Картирование генов (gene mapping)
Скачать 318.5 Kb.
|
Этиология заболеванияназвание, классификация Микоплазмы – единственные из всех прокариот ЛИШЕНЫ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ антибиотики пенициллинового ряда на них не действуют .
Род Mycoplasma включает 69 видов. Патогенным для человека является 1 вид M. pneumoniae Условно-патогенные для человека 3 вида M. hominis, M. fermentes, M. arthritidis. Род Ureaplasma включает 2 вида. Патогенным для человека является 1 вид U. urealyticumя морфологические особенности Сравнительно небольшого размера, ПОЛИморфные. При микроскопировании имеют вид овоидных, круглых или удлинённых клеток, а также нитевидных образований. Самые мелкие клетки проходят через бактериальные фильтры. такое морфологическое разнообразие объясняется отсутствием клеточной стенки, вместо которой микоплазмы окружены трёхслойной мембраной. Большинство микоплазм НЕПОДВИЖНЫ. РАЗМНОЖАЮТСЯ несколькими путями: 1) бинарным делением 2) почкованием 3) фрагментированием нитевидных форм на дочерние элементы. тип дыхания и питания факультативные анаэробы, хемоорганотрофы антигенные свойства Трёхслойная мембрана микоплазм содержит видоспецифические антигены, определение которых используется для дифференциации 69 видов этого рода. Наиболее специфический метод серологической идентификации микоплазм - тест угнетения роста - т.е. подавление размножения микроорганизмов на питательной среде , куда внесена гомологичная для данного вида иммунная сыворотка. Другие серологические реакции (ИФ, РСК, РПГА) не столдь точны. Уреаплазмы отличаются от микоплазм по антигенным свойствам: у них в большей степени выражена типовая специфичность, пр: вид Ureaplasma urealyticum представлен 14 сероварами. ферментативные свойства и токсинообразование Неспособны к синтезу стеринов, который необходим для их роста. Главный источник энергии для большинства микоплазм – глюкоза или аргинин. Биохимические свойства позволяют выявлять как родовые, так и видовые признаки микоплазм: для представителей рода Mycoplasma характерно расщепление глюкозы, маннозы, аргинина, желатина, казеина. для представителей рода Ureaplasma характерен гидролиз мочевины этот признак используется при построении дифференциально-диагностических сред, которые содержат в качестве индикатора гидролитического расщепления мочевины СУЛЬФАТ МАРГАНЦА – тогда уреаплазмы в отличие от представителей рода Mycoplasma дают коричневые колонии. устойчивость в окружающей среде Во внешней среде микоплазмы быстро погибают, т.к. очень чувствительны к изменению осмотического давления , рН среды, повышению температуры, действию ультрафиолетовых лучей, дезинфицирующих веществ. культуральные свойства Растут на искусственных питательных средах с ТРИПСИНОМ и добавлением СЫВОРОТКИ и углеводов. Т.к. микоплазмы лишены клеточной стенки, то они растут только в изотонических и гипертонических средах. На плотных средах через несколько суток образуются очень мелкие колонии, напоминающие яичницу-,,глазунью” – круглые с куполообразным врастающим в среду центром и плоской просвечивающей периферической зоной. Наряду с питательными средами для культивирования микоплазм можно использовать культуры тканей. Патогенез (механизм развития) Жизнедеятельность микоплазм происходит в организме животных и человека. Многие виды являются сапрофитами и обитают в полости рта, ЖКТ. Некоторые патогенны для животных и только единичные виды вызывают заболевания у человека:
источник микоплазм, способных вызывать заболевания человека больные люди факторы и пути передачи M. pneumoniae – ВОЗДУШНО-КАПЕЛЬНЫЙ. Заражение происходит при близком и длительном контакте – это связано с малой устойчивостью микоплазм в окружающей среде. Инфекции, вызываемые M. pneumoniae, широко распространены во всех странах мира. Факторы патогенности Микоплазмы и уреаплазмы способны вызывать агглютинацию эритроцитов животных разных видов. В основе их патогенетического действия – уникальные свойства мембранного паразитирования: тесный контакт мембран микроорганизма с клетками эпителия или других тканей с помощью особых концевых структур липопротеиновой природы. Эти структуры взаимодействуют с рецепторами клеток микроорганизма. При этом липидные компоненты мембран микоплазм диффундируют в мембрану клетки, а холестерин клетки макроорганизма поступает в мембрану микоплазм. Заканчивается этот процесс либо откреплением микоплазм от клетки либо поглощением их клеткой путём фагоцитоза. Если произошёл фагоцитоз, то микоплазмы размножаются внутриклеточно – этому способствуют специальные ферментные системы данной группы бактерий. В составе фагоцитирующих клеток микоплазмы из первичного очага заносятся в разные органы, а также длительно персистируют в организме. Токсинов микоплазмы НЕ ВЫДЕЛЯЮТ. Выделяют слаботоксические продукты обмена, которые оказывают неблагоприятное воздействие на мембраны поражённых клеток только в силу тесного контакта с этими микрорганизмами. Подобный характер мембранного и внутриклеточного паразитирования приводит к тому, что микоплазмоз приобретает хроническое или латентное течение, а анетигенная мимикрия, присущая возбудителю, создаёт для этого дополнительные условия. Микоплазмы способны стимулировать пролиферацию окружающих их клеток макроорганизма. Благодаря этому они способствуют непрямому повреждению тканей, вызывая усиление клеточных иммунных реакций (ГЗТ), а также повышая чувствительность клеток к вирусам, т.