Масс-спектрометрия биомолекул. 3 Базовые принципы массспектрометрии

• Название: 3 Базовые принципы массспектрометрии
• Дата: 07.10.2018
• Размер: 102.87 Kb.
• Имя файла: Масс-спектрометрия биомолекул.docx
• Тип: Документы; #52649
• страница: 15 из 18

B/Eсканирование это пример «псевдо-тандемного» масс-спектрометрического эксперимента (ион предшественник не был отобран по массе перед его диссоциацией). Другими примерами «псевдо-тандемной» масс-спектрометрии является B²Eсканирование (обеспечивающее средства для обнаружения всех ионов, приводящих к определенному фрагменту) и постоянное сканирование нейтральных потерь(CNL). Физический отбор иона предшественника перед его диссоциацией может быть достигнут расположениемколлизионной ячейки после магнитного сектора (второй field-freeрегион, FFR, Рисунок 3.16). Поскольку кинетическая энергия каждого фрагментного иона будет mf/m0 долей от кинетической энергии предшественника, сканирование электростатического поля электростатического анализатора, ESA, позволитполучить масс-спектр всех фрагментных ионов. Хотя эта техника [названная масс-аналитическая ионная кинетическо-энергетическая спектрометрия, MIKE] имеет довольно ограниченное аналитическое применение (из-за очень малой разрешающей способности), она может обеспечить информацию о геометрии макромолекулярного иона, тему, которую мы обсудим в некоторых деталях в Главе 9. Комбинация минимум трех секторов (BEB: магнитный сектор 1 – электростатический анализатор – магнитный сектор 2) требуется для получения данных тандемной масс-спектрометрии (MS/MS) высокого разрешения.

Магнитный сектор масс-спектрометра - это очень гибкое аналитическое устройство, которое позволяет выполнять разнообразные эксперименты без модификаций оборудования. Секторы позволяют выполнять измерения высокого разрешения с широким диапазоном m/z. Эксперименты по ионной фрагментации (CID) выполняются в режиме высокой коллизионной энергии, включаянаблюдение фрагментов которые обычно не детектируются при использовании большинства других анализаторов (например, d-, v- и w-ионы в спектрах пептидной фрагментации). Однако, инструменты магнитного сектора имеют также и значительные недостатки. Поскольку скорость получения данных обычно ограничивается магнитной скоростью магнитного сканирования, сектор масс-спектрометрии не может быть не могут быть легко сопряжены с «импульсными» источниками ионизации(такими, как МАЛДИ). Даже при сопряжении с непрерывными источниками ионизации (такими как электроспрей), чувствительность анализа часто ограничивается неблагоприятным рабочим циклом (частично, когда получение данных выполняется сверх ширины диапазона m/z).

3.5.2. Временная ионная дисперсия: времяпролётная масс-спектометрия.

Концепт времяпролетных (TOF) анализаторов массы был впервые введен больше полсотни лет назад под названиями «временной дисперсионный масс-спектрометр» и «ионный велоцитрон». Базовый принцип времяпролётной масс-спектрометрии очень простой (Рисунок 3.18): ионы с различными массами разогнанные до одной кинетической энергии (путем прохождения разности потенциалов V)в течение очень короткого периодавремени и введенные в регион дрифта свободного поля (или «пролетная трубка»). Если пренебречь начальной скоростью всех ионов, тогда финальная скорость каждого иона в регионе дрифта будет однозначно определена за счет его масса-зарядного соотношения и ускоряющего потенциала U0: