Контрольные вопросы для поготовки к итоговым занятиям. Даны современные методы диагностики многих инфекций. Сборник предназначен для студентов медицинских вузов, преподавателей и практикующих специалистов
 Скачать 1.8 Mb.
|
|
3 биовара: - gravis тяжелый) – вызывает тяжелое заболевание с эпидемической вспышкой. Находится в R – форме. На бульоне дает зернистый осадок и пленку. На плотных средах образуют плоские матовые колонии с радиальной исчерченностью и изрезанными краями (цветок маргаритки. - mitis легкий) – вызывает легкие спорадические заболевания. Колонии 1-2 мм в диаметре, гладкие, блестящие (S- форма, интенсивно- черные. На бульоне – равномерное помутнение - intermedius промежуточный) – колонии мелкие, до 1 мм. Переходит в R-S форму. Серологическая связь между тремя биоварами отсутствует. Биохимические свойства. 1. Все три бивара имеют фермент цистиназу – расщепляют цистин с образованием сероводорода. При посеве уколом в столбик агара образуется темный следи бурое облачко походу укола. Дифтероиды и ложнодифтерийная палочка – тест отрицательный. 2. Ферментируют глюкозу, галактозу, мальтозу до кислоты без газа. 3. Вариант гравис расщепляет крахмал. 4. Мочевину не разлагают. Уреазная активность имеется у ложнодифтерийных палочек. 5. Индол не образуют. Резистентность. С – гибель через 10-15 минут С – через 1 мин. Устойчивы к низким температурам, хорошо выдерживают высушивание. Долго сохраняют жизнеспособность в слюне, слизи, пыли, в виде мелкодисперсного аэрозоля – до 2 сут. Дезинфицирующие вещества в обычных концентрациях убивают в течение нескольких минут. Факторы патогенности 1. Адгезия, колонизация – за счет компонентов клеточной стенки и фимбрий. 2. Инвазия - ферменты гиалуронидаза, нейроминидаза, протеаза, фибринолизин. Способствует распространению в глубоко расположенные органы и как следствие - бактеримия (без клиники. Эти факторы помогают персистировать Св организме не проявляя своих своиств. 3. Белковая поверхностная микрокапсула. Отвечают за инвазию и защиту от фагоцитоза и умеренных бактериофагов. 4. Корд-фактор – нарушает процессы клеточного дыхания и фосфорилирования, что ведет к гипоксии и гибели клетки. 5. Токсичный гликопептид (трегалозо 6,6'- дикоринемиколат) находится в клеточной стенке – разрушает клетки ткани вместе внедрения возбудителя и макрофаги. 85 6. Дифтерийный экзотоксин – главный фактор патогенности. Синтезируется в виде неактивного предшественника в виде единой полипептидной цепи с ММ. 60КД. Активизируется собственной бактериальной протеазой, которая разрезает полипептид на 2 пептида, связанных между собой дисульфидными мостиками. Фракция В выполняет акцепторную функцию распознает рецептор на клетке, связывается сними формирует трансмембранный канал, через который фракция А проникает в клетку. Пептид А – фермент, отщепляющий аденозинтрифосфатрибозу от НАД, переносе на гистидиновый остаток EF-2 (фактор элонгации, что ведет к прекращению белкового синтеза. Синтез токсина контролируется конвертирующим фагом. Способность к токсинообразованию проявляют лишь лизогенные штаммы С. diphtheria, инфицированные бактериофагом (фаг, несущим ген. Нетоксигенные штаммы Смогут быть превращены в токсигенные в естественных и искусственных условиях. Если бактериальная клетка теряет ген, то она перестает быть и токсигенной и лизогенной. Методы определения токсигенности. 1. Реакция преципитации в агаре. На чашку с питательным агаром наслаивают полоску фильтровальной бумажки пропитанную антитоксином антитоксической сыороткой). По краям от полоски засевают культуру бляшками. От полоски в агар диффундирует антитоксин, от бляшек - токсин. Вместе их соединения выпадает белая линия преципитации - культура токсигенная. Учет через часов. 2. Биопроба на морских свинках. в/к – дермонекротическая проба п/к – смертьот повышенного АД. На вскрытии - увеличение надпочечников с кровоизлиянием в мозговой слой. 3. Заражение куриных эмбрионов. Letalis. 4. Заражение культуры клеток – ЦПД. 5. Метод ДНК- зонда. 