Правилозаборов. 1 Проведение забора материала от больных для бактериологических исследований

• Название: 1 Проведение забора материала от больных для бактериологических исследований
• Дата: 18.02.2019
• Размер: 326.18 Kb.
• Имя файла: Правилозаборов.pdf
• Тип: Документы; #67990
• страница: 3 из 3

РИА. Аг илил ат для РИА метят радиоизотопом. Чаще всего
125
I. Реакция РИА очень чувствительна, позволяет определить 1-2нг и меньше исследуемого материала.
Чаще всего применяется радиофазная модификация РИА (суть такая же, как и ИФА). Применяют три метода твердофазной РИА: конкурентный, обратный и непрямой.
При конкурентном методе на поверхности сорбента сорбируют известные ат. Затем в лунки вносят исследуемый аг и спустя определенное время, достаточное для специфического взаимодействия, добавляют меченый радиоизотопом очищенный аг той же специфичности.
Если в исследуемом материале содержится аг, соответствующий иммобилизированым ат, чатсь активных центров последних блокируется. В таком случае внесенный в лунки меченый аг будет в меньшей степени (в сравнении с контролем) соединяться с ат, о чем можно судить по радиоактивной жидкой части реагирующей смеси.
При проведении РИА обратным методом на поверхности лунок сорбируют очищенный немеченый аг, гомологичный исследуемому аг. В отдельной пробирке соединяют антигенсодержащий материал с меченвми ат, специфичными с аг, иммобилизированными в лунках. Если в исслудемомо материале модержится аг, способный взаимодействовать и мечеными ат, активные центры последних полностью или частично блокируются. В таком случае при внесении в лунки с аг смеси, меченые ат буду не полностью взаимодействовать с аг, о чем можно судить по степени радиоактивности жидкости в сравнении с контролем.
Наиболее удобным является непрямой метод РИА с использованием антивидовых меченых ат. Метод может использован для идентификации неизвестных аг и ат. В обоих случаях применят антивидовую сыворотку, содержащих ат против соответствующих гамма-глобулинов.
Для проведения этого метода на поверхности лунок сорбируют аг, а затем добавляют разведенную сыворотку больного. При наличии в ней соответствующих ат на поверхности лунок формируется комплекс ат-аг. При последующем введении в лунку антивидовой меченой сыворотки ат, содержащиеся в ней, адсорбируются на образовавшемся комлексе. Чем больше в сыворотке больного ат, тем больше удет связанной с поверхностью лунок радиоактивной метки.
15. Использование реакций Аг+Ат с мечеными компонентами (РИФ, ИФА, РИА) для обнаружения
антител в сыворотке крови.
ИФА. Определение неизвестных ат включает несколько этапов:
1.
Связывание известного аг с пластиком лунки планшета;
2.
Внесение испытуемой сыворотки
3.
Внесение конъюгата (меченой ферментом антиглобулиновой сыворотки);
4.
Внесение хромогенного субстрата;
Остальные реакции по сути такие же.
17. Использование иммунобиологических препаратов для специфической профилактики
бактериальных инфекций.
Кишечные инфекции:

