МКЛИ ШПОРЫ. Билет лаборант выполняет следующие должностные обязанности
 Скачать 109.86 Kb.
|
|
3. Определение протеолитической активности желудочного сока. Протеолитич. Активн. Желуд. сока зависит в основном от содержащегося в нем пепсина. Протеол. активн желуд сока определяется методом Туголукова по количеству расщепленного белка. Ход исследования. Профильтрован.желуд. сок разводят в 100 раз (9,9мл воды + 0,1мл желудочного сока). В одну градуирован. центрифужную пробирку помещают 1мл разведен. сока (опыт), в др – 1мл прокипяченного сока (контроль). В обе пробирки добавл. по 2мл 2% р-ра сух. плазмы и ставят их в термостат при 37°С на 20 часов. После этого в каждую пробирку приливают по 2мл 10% ТХУ, перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют 10 минут при 1500 об/мин. По разнице величин осадка в контроле и опыте определяют степень переваривания белка с последующ. пересчетом на кол-во пепсина. ВНУТРИЖЕЛУДОЧНАЯ рН-метрия. Дает точные сведения об истинной кис-ти путем определен.кол-ва ионов водорода. Установка для внутрижелуд. рН-метрии состоит из спец. зонда-электрода с двумя датчиками-оливами и рН-метра. Одна рН-олива находится на конце зонда, др. – на расстоянии 11см от первой. При зондировании концевая рН-олива располагается в привратниковой пещере и показывает кислотность пилорических желез, а вторая - кислотность секрета главных желез желудка. Регистрация рН проводится каждые 10-15 минут или непрерывно в разные фазы секреции. Норм. Показат.. Базальная секреция имеет рН 7,0-6,0; после применения раздражителя рН 1,2-1,7 и ниже. БИЛЕТ 6 1. Глюкозурия. Причины. Виды. Глюкозурия – появление глюкозы (сахара) в моче. Делится на физиологическую и патологическую. Физиолог-ая бывает алиментарной (связана с употреблением большого кол-ва углеводов, лекартсв-х средств) и эмоциональной (связана с эмоциональным напряжением, со стрессом). А патолог-я бывает связана с гипергликемией (инсулярная – недостаточ-е выделение инсулина, а также заб-я сахарный диабет, панкреатит; экстраинсулярная связана с наруш-м функции коры надпочечников, гипофиза, опухоль мозга, заб-е щитовид-й железы – тиреотоксикоз, а также заб-я печени – цирроз), несвязанная с гипергликемией (почечная глюкозурия при нефрите, почечном диабете). 2. Микроскопия желудочного сока. На предметное стекло наносим 3 кап. жел.сока. К 1-й капле + каплю р-ра Люголя, ко 2-й кап. судана lll, а к 3-й ничего. В содержимом жел.сока можно обнаружить: мышечные волокна с поперечной исчерченностью (при пониж.кислотности, замедленного опорожнения желудка), крахмальные зёрна в виде слоистых шаров различной величиы и формы (окраш-ся в тёмный цвет р-ром Люголя), жир в виде капель или жирных кислот (окраш-ся суданом в чёрный цвет), растител-я клетчатка (переварив-я более нежная и непереварив-я, при наруш-и эвакуации), эпителий (при кровотеч-ии), цилиндры, Le в виде разруш-х остатков, дрожжевые грибки (при атониях и застое), бациллы, сарцины, кокки, слизь (прозрач-е и полупрозрач-е нити; при гастрите, язве, новообразованиях). 3. Эритропоэз. Характеристика и значение эритроцитов. Эритропоэз –процесс образ-я красных кровяных клеток (эр-ов). Протекает по след.