6. Метод ИФА. 7. ПЦР-реакция для вывления tox – гена. Эпидемиология. Источник инфекции больной, выздоравливающий, бактерионоситель. Наибольшее значение имеют больные с атипичными, стертыми формами. Особая роль - здоровые носители. Они являются резервуаром сохранения микроорганизма, если нет эпидемий. Причина длительного бактерионосительства: наличие антитоксического и отсутствие антимикробного иммунитета. Путь передачи воздушно-капельный, воздушно-пылевой, контактно- бытовой (белье, посуда, игрушки. Патогенез. Входные ворота определяют клиническую картину. Различают следующие формы дифтерия зева, носа, гортани, уха, глаз, половых органов, кожи, раны. Инкубационный период сут. 86 Заболевание начинается сформирования спецмфмческой, тесно связанной с подлежащими тканями пленкой вместе внедрения возбудителя. Пленка состоит из фибрина, эпителия, лейкоцитов и коринебактерий. Возбудитель в подслизистый слой не проникает. В ткани проникает экзотоксин, что ведет к отеку слизистой и клетчатки, из-за повышения сосудистой проницаемости. Клиника. - Первичный круп. Отек распространяется на гортань и бронхи, вызывает асфиксию и леталис. Смерть от крупозного воспаления раньше составляла 50-6-%, в настоящее время- 3-6%. - Экзотоксин, циркулирующий в крови избирательно поражает сердечную мышцу, надпочечники, нервную ткань. Смерть от отстрого токсического миокардита, тотального периферического полиневрита, коллапса, ИТШ. Иммунитет. После перенесенного заболевания стойкий, прочный, иногда пожизненный. Носит антитоксический и антимикробный характер. После прививочный иммунитет антитоксический. Антитела не препятствуют формированию бактерионосительства. Определение напряженности иммунитета 1. Проба Шика. Ребенку в/к вводится дифтерийный токсин в дозе 1/40 DLM для морской свинки весом 250 грамм. При наличии в крови 0,03 АЕ антитоксических единиц) и больше - проба отрицательная, ребенок невосприимчив к инфекции. Если менее 0,03АЕ, нейтрализация токсина антитоксином не происходит, образуется отек - ребенка нужно прививать. 2. Определяют титр антитоксических антител в РПГА с антигенным эритроцитарным диагностикумом. Минимальный защитный титр 1:40- 1:320. Диагностика. Бактериологический метод. Обследуются - лица с острым воспалительным процессом ВДП; - контактные с больным дифтерией или носителем токсигенного штамма - лица, вновь поступающие на работу учреждения для детей, ЛПУ. Материал (слизь из зева и носа) берут двумя сухими тампонами. Делают посев на питательные среды и мазок на стекле с окраской по Грамму, метиленовой синькой, ЛСМ. Окончательный чет результатов через 96 часов. Лечение. - антибиотики. Действуют только на микроорганизм, ноне на токсин - антитоксическая противодифтерийная лошадиная сыворотка. (ИБП п - противодифтерийный иммуноглобулин человеческий для в/в (?). Профилактика. вакцина АКДС (ИБП п. 6.4); -АДС-анатоксин (ИБП п. 6.6); -АД-М-анатоксин (ИБС п. 6.5); вакцина «Тетракок»- содержит дифтерийный, столбнячный анатоксины, инактивированную полиомиелитную вакцину х типов, коклюшные микробы (ИБС п. 6.9). 87 Лекция № 12.2. Микробиология коклюша. Род Bordetella. Коклюш – о. инфекционное заболевание, сопровождающееся воспалением гортани, трахеи и бронхов. Bordatella pertus- возбудитель коклюша, B. р- паракоклюша - антропонозы. B. bronchiseptica – заболевания у собак, кошек, кроликов, редко у человека по типу ОРВИ. Морфология. Мелкие коккобактерии. Толуидиновым синим окрашиваются биполярно (метахроматические гранулы. Имеется капсула. Строгие аэробы, рост ускоряется в присутствии повышенного СО. Неустойчивы во внешней среде. Хемоорганотрофы, нуждаются в никотиновой кислоте, цистеине, метионине. Углеводы не ферментируют. Культуральные свойства. На агаре Борде – Жангу (30-50% крови, КУА 88 (казеиново-угольный агар) на 2-3 сутки выростают мелкие колонии, напоминающие капельки ртути или жемчужины, маслянистой консистенции, легко снимающиеся с поверхности среды – S- колонии. Гемолиз #. При стериомикроскопии виден узкий луч света, отходящий от центра колонии. На жидких средах (20% кровяной бульон) – помутнение, пленка со спускающимися вниз отростками. Антигенные свойства. Общие (родовые) Аг – коклюшные и паракоклюшные. Видовые АГ: фактор 1 для Bordatella pertussis, 12 – B. bron- chiseptica. 