1.
Брюшнотифозная моновакцина и брюшнотифозная спиртовая вакцина, обогащенная Vi-антигеном – комплексный препарат, состоящих из бактерий (инактивированных) и Vi-антигена S.Typhi, который выполняет роль растворителя. Применяется по эпидемическим показаниям.
2.
Поливалентный дизентерийный бактериофаг. Содержит фаги, лизирующие шигеллы Флекснера и
Зонне. Выпускается в виде таблеток с кислотоустойчивым покрытием. Применяют для экстренной профилактики и лечения у детей.
3.
Колибактерин. Содержит лиофильно высушенные живые клетки E. Coli штамма М17. Обладает выраженными антагонистическими свойствами в отношении ряда патогенных кишечных бактерий.
Применяют для нормализации кишечной микрофлоры.
4.
Холерная вакцина. Взвесь равных количеств холерных вибрионов сероваров Огава и Инаба, классических или эльтор биоваров. Вакцина вводится подкожно взрослым и детям по эпидемическим показаниям.
5.
Ботулинический трианатоксин адсорбированный очищенный. Экзотоксины С.botulinum (серотипы А,
В и Е) обезвреживают формалином при нагревании, затем очищают от балластных веществ.
Применяют подкожно в возрасте от 16 и 60 лет.
Респираторные инфекции:
1.
Коклюшная вакцина. Содержит взвесь В.Pertussis в I фазе, убитых формалином. Применяют для обязательной активной специфической профилактики коклюша. Входит в совтав АКДС.
2.
Иммуноглобулин нормальный человеческий. Получен из плацентарной или венозной крови человека. Содержит специфические антитела против возбудителей многих инфекционных заболеваний, в том числе возбудителей коклюша. Применяют у детей для экстренной профилактики.
3.
Дифтерийный адсорбированный очищенный анатоксин. Обезвреживают формалином при нагревании, очищают от балласта. Входит в состав АКДС.
4.
Противодифтерийная антитоксическая сыворотка.
5.
АКДС – коклюшно-столбнячная адсорбированная жидкая вакцина, состоит из взвеси убитых коклюшных микробов и очищенных дифтерийного и столбнячного анатоксинов. Вводят внутримышечно детям с трехмесячного возраста трехкратно с интервалом 30 дней, ревакцинация через 12-18 месяцев.
6.
Менингококковые вакцины. Вакцины А и А+С отечественного производства представляет собой капсульные специфические полисахариды менингококков соответствующих серогрупп. Выпускается в сухом виде в ампулах. Препарат вводят детям от 1 года и взрослым однократно подкожно.
7.
Поливалентная пневмококковая полисахаридная вакцина Пневмовакс 23. Смесь очищенных капсульных полисахаридов 23 наиболее часто встречающихся серотипов пневмококка. Выпускается о флаконах, содержащих одну дозу вакцины.
8.
Вакцина БЦЖ. Живая лиофильно высушенная в 1,5% растворе глютамата натрия культура авирулентного штамма M. Bovis BCG. Применяется однократно внутрикожно у новорожденных, последующие ревакцинации в возрасте 6-7 и 14-15 лет при отрицательной пробе Манту.
Зоонозные инфекции:
1.
Чумная живая сухая вакцина. Высушенная живая культура штамма EV. Используется однократно по эпидемическим показаниям.
2.
Туляремийная живая сухая накожная вакцина. Высушенная живая культура штамма F.tularensis применяетс однократно накожно и внутрикожно детям с 7 лет, ревакцинация через 5 лет.
3.
Бруцеллезная лечебная вакцина. Взвесь убитых нагреванием бруцелл.
4.
Сибиреязвенная живая вакцина СТИ. Высушенная взвесь живых спор авирулентного бескапсульного штамма В. Anthracis. Применяют двукратно с интервалом 21 день.
5.
Противосибиреязвенный иммуноглобулин.
6.
Лептоспирный иммуноглобулин. Для лечения и профилактики.
7.
Лептоспирная вакцина. Культуры основных сероваров лептоспир, убитых нагреванием.
8.
Вакцина Е сыпнотифозная комбинированная живая сухая. Представляет собой риккетсии Провачека авирулентного штамма. Для профилактики сыпного тифа у лиц в возрасте 16-60 лет. Иммунитет развивается через 3-4 недели.
18. Использование иммунобиологических препаратов для специфической профилактики
вирусных инфекций.
Респираторные инфекции:

