Курслекций по дисциплине в. Од. 1 Ветеринарная микробиология, вирусология
 Скачать 1.08 Mb.
|
|
Возбудители – несовершенные грибы класса Deuteromycetes, рода Aspergillus (ле- ечная плесень) Aspergillus fumigatus, flavus, A. niger. Культивируют на агаре Чапека, Сабуро, кровяном, мозговом, кукурузном агаре, МПА (рН 5,5–6,5). Гранулематозную ткань обжигают над пламенем, вырезают стерильно кусочки из середины и раскладывают их на питательную среду в чашки Петри, а экссудат засевают в пробирки со средой. Инкубируют при температуре 25°С и 37°С. На 3–5 сутки на плотных средах образуются характерные для аспергилл колонии. Aspergillus fumigatus на агаре Чапека образуют разрастающиеся колонии - ровные или шероховатые. Воздуш- ный мицелий придаёт им войлочный вид белого цвета или, позднее, зелёного. Зрелые культуры в стадии спороношения - чёрного цвета. С обратной стороны колонии бесцвет- ны или желтовато-коричневого цвета. В препаратах из культуры видны гладкие, короткие, зелёного цвета конидиеносцы. Воздушные гифы септированы и без перегородок. Колбо- образные вздутия содержат споры, находятся в верхней части гифов. Конидии тёмно- зелёного цвета, округлые, шиповатые или полушаровидной формы. Aspergillus flavus и Aspergillus niger на агаре Чапека формируют широко разрастающиеся колонии с обиль- ным спороношением. При микроскопировании обнаруживают бесцветный или светлоо- крашенный септированный мицелий. Цвет колоний зависит от массы конидий. Для подтверждения патогенности выделенных культур аспергилла ставят био- пробу. Кроликам, морским свинкам или белым мышам вводят в/в суспензию спор грибов 0,5–1х106, что вызывает развитие у них генерализованного процесса с типичным пораже- нием органов дыхания, почек, сердца. При вскрытии в органах обнаруживают множество мелких узелков с интенсивным развитием грибка. С помощью микологических исследо- ваний дифференцируют аспергиллёз от микозов, вызванных другими плесневыми гриба- ми. 102 Устойчивость. Дезинфицирующие вещества: 1,5% раствор креолина, 2,5% р-р фе- нола, 1-5% р-р хлорной извести убивают Aspergillus в течение 3 ч, 2% р-р формальдегида – через 10 минут. Патогенность. Aspergillus продуцируют термостабильный и термолабильные ток- сические вещества местного и общего действия. В организме животных выделяет протео- литические ферменты и эндотоксины. Антигенная структура. Изучена недостаточно. Антигенными свойствами облада- ет эндотоксин. Выделены корпускулярные (конидиальные и мицелярные) и растворимые (полисахаридные и белковые) антигены. Диагностика. В лабораторию направляют свежие трупы мелких животных, от крупных животных - пораженные органы или их кусочки, мокроту, яйца. При микроскопии патологический материал помещают в смесь этанола с глице- рином и водой в равных соотношениях или в физический раствор. Затем накрывают кон- трольным стеклом и микроскопируют с объективом х 40 при затемнённом поле зрения (опущен конденсор) или в иммерсионной системе (обнаруживают головку, стеригмы со спорами). Микологическое исследование. Включает: обнаружение возбудителя в патологи- ческом материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды, идентификацию возбудителя по культуральным, морфологическим и патогенным свойствам. Иммунитет. Изучен недостаточно, специфические меры профилактики не разрабо- таны. Пенициллёз - заболевание многих видов животных, характеризующееся пораже- нием кожи, слизистых оболочек. Основные возбудители: грибы рода Penicillium: Penicillium crustosum, P. glaucum, P. purpurogenum, P. rubrum, P. mycetomagenum. В лабораторию направляют поражённые участки кожи, слизистых оболочек, по- ражённые органы и ткани от трупов.Часто Penicillium выделяют из лёгких и других тка- ней при туберкулёзе и других инфекциях. Лабораторная диагностика основана на результатах микологического исследова- ния. Микологическое исследование включает обнаружение возбудителя в патологиче- ском материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды, идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим и патогенным свойствам. Микроскопируют методом "раздавленная капля" в окрашенном (по методу Грама, Циль-Нильсена) и неокрашенном виде. Культивируют посевом патологического материала на агаре Сабуро или Чапека, при температуре 18-25°С . Penicillium crustosum образуетплоские бархатистые колонии. При микроскопировании видны кисточки двух-, трёх- и многомутовчатые конидии. Конидии круглые и эллиптические. Penicillium glaucum образует колонии светло-голубые или зелёные, радиальнобо- роздчатые, быстрорастущие. При микроскопировании видны одиночные конидиеносцы с одно- или многомутовчатыми кисточками. Penicillium mycetomagenum образуеттёмно-зелёные с диффузным пигментом пу- шистые колонии, окрашивающие среду в чёрный цвет. При микроскопировании виден мицелий с конидиеносцами, на конце которых од- но-, двух-, и трёхмутовчатые кисточки. Хламидоспоры желтовато-серые. Патогенность культур определяют биопробой. Заражают кроликов, морских сви- нок, крыс, белых мышей подкожно. На месте введения культуры грибов возбудителей развивается абсцесс и формируется грануляционная ткань. 