14 – B. р. Эпидемиология. Путь передачи – воздушно-капельный. Факторы патогенности B. pertussis. - гистаминсенсибилизирующий фактор - лимфоцитозстимулирующий фактор - термолабильный токсин цитоплазмы - фактор, активизирующий островки - микроворсинки – адгезия к мерцательному эпителию ВДП; - гемагглютинин – адгезия и агглютинация эритроцитов - коклюшный токсин, в состав входит эндотоксин (лимфоцитоз, выработка инсулина, торможение гипергликемии, повышает цАМФ, что подавляет активность макрофагов - цитотонин – повреждение мерцательного эпителия. Клиника. И.п. 6-20 сут. Стадии 1 – катаральная, напоминает ОРВИ, слабый упорный кашель. Длится 1-2 нед. 2 – пароксизмальная, тяжелая. Длится 2-4 нед. Повторные приступы спастического кашля, иногда до остановки дыхания. После приступа – инспираторный стридор. 3 – выздоравления, длится 4-6 нед. Профилактика Вакцина АКДС (ИБП п. 6.4). Содержит убитые бактерии 1 фазы, коклюшный токсин, агглютиногены и Аг капсулы. Лекция № 13. Микобактерии. Лекция № 13.1. Микробиология туберкулеза. Mycodacterium tuberculosis. Семейство – Mycobacteriaceae Род - Mycodacterium 5 групп микобактерий 1 группа - патогенные, относятся ММ, ММ, МАМ. М. lepraemurium. Туберкулез - бугорок - острое инфекционное заболевание человека и животных, характеризуется образованием специфических воспалительных изменений, часто имеющих вид маленьких бугорков, с преимущественной локализацией в легких и лимфоузлах и имеющие наклонность к хроническому течению. 89 Заболевание известно с древних времен. В развитии болезни играет роль социальные условия. Возбудители распространенны в природе встречаются в почве, воде, организме тепло - и холоднокровных. Открыт Р. Кохом в 1882 г. Возбудители туберкулеза ММ возбудитель туберкулеза крупного рогатого скота- 5-20%, вызывают тяжелую, быструю форму с (чахотка М. avium – возбудитель туберкулеза птиц - 3% заболеваний. Животные болеют Ми М. bovis. Люди заражаются через пищевые продукты. Низкая температура заморозки повышает вирулентность м/о. Пастеризация не уничтожает МБТ. Статистика по заболеваемости туберкулезом. С 1995 года во всем мире объявлена пандемия по ТБ. В 2007 году в мире насчитывалось 13,7 миллионов зарегистрированных случаев хронического активного туберкулёза; 9,3 миллиона новых случаев заболевания 1,8 миллиона случаев смерти, главным образом в развивающихся странах. В 2007 г. в России зарегистрировано 117 738 больных впервые выявленным туберкулёзом в активной форме (82,6 на 100 тыс. населения, что на 0,2 % выше, чем в 2006 г. Среди всех впервые выявленных больных туберкулёзом, бактериовыделители составили 40 %. Заболеваемость детей до 14 лет – 16,1 на 100 тыс. детей данной группы, а подростков - 15-17 лет – 33,5 на 100 тыс. также, как в Руанде, Бангладеш, Афганистане. России смертность от туберкулёза за 2007 год составила 18,1 человека на 100 тысяч жителей (на 7 % ниже, чем в 2006 г, таким образом, в год умирает от туберкулёза около 25 000 человек (в среднем по Европе смертность от туберкулёза приблизительно в 3 раза меньше. - Африка – 363 случая на 100 тыс. населения 28% случаев всех заболеваний. - Азия – Бангладеш, Индия Индонезия Китай Филиппины- приходится половина всех новых случаев заболеваний. - Китай – 250- 300; - Туркмения, Таджикистан – 200; - Нью- Йорк – 500; - Япония – 30; - Австралия до 40; Прогноз ВОЗ к 2020 году около 1 млрд. будут инфицированы МБТ, 200 млн. заболеют. Заболеваемость тропическими болезнями, ОКЗ, СПИДом в сумме меньше, чем больных с. Морфология. - грам (+), прямые или изогнутые палочки - в старых культурах образуют нитевидные формы - зерна Муха - кокковидные формы - кислотостабильные гранулы, состоящие