1.
Вакцина живая, очищенная аллантоисная сухая. Готовят из аллантоисной жидкости куриных эмбрионов, зараженных вакцинными штаммами гриппа. Применяют для профилактики гриппа.
2.
Убитые гриппозные вакцины. Инактивированные формалином цельные вирионы вакцинного штамма гриппа, выращенного в культуре клеток. Получают ежегодно на основе данных эпидемиологического контроля.
3.
Лечебно-профилактическая поливалентная гриппозная сыворотка. Получена путем гипериммунизации лошадей вирусом гриппа разных серотипов. Выпускают в виде смеси с антибиотиками.
4.
Живая ослабленная коревая вакцина. Аттенуированный штамм вируса кори Л-16. Изготавливают при выращивании вакцинного штамма на культуре клеток эмбриона перепела.
5.
Иммуноглобулин человеческий противокоревой. Получают из крови серопозитивных здоровых доноров. Применяют для создания пассивного иммунитета.
6.
Живая ослабленная краснушная вакцина. Содержит аттенуированный штамм вируса краснухи.
Вводят парентерально детям в 12 месяцев, ревакцинация в 6 лет.
Кишечные инфекции:
1.
Пероральная живая вакцина против полимиелита. Содержит ослабленные штаммы вирусов полиомиелита 1, 2 и 3 типов. Выпускается в жидком виде. Применяют с трехмесячного возраста.
2.
Парентеральная вакцина против полимиелита. Содержит инактивированные вирусы 1-3 типов.
Вводится подкожно или внутримышечно с трехмесячного возраста.
3.
Вакцина гепатита А культуральная очищенная концентрированная. Представляет собой вирионы гепатита А. выращенных на культуре клеток.
Трансмиссивные инфекции:
1.
Плазменная вакцина против гепатита В. Готовят путем инактивации вируса, содержащегося в плазме доноров-носителей вируса. В России не применяется.
2.
Генно-инженерные вакцины против гепатита В. Готовят путем встраивания гена вируса в дрожжевые клетки. После завершения процесса дрожжи выделяют белок Hbs-Ag, который очищают.
Зоонозы:
1.
Инактивированная культуральная вакцина против клещевого энцефалита. Состоит из специфического антигена вируса энцефалита, инактивированного формалином. Применяют для профилактики по эпидемическим показаниям. Вакцина проводится в возрасте 4-65 лет и состоит из трех инъекций.
2.
Иммуноглобулин против клещевого энцефалита из сыворотки лошадей, жидкий.
3.
Живая антирабическая вакцина Ферми. Изготавливается из мозга овец, зараженных аттенуированным вирусов бешенства. Вакцину вводят людям, укушенными подозрительными животными.
4.
Вакцина культуральная инактивированная сухая антирабическая. Получают путем инактивации ультрафиолетом вирусов, выращенных на культуре клеток. Вводят подкожно или внутримышечно.
Схема применения зависит от укуса.
5.
Иммуноглобулин антирабический. Получают путем гипериммунизации лошадей фиксированным вирусом. Применяют для создания пассивного иммунитета для профилактики бешенства.
19. Использование иммунобиологических препаратов для диагностики бактериальных инфекций.
Кишечные инфекции:
1.
Сальмонеллезные групповые. Адсорбированные и монорецепторные О- и Н- агглютинирующие диагностические сыворотки. Применяют для серотипирования в РА.
2.
Эритроцитарные диагностикумы для РНГА: комплексный эритроцитарный диагностикум группы
АВСДЕ, брюшнотифозный эритроцитарный О9 диагноститум.
3.
Агглютинирующие ОВ-сыворотки против патогенных кишечных палочек. Получают путем иммунизации кроликов взвесью эшерихий соответствующего серовара и применяют в РА.
4.
Адсорбированные агглютинирующие сыворотки для идентификации шигелл. Различают групповые и моновалентные сыворотки. Получают путем иммунизации кроликов определенными сероварами.
5.
Эритроцитарные диагностикумы Флекснера и Зонне для постановки РНГА с целью ретроспективной диагностики. Диагностические титры при дизентерии Флекснера 1:200 и дизентерии Зоне 1:100.
6.
Противохолерная агглютинирующая О-сыворотка, типовые сыворотки Огава и Инаба. Получены из крови кроликов, иммунизированных вибрионами.
Респираторные инфекции:

