La chromatographie distributive Распределительная хроматография Метод распределительной, или жидкостно-жидкостной, хроматографии основан на распределении вещества между двумя несмешивающимися жидкостями, подобно тому, как это происходит в многократной ступенчатой экстракции. Жидкую неподвижную фазу наносят на пористый достаточно инертный сорбент и заполняют им распределительную колонку. При пропускании жидкой подвижной фазы через колонку смесь разделяется на компоненты главным образом за счет их различной растворимости в жидкой неподвижной фазе. Обычно растворимость компонентов пробы в подвижной и неподвижной фазах, обладающих разной полярностью, сильно различается. Если растворимость пробы выше в неподвижной фазе, то время удерживания компонентов значительно возрастает. Если растворимость пробы выше в подвижной фазе, то время удерживания может быть близким к времени удерживания несорбируемого компонента. Чтобы добиться разделения, в подвижную фазу, насыщенную неподвижной, включают третий компонент, снижающий различие в полярности подвижной и неподвижной фаз. Например, к смеси из неполярного (гексан) и полярного (вода) растворителей прибавляется спирт. В нормально-фазовой распределительной хроматографии используют следующие системы: полярный растворитель (вода, спирт) фиксирован на твердом носителе – силикагеле, диатомите, целлюлозе, оксиде алюминия. Полярной фазой в этом случае служат неполярные растворители – изооктан, бензол, и др. В обращенно-фазовой распределительной хроматографии неполярный растворитель фиксируют на носителе, а в качестве подвижной фазы используют полярные растворители (вода, спирт, буферные растворы, сильные кислоты). Les phases liquides appliquées présentent un gros inconvénient: elles sont rapidement éliminées de la surface du support par une phase liquide mobile, en particulier lors de l’utilisation de tels systèmes en HPLC, c’est-à-dire lorsque la pression augmente dans la colonne. Par conséquent, les phases liquides sont greffées sur le support. Les gels de silice avec des groupes nitrile, amine et autres greffés sont utilisés comme supports de phases liquides stationnaires pour NFPC. Dans la version en phase inverse, des gels de silice avec des groupes alkylsilyle greffés sont utilisés. Le mécanisme de rétention de ces absorbants est compliqué. La méthode de chromatographie de distribution est utilisée pour séparer des composés hautement polaires, des acides aminés, des phénols, des acides phénylcarboxyliques et autres. Les phases liquides appliquées présentent un gros inconvénient: elles sont rapidement éliminées de la surface du support par une phase liquide mobile, en particulier lors de l’utilisation de tels systèmes en HPLC, c’est-à-dire lorsque la pression augmente dans la colonne. Par conséquent, les phases liquides sont greffées sur le support. Les gels de silice avec des groupes nitrile, amine et autres greffés sont utilisés comme supports de phases liquides stationnaires pour NFPC. Dans la version en phase inverse, des gels de silice avec des groupes alkylsilyle greffés sont utilisés. Le mécanisme de rétention de ces absorbants est compliqué. La méthode de chromatographie de distribution est utilisée pour séparer des composés hautement polaires, des acides aminés, des phénols, des acides phénylcarboxyliques et autres. Нанесенные жидкие фазы имеют большой недостаток – они быстро смываются подвижной жидкой фазой с поверхности носителя, особенно, при использовании таких систем в ВЭЖХ, т. е. при повышенном давлении в колонке. Поэтому жидкие фазы прививают к носителю. В качестве носителей неподвижных жидких фаз для НФРХ используют силикагели с привитыми нитрильными, аминными и другими группами. В обращенно-фазовом варианте используют силикагели с привитыми алкилсилильными группами. Механизм удерживания на таких сорбентах сложен. |
Скачать 55.25 Kb.