Видовое название возбудителя и его систематическое положение. С. botulinum
 Скачать 21.8 Kb.
|
|
Микробиология Ботулизма Видовое название возбудителя и его систематическое положение. С.botulinum. Clostridium относится к классу Clostridia. Морфологические свойства. С.botulinum – довольно крупные полиморфные палочки с закругленными концами, длиной 4—9 мкм, диаметром 0,5—1,5 мкм, иногда образуются укороченные формы. Располагаются беспорядочно, иногда парами или в виде коротких цепочек. В старых культурах могут образовывать длинные нити. Подвижны, имеют перитрихиальные жгутики. Капсулы не образуют, споры овальные, располагаются субтерминально, придавая палочке форму, напоминающую теннисную ракетку Тинкториальные свойства. Грамположительны. Культуральные свойства. Тип А и протеолитические штаммы типов В, С, D и F – обильно растут на питательном бульоне. На кровяном агаре с 0,5-1% раствором глюкозы образуют гладкие или шероховатые колонии диаметром 3— 8 мм, окруженные зоной гемолиза. В начале роста колонии очень мелкие, блестящие, в виде капелек росы. Затем они увеличиваются, становятся сероватыми с ровными или неровными краями. В агаре столбиком колонии дискообразные или в виде «пушинок». Молоко пептонизируют. Тип E и непротеолитические штаммы типов В и F – Обильный рост на среде Китт-Тароцци с газообразованием. Колонии на кровяном агаре 1—3 мм в диаметре, с неровными краями, матовой поверхностью, мозаичной структурой, с зоной гемолиза. Молоко свертывают, но не пептонизируют. Непротеолитические штаммы типов С и D – молоко не свертывают и не пептонизируют. Рост на среде Китт-Тароцци с умеренным газообразованием. На кровяном агаре колонии круглые, с неровными краями, слегка приподняты, гладкие, серовато-белого цвета, полупрозрачные, окружены зоной гемолиза. Тип G – На кровяном агаре колонии круглые, диаметром 0,5—1,5 мм, с ровными краями, приподнятые, полупрозрачные, серые, гладкие, с блестящей поверхностью. На среде Китт-Тароцци рост умеренный, без ферментации глюкозы; молоко пептонизируют медленно. Физиологические свойства. С.botulinum – анаэробы, температурный оптимум для роста: Тип А и протеолитические штаммы типов В, С, D и F 30-400, Тип E и непротеолитические штаммы типов В и F 25-370, Непротеолитические штаммы типов С и D 30-370, Тип G 30-370. Биохимические свойства. Возбудители, относящиеся к протеолитический группе, способны гидролизовать казеин и продуцировать H2S. Факторы патогенности. Главный фактор патогенности ботулизма – экзотоксины. Хотя они отличаются по антигенным свойствам, их биологическая активность одинакова. Все они – варианты одного нейротоксина. Антигенная специфичность и летальная активность определяются различными детерминантами экзотоксина. Нейротоксические компоненты любого серотипа ботулинических токсинов и любого типа токсического комплекса имеют сходную структуру и биологические свойства. Они синтезируются в виде единой полипептидной цепи, которая не обладает значительной токсической активностью. Эта полипептидная цепь превращается в активный нейротоксин только после ее разрезания бактериальной протеазой или протеазами кишечного тракта человека. В результате точечного гидролиза возникает структура, состоящая из двух связанных между собой дисульфидными связями цепей – тяжелой (Н-цепь), и легкой (L-цепь). Н-цепь ответственна за прикрепление нейротоксина к рецепторам мембраны клеток, а L-цепь осуществляет специфическое блокирующее действие нейротоксина на холинергическую передачу возбуждения в синапсах. Помимо выраженной нейротоксической активности, различные типы С.botulinum обладают лейкотоксической, гемолитической и лецитиназной активностью. Эпидемиология инфекции. Естественной средой обитания С. botulinum является почва, откуда они попадают в воду, на пищевые продукты, фураж, в кишечник человека, млекопитающих, птиц и рыб, где размножаются. Установлено носительство в кишечнике у лошадей, рогатого скота, свиней, кур, грызунов. Загрязняя своими испражнениями продукты, фураж, почву, они способствуют широкому обсеменению клостридиями окружающей среды. Заражение красной и частиковой рыбы возбудителем ботулизма может быть эндогенным – из их кишечника, и экзогенным – из внешней среды (при неправильных транспортировке и хранении). Патогенез инфекции. Ботулизм протекает как токсикоинфекция. Организм поражается не только токсином, содержащимся в пищевом продукте, но и токсином, который образуется в пищеварительном тракте и тканях в связи с проникновением туда возбудителя. Ботулинический токсин быстро всасывается в желудке и кишечнике, проникает в кровь и избирательно действует на ядра продолговатого мозга и ганглиозные клетки спинного мозга. Следует отметить, что, попадая в пищеварительный тракт человека или животного, клостридии ботулизма размножаются, проникают в кровь и оттуда во все органы, продуцируя при этом токсины. Инкубационный период у людей варьирует от двух часов до 10 дней, но чаще всего он составляет 18—24 ч. Чем больше инфицирующая доза, тем короче инкубационный период и тем тяжелее протекает заболевание. Клиническая картина ботулизма обычно складывается из сочетания различных мионеврологических синдромов, из которых раньше всего проявляется офтальмоплегический: у больного нарушается аккомодация, неравномерно расширяются зрачки, появляется косоглазие, двоение в глазах, опущение век, а иногда и слепота. Эти симптомы связаны с поражением глазодвигательных нервов. Затем присоединяется парез мускулатуры языка (афония), глотание затрудняется, мышцы шеи, туловища и кишечника ослабевают (парезы, запоры, метеоризм), наблюдается выделение густой тягучей слизи. Температура может быть нормальной, иногда повышается. Сознание сохраняется. Как правило, никаких острых явлений воспаления со стороны желудочно-кишечного тракта не отмечается. В заключительной стадии болезни основную роль играет расстройство дыхания, смерть наступает от паралича дыхания и сердца. Иммунитет. Перенесенное заболевание, очевидно, оставляет типоспецифический антитоксический иммунитет, перекрестный иммунитет не формируется. Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат: от больного – промывные воды желудка, испражнения, кровь, моча, рвотные массы. От трупа – содержимое желудка, тонких и толстых кишок, лимфатические узлы, а также головной и спинной мозг. Исследованию подвергают и продукт, послуживший причиной отравления. Для выделения культуры С.botulinum материал засевают на плотные среды и накопительную среду Китта-Тароцци. Из жидких культур после инкубирования делают посевы на плотные среды с целью получения изолированных колоний, а затем и чистых культур, которые идентифицируют по морфологическим, культуральным, биохимическим и токсигенным свойствам. Для обнаружения ботулинического токсина в исследуемом материале или в фильтрате полученной культуры можно использовать следующие три способа: Биологическая проба на мышах. Для этого берут не менее 5 мышей. Одну из них заражают только исследуемым материалом, а каждую из остальных четырех – смесью материала с 200 АЕ антитоксической сыворотки соответствующего типа — А, В, С и Е. Смесь при комнатной температуре выдерживают 40 мин для нейтрализации токсина антитоксином. При наличии в исследуемом материале ботулинического токсина погибают все мыши, кроме той, которой была введена смесь материала с антитоксической сывороткой, нейтрализовавшей действие гомологичного типа токсина. Использование РПГА с антительным диагностикумом, т. е. эритроцитами, сенсибилизированными антитоксинами соответствующих типов. Высокочувствительный и специфический метод обнаружения ботулинического токсина основан на его способности подавлять активность фагоцитов. В присутствии соответствующей антитоксической сыворотки лейкотоксическое свойство токсина нейтрализуется. Лечение и профилактика. Наиболее эффективным методом лечения ботулизма является раннее применение антитоксических сывороток. Противоботулиновые лечебно-профилактические антитоксические сыворотки. Состав: очищенные и концентрированные методом Диаферм-3 сыворотки лошадей или КРС, гипериммунизированных анатоксинами или токсинами возбудителей ботулизма типов А, В, С, E, F. Назначение: для лечения и профилактики ботулизма. Способ применения: для лечения – внутривенно или внутримышечно. Для профилактики – внутримышечно. |