схеме: эритробласт -> нормоцит -> нормоцит базофильный -> нормоцит полихромный -> нормоцит оксифильный -> ретикулоцит -> эритроцит. Эр – округлое образ-е d = 7 мкм, по форме двояковогнутые диски (эта форма обеспечивает быструю и равномерную диффузию О₂ внутрь эр, способствует лучшему поглащению газов из крови. Окраш-ся по Романовскому Гимзе в ярко-розовый цвет. Норма у муж: 4,5 – 5 млн  , у жен: 3,7 – 4,7 млн . Уменьш-е кол-ва эр. – эритропения, а увел-е – эритроцитоз. Появление эр-в разного диаметра – анизацитоз. Микроциты – ниже 7 мкм, макроциты – d = 8 – 9,5 мкм, мегалоциты – свыше 12 мкм. Изменение формы (серпавидные, колбовидные, стомациты, грушевидные и т.д) – пойкилоцитоз. В эр-х могут встречаться тельца Жоли (при мегалобластных анемиях, гемолизе), кольца Кебота (при тяжёлых формах анемии), крапчатость Шуффнера (при 3-х дневной малярии). Цветной показатель отражает содержание Hb в одном эр. В норме = 0,85 -1. Бледность эр. говорит о гипохромии (железодефицитная анемия): ЦП ниже 0,85. Интенсивное окрашивание о гиперхромии (гиперхромная анемия, В₁₂ - фолиеводефицитная анемия) : ЦП выше 1.БИЛЕТ 7. 1.Методы определения белка в моче (качественно). Сульфосалициловой кислотой (20 %) или индикатором. Проба Ларионовой:наслаиваем мочу на реактив Ларионовой(1% р-р HNO3 на насыщенном растворе поваренной соли). При + - белое кольцо на границе двух сред. Проба Геллера: 1мл мочи + 50%р-р HNO3 наслаиваем. При + - белое кольцо на границе двух сред. Бренберга – стольникова: в основе проба Геллера, положительный результат при наличии 0,033 г/л белка(нитевидное кольцо на 3 минуте). Если кольцо более плотное, широкое или появились раньше – мочу разводим дист.водой или физ.раствором до тех пор пока кольцо не станет нитевидным. 2.Определение молочной кислоты в желудочном соке. Молочная кислота –кислота , которая образуется в результате патологического брожения , ее можно обнаружить при отсутствии в желуд.содержимом соляной кислоты и при молочно- кислом брожении . она также появляется при раковой опухоли в желудке. А)Проба Уфельмана. К 10 мл 2 % раствора карболовой кислоты + 1 каплю 10 % расвора хлорного железа , появляется аметистовый цвет. Прибавление к раствору несколько капель профильтрованного желуд.сока – при наличии молочной кислоты ,цвет раствора изменяется до канареичного-желтого. Б) проба с эфирной вытяжкой. Берут 5 мл профильтрованного или отцентрифугированного желуд.сока смешивают с 20 мл. эфира , 10 мин взбалтывают. Слой эфира выпускают в пробирку + 20 мл воды и 2 капли 10% раствора полуторахлористого железа. В присутствии молочной кислоты появляется зеленое окрашивание. Проба очень чувствительна. 3. Техника взятие крови из пальца. Алгоритм и техника взятия следующие: Пациент сидит напротив лаборанта. Рука (обычно левая) лежит на столе. Место прокола дезинфицируется спиртом и обезжиривается эфиром. Одноразовым скарификатором быстро делают прокол в подушечке безымянного пальца, погружая инструмент на всю глубину режущей части (примерно на 2-3 мм). Первая капля крови снимается с помощью сухой ваты. Для исследования используют вторую и следующие капли крови, которые набирают с помощью стеклянного переходника, затем помещают в пробирки и подписывают. После того, как кровь взяли, место укола обрабатывают спиртом или йодом и зажимают ватным тампоном до полной остановки крови. Алгоритм забора капиллярной крови у ребенка точно такой же, как и у взрослого. Билет 8. 1. Гематурия. Виды и причины. Гематурия – кровь в моче. В норма быть недолжно. Почечная: при заболеваниях почек (нефрит,нефроз, гломенулонефрит) Внепочечная: кровь попадает в мочу в отделах ниже почек ( при движении камня по мочеиспускательному каналу, также кровь может попасть в мочу при геморроях, анальных трещинах, менструации и тд). Микрогематурия – Мало Эр – цвет не изменяется. Макрогематурия – Много Эр – цвет крови. 