из метофосфата, могут распологаться вне- и внутриклеточно; - под влиянием химиопрепаратов образуют L- и фильтрующиеся формы, 90 сохраняющие инфекционность, что ведет к длительной персистенции бактерий в организме - споры, капсула, подвижность – отсутствуют - строгие аэробы, температурный оптимум С, рН 7,0-7,5, диапазон – 4,5- 8,0. Время генерации 14-18 часов, рост стимулируется 0,5% глицерином и 5- 10% СОМ короткие, толстые палочки, в отличие от М. tuberculosis патогенны для кроликов при в/в заражении вызывают гибель от генерализованного туберкулеза через 3-6 недель (время генерации больше. Биологические свойства Характерно высокое содержание липидов - до 40% сухого остатка клетки. Обнаружены 3 фракции липидов - фосфатидная (растворимая в эфире) - жировая (растворимая в эфире и ацетоне) - восковая (растворимая в эфире и хлороформе) В составе липидов имеются специфические кислотоустойчивые жирные кислоты - туберкулостеариновая - фтиоидная - миколовая - миколиновая Высокое содержание липидов определяют свойства с 1. Устойчивость к спиртам, кислотам, щелочам 2. Трудная окрашиваемость. Клеточная стенка имеет строение как у Грам +, но при окраски по Грамму бесцветные, т.к. не воспринимают спирты и кислоты. Используют метод Циля-Нильсона - с окрашиваются в рубиново- красный цвет, форменные элементы и другие м/о в синий. 3. Устойчивость к высушиванию и действию солнечных лучей. Рассеянный солнечный свет убивает на 8-10 сутки. Кипячение мокроты – гибель палочек через 5-7 мин до 1 часа, в высохшей мокроте сохраняются несколько недель. 4. Устойчивость к действию обычных дезинфектантов: 5% фенол – гибель через 6 часов, 0,05% р-р бензилхлорфенола- 15 минут, 5% хлорамин - 30 мин, 10% лизол, 5% карболовая кислота – от 6 до 12 часов. 5. Высокая гидрофобность. На жидких средах на 5-7 сут образуют пленку, которая со временем утолщается, бульон остается прозрачным на агаре - на 14-40 сутки сухой чешуйчатый налет или бородавчатые образования с приятным запахом, плохо смачиваются водой, плохо снимаются с агара. 6. Патогенные факторы -фосфатидная фракция - вызывает образование специфической тканевой реакции с образованием эпителиоидных клеток. жировая фракция- вызывает образование туберкулоидной реакции. Связано с действием фтиоидной кислоты. - восковая фракция (связана с миколовой кислотой) – образование гигантских клеток Пирогова – Ланханса. - главный фактор патогенности – токсический гликопептид - тригалоза 91 6,6´ димиколат (корд- фактор Оказывает токсическое действие на ткани и защищает от фагоцитоза - блокирует окислительное фосфорилирование в митохондриях макрофагов. Микобактерии с лишенные корд – фактора, являются непатогенными. При заражении корд – фактором белых мышей, гибель наступает через 1-2 недели. 7. Липиды в ассоциации с белками вызывают ГЗТ. Выявляют с помощью туберкулиновой пробы. По степени патогенности делятся на 2 группы патогенные и условно- патогенные сапрофиты. Для отличия используют 3 признака I. скорость и условия роста. 1. Быстрорастущие (18 видов) – видимые колонии появляются ранее 7 дня. 2. Медленнорастущие (20 видов) – колонии появляются позже 7 сут. 3. Не растущие на питательных средах или требующие особые условия культивирования (лепра, лепрамуриум). II. способность к пигментообразованию/ 1. Фотохромогенные – образуют лимонно- желтый пигмент при инкубации на свету. 2. Скотохромогенные - оранжево- желтый пигмент при инкубации в темноте. 