. Эпителиальные цилиндры состоят из клеток эпителия в различных стадиях дегенерации. Эпителиальный цилиндр иногда сохраняет просвет, являясь частицей эпителиальной трубки. Появляются при некрозе почечных канальцев, отравлении тяжелыми металлами. Появлении этих цилиндров – показатель отторжения аллотрансплантата (через несколько дней после операции). Бактерии. Бактериурия – это выделение микробов с мочой. При исследовании мочи ориентировочным методом выявление бактерий не имеет существенного диагностического значения. Более информативным является подсчет количества микробных тел в единице объема (степень бактериурии) и посев мочи с определением чувствительности микрофлоры к антибиотикам и уросептикам. Грибы. Наибольший интерес представляют грибы – возбудители кандидамикоза. Они могут появиться после интенсивного лечения антибиотиками. Обнаружение вместе с грибами бактерий – симптом хронического приелонефрита. 3.4 Неорганизованный (неорганический) осадокМоча представляет собой раствор различных солей, выпадение которых в осадок определяется реакцией мочи (рН) и рядом других факторов. Присутствие кристаллов солей в осадке мочи в первую очередь указывает на изменение реакции мочи в кислую или щелочную сторону. Мочевая кислота. Выпадение в осадок мочевой кислоты наблюдается в высококонцентрированной моче или при ее кислой реакции (после физической нагрузки, преимущественно мясной пищи, при лихорадочных состояниях, подагре, лейкозах, вирусном гепатите, истинной полицитемии). Присутствие в осадке солей мочевой кислоты (уратов)отмечается при острых и хронических нефритах, хронической почечной недостаточности, повышенной потери жидкости (рвота, понос, усиленное потоотделение). Однако спородическое появление мочевой кислоты или ее солей еще не свидетельствует о мочекислом диатезе или подагре. Фосфаты. Присутствие в осадке аморфных фосфатов, трипель фосфатов, фосфатов магния и кальция наблюдается при щелочной реакции мочи у совершенно здоровых людей (после обильной еды, промывания желудка), у больных циститом. Истинная гиперфосфатурия наблюдается при гиперпаратиреозе и синдроме Фанкони. Оксалаты. В основном соли щавелевокислого кальция и аммония. Встречаются при любой реакции мочи. Способствуют выпадению оксалатов употребление в пищу в большом количестве овощей и фруктов. Оксалаты встречаются в осадке при пиелонефрите, сахарном диабете, отравлении этиленгликолем (антифриз, тормозная жидкость). Стойкая оксалурия – патологический признак. При микроскопическом исследовании осадка кристаллы различных солей различаются по цвету и форме. Выпадение в осадок солей, их аномальная кристаллизация, наряду с многими другими, факторами, способствует образованию мочевых конкрементов и развитию мочекаменной болезни. Чаще всего встречаются камни из щавелевокислого кальция, реже из фосфорнокислого кальция, мочевой кислоты и ее солей. Однако в большинстве случаев образуются камни смешанного состава с преобладанием тех или иных солей. Определение химического состава камней производится в клинических лабораториях, использую способность солей, образующих камни, растворяться при нагревании, под действием уксусной, соляной и т.д. Определение состава камней имеет очень важное значение при назначении специальной диеты и лечебных мероприятий. ЗаключениеОчень часто изменения внешних признаков мочи первым замечает сам пациент, что служит поводом его обращения к врачу. Анализ мочи – важный диагностический показатель, поэтому больным, страдающим заболеваниями почек и мочевыводящих путей, постоянно проводятся контрольные исследования мочи. Даже здоровым людям рекомендуется для контроля за функцией почек исследовать мочу хотя бы один раз в год, а лицам, перенесшим ОРВИ, грипп, ангину анализ мочи производят 1-2 раза после выздоровления через 2 недели. Оценка количества, относительной плотности и цвета мочи, а также биохимическое исследование крови с определением уровня азотистых шлаков (остаточного азота и его фракций) и электролитов (калия и натрия) особенно важны для своевременной диагностики синдромов острой и хронической почечной недостаточности. Ориентировочный, количественные и специальные методы микроскопического исследования осадка мочи служат основными в диагностике важных симптомов почечных заболеваний – лейкоцитурии и гематурии. Необходимо помнить, что единичные анализы мочи еще не позволят делать каких-либо окончательных выводов. Повторные исследования, особенно в динамике заболевания, имеют значительно большее диагностическое значение. Список литературы1. Лабораторные методы исследования в клинике / Под ред. В.В,Меньшикова.- М.: Медицина, 1987. - 366стр. 2. А.и.Карпищенко. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: Справочник. – Санкт-Петербург: Интермедика, 2002. – 408 стр. с илл. 3. В.М.Лифшиц, В.И.Сидельникова. Медицинские лабораторные анализы. Справочник. – М.: Триада-Х, 2003. – 312 стр. 4. Л.В.Козловская, А.Ю.Николаев. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования. – М.: Медицина, 1984. – 288 стр. с илл. 5. В.С.Ронин, Г.М.Старобинец. Руководство к практическим занятиям по методам клинических лабораторных исследований. – М.: Медицина, 1989. – 320 стр. 6. С.И.Рябов, Ю.В.Наточин, Б.Б.Бондаренко. Диагностика болезней почек. – Л.: Медицина, 1979. – 255 стр. |