Задача 1 staphilococcus (aureus, epidermis, saprophyticus)
 Скачать 30.8 Kb.
|
|
Ситуационная задача 1 STAPHILOCOCCUS (aureus, epidermis, saprophyticus) Морфология: круглые, неподвижные, не имеющие спор Г+ шары, образуют скопления в виде гроздей винограда, в гное встречаются и парные кокки. При специальных условиях культивирования образуют микрокапсулу. Культивирование: факультативные анаэробы, лучше растут в присутствии О2. Рост и размножение на обычных питательных средах, особенно на средах с кровью. Элективные среды: ЖСА и СА. На МПА колонии выпуклые, круглые, непрозрачные, блестящие с ровными краями. При росте – пигмент золотистого, белого, лимонно-желтого цвета. На агаре с кровью – зона гемолиза. Рост на бульоне характеризуется равномерным помутнением и осадком на дне. Ферментативные св-ва: расщеплет ряд сахаров с образованием кислоты, проявляет и протеолитические св-ва. Ферменты патогенности: коагулаза, гиалуронидаза, лецитиназа, фибринолизин, ДНКаза, фосфатаза и т.д. Отличаются наличием плазмокоагулазы, позволяющий дифференцировать золотистый S от др. видов. Патогенез: различные гнойные воспаления при попадании через кожу и слизистые оболочки. Гной из пораженных участков. Материал отбирают из глубоких слоев пораженного участка. При наличии открытых процессов – стерильным тампоном, пастеровской пипеткой, при закрытых абсцессах – стерильным шприцем. Транспорт в стерильных закрытых пробирках. Избегать излишнего попадания прямого солнечного света, высоких и низких температур, высыхания. Питательные среды: ЖСА, 5% кровяной агар, также разрешается среда обогащения сахарный бульон. – Оснащение: средства индивидуальной защиты (халат, шапочка, перчатки), ёмкость с биоматериалом, чашки Петри с питательными средами КА и ЖСА, термостат, стерильные пробирки, крышки для пробирок, предметные стекла, реактивы для окрашивания по Граму, микроскоп, набор антибиотиков, пробирки со средами Гисса (1 шт), спиртовая горелка, шпатели, петли, маркер или карандаш, реактивы для изучения ферментативных, биохимических свойств, контейнеры с дез.р-ром. Реакция плазмокоагуляции. Цитратную плазму, разведенную изотонич.р-ром 1:4 наливают в две преципитационные пробирки по 0,3-0,5 мл. В одну пробирку вносят петлю с иссл.культурой, другая – контроль. Пробирки помещают в термостат при t 37о С. Через 2-3 часа учет результатов: при отсутствии свертывания плазмы посевы оставляют при комнатной t на 24 ч, после чего учитывают реакцию. При наличии фермента коагулазы плазма свертывается (не выливается из перевернутой пробирки), в К консистенция плазмы не меняется. Утилизация отработанного материала: биоматериал сливают в ёмкость для отходов класса Б, засыпают хлорной известью в соотношении 1:5 на полчаса, затем содержимое собирают в герметичную упаковку желтого цвета соответственно классу отходов Б и утилизируют окончательно. Средства индивидуальной защиты (например перчатки) помещают в контейнер с дез.р-ром для отходов класса Б и утилизируют окончательно. Лабораторная посуда помещается в дез.р-р на определенное время в зависимости от дез.ср-ва. Затем её помещают в упаковку (биксы, бязь, бумага-ламинат, крафт-пакеты) и стерилизуют в автоклавах при 132о C. Чашки Петри, пипетки градуированные и пастеровские, флаконы, колбы, пробирки разрешается стерилизовать сухожаровым способом в печи Пастера. Ситуационная задача 2 STREPTOCOCCUS (пиогенные) Морфология: щаровидные, неподвижные, не имеющие спор Г+ кокки, располагающиеся цепочкой. Свежевыделенные культуры иногда образуют капсулу. Культивирование: факультативные анаэробы. Оптимальными являются среды, содержащие кровь или сыворотку крови. На плотных питательных средах колонии мелкие, плоские, мутные, сероватые. На агаре с кровью – иногда гемолиз. На сахарном бульоне рост с образованием пристеночного и придонного мелкозернистого осадка (бульон прозрачный). Ферментативные св-ва: расщепляют сахара с образованием кислоты, слабые протеолитические св-ва (свертывают молоко, желатин не разжижают). Токсинообразование: отсутствует катлазная активность, большинство способны лизировать