1.
Агглютинирующие адсорбированные (факторные) сыворотки. Применяют для серологической дифференциации возбудителей коклюша.
2.
Агглютинирующая противодифтерийная сыворотка. Применяют для дифференциации дифтерии от дифтероидов.
3.
Диагностикум корпускулярный коклюшный, применяется в РСК с парными сыворотками, полученными от больного на 2-3 неделе заболевания для определения нарастания титра антител в 4 и более раз.
4.
Эритроцитарный менингококковый диагностикум для определения антител в РНГА, диагностический титр 1:200.
5.
Стандартные агглютинирующие сыворотки для определения серогрупп менингококков.
Зоонозы:
1.
Бруцеллезный единый диагностикум. Взвесь убитых бруцелл, окрашенных метиленовым синим.
Применяется для серодиагностики бруцеллеза в РА.
2.
Туляремийный диагностикум. Взвесь убитых бактерий. Применяется для постановки РА при серодиагностике туляремии.
3.
Чумной бактериофаг.
4.
Сибиреязвенный бактериофаг.
5.
Антраксин. Белково-полисахаридно-нуклеиновый комплекс, извлеченный при гидролизе микроорганизма. Применяется для постановке кожно-аллергической пробы.
Контактные:
1.
Диагностические стафилококковые фаги. Набор специфических фагов для фаготипирования стафилококков.
2.
Антигены для реакции Вассермана

Специфический антиген из тканевых трепонем, разрушенных ультразвуком

Неспецифический кардиолипиновый антиген – высокоочищенный экстракт бычьего сердца, имеющий постоянный химический состав липидов, смешанный в определенных пропорциях с лецитином и холестерином.
3.
Гонококковый антиген. Взвесь убитой культуры гонококка. Применяется для постановки РСК.
20. Использование иммунобиологических препаратов для диагностики вирусных инфекций.
Респираторные инфекции:
1.
Типоспецифические гриппозные сыворотки. Применяют для серотипирования вирусов в РТГА,
РСК.
2.
Типоспецифические парагриппозные сыворотки.
3.
Сухие типоспецифические диагностикумы (гриппозный, парагриппозный, аденовирусный).
Применяются для диагностики соответствующих инфекций.
4.
Диагностикумы из вирусов кори, краснухи, эпидемического паротита для выявления ат и РСК,
РН и РТГА.
Кишечные инфекции:
1.
Диагностические поливалентные и типоспецифические полиомиелитные сыворотки.
2.
Диагностические поливалентные и типоспецифические сыворотки к вирусам Коксаки.
Трансмиссивные инфекции:
1.
Стандартная диагностическая сыворотка анти-Hbs. Получена из крови переболевших гепатитом
В доноров.
2.
Стандартный HBs аг. Применяют для серодиагностики вирусного гепатита В в реакции ИФА.
3.
Диагностикум эритроцитарный для определения антител к Нве-антигену. Применяют в РНГА.
Зоонозы:
1.
Диагностикум из вируса клещевого энцефалита. Применяют для диагностики.
2.
Диагностические эталонные типоспецифические сыворотки против вируса энцефалита.
3.
Тест-системы для выявления вирусов бешенства в РИФ.
21. Постановка и учет внутрикожных аллергических проб
Для диагностики ряда инфекционных заболеваний вспомогательным методом является аллергический, основанный на введении аллергенов в виде прозрачных бесцветных жидкостей, полученных путем гидролиза микробных масс в кислой среде. В основе лежит повышенная чувствительность

макроорганизма к возбудителям или его токсинам. Они специфичны, просты и доступны в любых условиях и применяются при таких заболеваниях, как бруцеллез, туляремия, сибирская язва, брюшной тиф, токсоплазмоз.
Аллергены в количестве 0,1-0,2мл туберкулиновым шприцом вводятся внутрикожно на ладонной поверхности предплечья, после предварительной дезинфекции кожи спиртом. При правильном внутрикожном введении на месте инъекции образуется беловатый, плотный и четко очерченный пузырек в виде лимонной корочки и исчезавший не ранее, чем через10-15 минут.
Оценку внутрикожной аллергической пробы необходимо осуществлять через 24 и 48 часов после введения.
Различают следующие реакции:

Резко положительные, при которых инфильтрат более 6см в диаметре, имеется повышение температуры тела, регионарный лимфаденит;

Положительные, инфильтрат 3-6см, общая реакция отсутствует;

Слабо положительная, инфильтрат 1-3см;

Сомнительная, инфильтрат менее 1см;
Реакция считается отрицательной, если после введения аллергена появляется покраснение кожи без отека, исчезающее обычно через 3 часа.
Аллергические пробы становятся положительными одновременно с серологическими реакциями или несколько раньше и сохраняются длительное время у переболевших инфекционными заболеваниями или привитых.