к. вирусы интенсивно размножаются именно в делящихся клетках.Могут возникать бессимптомные формы микоплазмоза, нередки сочетания микоплазмоза с респираторными вирусными инфекциями. Условно-патогенные микоплазмы вызывают заболевания у лиц с иммунодефицитными состояниями. Это эндогенные инфекции, вызванные ассоциациями микоплазм с другими микроорганизмами. Особенно тяжело протекает микоплазменная инфекция в детском возрасте. У детей M. pneumoniae вызывает поражениие органов дыхания и нервной системы. Часто – генерализация процесса с развитием патологических очагов в других внутренних органах. У детей дошкольного и младшего школьного возраста 10-20% пневмоний имеют микоплазменную этиологию. Велика роль патогенных микоплазм в развитии внутриутробных инфекций плода. ИммуногенезРанняя ответная иммунная реакция – КИО Позже – развивается ГИО: 1) сывороточные антитела 2) SIgAслизистых оболочек по месту локализации возбудителя. Продосжительность приобретённого иммунитета зависит от интенсивности и формы иммунного процесса. Пр: микоплазменные пневмонии вызывают формировании выраженного КИО и ГИО на 5 – 10 лет. Методы лабораторной диагностикиНаиболее эффективна – серодиагностика с помощью РСК, ИФА, РПГА. Разрабатываются методы регистрации КИО при микоплазмозе. Для ранней диагностики используют ИФА мазков из бронхиальных и носоглоточных смывов. Специфическая терапия и специфическая профилактикаЭти микроорганизмы, лишённые клеточной стенки, Устойчивы к пенициллину Чувствительны к антибиотикам тетрациклинового ряда, некоторые – к эритромицину. Общая профилактика – своевременное выявление больных микоплазмозом и их изоляция. Вакцины не разработаны. Микрофлора воды Вода является естественной средой обитания многих микробов. Основная масса микробов поступает из почвы. Количество микробов в 1 мл воды зависит от наличия в ней питательных веществ. Чем вода сильнее загрязнена органическими остатками, тем больше в ней микробов. Наиболее частыми являются воды глубоких артезианских скважин, а также родниковые воды. Обычно они не содержат микробов. Особенно богаты микробами открытые водоемы и реки. Санитарно-микробиологическнй анализ питьевой Отбор пробы воды Для отбора проб воды используют специально предназначенную для этих целей одноразовую посуду или емкости многократного применения, изготовленные из материалов, не влияющих на жизнедеятельность микроорганизмов. Емкости должны быть оснащены плотно закрывающимися (силиконовыми, резиновыми или из других материалов) пробками и защитным колпачком (из алюминиевой фольги, плотной бумаги). Многоразовая посуда, в том числе пробки, должны выдерживать стерилизацию сухим жаром или автоклавированием. Пробу отбирают в стерильные емкости с соблюдением правил стерильности. Емкость открывают непосредственно перед отбором, удаляя пробку вместе со стерильным колпачком. Во время отбора пробка и края емкости не должны чего-либо касаться. Ополаскивать посуду запрещается. При исследовании воды из распределительных сетей отбор проб из крана производят после предварительной его стерилизации обжиганием и последующего спуска воды не менее 10 минут при полностью открытом кране. Если отбирают воду после обеззараживания химическими реагентами, то для нейтрализации остаточного количества дезинфектан-та в емкость, предназначенную для отбора проб, до стерилизации вносят натрий серноватистокислый в виде кристаллов или концентрированного раствора из расчета 10 мг на 500 мл воды. После наполнения емкость закрывают стерильной пробкой и колпачком. Отобранную пробу маркируют и сопровождают актом отбора проб воды с указанием названием пробы, места забора, даты (год, месяц, число, час), цель исследования, куда направляется проба для исследования, подпись лица, взявшего пробу. Хранение и транспортировка проб воды К исследованию проб в лаборатории необходимо приступить как можно быстрее с момента отбора. Доставка проб осуществляется в контейнерах-холодильниках при температуре 4—10°С. В холодный период года контейнеры должны быть снабжены термоизолирующими материалами, обеспечивающими предохранение проб от промерзания. При соблюдении указанных условий срок начала исследований от момента отбора проб не должен превышать 6 часов. Выполнение анализа При исследовании воды на выходе с водопроводных сооружений и в распределительной сети необходимо анализировать 3 объема по 100 мл. Точно отмеренный объем воды фильтруют через мембранные фильтры с соблюдением вышеуказанных требований. Фильтры помещают на среду Эндо, ставят в термостат вверх дном и инкубируют посевы при температуре (37 + 1)°С в течение 24 + 2 часов. Учет результатов Результат считается отрицательным, если на фильтрах вообще не выросли колонии или выросли колонии с неровными краями и поверхностью (пленчатые, губчатые, плесневые, прозрачные, слизистые). При сливном росте на всех фильтрах проводят рассев на среде Эндо для получения изолированных колоний обычными бактериологическими методами. Вычисление и представление результатов Результат анализа выражают числом колоний образующих единиц (КОЕ) общих колиформных бактерий в 100 мл воды. Для подсчета результата суммируют число колоний, подтвержденных как общие колиформные бактерии, выросших на всех фильтрах, и делят на 3. |