103 Устойчивость. Токсические вещества многих видов пенициллов не разрушаются температурой 180°С и УФЛ. Пораженные корма не обезвреживаются запариванием. Ток- сические вещества не разрушаются щелочами и кислотами. КАНДИДАМИКОЗ (КАНДИДОЗ) - заболевание животных и человека, характе- ризующееся поверхностным поражением кожи, слизистых оболочек ротовой полости, на- ружных половых органов, а также органов дыхания, молочных желез и других органов. Возбудители: род Candida, сем. Crytococcaceae, класс Deuteromycetes – Candida albicans, Candida tropicalis, реже Candida krusei Широко распространены в природе. Наиболее часто их выделяют с поверхности различных фруктов, ягод, овощей. Входят в состав нормальной микрофлоры организма человека и животных. Любые нарушения функций иммунокомпетентных клеток или нормального микробного ценоза приводят к возникновению заболевания. Candida albicansв основном поражает птиц: кур, гусей, уток, индеек, голубей и др. Более тяжело болеют поросята, телята, ягнята, щенки. Лабораторная диагностика основана на результатах микологического исследова- ния. Патологическим материалом служат соскобы со слизистой оболочки, содержи- мое язв, эрозий, кусочки органов. Микроскопию препаратов проводят из исходного материала. В тканях животных Candida albicans может образовывать дрожжевые клетки и ги- фы. Клеточная стенка мицелия состоит из трёх слоёв. Выделение и идентификация культуры возбудителя Из патологического материала делают посев на агар Сабуро и МПА с глюкозой в чашки Петри, инкубируют при температуре 37°С, через 24–48 ч. появляются колонии. Candida albicans через 24–48 часов образует выпуклые колонии, белого или кре- мового цвета, сметанообразной консистенции, с гладкой блестящей поверхностью и ров- ными краями. При микроскопии видны овальные или округлые дрожжевидные клетки. На 5–10 сутки поверхность колоний гладкая, матовая, края ровные или волнистые без выростов. При микроскопии видны клетки с небольшими вакуолями, с элементами псевдомицелия. Candida tropicalis через 24–48 часов образует колонии белого или серого цвета, с ровными краями, гладкой или слегка морщинистой поверхностью. При микроскопии в неокрашенных препаратах видны овальные клетки с хорошо заметными ядрами и круп- ными вакуолями, видны отдельные нити псевдомицелия. Позднее (на 3–5 сутки) обнару- живают сильно удлинённые клетки псевдомицелия, образующие колонию. Для оконча- тельной идентификации грибов рода Candida выделенную культуру высевают на жидкие питательные среды (бульон Сабуро, картофельный и кукурузный агары, а также на карто- фельный и кукурузный бульоны) и определяют культуральные признаки и цитоморфоло- гические особенности. При микроскопировании учитывают наличие псевдомицелия, тип роста на жидких средах; на агаре в чашках Петри обращают внимание на присутствие хламидоспор.На жидких питательных средах Candida albicans через 24-48 часов вызывают помутнение среды и образование рыхлого осадка на дне пробирки. Для Candida tropicalis характерны глубинный рост и образование плёнки и пристеночного кольца. Для дифференциации ви- дов грибов рода Candida определяют ферментативную активность на жидких средах Гис- са, содержащих 3% различных углеводов и индикатор Андредэ. Посевы наблюдают в те- чение 10–15 дней, учитывают кислото- и газообразование. Candida albicans ферментиру- ет глюкозу, мальтозу и сахарозу без образования кислоты и газа; лактозу – не ферменти- рует. 104 Candida tropicalis ферментирует глюкозу, мальтозу и сахарозу с образованием ки- слоты и газа; лактозу не ферментирует. Устойчивость. При воздействии высокой температуры (100°С) инактивируется че- рез 10-15 минут, сухого жара (90-110°С) в течение 20-30 минут, УФЛ - 30 минут,В воде и почве сохраняется 3-7 мес. Дезинфицирующие растворы: 5% р-р фенол и хлорамин , 10% р-р лизол, убивают через 3-6 ч. Иммунитет. Изучен недостаточно, специфические меры профилактики не разрабо- таны. |