ФС_(проект)_Марены_корневища_и_корни (3). Копейная статья марены корневища и корни фс rubiae rhizomata et radices
 Скачать 47.94 Kb.
|
|
КОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Марены корневища и корни ФС Rubiaerhizomata etradices Взамен ГФ XI, вып. 2, ст. 76 Собранные весной в начале вегетации или осенью в период плодоношения, тщательно очищенные от земли и высушенные корневища и корни дикорастущих и культивируемых многолетних травянистых растений марены красильной - Rubia tinctorum L. и марены грузинской - Rubia iberica (Fish. ex DC). С. Koch, сем. мареновых - Rubiaceae. ПОДЛИННОСТЬ Внешние признаки. Цельное сырье. Корневища и корни продольно-морщинистые, цилиндрические, различной длины, толщиной 2 -18 мм, обычно с отслаивающейся шелушащейся пробкой. У корневищ в центре обычно имеется полость. Цвет корневищ и корней снаружи красновато-коричневый, на изломе видна красновато-коричневая кора и оранжево-красная древесина. Запах слабый, характерный. Вкус водного извлечения сладковатый, затем слегка вяжущий и горький. Измельченное сырье. Кусочки корневищ и корней различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм. Цвет красновато-коричневый, оранжево-красный. Запах слабый, характерный. Вкус водного извлечения сладковатый, затем слегка вяжущий и горький. Микроскопические признаки. Цельное сырье. Измельченное сырье. На поперечном срезе корня (или корневища) видно, что пробка состоит из клеток с очень тонкими оболочками. В некоторых клетках корковой паренхимы содержатся рафиды оксалата кальция. Линия камбия узкая. Древесина нелучистая. Сосуды древесины расположены группами, клетки древесной паренхимы - радиальными рядами. Все элементы древесины одревесневшие. В корневище центральная часть занята крупными клетками сердцевины с утолщенными пористыми стенками; здесь также встречаются рафиды оксалата кальция.  Рис. Марены корневища и корни: поперечный срез: 1 - пробка; 2 - кора; 3 - камбий; 4 - древесина; 5 - рафиды оксалата кальция (280×). Люминесцентная микроскопия. При рассмотрении поперечного среза корня (без включающей жидкости) в УФ-свете должна быть видна тусклая, почти черная пробка. Кора должна иметь интенсивное желтовато-оранжевое или красновато-оранжевое свечение (антраценпроизводные). Оболочки древесных сосудов и трахеид яркие зеленовато-голубые, содержимое клеток древесной паренхимы желтовато-оранжевое или красновато-оранжевое. В отдельных сосудах, на месте тиллов, встречаются сростки кристаллов с очень яркой желтовато-оранжевой или красновато-оранжевой люминесценцией (руберитриновая кислота). В корневище сердцевина имеет такое же свечение, как и кора. Определение основных групп биологически активных веществ Тонкослойная хроматография На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором на алюминиевой подложке размером 10 × 10 cм наносят в виде полосы длиной 2 см 15 мкл испытуемого раствора (водный слой 2 раза по 20 мл, предварительно профильтрованный через бумажный фильтр, раздел «Количественное определение»). Пластинку с нанесенной пробой сушат при температуре около 100 С в течение 7 мин и помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин смесью растворителей спирт 96 % - хлороформ - толуол - уксусная кислота ледяная (15:15:10:10), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 – 90 % длины пластинки от линии старта ее вынимают из камеры, сушат при температуре около 100 С в течение 3 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм. На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться 2 зоны адсорбции с флуоресценцией красновато-оранжевого или желто-оранжевого цвета (антраценпроизводные); допускается обнаружение других зон адсорбции. При взаимодействии эфирных извлечений с раствором натрия гид- роксида 30 % и щелочно-аммиачным раствором (раздел «Количественное оп- ределение») должно наблюдаться красно-фиолетовое окрашивание (антра- ценпроизводные). ИСПЫТАНИЯ Влажность. Цельное сырье. Измельченное сырье – не более 13 %. Зола общая. Цельное сырье. Измельченное сырье –не более 10 %. Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье. Измельченное сырье – не более 4 %. Измельченность сырья. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, – не более 5 %; измельченных частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,25 мм, – не более 5 %. Посторонние примеси Других частей растения (стеблей, листьев и др.). Цельное сырье – не более 1,5 %. Органической примеси. Цельное сырье, измельченное сырье – не более 1 %. Минеральной примеси. Цельное сырье, измельченное сырье – не более 1 %. Тяжелые металлы. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота». Количественное определение. Связанные производные антрацена. Цельное сырье, измельченное сырье: связанных производных антрацена – не менее 3 %. Приготовление растворов. Щелочно-аммиачный раствор. 