2. Определение скрытой крови в желудочном соке. Проба с пирамидоном. Готовим эфирную вытяжку из желудочного сока: 5-10 мл желудочного сока + 2 кап ледяной уксусной кислоты→смешиваем→оставляем на 5 мин. 5мл эфира + 2кап спирта→встряхнуть →стоит 10 мин. Затем к к 2-3 мл эфирной вытяжки + 5-8 кап 5% раствора пирамидона + 8 кап 3% перекиси водорода. При «+»- фиолетовый цвет Реакция Адлера с бензидином. 3 мл желудочного сока + 10 кап 1% раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте + 10 кап 3% перекиси водорода. При «+» - зеленый цвет. 3. Лейкопоэз. Агранулоциты. Характеристика и их значение Lе – белые кровяные тельца, отличаются по величине, форме, строению. Агранулоциты – не содержат зернистости, но могут иметь специфическую зернистость (азурофильные зерна – гранатовый цвет). -Лимфоциты (9мкм) – имеют темно – фиолетовое ядро. Протоплазма небесно – голубая. Могут быть азурофильные зерна. НОРМА: 18-42 %. -Моноциты – самые большие Le. D=12-20мкм. Протоплазма – свинцово – серая, может содержать азурофильные зерна. Ядро – крупное в виде боба. НОРМА: 3-11% Билет 9. 1. Методы определения сахара в моче (качественно и количественно). Качественные пробы. а) Проба Мора 2-3мл мочи + 1мл 10% NaOH кипятят над пламенем спиртовки. При наличии сахара появляется окрашивание мочи от желтого до темно-бурого цвета. б) Проба Гайнеса-Акимова. К 1 мл мочи + 10 Кап реактива Гайнеса. В присутствии сахара моча изменяет цвет от коричнево-зеленого до красного цвета в зависимости от количества сахара. в) Проба с экспресс - тестом (глюко - тест). Полоску с индикаторной бумажкой обмакивают в мочу, через 1 мин ее сравнивают с цветной шкалой, где отмечено количество сахара в моче. Количественные пробы. а) Метод Альтгаузена. Берут 4мл мочи + 1 мл 10% NaOH. Кипятят 1 мин над пламенем спиртовки. Остуживают пробирку и через 15 мин сравнивают с цветной шкалой Альтгаузена, где отмечена концентрация сахара. б) Определение сахара поляриметрем. Заполняется пробирка поляриметра исследуемой мочой, которая должна быть прозрачной и бесцветной. Для этого добавляют адсорбент (активированный уголь или уксусно-кислый свинец), а потом фильтруют. Луч света, проходя через мочу с сахаром, отклоняется. Поворачивая винт, возвращаем направление луча в исходное положение количество градусов на которые отклонился луч, пропорционально количеству сахара в моче (1° - 1% сахара). в) Определение сахара на ФЭКе. Берут 0,1 мл мочи + 0,9 мл 3% ТХУ, перемешать, отцентрифугировать (15мин при 1500 обор; 1 мин). Берут 0,5 мл центрифугата + 4,5 мл орто -толуидинового реактива. Кипятят 8 минут (!), охлаждают и колориметрируют на ФЭК - при красном светофильтре, кюветы 10 мм. 2. Функции желудка Состав желудочного сока в норме. Он содержит соляную кислоту, ферменты, минеральные вещества, гормон гастрин, слизь, следы органических соединений. Желудочный сок имеет кислую реакцию. Функции: 1.Переваривающая (секреторная)- выработка пищеварительных соков: слюны, желудочного, поджелудочного, кишечного соков и желчи. 2. Моторная (двигательная)- осущ. мускулатурой пищеварительного аппарата- жевание, глотание, передвижение пищи. 3.Всасывательная- осуществляется слизистой оболочкой желудка. 4. Экскреторная- выделение пищевар. железами в полость ЖКТ продуктов обмена, воды, солей и т.д. 5.