эритроциты. Экзотоксины: стрептолизин, лейкоцидин, эритрогенный токсин, цитотоксины. Патогонез: Ферменты патогенности, капсула, М-протеин обладают антифагоцитарными свойствами. S вызывают нагноительные и ненагноительные инфекционные заболевания. Слизь из зева. При заборе материала пациент открывает рот, корень языка врач придерживает деревянным шпателем. Стерильным ватным тампоном, не касаясь полости рта и язык, врач проводит по миндалинам, слизистой оболочке горла. Собранный биоматериал помещается в чистую пробирку с питательной средой. Предохранять от низких и высоких температур, высыхания. Питательные среды: 5% кровяной агар, разрешается среда накопления сахарный бульон. – Оснащение: средства индивидуальной защиты (халат, шапочка, перчатки), ёмкость с биоматериалом, чашки Петри с питательной средой КА, термостат, стерильные пробирки, крышки для пробирок, предметные стекла, реактивы для окрашивания по Граму, микроскоп, набор антибиотиков, пробирки со средами Гисса, спиртовая горелка, шпатели, петли, маркер или карандаш, реактивы для изучения ферментативных, биохимических свойств, контейнеры с дез.р-ром. Окраска по Граму фиксированного мазка: На мазок накладывают фильтровальную бумагу, наносят несколько капель р-ра генцианового фиол. Через 1-2 минуты бумагу снимают, краситель сливают Наносят р-р Люголя до почернения (1 мин), краситель сливают Наносят 96% спирт до отхождения красителя (30-60 сек) Промывают препарат водой Докрашивают фуксином Пфейффера (1-2 мин), промывают водой и высушивают Учет результатов. Г+ клетки стрептококков фиолетовые, Г- (не S) красные. Утилизация отработанного материала: биоматериал сливают в ёмкость для отходов класса Б, засыпают хлорной известью в соотношении 1:5 на полчаса, затем содержимое собирают в герметичную упаковку желтого цвета соответственно классу отходов Б и утилизируют окончательно. Средства индивидуальной защиты (например перчатки) помещают в контейнер с дез.р-ром для отходов класса Б и утилизируют окончательно. Лабораторная посуда помещается в дез.р-р на определенное время в зависимости от дез.ср-ва. Затем её помещают в упаковку (биксы, бязь, бумага-ламинат, крафт-пакеты) и стерилизуют в автоклавах при 132о C. Чашки Петри, пипетки градуированные и пастеровские, флаконы, колбы, пробирки разрешается стерилизовать сухожаровым способом в печи Пастера. Ситуационная задача 3 ПНЕВМОКОККИ Морфология: Г+ диплококки, у которых стороны клеток, обращенные друг к другу, уплощены, а противоположные вытянуты. Неподвижны, не имеют спор, образуют капсулу. Культивирование: факультативные анаэробы. Требовательны к средам – растут только на средах с добавлением нативного белка (крови или сыворотки). На агаре с сывороткой средах колонии мелкие, нежные, прозрачные колонии. На агаре с кровью колонии влажные зеленовато-серые, окруженные зеленой зоной. Рост в жидких средах характеризуется диффузным помутнением и пылевидным осадком на дне. Ферментативные св-ва: расщепляют сахара (кроме маннита) с образованием кислоты. Важный диагностический признак – способность расщеплять инулин и растворяться в желчи. Токсинообразование: эндотоксин, гемолизин, лейкоцидин. Патогонез: вызывают гнойно-воспалительные заболевания. Мокрота. По возможности утреннюю мокроту собирают в герметичный стерильный контейнер с широким горлом, с крышкой. Пациент откашливает мокроту, предварительно можно использовать ингаляцию. Мокроту хранят в холодильнике. Описанные выше культуральные свойства при росте на КА характерны для стрептококков. Исключаются стафилококки, т.к у пневмококков отсутствует рост на средах Эндо и ЖСА (это элективные среды для стафилокков). – Оснащение: средства индивидуальной защиты (халат, шапочка, перчатки), ёмкость с биоматериалом, чашки Петри с питательной средой КА, термостат, стерильные пробирки, крышки для пробирок, предметные стекла, реактивы для окрашивания по Граму, микроскоп, набор антибиотиков, пробирки со средами Гисса, спиртовая горелка, шпатели, петли, маркер или карандаш, реактивы для изучения ферментативных, биохимических свойств, контейнеры с дез.