50 г натрия гидроксида растворяют при перемешивании в 870 мл воды. После охлаждения раствора прибавляют 80 мл аммиака раствора концентрированного 25 % и перемешивают. Раствор годен в течение суток. Определение суммы производных антрацена. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,25 мм. Около 0,1 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 200 мл, приливают 7,5 мл ледяной уксусной кислоты, 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и нагревают с обратным холодильником на кипящей водяной бане при слабом кипении в течение 15 мин; при этом колбу периодически встряхивают вращательным движением, смывая появляющийся на ее стенках осадок. Затем колбу охлаждают холодной водой и проводят экстракцию эфиром 3 раза по 30 мл при нагревании на водяной бане с обратным холодильником (температура не выше 35 °С) в течение 15 мин с момента закипания эфира. После охлаждения колбы объединенное эфирное извлечение фильтруют через вату в делительную воронку вместимостью 250 мл. Эфирное извлечение промывают 2 раза по 20 мл воды, водный слой (2 раза по 20 мл) используют для испытания по показателю «Подлинность». При непрерывном охлаждении к эфирному извлечению приливают малыми порциями сначала 15 мл натрия гидроксида раствора 30 %, затем 25 мл щелочно-аммиачного раствора. Затем, не переставая охлаждать, смесь встряхивают в течение 5 мин, окрашенный раствор собирают в мерную колбу вместимостью 500 мл. Экстракцию щелочно-аммиачным раствором повторяют несколько раз до прекращения окрашивания щелочного раствора. К объединенному извлечению прибавляют 3 капли пергидроля, тщательно перемешивают, доводят объем раствора щелочно-аммиачным раствором до метки и перемешивают. Через 10 мин измеряют оптическую плотность полученного раствора на фотоэлектроколориметре или спектрофотометре при длине волны около 530 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм, используя в качестве раствора сравнения щелочно-аммиачный раствор. По калибровочному графику находят содержание производных антрацена в граммах в 1 мл раствора. Содержание суммы производных антрацена в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:
где C - содержание свободных производных антрацена в 1 мл раствора, найденное по калибровочному графику, в граммах; а - навеска сырья в граммах; W - влажность сырья в процентах. Определение свободных производных антрацена. Около 0,1 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 300 мл, прибавляют 50 мл эфира и нагревают на водяной бане с обратным холодильников в течение 10 мин с момента закипания эфира. Экстракцию повторяют трижды, затем колбу охлаждают и эфирные извлечения фильтруют через вату в делительную воронку вместимостью 20 мл. Воронку с эфирным извлечением охлаждают и производные антрацена извлекают 4 раза по 20 мл щелочно-аммиачным раствором, каждый раз встряхивая в течение 5 мин. Щелочной раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 1 каплю пергидроля, объем раствора доводят щелочно-аммиачным раствором до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора как указано при определении суммы производных антрацена («1»). Содержание свободных производных антрацена в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X1) вычисляют по формуле:
где C - содержание свободных производных антрацена в 1 мл раствора, найденное по калибровочному графику, в граммах; а - навеска сырья, в граммах; W - влажность сырья, в процентах. Содержание связанных производных антрацена в пересчете на абсолютно сухое сырье (в процентах X 2) вычисляют по формуле: X2 = Х - X1. Построение калибровочного графика. 50 г кобальта хлорида (CoCl2•6H2O), высушенного до постоянной массы, помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл, растворяют в 250 мл воды, прибавляют 1 мл кислоты хлористоводородной, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Полученный раствор является исходным (№ 10). Из этого раствора готовят серию разбавленных растворов (№ 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и 9), содержащих кобальта хлорида соответственно 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 и 90 мг в 1 мл, и измеряют их оптические плотности на фотоэлектроколориметре при длине волны около 530 нм. Для построения калибровочного графика на оси абсцисс откладывают концентрацию растворов, а на оси ординат - их оптическую плотность. При этом концентрации растворов кобальта хлорида выражают в соответствующих концентрациях свободных производных антрацена, пользуясь таблицей. Таблица – Соотношения содержания свободных производных антрацена, содержащего кобальта хлорида (CoCl2 · 6H2O), г/мл в растворе
Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья». Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». |