Инкреторная- образование гормонов, которые оказывают специфическое воздействие на процесс пищеварения. Состав желуд. сока в норме: 1.Соляная кислота- её функции: поддержание определённого уровня кислотности в желудке, обеспечивающего превращение пепсиногена в пепсин, препятствование проникновению в организм болезнетворных бактерий и микробов, способствование набуханию белковых компонентов пищи, её гидролиз, стимулирует выработку секрета поджелудочной железы. 2. Бикарбонаты- для нейтрализации соляной кислоты, в целях защиты слизистой. 3.Пепсиноген и пепсин- пепсин является основным ферментом, с помощью которого происходит расщепление белков. Пепсины получаются из пепсиногенов, когда последние попадают в среду с определённой кислотностью. 4. Слизь- фактор защиты слизистой оболочки желудка. Хим. состав желудка: вода, хлориды, сульфаты, фосфаты, гидрокарбонаты натрия, калия, кальция, магния, аммиак. 3. Лейкопоэз. Гранулоциты. Характеристика и их значение. Лейкопоэз- образование лейкоцитов. Лейкоциты- белые кровяные тельца, лейкоциты нормальной крови отличаются по величине, форме, строению и отношению к окраске. Различают 2 основные группы: гранулоциты,агранулоциты. Гранулоциты. Различают по хар-ру специфической зернистости их протоплазмы. К ним отн.: NE, EOZ, BAZ. Их начальной клеточной формой явл.клетка 4 класса – миелобласт. NE – кл.округлой формы, протоплазма составляет большую часть клетки и при окраске имеет розовато-серо-синеватый цве с мелкой зернистостью, к-я окраш.от коричневого до синевато-розового оттенка. Ядра полиморфные, иногда состоят из неск.сегментов (в норме 3-5), соед-х тонкими перемычками. В этом случае NE-сегментоядерные. Если ядра цельные, вытянутые в виде палочки – палочкоядерные. Сегментоядерных в норме 65-70%, палочкоядерных – 1-6%. EOZ(x2ER) – кл.округлой формы. Протоплазма слабо голубая с обильной неоднородной зернистостью ярко-красного цвета. Ядра тоже полиморфные, сост.из 2-х широких округлых сегментов соед-х тонкими перемычками. В норме 1-5% от всех LE. Увелич.при аллергии, гельминтозе – эозинофилез. Уменьшение – эозинофилия. BAZ – крупные тучные клетки, округлой формы с полиморфным ядром неопределенной конфигурацией с внутренней сегментацией, похож на кленовый лист. Протоплазма розовато-фиол.с зернами различной величины. Зернистость очень обильная, часто покрывает ядра. В норме 0-1%. Увелич.при вакцинации. БИЛЕТ 10 1)Методы определения белка в моче (количественно). 1 .Метод Брандберга-Стольникова - на основе кольцевой пробы Геллера с 50% азотной кислоты. Кольцо белка зависит от количества белка. Может быть различной толщины. Если кольцо появляется на 3минуте и толщина его нитевидная, то белка в моче 0,033 г/л. Если кольцо толще, то мочу разводят в 2-4-6-10 раз до тех пор, пока при наслоении мочи не образуется нитевидное кольцо на 3 минуте, то белок в таком случае рассчитывается так: 0,033 г/л • на разведение мочи. Например: 0,033 г/л • 5 = 0,165 г/л в 5 раз разведение. 0,033 г/л • 100 (раз) = 3,3 г/л белка ( 1мл. мочи+9 воды) (1мл мочи+99, воды) 2. На ФЭКе с 3% сульфосалициловой кислотой 0,5 г/л мочи + 1,5мл кислоты 1,25 г/л мочи + 3,75 мл 3°/о сск. 2) Определение дебита соляной кислоты в желудочном соке. Дебит соляной кислоты отражает абсолютное количество HCl, которое вырабатывается желудком за определенный промежуток времени. Чаще всего определяют количество соляной кислоты, выделяемое за 1 час секреции, то есть дебит-час соляной кислоты. Различают дебит свободной HCl, связанной HCl и дебит HCl (кислотную