р-ром. Посев тампоном на плотные питательные среды при подозрении на коклюш. В питательную среду, находящуюся в приоткрытой у пламени спиртовки чашке Петри, тампоном с исследуемым материалом втирают его содержимое зигзаговыми движениями. При этом вращается тампон и чашка Петри около 4-х раз. При исследовании на коклюш 4 площадки сброса и посев в центре чашки. Утилизация отработанного материала: биоматериал сливают в ёмкость для отходов класса Б, засыпают хлорной известью в соотношении 1:5 на полчаса, затем содержимое собирают в герметичную упаковку желтого цвета соответственно классу отходов Б и утилизируют окончательно. Средства индивидуальной защиты (например перчатки) помещают в контейнер с дез.р-ром для отходов класса Б и утилизируют окончательно. Лабораторная посуда помещается в дез.р-р на определенное время в зависимости от дез.ср-ва. Затем её помещают в упаковку (биксы, бязь, бумага-ламинат, крафт-пакеты) и стерилизуют в автоклавах при 132о C. Чашки Петри, пипетки градуированные и пастеровские, флаконы, колбы, пробирки разрешается стерилизовать сухожаровым способом в печи Пастера. Ситуационная задача 4 МЕНИНГОКОККИ Морфология: бобовидные, имеющие микрокапсулу и пили, не образующие спор, неподвижные Г- диплококки. Культивирование: Аэробы. Культивируются на средах с нормальной сывороткой или дефибринованной кровью лошади. Не растут на простых питательных средах. На сывороточном агаре Биохимические св-ва: слабо выражены (расщепляют глюкозу и мальтозу с образованием кислоты). Образуют ферменты гиалуронидаза и нейроминидаза, эндотоксин. Патогенез: вызывают локальное поражение слизистой оболочки носоглотки, генерализированные инфекции. Отделяемое слизистой оболочки носоглотки. Материал собирают стерильным ватным тампоном, укрепленным на проволоке. Перед сбором тампон изгибают о край пробирки под углом 135оС на расстоянии 3-4 см от того конца, где будет накручена вата. Стерильным шпателем, находящимся в левой руке, прижимают корень языка, а правой вводят тампон концом вверх в носоглотку и собирают отделяемую слизь легкими движениями. Тампон не должен касаться щек, зубов, языка. Посев производят сразу на чашку Петри с сывороточным агаром тампоном. Засеянные чашки предохраняют от высоких и низких температур, высыхания. Посев чистой культуры будет производиться на агар с сывороткой, без сыворотки, среды Гисса при температуре 37о С и 22о С. Также проводится проба на оксидазу. О выделении непатогенных нейссерий свидетельствует положительная проба при t 22о C на росте агаре с сывороткой. И при 37о С на агаре без сыворотки; на средах Гисса расщепляется лактоза и сахароза; проба на оксидазу отрицательная. – Оснащение: средства индивидуальной защиты (халат, шапочка, перчатки), ёмкость с биоматериалом, чашки Петри с питательной средой КА, термостат, стерильные пробирки, крышки для пробирок, предметные стекла, реактивы для окрашивания по Граму, микроскоп, набор антибиотиков, пробирки со средами Гисса, спиртовая горелка, шпатели, петли, маркер или карандаш, реактивы для изучения ферментативных, биохимических свойств, контейнеры с дез.р-ром. В пробирки со средами Гисса с 0,25% сыворотки (лактозы, глюкозы, сахарозы и мальтозы) засеивают уколом с помощью бактериальной петли исследуемый материал, взятый с колоний, выросших на с сывороточном агаре. Среды инкубируются в термостате при 37о С. Утилизация отработанного материала: биоматериал сливают в ёмкость для отходов класса Б, засыпают хлорной известью в соотношении 1:5 на полчаса, затем содержимое собирают в герметичную упаковку желтого цвета соответственно классу отходов Б и утилизируют окончательно. Средства индивидуальной защиты (например перчатки) помещают в контейнер с дез.р-ром для отходов класса Б и утилизируют окончательно. Лабораторная посуда помещается в дез.р-р на определенное время в зависимости от дез.ср-ва. Затем её помещают в упаковку (биксы, бязь, бумага-ламинат, крафт-пакеты) и стерилизуют в автоклавах при 132о C. Чашки Петри, пипетки градуированные и пастеровские, флаконы, колбы, пробирки разрешается стерилизовать сухожаровым способом в печи Пастера. |