3. Нефотохромогенные – вне зависимости отсвета или не образуют пигмент или имеют светло- желтую окраску. III. способность образовывать никотиновую кислоту (ниациновая проба. М. tuberculosis - образует никотиновую кислоту (отличие от прочих МБ). ММ, ММ, М. avium - медленнорастущие, нефотохромогенные. Культуральные свойства Питательные среды глицериновые, картофельные с желчью, яичные среда Левенштейна- Иенсена). Метод Прайса - культивирование мазка мокроты на стекле в сосуде с цитратной кровью. Мазок предварительно обработывают 5% серной кислотой для уничтожения сопутствующей микрофлоры. При наличии корд - фактора – рост палочек в виде серпантинообразных кос, обусловленный сближением клеток в микроколониях. Окраска мазка по Ц-Н. Антигенная структура. Каждый вид однороден, сильно отличается от других видов. Вызывает образование антиполисахаридных, антифосфатидных, антипротеиновых антител. Живые и убитые МБТ индуцируют развитие ГЗТ. Лабораторные животные. Наиболее чувствительные к М. tuberculosis морские свинки. При любом способе заражения – генерализованная инфекция, гибель наступает через 4-6 нед. При п/к введении через 1,5-2 нед формируется инфильтрат, переходящий в язву незаживающую до гибели животного. Регионарные л\у увеличиваются, уплотняются, подвергаются казеозному 92 распаду, в печени, легких, селезенке формируются многочисленные бугорки, в которых содержится МБТ. Эпидемиология. Источник инфекции – больные открытыми формами ТВС (ВК+), реже – больные животные. Открытая форма - есть очаг с казеозным распадом и сообщением с внешней средой через бронхи, свищи, мочевыводящие пути. Может выделятся с испражнениями. Инкубационный период - от момента заражения до проявления заболевания, иногда это вся жизнь. Влет инфицированность. Входные ворота легкие – воздушно- пылевой - воздушно- капельный способ алиментарный – входные ворота кишечник. М передается от больных животных, чаще встречается у детей контактный (у доярок от больных животных трансплантационный (L- формы проходят через ворсинки хориона. Патогенез. Зависит от пути заражения. Первичный очаг может быть в легких аэрогенный путь) или в мезентериальных л/у (алиментарный путь. Ингалированные микобактерии фагоцитируются альвеолярными и легочными макрофагами. Характерен незавершенный фагоцитоз (действие корд- фактора. Формируется первичный аффект в виде бронхопневмонического фокуса из которого возбудитель пол сосудам проникает в регионарные л/у. Бронхопневмонический фокус + лимфангоит + лимфаденит – образуется первичный туберкулезный комплекс с развитием гранулем. В центре бугорка находятся гигантские клетки Пирогова- Ланханса, содержащие возбудитель. Центр бугорка окружен эпителиоидными клетками (основная масса бугорка, по периферии – лимфоидными клетками, плазмоцитами, мононуклеарами. Судьба первичного туберкулезного комплекса. - при снижении общей резистентности очаг увеличивается, подвергается творожистому распаду, некрозу, происходит генерализация процесса гематогенным, лимфогенным, бронхогенным путем. - при доброкачественном течении первичный очаг окружается соединительнотканной капсулой, сморщивается, пропитывается солями кальция (петрификация), формируется очаг Гона. Иммунитет инфекционный нестерильный, т.к. МБТ могут долгие годы сохранять жизнеспособность. Для клиники характерно чередование периодов выздоровления после химиотерапии и частых рецидивов. В организме МБТ сохраняются в виде L- форм, меняется иммунный статус больного. формы маловирулентны, без лечения переходят в основную форму и приобретают факторы вирулентности. Биологического излечения не наступает. Особенности иммунитета. 93 - антитела не играют решающую роль в формировании приобретенного иммунитета, их высокий титр говорит о тяжести процесса. В составе ЦИК удаляют АГ из организма. - основная роль – клеточный иммунитет. Феномен Коха: Опытна месте заражения морской свинки живыми бактериами через 10-14 дней образуется инфильтрат, затем незаживающая до самой смерти язва идет генерализация процесса и гибель животного. Опыт № 2- при заражении живыми бактериями через неделю после введения БЦЖ, реакция идет быстрее на месте нового заражения через 2-3 дня формируется воспаление, некроз, язва заживает, распространение возбудителя не наступает. Те. сформировалась сенсибилизация (ГЗТ). Организм связывает новую дозу патогена и удаляет. Клетки – эффекторы Т- лимфоциты при участии белков МНС I класса. Появление ГЗТ говорит о формировании приобретенного постинфекционного (поствакцинального) иммунитета. |