продукцию желудка по общей кислотности). В нашей стране принято определять дебит-час свободной HCl, за рубежом - дебит-час HCl по общей кислотности. Отдельно вычисляют дебит-час базальной и стимулируемой секреции. Дебит-час соляной кислоты более достоверно, чем концентрация HCl, отражает кислотообразующую функцию желудка. Дебит-час свободной HCl выражается в ммоль и рассчитывается по формуле: Dчас= (V1· Е1+ V2· Е2+ V3· Е3+ V4· Е4) · 0,001, где Dчас – дебит-час свободной HCl (ммоль); V1-V4 – объем порций желудочного сока базальной или стимулируемой секреции (мл); Е1-Е4 – концентрация свободной HCl в отдельных порциях (ммоль/л); 0,001 – количество HCl в 1л желудочного сока при концентрации её в 1ммоль/л. Дебит порции «натощак» вычисляют по формуле D = V·E · 0,001. Дефицит соляной кислоты определяют только в тех порциях желудочного сока, в которых отсутствует свободная HCl. Дефицит соляной кислоты соответствует количеству 0,1N раствора соляной кислоты, которое нужно добавить к 100мл желудочного сока, чтобы появилась положительная реакция на свободную соляную кислоту. 3) Кровь. Её роль в жизнедеятельности организма. Состав крови. Кровь – внутренняя среда организма, играющая большую роль в его ж/д. Функции : 1)Дыхательная – перенос О2 и СО2 2)Питательная – транспорт пит. в-в :глюкоза ,аминокислоты, жирные кислоты. 3)Экскреторная – удаление конечных продуктов обмена в-в: мочевина, аммиак, креатинин. 4)Поддержание осмотического баланса ткани- обмен воды м/д тканями и кровью ,и обмен микроэлементов. 5)Защитная – выработка антител и фагоцитоз 6)регуляторная - перенос гормонов и хим. метаболитов. Состав крови : ФЭК 45% , ПЛАЗМА – 55 %. В состав плазмы крови (жидкая часть) входят различные соли( в виде анионов и катионов), электролиты, ферменты, бжу, промежуточные продукты обмена в-в, витамины и встроенные газы. *Уд.вес 1050-1060 *Осмотическое давление 7,7-8,1 мм.рт.ст.(обусловлено содержание в плазме минерал. солей, орган.соед-й, глюкозы) *Вязкость 4-5(зависит от присутствия фэк, их кол-ва и объема, и от коллоидных с-в белковых частиц) *Реакция слабощелочная 7,4 БИЛЕТ 11. 1.Количественное определение осадка мочи по методу Аддис-Каковского, правила сбора, ход исследования, расчет, норма. Для выявления лейкоцитурии используют метод Аддис-Каковского. Мочу собирают за 10-12 часов с 9 вечера до 9 утра, собранную мочу тщательно размешивают и измеряют ее количество. На исследование направляют количество выделенное за 12 мин. Если собрали 350 мл мочи за 10 часов, то за час 35 мл мочи, за 1/5 часа 7 мл мочи. Собранную мочу центрифугируем и надосадочную выливаем. Смотрим на камере Фукс-Розенталя или камере Горяева. Из 350 мл мочи берем 7 мл и в центрифуге получаем осадок. Сливаем надосадочную мочу, т.е. 6 мл и оставляем 1 мл (моча с осадком). Заполняем камеру Горяева (1 объем) или Фуксе-Розент (3 объема) и считаем лейкоциты, эритроциты и цилиндры в камере. Получим число клеток за сутки, а если оставляли после центрифуги 0,5 мл, то умножим на 60000 1 = 1000 мкл * 5 * 24 = 120000 а * 120000 0,5 = 500 мкл * 5 * 24 = 60000 а * 60000 Норма лейкоцитов до 2000000/сут. Норма эритроцитов 1000000. Цилиндров – 40000. Лейкоциты - 2 * 109 на литр Эритроциты – 1 * 109 на литр Расчет по формуле: Q = V/(t*5), где: Q – количество мочи (в мл), выделенное за 12 минут, V – общий объем собранной мочи (в мл), t – время (в часах), за которое собрана моча, 5 – число для расчета объема мочи, выделенной за 12 минут. |